BEWO Cellinje

BeWo är en human choriocarcinomderiverad cellinje som ofta används inom biomedicinsk forskning. Den fungerar som en värdefull in vitro-modell för att utforska den komplicerade processen med placental utveckling och syncytialisering av humana trofoblaster. Forskare använder också dessa celler för att studera trofoblastcellernas beteende, hormonproduktion och transport av ämnen genom placentan. Dessutom kan BeWo-celler användas inom toxikologi, infektion och studier av sjukdomsöverföring.

Den här artikeln innehåller grundläggande kunskaper om BeWo-celler som kan hjälpa dig att hantera dem i din forskning. Den kommer att inkludera:

  1. Allmänna egenskaper och ursprung för BeWo-celler
  2. BeWo cellinje: Information om odling
  3. Fördelar och nackdelar med BeWo-cellinjen
  4. Forskningsapplikationer av BeWo-celler
  5. Forskningspublikationer med BeWo-celler
  6. Resurser för BeWo cellinje: Protokoll, videor och mer

1. Allmänna egenskaper och ursprung för BeWo-celler

Förkunskaper om en cellinjes ursprung och allmänna egenskaper är avgörande för att den ska kunna användas i din forskning. Denna del av artikeln utforskar BeWo-cellinjens ursprung, karakteristiska egenskaper och mycket mer. Här kommer du att lära dig: Vad är BeWo choriocarcinoma cellinje? Vad är BeWo syncytialisering? Varifrån kommer BeWo-cellerna? Vad är BeWo-cellernas morfologi? Vad är ploidin hos BeWo?

  • Placentacellinjen, BeWo, härstammar från ett malignt gestationellt choriocarcinom i en manlig fosterplacenta 1968 [1]. Den fungerar därför som en ovärderlig modell för placentaforskning.
  • BeWo-cellerna uppvisar en epitelliknande morfologi.
  • BeWo-cellerna är relativt små, mellan 20 och 30 µM [2].
  • BeWo-cellerna uppvisar en stabil karyotyp. Deras stamledningsnummer är hypo-tetraploid. Det modala kromosomantalet för BeWo-celler är 86. Det kan variera från 71 till 178.
  • BeWo-celler producerar flera hormoner, t.ex. humant korion somatomammotropin, humant koriongonadotropin (hCG) och steroidhormoner.
  • BeWo-celler uttrycker molekylära markörer, bland annat CK 7, E-cadherin och VE-cadherin.

B30 underlinje

B30 är en sublinje av BeWo-celler. Den används för att undersöka upptag och transport av näringsämnen. Detta tillskrivs deras kraftiga tillväxt på porösa membran.

BeWo och JEG-3

BeWo JEG-3-cellinjerna härrör från choriocarcinom och används inom placentaforskningen. BeWo-cellerna producerar hormoner i lägre nivåer än JEG-3, t.ex. humant koriongonadotropin (hCG) och östradiol.

Time-lapse-visualisering av fertiliteten hos mänskliga ägg, som illustrerar stadierna i blastocystbildningen, observerad i mikroskop.

2. BeWo cellinje: Information om odling

Att underhålla en cellkultur kan vara svårt om man inte känner till viktiga detaljer. Till exempel: Vad är fördubblingstiden för BeWo? Vad är BeWo cellmedium? Hur odlar man BeWo-cellinjen? och Hur fryser man BeWo-celler?

Viktiga punkter för odling av BeWo-celler

Fördubblingstid:

Populationsfördubblingstiden för BeWo-cellerna är cirka 30 timmar.

Adherent eller i suspension:

BeWo är en adherent cellinje.

Cellens sådddensitet:

Den rekommenderade sådddensiteten för BeWo-celler är 1 x104 celler/cm2. Vid sådd avlägsnas gamla medier från cellerna och cellerna sköljs med 1 x PBS. Därefter tillsätts Accutase (passagelösning) och cellerna inkuberas i 8 till 10 minuter vid rumstemperatur. Därefter tillsätts de avskilda cellerna med odlingsmedia och centrifugeras. De skördade cellerna resuspenderas sedan och hälls över i en ny kolv.

Tillväxtmedium:

Ham's F12K-medium innehållande 10% FBS, 2,0 mM L-glutamin, 2,0 mM natriumpyruvat och 2,5 g/L NaHCO3 används för att odla BeWo-celler. BeWo-cellmediet bör bytas ut 2 till 3 gånger per vecka.

Tillväxtförhållanden:

BeWo-cellerna förvaras i en fuktad inkubator vid 37 grader Celcius och med 5% CO2-tillförsel.

Förvaring:

Frysta BeWo-celler förvaras vid en temperatur under -150°C i en elektrisk frys för extremt låg temperatur eller i ångfasen av flytande kväve.

Frysningsprocess och medium:

BeWo-celler rekommenderas att frysas i CM-1 eller CM-ACF frysningsmedium. Cellerna fryses med hjälp av en långsam frysmetod. Denna metod tillåter endast en temperatursänkning på 1 grad per minut, vilket förhindrar att cellerna utsätts för chock och skyddar cellernas livskraft.

Upptiningsprocess:

Frysta celler tinas upp genom att de sänks ned i ett förinställt 37°C vattenbad i 40 till 60 sekunder tills en liten isklump återstår. Därefter tillsätts färskt tillväxtmedium och cellerna centrifugeras för att avlägsna frysmediets komponenter. Den uppsamlade cellpelleten resuspenderas och fördelas i en odlingskolv för tillväxt.

Biosäkerhetsnivå:

Biosäkerhetsnivå 1-laboratorium är nödvändigt för att hantera och underhålla BeWo-cellkulturer.

Fångar den epiteliala, polygonala morfologin och den öliknande tillväxten hos den mänskliga choriocarcinomcellinjen BEWO genom 10x och 20x förstoring i mikroskop.

3. Fördelar och nackdelar med BeWo-cellinjen

BeWo-cellerna har unika egenskaper och kommer med specifika för- och nackdelar. I det här avsnittet kommer vi att utforska några av de mest anmärkningsvärda.

Fördelar och nackdelar

De främsta fördelarna med BeWo choriocarcinoma-cellinjen är följande:

  • In vitro placentacellmodell

    BeWo-celler utgör en in vitro-modell för att studera trofoblastcellers beteende och placentasyncytisering, vilket replikerar processer som är svåra att observera in vivo.

  • Produktion av hormoner

    BeWo-celler utsöndrar hormoner, såsom hCG och placentalaktogen, vilket gör dem värdefulla för studier av hormonell reglering och forskning inom reproduktionsbiologi.

Nackdelar med BeWo

Nackdelarna med BeWo trofoblastceller är:

  • Cancercellinje

    BeWo-celler härrörde från choriocarcinom, som är en placentatumör. Detta ursprung kanske inte helt representerar normal placentacellfunktion.

4. Forskningsapplikationer för BeWo-celler

BeWo-cellinjen används i stor utsträckning inom placentaforskningen. Några specifika tillämpningar av denna cellinje nämns här:

  • Forskning om placenta och graviditet: BeWo-celler är centrala i placenta- och graviditetsrelaterad forskning. Forskare använder t.ex. dessa celler för att studera transporten av ämnen, inklusive läkemedel, näringsämnen och toxiner, över placentabarriären. Dessutom undersöker de produktionen och regleringen av hormoner, bland annat humant koriongonadotropin (hCG), placentalaktogen och steroidhormoner. Detta är viktigt för att förstå hormonella förändringar under graviditeten. I forskning som genomfördes 2018 undersöktes effekten av bromerade flamskyddsmedel (BFR) på aktiviteten hos sulfotransferas i den humana trofoblastiska cellinjen (BeWo). Detta enzym är involverat i regleringen av de intracellulära nivåerna av sköldkörtelhormon [3].
  • Infektions- och sjukdomsforskning: BeWo-celler används också för att undersöka interaktionen mellan patogener och placentaceller. Denna forskning är värdefull för att förstå sjukdomar som kan överföras från mor till foster och för att utveckla strategier för att skydda fostrets hälsa. Dessutom hjälper denna cellinje forskarna att undersöka komplikationer som uppstår under graviditeten, t.ex. havandeskapsförgiftning (preeklampsi). I en studie utförd av Michalina Bralewska år 2023 användes till exempel BeWo-trofoblastcellmodellen och man fann att både kromogranin A (CgA) och den peptid som härrör från det, katestatin (CST), kan ha roller i den komplicerade processen för preeklampsi (PE) patogenes [4]. I en annan studie undersöktes trichosanthinets anticancerpotential med hjälp av BeWo choriocarcinoma cellinje. Forskningen gjorde också en extra ansträngning för att upptäcka biomarkörer genom att utföra jämförande proteomisk analys före och efter experimentet [5].

5. Forskningspublikationer med BeWo-celler

Här är några viktiga forskningspublikationer som innehåller BeWo trofoblastceller.

AMPK-signalering reglerar mitofagi och mitokondriell ATP-produktion i den humana trofoblastcellinjen BeWo

I denna studie i Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) föreslogs att AMPK-signalering aktiverar mitofagi i BeWo-trofoblastceller via FUNDC1 och PRKN-faciliterade mitofagi-vägar. Som ett resultat bidrar mitofagi till att upprätthålla ATP-produktion och mitokondriell membranpotential.

Etylparaben inducerar apoptotisk celldöd i BeWo-celler från mänsklig placenta via Caspase-3-vägen

Denna artikel publicerades i Animal Cells and Systems (2020). Studien föreslog att etylparaben förmedlar BeWo-cellers apoptos genom att reglera caspase 3-vägen.

Karakterisering av Xenobiotic och Steroid Disposition Potential av Human Placental Tissue och Cell Lines (BeWo, JEG-3, JAR, och HTR-8/SVneo) genom kvantitativ proteomik

Denna studie i läkemedlet Metabolism and Disposition (2023) använde placentacellinjer, inklusive BeWo, JAR, JEG-3 och HTR-8/SVneo, för att undersöka xenobiotika och steroiddeponering i celler.

Apelin och apelinreceptor i human placenta: Uttryck, signalväg och reglering av trofoblast JEG-3- och BeWo-cellers proliferation och cellcykel

I denna forskningsartikel i International Journal of Molecular Medicine (2020) föreslogs att Apelin, liganden för APJ-receptorn, främjar BeWo-cellproliferation genom APJ- och ERK1/2-, stat3- och AMPK-signalering. Det kan således vara en viktig adipokin som reglerar utvecklingen av placentan.

Läkemedel mot epilepsi och näringsämnen i fostret: effekter på kolintransportörer i en cellinje från human placenta

I denna studie i Epilepsia (2021) undersöktes effekterna av fetala näringsämnen och antiepileptika på kolintransportörer i den trofoblastiska cellinjen BeWo, som härrör från människa.

6. Resurser för BeWo Cell line: Protokoll, videor och mer

Här är några online-resurser som finns tillgängliga om BeWo-cellerna:

  • Transfektion in vitro: Den här videon hjälper dig att lära dig in vitro plasmid DNA transfektionsprotokoll för adherenta celler.

Följande länk innehåller information om cellodling för BeWo-celler:

  • BeWo-celler: Denna webbplats innehåller viktig cellodlingsinformation om BeWo-cellinjen. Detta inkluderar information om cellmedier och odlingsförhållanden. Den innehåller också protokoll för subkulturer och hantering av kryokonserverade och proliferativa kulturer.

Referenser

  1. Weber, M., et al, Cytogenomics of six human trophoblastic cell lines. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
  2. Kolokol'tsova, T., et al, Characteristics of trophoblasts in long-term culture. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2017. 164: p. 259-265.
  3. Leonetti, C.P., C.M. Butt, and H.M. Stapleton, Disruption of thyroid hormone sulfotransferase activity by brominated flame retardant chemicals in the human choriocarcinoma placenta cell line, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
  4. Bralewska, M., T. Pietrucha och A. Sakowicz, Reduction in CgA-Derived CST Protein Level in HTR-8/SVneo and BeWo Trophoblastic Cell Lines Caused by the Preeclamptic Environment. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): p. 7124.
  5. Hu, Y., et al., Jämförande proteomisk analys av läkemedelstrichosanthin-tillägg till BeWo-cellinjen. Molecules, 2022. 27(5): p. 1603.

Vi har upptäckt att du befinner dig i ett annat land eller använder ett annat webbläsarspråk än det som för närvarande är valt. Vill du acceptera de föreslagna inställningarna?

Nära