AGS-celler – Undersökning av AGS-celler från magadenokarcinom i cancerforskning
AGS-celler utgör en cellinje från humant gastriskt adenokarcinom som används i stor utsträckning inom biomedicinsk forskning. Den används särskilt för att studera magcancerbiologi, inklusive tumörtillväxt, utveckling, progression och terapeutiska ingrepp. Dessutom används den för att undersöka interaktioner mellan värd och patogen.
- Tillväxtmedium
- DMEM-medium innehållande 10 % FBS, 4 mM L-glutamin, 4,5 g/l glukos, 1,5 g/l NaHCO3 och 1,0 mM natriumpyruvat används för att odla AGS-celler. Mediet bör bytas 2 till 3 gånger i veckan.
- Fördubblingstid
- Fördubblingstiden för AGS-celler varierar mellan 24 och 48 timmar.
- Tillväxt
- AGS-celler är vidhäftande. De växer till monoskikt.
- Biosäkerhetsnivå
- BSL-2
- Finns hos
- Cytion — Beställ AGS
Allmänna egenskaper och ursprung för AGS-celler
Det är viktigt att känna till en cellinjes ursprung och allmänna egenskaper innan man börjar arbeta med den. I detta avsnitt behandlas följande: Vad är AGS-celler? Vad är AGS-cellens ursprung? Vilken morfologi har AGS-cancercellinjen?
- AGS-cellinjen härstammar från magvävnad hos en 54-årig kaukasisk kvinna med gastriskt adenokarcinom. Den isolerades 1979 [1].
- AGS-celler har en epitelial morfologi.
- De gastriska epitelcellerna AGS är hyperdiploida. Det modala kromosomantalet för AGS-celler är 49, vilket förekommer i nästan 60 % av cellerna. Polyploidi förekommer också i cirka 3,6 % av cellerna.
Information om odling av AGS-cellinjen
För korrekt hantering och skötsel av en cellinje måste du känna till de grundläggande odlingsbegreppen. I synnerhet bör du lära dig: Vad är AGS-cellernas fördubblingstid? Vad är AGS-cellernas odlingsmedium? Hur subkultiverar man AGS-celler? Vilka frysmedier används för gastriska epitelceller av typen AGS?
Viktiga punkter för odling av AGS-celler
Fördubblingstid:
Fördubblingstiden för AGS-celler ligger mellan 24 och 48 timmar.
Adhärenta eller i suspension:
AGS-celler är vidhäftande. De växer till monolager.
Utsädestäthet:
AGS-celler sås med en celltäthet på 1 x 104 celler/cm2. Vid denna täthet bildar cellerna ett konfluent monolager inom 3 till 5 dagar. Efter att det gamla mediet har avlägsnats sköljs cellerna med 1 x PBS och inkuberas med Accutase-dissociationslösning. De lossnade cellerna resuspenderades i odlingsmedium och centrifugerades. Cellpelleten resuspenderades igen, och efter räkning av AGS-cellerna överfördes de till en ny kolv för tillväxt.
Odlingsmedium:
DMEM-medium innehållande 10 % FBS, 4 mM L-glutamin, 4,5 g/l glukos, 1,5 g/l NaHCO3 och 1,0 mM natriumpyruvat används för att odla AGS-celler. Mediet bör bytas 2 till 3 gånger i veckan.
Odlingsförhållanden:
AGS-celler förvaras i en fuktad inkubator (vid 37 °C) med 5 % CO2-tillförsel.
Förvaring:
Frysta AGS-celler förvaras i elektriska frysar vid en temperatur under -150 °C eller i flytande kväves ångfas under en längre tid.
Frysningsprocess och medium:
CM-1- eller CM-ACF-medium används för att frysa AGS-celler. Cellfrysningen sker genom en långsam frysningsprocess som endast tillåter en temperatursänkning på 1 °C per minut och skyddar cellernas livskraft.
Upptining:
Frysta magepitelceller omrörs snabbt i ett 37 °C varmt vattenbad i 40 till 60 sekunder. Upptinade celler resuspenderas i färskt odlingsmedium och hälls i nya kolvar för tillväxt. Efter 24 timmars inkubation byts mediet ut för att avlägsna komponenter från frysmediet. Därefter centrifugeras de upptinade cellerna och frysmediets beståndsdelar avlägsnas. Därefter resuspenderas de skördade cellerna igen och hälls i kolven som innehåller odlingsmediet.
Biosäkerhetsnivå:
Laboratoriemiljöer med biosäkerhetsnivå 2 är nödvändiga för odling av AGS-celler.
AGS-cellinjen: Fördelar och begränsningar
I detta avsnitt av artikeln belyser vi några av de viktigaste fördelarna och begränsningarna med AGS-celler.
Fördelar
De främsta fördelarna med AGS-celler från magslemhinnan är:
Lätt att odla
AGS-cellinjen för magcancer är lätt att underhålla i cellodlingslaboratorier. Den har inga komplicerade eller krävande krav på cellodling. Dessutom uppvisar den goda tillväxtegenskaper, vilket gör den till ett idealiskt val för att studera magcancerbiologi.
Relevans för magcancer
AGS-celler härstammar från humant magadenokarcinom, vilket gör att de används i stor utsträckning för att studera magcancerbiologi och terapeutiska ingrepp.
Begränsningar
Begränsningarna förknippade med AGS-cellinjen är:
In vitro-cellmodell
AGS-celler odlas i biomedicinska forskningslaboratorier under artificiella förhållanden. Därför kanske de inte helt återspeglar den in vivo-mikromiljön vid magcancer och andra cellulära och molekylära interaktioner.
Användningsområden för AGS-celler
AGS-celler används specifikt för att studera magcancerbiologi. De har många andra lovande tillämpningar inom det biomedicinska området. Några av de intressanta forskningstillämpningarna för AGS-celler är:
- Magsårsforskning: AGS-celler är ett utmärkt forskningsverktyg för att undersöka cellulära och molekylära mekanismer som ligger till grund för magcancer tillväxt, metastasering och invasion. Forskare använder också magepitel-AGS-celler för att studera olika cellulära processer, genetiska mutationer och signalvägar i utvecklingen av magcancer. En studie i Oncology Reports (2019) fann att mikroRNA-183-5p.1 främjar tumörcellers proliferation, migration och invasion genom att hämma Bcl 2/P53-signalkaskaden. Dessutom nedreglerar det TPM1-genen för att utöva dessa effekter. Således föreslås både mikroRNA och TPM1 som effektiva molekylära mål för utveckling av riktade terapier mot magcancer [2].
- Läkemedelsscreening: AGS-celler har ofta använts för att screena nya och effektiva läkemedel mot magcancer. Forskare utvärderar cytotoxiciteten och effekten hos potentiella läkemedel med hjälp av AGS-cellinjen. Studier har också genomförts för att identifiera nya molekylära mål och utveckla nya riktade terapier för att bekämpa magcancer. I forskning som genomfördes 2021 användes AGS-magcancerceller för att studera den terapeutiska effekten av läkemedlet paklitaxel. Resultaten visade att paklitaxel inducerar en mitotisk katastrof, en integrerad mekanism för apoptos eller celldöd i AGS-celler. Dessutom främjade det även autofagi i magcancerceller [3].
- Interaktioner mellan värd och patogen: AGS-cancercellinjen används även för att studera interaktioner mellan värd och patogen. Detta hjälper forskare att förstå de cellulära mekanismerna och reaktionerna som är involverade i en infektion. I en studie som genomfördes 2020 observerades till exempel att små icke-kodande RNA som finns i yttre membranvesiklar hos Helicobacter pylori minskar utsöndringen av interleukin 8 i humana AGS-celler [4].
5. Forskningspublikationer om AGS-cellinjen
I detta avsnitt av artikeln behandlas några intressanta och ofta citerade forskningspublikationer om AGS-celler.
Denna studie i Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) föreslog att salidrosid, en naturlig förening, inducerar skyddande autofagi och celldöd i AGS-celler från magsäckens epitel genom modulering av PI3K/AKT/mTOR-signalvägen.
Denna studie publicerades i Biomedicine & Pharmacotherapy (2018). Den undersökte de synergistiska antikancereffekterna av astragaluspolysackarid och läkemedlet apatinib i AGS-celler. Studieresultaten visade att astragalus förstärker apatinibs antitumöreffekter genom att hämma AKT-signaleringen.
Denna forskning i Journal of Ethnopharmacology (2018) föreslog att curcuzedoalide, en naturlig förening från växten Curcuma zedoaria Roscoe, bidrar till dess cytotoxiska potential mot AGS-celler.
Överuttryck av FOXA1 hämmar cellproliferation och EMT hos AGS-celler från mänsklig magcancer
Denna publikation i Gene (2018) föreslog att uppreglering av FOXA1 hämmar proliferation av AGS-celler från magadenokarcinom samt epitel-till-mesenkym-övergång (EMT) och invasion.
sncRNA förpackade av Helicobacter pylori-ytmembranvesiklar dämpar IL-8-sekretionen i humana celler
Denna forskningsartikel publicerades i International Journal of Medical Microbiology 2020. I denna studie användes AGS-celler för att studera interaktioner mellan värd och patogen. Resultaten visade att Helicobacter pylori innehåller icke-kodande RNA i sina yttre membranvesiklar som påverkar IL-8-nivåerna i AGS-celler.
Resurser för AGS-cellinjen: protokoll, videor och mer
Här följer några resurser om AGS-celler.
- Transfektionsprotokoll för AGS-celler: Denna video är en steg-för-steg-guide för att lära sig transfektionsprotokollet för gastriska epitelceller av typen AGS.
Följande länk innehåller protokollet för AGS-cellodling.
- Protokoll för AGS-cellodling: Denna webbplats innehåller användbar information om AGS-cellmedier och protokoll för cellodling. Kortfattat ger den ett protokoll för subodling av AGS-celler från magsäckens epitel samt hantering av prolifererande och kryokonserverade AGS-odlingar.
- Subkultivering av AGS-celler: Denna webbplats förklarar subkultiveringsproceduren för AGS-celler i detalj.
Referenser
- Phuc, B.H., et al., Jämförande genomik av två vietnamesiska Helicobacter pylori-stammar, CHC155 från en patient med magcancer utanför cardia och VN1291 från en patient med duodenalsår. Scientific Reports, 2023. 13(1): s. 8869.
- Lin, J., et al., miRNA‑183‑5p. 1 främjar migration och invasion av AGS-celler från magcancer genom att rikta in sig på TPM1 Rättelse i/10.3892/or. 2020.7902. Oncology reports, 2019. 42(6): s. 2371–2381.
- Khing, T.M., et al., Effekten av paklitaxel på apoptos, autofagi och mitotisk katastrof i AGS-celler. Scientific Reports, 2021. 11(1): s. 23490.
- Zhang, H., et al., sncRNA förpackade av Helicobacter pylori-ytmembranvesiklar dämpar IL-8-sekretionen i humana celler. International Journal of Medical Microbiology, 2020. 310(1): s. 151356.