HL-60-celler: Grundläggande fakta för forskning om akut myeloid leukemi
HL-60 är en odödlig human leukemicellinje. Den används ofta för att studera cancerbiologi och undersöka effekten av läkemedel mot cancer. Dessutom kan den användas för att förstå olika cellulära och molekylära mekanismer som är involverade i leukemicellers proliferation och differentiering.
- Odlingsmedium
- Se produktsidan
- Fördubblingstid
- Se produktsidan
- Tillväxt
- Adherent
- Biosäkerhetsnivå
- BSL-1
- Tillgänglig från
- Cytion — Beställ HL-60
- HL-60-cellinje: Ursprung och allmän information
- Information om HL-60-cellodling
- HL-60-celler: Fördelar och nackdelar
- Användningsområden för cellinjen HL-60 inom forskning: Från cancer till immunologi och därefter
- HL-60-cellinjen för din forskning
- HL-60-celler: Forskningspublikationer
- HL-60-cellinjen – resurser: protokoll, videor och mer
- HL-60-cellinjen: Viktiga vanliga frågor för forskare
- Referenser
- Vanliga frågor
HL-60-cellinjen: Ursprung och allmän information
HL-60-cellinjen fungerar som en viktig modell inom hematologisk forskning och ger djupgående insikter i naturen och behandlingen av akut promyelocytisk leukemi. Detta blogginlägg fördjupar sig i ursprunget och de utmärkande egenskaperna hos HL-60-cellinjen och belyser dess avgörande roll inom medicinsk forskning och terapeutisk utveckling.
HL-60 etablerades först från leukemiceller hos en 36-årig kaukasisk kvinna som diagnostiserats med akut promyelocytisk leukemi. Detta banbrytande arbete utfördes av S.J. Collins och hans team och innebar ett betydande genombrott, eftersom HL-60 var den första myeloida leukemicellinjen som framgångsrikt isolerades och odlades i suspension. Denna bedrift har banat väg för ett stort antal forskningsmöjligheter inom studiet av leukemi och andra relaterade sjukdomar. När det gäller fysiska egenskaper uppvisar HL-60-celler en lymfoblastisk morfologi och är kända för att växa i suspension, där de framträder som runda. Storleken på dessa celler varierar, med diametrar som sträcker sig från 9 till 25 μm, vilket återspeglar deras heterogenitet. På genomnivå är cellinjen HL-60 övervägande pseudodiploid, med ett modalt kromosomantal på 43. Intressant nog uppvisar en liten andel (6,2 %) av cellerna en 2S-komponent, vilket tillför ytterligare en dimension av komplexitet till deras genetiska sammansättning [1].
Att förstå dessa grundläggande aspekter av HL-60-celler förbättrar inte bara vår kunskap om leukemi på cellnivå utan stöder också pågående forskningsinsatser för att upptäcka nya behandlingsmetoder. I de följande avsnitten kommer vi att undersöka hur de unika egenskaperna hos cellinjen HL-60 har bidragit till betydande framsteg inom medicinsk forskning.
Information om odling av HL-60-celler
HL-60-cellodling är enkelt och lätt. I detta avsnitt får du lära dig grunderna, till exempel: Vad är fördubblingstiden för cellinjen HL-60? Är HL-60 en vidhäftande eller en suspensionsodling? Vad är utsädesdensiteten för cellinjen HL-60? Vilket medium används för tillväxt av HL-60?
Fördubblingstid:
Fördubblingstiden för HL-60-celler är cirka 36 till 48 timmar.
Adherent eller i suspension:
HL-60-celler odlas som suspensionskulturer.
Utsädestäthet:
Dessa celler sås med en densitet på 1 x 106 celler/ml vid subkultivering och 2 x 105 celler/ml när en ny odling startas.
Odlingsmedium:
RPMI 1640-tillväxtmedium tillsatt med 10 % FBS och 2,5 mM L-glutamin används för att odla HL-60-celler. Mediet bör bytas ut 2 till 3 gånger per vecka.
Odlingsförhållanden:
HL-60-celler odlas i en fuktad inkubator vid 37 °C och 5 % CO2-tillförsel.
Förvaring:
HL-60-celler förvaras vid en temperatur under -150 °C eller i flytande kväves ångfas för att maximera antalet livsdugliga celler.
Frysmedel och frysprocess:
CM-1- eller CM-ACF-frysmedier används för frysning av HL-60-celler. En långsam frysmetod föredras för frysning av HL-60-celler.
Upptining:
Frysta ampuller med HL-60-celler skakas snabbt i ett vattenbad inställt på 37 °C. Därefter centrifugeras cellerna för att avlägsna frysmediet. Nytt odlingsmedium tillsätts och cellerna resuspenderas för att överföras till en kolv för tillväxt.
Biosäkerhetsnivå:
Biosäkerhetsnivå 1 rekommenderas för hantering av HL-60-odlingar.
HL-60-celler: Fördelar och nackdelar
Innan du börjar arbeta med en cellinje kan det vara bra att känna till dess fördelar och nackdelar. I detta avsnitt av artikeln går vi igenom några för- och nackdelar med att använda HL-60-celler.
Fördelar
Några framträdande fördelar med cellinjen HL-60 är:
- Mångsidighet: HL-60-celler har förmågan att differentieras till flera celltyper, inklusive monocyter, makrofager och granulocyter, under lämpliga tillväxtförhållanden. Detta gör dem användbara för att studera celldifferentiering och andra cellprocesser.
- Lätt att odla: HL-60-celler är lätta att odla och underhålla i suspensionskulturer, vilket gör dem till ett praktiskt verktyg för att studera flera cellprocesser.
- In vitro-modell för leukemi: Dessa celler erhölls från en patient med akut myeloid leukemi och har därför genetiska och molekylära egenskaper som liknar sjukdomen.
Nackdelar
Nackdelarna med cellinjen HL-60 är:
- Begränsad differentieringspotential: HL-60 kan differentieras till vissa myeloida linjer som svar på stimuli, men deras differentieringspotential är begränsad jämfört med primära celler.
Användningsområden för cellinjen HL-60 inom forskning: Från cancer till immunologi och därefter
HL-60-cellinjen, som härstammar från en patient med akut promyelocytisk leukemi, har blivit en hörnsten inom medicinsk forskning tack vare sin mångsidighet och enkla odling. Dessa lättskötta odlingar är avgörande för en mängd olika forskningsapplikationer, och vi avser att utforska några av de mest betydelsefulla, med hjälp av ett brett spektrum av nyckelord för att ge en omfattande översikt.
Cancerforskning
Inom onkologin har cellinjen HL-60 varit avgörande för att nysta upp komplexiteten i cancercellers signalering, fördjupa vår förståelse av onkogenuttryck och driva på upptäckten av nya terapeutiska mål. Denna cellinje ingår i det panel av leukemicellinjer som används för screening av nya kemoterapeutiska medel. Ett talande exempel är användningen av HL-60-celler för att fastställa de antileukemiska egenskaperna hos föreningar extraherade från marina organismer, vilket har avslöjat både antiproliferativa och proapoptotiska effekter [2]. Vidare har cellinjen underlättat undersökningen av centrala signalvägar såsom JAK/STAT och deras inflytande på leukemicellernas proliferation, samt bedömningen av det terapeutiska potentialen hos bioaktiva föreningar som tymokinon [3].
Immunologi
HL-60-celler är ett robust in vitro-system för att undersöka olika immunreaktioner, inklusive den komplexa processen kemotaxi och regleringen av uttrycket av viktiga immunmediatorer. Dessa celler kan differentieras till myeloida celler som liknar makrofager och neutrofiler, vilket gör dem till en mångsidig modell för att undersöka inflammatoriska signalvägar. Till exempel användes makrofagliknande celler härledda från HL-60 för att undersöka den antiinflammatoriska potentialen hos fytokemikalier från släktet Brassica [4]. I en annan studie gjorde differentieringen av HL-60-celler till neutrofil-liknande celler det möjligt för forskare att identifiera gener som är avgörande för celldifferentiering och relaterade immunfunktioner [5].
Läkemedelsutveckling
HL-60:s förmåga till myeloid differentiering har också utnyttjats vid läkemedelsutveckling, särskilt för att identifiera kandidater som potentiellt kan modulera differentieringsvägen, vilket är avgörande vid behandling av leukemi. Detta illustreras av studier som har använt HL-60-cellinjen för att utvärdera den anticancerpotential som finns i naturprodukter [6].
Dessutom används HL-60-cellinjen för att studera olika aspekter av myeloida cellinjers biologi, såsom att förstå hur behandling med ämnen som retinsyra kan leda till monocytisk differentiering, eller hur dessa celler efterliknar primära neutrofiler när de genererar extracellulära fällor. Modellens användning för att belysa de molekylära händelserna vid hematologiska maligniteter utvidgas ytterligare genom dess tillämpning i studier av mutationscellpaneler, särskilt i samband med p53-hotspot-analys vid leukemi.
För dem som utforskar cellmekaniken, fördubblingstiden för HL-60 och deras respons på elektroporering i mikrofluidiska kanaler erbjuder cellinjen en pålitlig plattform för undersökning.
HL-60-cellinjen för din forskning
HL-60-celler: Forskningspublikationer
Det finns flera forskningsstudier om HL-60-celler. Här har vi listat några anmärkningsvärda exempel:
Denna forskningsartikel föreslog en antitumöreffekt av en förening, Stigmast-5-en-3-ol, på HL-60-leukemiceller och MCF7-bröstcancerceller.
Denna studie beskriver JAK/STAT-signaleringens roll i proliferation av HL-60-celler. Dessutom undersöker forskarna den terapeutiska potentialen hos föreningen tymokinon med hjälp av denna leukemicellinje. Föreningen hämmar cellproliferation och inducerar celldöd genom att återuppliva uttrycket av negativa regulatorer av JAK/STAT-kaskaden.
I denna studie användes HL-60-celler för att härleda en makrofagliknande cellmodell för att undersöka den antiinflammatoriska aktiviteten hos växtföreningar från Brassica.
Denna studie, publicerad i tidskriften International Immunopharmacology, utvecklade en neutrofilcellsimulering från HL-60-cellinjen med hjälp av dimetylsulfoxid. Studien observerade att ERK-genen är involverad i differentieringen av dessa celler.
Denna forskningsartikel undersöker den anticancerpotential som växtpolyfenolföreningar, dvs. gallussyra och ellagsyra, har på läkemedelskänsliga och resistenta HL-60-leukemiceller.
HL-60-cellinjen Resurser: Protokoll, videor och mer
Det finns flera utbildningsresurser online om HL-60-cellinjen. I detta avsnitt beskrivs några resurser som behandlar odling och transfektion av denna cellinje.
Protokoll för cellodling
Resurserna som beskriver odlingsmetoder för HL-60-celler är:
- Förökning av HL-60: Detta dokument innehåller information om subodling av HL-60-celler.
- HL-60-cellinjen: Denna webbplats innehåller grundläggande information om HL-60-celler och protokoll, inklusive odling, frysning och upptining av celler.
Transfektionsprotokoll
Här är några resurser som beskriver transfektionsmetoder som valts för HL-60-celler.
- Transfektion av HL-60-celler: Denna länk innehåller en detaljerad transfektionsprocedur för HL-60-leukemiceller.
- Transient transfektion av HL-60-celler: Detta dokument innehåller användbar information om cellinjen och ger ett detaljerat protokoll för transient transfektion av HL-60-celler.
Videor relaterade till HL-60-cellinjen
Det finns mycket begränsade videoresurser om HL-60-celler.
- Passering av HL-60-celler: Denna video förklarar protokollet för subkultivering av HL-60-celler.
Vi hoppas att denna artikel ger dig grundläggande information om odling och underhåll av HL-60-cellinjen. Dessutom kan den öka din kunskap om fördelarna med att använda dessa leukemiceller i forskning. Om du planerar att använda denna cellinje, beställ den från oss.
HL-60-cellinjen: Viktiga vanliga frågor för forskare
Cellinjen HL-60 är en cellinje för promyelocytisk leukemi som härrör från en patient med akut promyelocytisk leukemi. Denna cellinje används i stor utsträckning inom forskningen för att studera differentieringen av myeloida celler och uttrycket av onkogener.
Retinsyra inducerar differentiering i cellinjen HL-60, vilket får cellerna att mogna till granulocytliknande celler. Denna process är avgörande för att studera de mekanismer som ligger till grund för myeloid differentiering.
Serum är en viktig beståndsdel i odlingsmediet för blodbildande celler och tillför viktiga tillväxtfaktorer och näringsämnen som behövs för att HL-60-cellerna ska kunna föröka sig och överleva i odling.
Ja, cellinjen HL-60 kan utföra kemotaxi, vilket innebär att cellerna rör sig som svar på kemiska stimuli. Detta gör dem användbara för kemotaxistester och för att förstå cellmigrering.
Cellinjen HL60, som uppvisar uttryck av cellulära onkogener, fungerar som ett modellsystem för att undersöka regleringen av onkogenernas uttryck och deras roll i uppkomsten av leukemi.
Cellinjen HL-60 är ovärderlig inom cellbiologiska studier, särskilt när det gäller att undersöka cellcykeln, celldifferentieringsprocesser och de molekylära händelser som leder till leukemi.
Paneler med leukemicellinjer möjliggör jämförande studier av olika leukemicellinjer, bland annat avseende deras genetiska sammansättning, mutationsprofiler, läkemedelsrespons samt de molekylära signalvägar som är involverade i leukemigenesen, såsom MAPK-signalvägen.
Analys- och ursprungsintyg kan vanligtvis laddas ner eller beställas från den leverantör eller det arkiv som tillhandahåller cellinjen HL-60, vilket garanterar att forskarna får verifierade och kontamineringsfria celler till sina studier.
Cellinjen HL-60 kan differentieras så att den får egenskaper som liknar primära neutrofiler, däribland förmågan att bilda extracellulära fällor, vilket gör det möjligt för forskare att använda den som en surrogatmodell för att studera neutrofilernas beteende och funktion.
HL-60-celler används som en in vitro-modell för att studera akut promyelocytisk leukemi, biologin hos myeloida cellinjer samt effekterna av olika substanser på differentiering och proliferation. De används även i experiment som undersöker cellulära reaktioner såsom kemotaxi, uttryck av onkogener och mutationers inverkan på cellulära processer.
Förkortningen ”HL-60” står för ”Human Leukemia 60”. Den avser den 60:e cellinjen som etablerades från patienter med leukemi vid tidpunkten för dess utveckling. ”HL” står för att fokus ligger på humana leukemiceller.
Fördubblingstiden för HL-60-celler är cirka 36 till 48 timmar under optimala odlingsförhållanden. Detta kan dock variera beroende på odlingsförhållandena och cellernas passagenummer.
När HL-60-celler behandlas med forbol-12-myristat-13-acetat (PMA) differentieras de vanligtvis till en celltyp som liknar makrofager eller monocyter. Denna differentiering ingår i studiet av monocytiska differentieringsvägar och i arbetet med att förstå mekanismerna bakom differentieringen av myeloida celler.
Referenser
- Fleck, R., S. Romero-Steiner och M. Nahm, Användning av cellinjen HL-60 för att mäta opsonisk kapacitet hos pneumokockantikroppar. Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1): s. 19–27.
- Fernando, I.S., et al., Apoptotiska och antiproliferativa effekter av Stigmast-5-en-3-ol från Dendronephthya gigantea på humana leukemiceller HL-60 och humana bröstcancerceller MCF-7. Toxicology in Vitro, 2018. 52: s. 297–305.
- Almajali, B., et al., Tymokinon hämmar cellproliferation och förstärker apoptos hos HL60-leukemiceller genom återuttryck av JAK/STAT-negativa regulatorer. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention: APJCP, 2021. 22(3): s. 879.
- Ruiz-Alcaraz, A.J., et al., Analys av den antiinflammatoriska potentialen hos bioaktiva föreningar från Brassica i en modell av mänskliga makrofagliknande celler härledda från HL-60-celler. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2022. 149: s. 112804.
- Wang, D., et al., ERK är involverat i differentieringen och funktionen hos dimetylsulfoxid-inducerade HL-60-neutrofil-liknande celler, vilka efterliknar inflammatoriska neutrofiler. International Immunopharmacology, 2020. 84: s. 106510.
- Núñez-Sánchez, M.Á., et al., Anti-leukemisk aktivitet hos bioaktiva föreningar härrörande från Brassica i HL-60-myeloida leukemiceller. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): s. 13400.