BxPC-3 cellinje
BxPC-3 är en cellinje för pankreascancer som härrör från människa. Den används i stor utsträckning i cancerstudier. Forskare använder främst dessa celler för att studera biologin i bukspottkörtelcancer, identifiera terapeutiska mål och utveckla läkemedel mot cancer.
Denna artikel omfattar viktig information om BxPC-3-cellinjen som kan hjälpa dig att arbeta med den. Huvudsakligen kommer den att diskutera:
- Allmän information och ursprung för BxPC-3-cellinjen
- Odling av BxPC-3-celler
- BxPC-3 cellinje: Fördelar och begränsningar
- Tillämpningar av BxPC-3-celler inom forskning
- Forskningspublikationer om BxPC-3-celler
- Resurser för BxPC-3 cellinje: Protokoll, videor och mer
1. allmän information och ursprung för BxPC-3-cellinjen
Att känna till en cellinjes ursprung är avgörande för dess tillämplighet i forskning. Att känna till dess egenskaper, inklusive morfologi, cellstorlek och ploidi, gör dess användning mer okomplicerad och bekväm. Här kommer du att lära dig ursprunget och de allmänna egenskaperna hos BxPC-3-celler: Vad är BxPC-3-celler? Vad är BxPC-3-cellinjen? Vad är ursprunget till BxPC-3-cellinjen? Vad är BxPC-3 morfologi?
- BxPC-3, humana pankreascarcinomceller, härstammar från en 61-årig europeisk kvinna med adenocarcinom i pankreas 1986. Dessa celler bekräftades vara tumörbildande även efter att patienten genomgått flera radio- och kemoterapibehandlingar. Den etablerade cellinjen är således en ovärderlig modell för att studera cancerutveckling och progression.
- BxPC-3-cellerna har en epitelcellsliknande morfologi.
- Det modala kromosomnumret för BxPC-3 är 59. Dessa celler har en homozygot deletion på kromosom 18q, som kodar för SMAD4/DPC4-protein. Dessutom saknar cellinjen BxPC-3 kras-mutationen som är vanlig bland tumörer i bukspottkörteln. BxPC-3 braf-deletion finns också i dessa pankreascancerceller.
Vad är skillnaden mellan BxPC3 och PANC-1?
BxPC-3 PADC (pancreatic ductal adenocarcinoma) och PANC-1 är primära cellinjer för cancer i bukspottkörteln med en epitelial morfologi. Här har de tidigare cellerna mer epitelliknande egenskaper, medan de senare uppvisar mer mesenkymala attribut [1].
2.odling av BxPC-3-celler
BxPC-3-cellinjen används ofta i laboratorier för cancerforskning. Du behöver känna till följande viktiga punkter för effektiv odling av denna cellinje för cancer i bukspottskörteln. Du kommer att lära dig: Vad är fördubblingstiden för bxpc3? Hur odlar man BxPC-3-cellinjen?
Viktiga punkter för odling av BxPC-3-celler
|
Populationens fördubblingstid: |
Fördubblingstiden för BxPC-3-celler varierar mellan 48 och 60 timmar. |
|
Adherent eller i suspension: |
BxPC-3 är en adherent cellinje. |
|
Delningsförhållande: |
BxPC-3-celler subkultiveras i förhållandet 1:2 till 1:4. Cellerna tvättas med 1 x PBS och inkuberas med en passagelösning som kallas accutase. Efter 8-10 minuter tillsätts färskt media till cellerna och cellerna centrifugeras. Pelleten resuspenderas återigen i media och cellerna hälls över i ett nytt odlingskärl för tillväxt. |
|
Tillväxtmedium: |
RPMI 1640-media används för odling av cellinjen BxPC-3. Det kompletteras med 10% fetalt bovint serum, 2,1 mM stabilt glutamin och 2,0 g/L NaHCO3 för att uppnå idealisk celltillväxt. Media bör bytas ut 2 till 3 gånger per vecka. |
|
Tillväxtförhållanden: |
BxPC-3-cellkulturer hålls i en 37 °C fuktig inkubator ansluten till en 5% CO2-försörjning. |
|
Förvaring: |
Frysta celler förvaras i allmänhet vid en temperatur under -150 °C eller i ångfasen av flytande kväve för att skydda cellernas livsduglighet. |
|
Frysningsprocess och medium: |
CM-1 eller CM-ACF kan användas för att frysa BxPC-3-cellkulturer. En långsam frysningsprocess som endast tillåter en temperatursänkning på 1 °C följs för att förhindra att cellerna utsätts för chock. |
|
Upptiningsprocess: |
Frysta BxPC-3-celler tinas i ett förinställt 37 °C vattenbad i 40 till 60 sekunder. När det finns en liten isklump kvar tillsätts cellerna med färskt odlingsmedium och centrifugeras för att avlägsna frysmedieelement. Därefter resuspenderas cellpelleten och cellerna fördelas i kolven för tillväxt. |
|
Biosäkerhetsnivå: |
BxPC-3-cellkulturer förvaras i laboratorier med biosäkerhetsnivå 1. |
3. bxPC-3 cellinje: Fördelar och begränsningar
BxPC-3 är en välkänd cellinje för adenokarcinom i bukspottkörteln som är förknippad med flera fördelar och begränsningar. De viktigaste fördelarna och nackdelarna med cellinjen listas här.
Fördelar och nackdelar
De viktigaste fördelarna med BxPC-3-celler är:
-
In vitro-modell av bukspottkörtelcancer
BxPC-3-celler, som härrör från patienter med adenokarcinom i bukspottkörteln, uppvisar relevanta egenskaper, vilket gör dem till en lämplig modell för att studera beteendet hos bukspottkörtelcancer in vitro.
-
Tumörframkallande cellinje
BxPC-3-cellerna har tumörframkallande egenskaper och kan bilda tumörer när de injiceras i nakna eller immunkomprometterade möss. Dessa tumörer liknar i hög grad primära adenokarcinom i bukspottkörteln, vilket gör BxPC-3-xenograftmodellen idealisk för studier av cancertillväxt och -progression.
Begränsningar
De begränsningar som är förknippade med BxPC-3-cellinjen är:
-
Korskontaminering
BxPC-3-cellinjen, som alla andra, medför en risk för korskontaminering. Forskare bör iaktta försiktighet och följa strikta protokoll för förebyggande av kontaminering vid hantering av dessa celler.
-
Långsam tillväxthastighet
BxPC-3-celler uppvisar en relativt långsam proliferationshastighet, med en fördubblingstid som sträcker sig mellan 48 och 60 timmar. Denna egenskap kan kräva längre inkubationsperioder för specifika experiment, vilket potentiellt kan orsaka förseningar i forskningsframstegen.
4. tillämpningar av BxPC-3-celler inom forskning
BxPC-3-celler har många användningsområden inom cancerforskningen. De vanligaste tillämpningarna är:
- Forskning om cancer i bukspottkörteln: BxPC-3-celler imiterar adenokarcinom i bukspottkörteln och används därför för att utforska de genetiska och molekylära mekanismer som ligger bakom tumörutveckling och tillväxt. Dessutom upptäcker forskarna nya biomarkörer och terapeutiska mål med hjälp av dessa celler. BxPC-3-celler uttrycker dessutom angiogenetiska faktorer i hög grad, dvs. interleukin-8 (IL-8), prostaglandin E2 (PGE2) och VEGF (vascular endothelial growth factor), vilket gör dem lämpliga för studier av angiogenes. I detta sammanhang är angiogenes en avgörande process som är förknippad med cancertillväxt och metastasering. I en studie publicerad 2022 studerades att överuttryck av laminin-5 gamma-2 (LAMC2) i BxPC3 PDAC (pankreatiskt duktalt adenokarcinom) förstärker dess tumörutveckling genom att reglera BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/ mTOR-signalvägen [2].
- Upptäckt och utveckling av läkemedel: BxPC-3-cellinjen fungerar som en ovärderlig modell för testning av cancerläkemedel. Forskare undersöker potentiella läkemedels cytotoxiska, anti-metastatiska och apoptotiska effekter på BxPC3 PDAC. I en studie som genomfördes av Alexandria Turner och medarbetare 2020 undersöktes de apoptotiska egenskaperna hos fruktextrakt från Elaeocarpus reticulatus i BxPC-3-pankreascancerceller [3]. På liknande sätt utfördes forskning 2020 som fastställde anticancerpotentialen hos ett metanoliskt extrakt av en växt som heter Oxialis obtriangulata i BxPC-3-celler. Dessutom studerade forskarna också den cellmekanistiska vägen genom vilken växtextrakt utövade terapeutiska effekter [4].
5.forskningspublikationer om BxPC-3-celler
I detta avsnitt listas några av de mest citerade och intressanta publikationerna som innehåller BxPC-3-cellinjen.
Licocoumarone inducerar BxPC-3-pankreatisk adenokarcinomcelldöd genom att hämma DYRK1A
I denna publikation i Chemico-Biological Interactions (2020) undersöktes de apoptotiska effekterna av en naturprodukt, licocoumarone, på BxPC-3-pankreascancerceller.
Denna forskningsartikel publicerades i Anticancer Research (2022). Studien föreslog att hydroxiklorokin orsakar BxPC3-celldöd genom att hämma BCL-XL-genen.
Denna forskning publicerades 2020 i Journal of Cellular Biochemistry. I studien anges att en naturlig förening, salidrosid, uppvisar anti-canceraktiviteter i BxPC-3-celler genom att reglera HIF-1α (hypoxia-inducible factor) och LOXL2-signaleringskaskaden.
Denna artikel i Biomedicine & Pharmacotherapy tyder på att ibrutinib kan användas som ett utmärkt strålningsstimulerande medel hos patienter med bukspottkörtelcancer. En in vitro-studie på BxPC-3-celler tyder på att det minskar fosforyleringen av EGFR i BxPC3 och uttrycket av pAKT och nedströmsgener som uppregleras av strålbehandling.
Kelidonin inducerar apoptos via GADD45a-p53-reglering i mänskliga cancerceller i bukspottkörteln
I denna studie i Integrative Cancer Therapies föreslås att en naturprodukt, chelidonine, utövar apoptotisk aktivitet i mänskliga bukspottkörtelceller BxPC-3 via reglering av BxPC3 p53 och GADD45a-signalering.
6. resurser för BxPC-3 Cell line: Protokoll, videor och mer
BxPC-3 cellinje har många fängslande fördelar som gör den lämplig för forskningsanvändning. Många online-resurser om BxPC-3-cellinjen nämner dess hantering, underhåll och transfektionsprotokolls.
- Transfektion av BxPC3: Den här videon är en steg-för-steg-guide för att lära sig transfektionsprotokoll för BxPC-3-celler.
Detta avsnitt av artikeln innehåller några länkar som förklarar protokoll för cellodling av BxPC3.
- BxPC3 cellodling: Denna webbplats hjälper dig att lära dig protokoll för subkulturering och hantering av kryokonserverade och proliferativa BxPC-3-kulturer.
Referenser
- Kim, Y., et al, Comparative proteomic profiling of pancreatic ductal adenocarcinoma cell lines. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Överuttryck av laminin-5 gamma-2 främjar tumörbildning av adenokarcinom i bukspottkörteln genom EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR-kaskaden. Cellulär och molekylär biovetenskap, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Elaeocarpus reticulatus fruktextrakt minskar viabiliteten och inducerar apoptos i bukspottkörtelcancerceller in vitro. Molekylärbiologiska rapporter, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al. , Anti-cancerpotential för Oxialis obtriangulata i bukspottkörtelcancercell genom reglering av ERK / Src / STAT3-medierad väg. Molekyler, 2020. 25(10): p. 2301.