A431-celler - Djupgående analys av epidermoidcarcinomceller i dermatologisk forskning

A431 är en human epidermoid cancercellinje. Det används ofta inom det biomedicinska forskningsområdet, främst inom cancerbiologi, immunonkologi och toxikologiska studier. Dessutom överuttrycker A431-celler EGFR (epidermal tillväxtfaktorreceptor) och används därför som en värdefull in vitro-modell för att studera cellcykeln och cancerassocierade cellsignaleringsvägar.

I den här artikeln förklaras grunderna för cancercellinjen A431. Du kommer att lära dig följande:

  1. A431-celler: Allmänna egenskaper och ursprung
  2. A431 cellinje: Information om odling
  3. Fördelar och nackdelar med A431-cellinjen
  4. Forskningsapplikationer av A431-celler
  5. Forskningspublikationer med A431-celler
  6. Resurser för A431 cellinje: Protokoll, videor och mer

1. A431-celler: Allmänna egenskaper och ursprung

Detta avsnitt av artikeln hjälper dig att känna till den allmänna informationen om A431-cellinjen som du behöver veta innan du arbetar med den. Till exempel, vad är ursprunget till Vad är A431-cellinjen? Vilka är A431-cellinjens egenskaper? Vilken morfologi har A431-cellerna? Varifrån kommer A431-cellerna?

  • A431, en human hudcancercellinje, erhölls från epidermis hos en 85-årig kvinnlig patient med epidermoid karcinom [1]. Den etablerades av D.J. Giard, et al, som utvecklat många andra cellinjer från solida tumörer.
  • A-431-cellerna har en epitelial morfologi. De aggregerar och bildar cellkluster.
  • Hudcancercellinjen a431 är hypertriploid. Det modala kromosomnumret för denna cellinje är 74, vilket förekommer i cirka 36% av cellerna. Högre ploidier förekommer också i cirka 1% av en cellpopulation.

Tumör som växer under huden och infiltrerar underliggande vävnader.

2.a431 cellinje: Information om odling

Att känna till en cellinjes krav och procedurer för cellodling kan göra hanteringen av den problemfri. Denna del av artikeln hjälper dig att lära dig viktiga punkter för odling av A431-cellinjen. Till exempel kommer du att veta, Vad är fördubblingstiden för A431-celler? Är A431 cancercellinje vidhäftande? Vilket tillväxtmedium används för A431?

Viktiga punkter för odling av A431-celler

Fördubblingstid:

Populationsfördubblingstiden för A431-celler varierar från 80 till 100 timmar.

Adherent eller i suspension:

A431 är en adherent cellinje.

Utsådd densitet:

en celldensitet på 1 x104 celler/cm2 är idealisk för A431-cellinjen. Cellerna tar nästan 4 dagar på sig att bli konfluenta vid denna densitet. Adherenta celler tvättas med PBS (1x) och inkuberas med Accutase passaging solution. Därefter resuspenderades cellerna i ett odlingsmedium och centrifugerades. De skördade cellerna resuspenderades igen och fördelades i nya kolvar för tillväxt.

Tillväxtmedium:

DMEM-medium kompletterat med 10% fetalt bovint serum, 4,5 g/L glukos, 1,0 mM natriumpyruvat, 1,5 g/L NaHCO3 och 4 mM L-glutamin används för att odla A431-cellinjen. Media bör bytas ut varannan till var tredje dag i veckan.

Tillväxtförhållanden:

A431-cancerceller odlas i en befuktad inkubator utrustad med en 5% CO2-källa vid 37°C temperatur.

Förvaring:

Cellinjen kan förvaras i en elektrisk frys eller i ångfas med flytande kväve vid en temperatur under -150°C eftersom det bidrar till att skydda cellernas livskraft.

Frysningsprocess och medium:

CM-1 eller CM-ACF är de två starkt rekommenderade frysmedierna som används för A431-celler. Cellerna fryses genom att använda en långsam frysmetod som gör att temperaturen sjunker med endast 1 grad per minut.

Upptiningsprocess:

Frysta A431-celler tinas i ett 37°C vattenbad innehållande ett antimikrobiellt medel under 40 till 60 sekunder. När endast en liten isklump återstår tillsätts cellerna med odlingsmedia och centrifugeras. De skördade cellerna resuspenderas och hälls i odlingsflaskor för tillväxt.

Biosäkerhetsnivå:

Biosäkerhetsnivå ett rekommenderas för hantering och underhåll av A431-kulturer.

A-431-sfäroider vid olika celldensiteter.

3.för- och nackdelar med A431-cellinjen

A431-cellinjen har särskiljande egenskaper och erbjuder flera fördelar och nackdelar. Här nedan har vi sammanfattat några av dessa.

Fördelar och nackdelar

De främsta fördelarna med cancercellinjen A431 är

Överuttryck av EGFR

A431-cellerna överuttrycker den epidermala tillväxtfaktorreceptorn (EGFR). De fungerar som en positiv kontroll för studier av EGFR-signalering och dess betydelse vid cancer. De används också för att utvärdera nya cancerbehandlingar.

Tumorigenicitet

A431-celler är tumörframkallande och har förmåga att bilda tumörer. De kan användas för att utveckla xenograft-cancermodeller, som är värdefulla verktyg för att studera tumörtillväxtens dynamik och utvärdera nya cancerbehandlingar.

Nackdelar med A431

Nackdelarna med A431-celler är följande:

Genetiska abnormiteter

A431 är en cancercellinje som innehåller genetiska mutationer och förändringar som kan skilja den från den ursprungliga tumörens egenskaper.

Mikrobiell kontaminering

A431 är benägen för mikrobiell kontaminering, främst bakteriell kontaminering. Genom att upprätthålla aseptiska odlingsförhållanden av standardtyp kan man dock förhindra sådan kontaminering i A431-cellkulturer.


4. Forskningsapplikationer för A431-celler

Cellinjen A431 används flitigt inom cancerforskningen. Några lovande tillämpningar av denna hudcancercellinje listas här. Cancerbiologi: Hudcancercellinjen A431 är ett utmärkt forskningsverktyg för att undersöka cellulära och molekylära mekanismer som driver cancertillväxt, utveckling, metastasering och invasion.
Forskare har i stor utsträckning använt denna cellinje för att intensivt studera de cellsignaleringsvägar som är involverade i olika cancercellprocesser. Till exempel visade en studie från 2018 att PI3K/AKT/mTOR-signalvägen är involverad i cancercellers proliferation och att hämning av denna signalväg inducerar apoptos i hudtumörceller, A431 [2]. I en annan studie rapporterades dessutom att PI3K/AKT/mTOR-signalvägen bidrar till metastasering av hudcancerceller och övergången från epitel till mesenkymal (EMT), vilket tyder på att den spelar en avgörande roll för utveckling och progression av cancer [3]. Testning och utvärdering av läkemedel: A431-celler används för att utvärdera effekten och effektiviteten hos potentiella läkemedelskandidater mot cancer. Forskare fastställer läkemedlens effekter på cancercellers proliferation, metastasering, invasion och apoptos genom att utföra flera laboratorieexperiment - forskning utförd av Nurhidayah Ab. Rahim och kollegor använde A431-celler och bedömde den terapeutiska potentialen hos en biogeniskt syntetiserad Alstonia angustiloba-växt silvernanopartiklar 2022. Resultaten visade att angustiloba-AgNPs utövade antiproliferativa effekter på skivepitelcancerceller i huden [4]. Xenograftmodeller för tumörer: A431-cellinjen är tumörframkallande och kan bilda tumörer när den inokuleras i en musmodell. Den är därför ett användbart verktyg för att utveckla xenograftmodeller för mus för att undersöka cancerbiologi in vivo. Flera studier har använt cancercellinjen A431 för att utveckla xenograftmodeller för tumörer. Yu Jin Lim och hans team utvecklade t.ex. en musmodell för hudtumörxenograft med A431-celler för att bedöma de antitumör- och strålningssensibiliserande effekterna av exogen epidermal tillväxtfaktor (EGF) in vivo [5]. 5. Forskningspublikationer med A431-celler Här är några viktiga forskningspublikationer som innehåller A431-cellinjen för hudcancer. Effektiviteten hos biopolymera PVA-AuNPs och PCL-Curcumin-laddade elektrospunna nanofibrer och deras anticanceraktivitet mot A431-cellinjen för hudcancer Denna artikel publicerades i Materials Today Communications 2020. Studien utvärderade anticancerpotentialen hos poly-ε-kaprolakton curcumin-laddade elektrospunna nanofibrer och polyvinylalkohol-AuNPs mot A431 cancerceller. miRNA-221 främjar progression av kutan skivepitelcancer genom att rikta in sig på PTEN Denna studie publicerad i Cellular & Molecular Biology Letters (2019) föreslog att microRNA-221 spelar en onkogen roll i kutan skivepitelcancer genom att rikta in sig på PTEN-genen. Svampvincristine från Eutypella spp-CrP14 isolerad från Catharanthus roseus inducerar apoptos i human skivepitelcancercellinje-A431 Denna forskning i BMC Complementary Medicine and Therapies (2016) tyder på att vincristine, en sekundär metabolit isolerad från en svamp, Eutypella spp - CrP14, inducerar apoptos i A431-celler. Overexpression of CDC42SE1 in A431 cells reduced cell proliferation by inhibiting the Akt pathway Denna studie publicerades 2019 i tidskriften Cells. Denna forskning föreslog CDC42SE1-genen som en viktig biomarkör för hudcancerprogression eftersom dess nedreglering underlättar tumörbildning. Metformin hämmar proliferationen av A431-celler genom att modulera PI3K/Akt-signalvägen Denna forskning publicerades i Experimental and therapeutic medicine 2015. Den föreslog att metformin undertryckte spridningen av hudcancercellinjen a431 genom att reglera PI3K/Akt-signalvägen. 6. Resurser för A431 Cell line: Protocols, Videos, and More Här är några online-resurser som handlar om hudcancercellinjen A431. Transfecting A-431 cells: Den här länken ger en steg-för-steg-guide till transfektion av A431-cancerceller. Följande länk innehåller information om cellodling för A431-celler. A431 cancer cellinje: Den här länken innehåller nödvändig cellodlingsinformation om A431-cellinjen. Den omfattar odlingsmedier, celldensitet, hantering av kryokonserverade och proliferativa kulturer etc. Odling av A431-celler: Denna webbplats innehåller ett kortfattat protokoll för odling av A431-cellinjen.

Referenser

Quadri, M., et al, Investigating Cutaneous Squamous Cell Carcinoma in vitro and in vivo: Novel 3D Tools and Animal Models. Front Med (Lausanne), 2022. 9: p. 875517.
Zeng, N., et al., Anticanceraktivitet av koffeinsyra n-butylester mot A431 hudcarcinomcellinje sker via induktion av apoptos och hämning av mTOR / PI3K / AKT-signalvägen Retraktion i / 10.3892 / mmr. 2021.12011.
Rapporter om molekylär medicin, 2018. 17(4): p. 5652-5657.
Rahaman, A., et al., Eukalyptol riktar sig till PI3K / Akt / MTOR-vägen för att hämma metastaser av hudcancer.
Carcinogenesis, 2022. 43(6): s. 571-583. Rahim, N.A., et al., Undersökning av antiproliferativa mekanismer hos nanopartiklar av Alstonia angustiloba-silver i skivepitelcancer i huden (A431 cellinje).
Journal of Molecular Structure, 2022. 1250: s. 131814. Lim, Y.J., et al., Tumörtillväxtundertryckning och förbättrad radiorespons genom en exogen epidermal tillväxtfaktor i musxenograftmodeller med A431-celler.
Cancerforskning och behandling: Officiell tidskrift för koreanska cancerföreningen, 2015. 47(4): p. 921-930.


Vi har upptäckt att du befinner dig i ett annat land eller använder ett annat webbläsarspråk än det som för närvarande är valt. Vill du acceptera de föreslagna inställningarna?

Nära