Mediu de cultură celulară

Celulele cultivate necesită un control meticulos al mediului pentru o creștere și o întreținere reușite. O abordare cuprinzătoare implică asigurarea sterilității, furnizarea de nutrienți, stabilitatea pH-ului și controlul temperaturii.

Condiții sterile și aprovizionare cu nutrienți

Pentru a preveni contaminarea și a asigura viabilitatea celulelor, un mediu steril este esențial. Acest lucru se realizează de obicei prin tehnici aseptice și echipamente specializate, cum ar fi hotele cu flux laminar. Nutrienții sunt furnizați prin medii de cultură, care conțin un amestec de ingrediente esențiale, inclusiv:

  • Săruri anorganice: Vitale pentru menținerea echilibrului osmotic și furnizarea ionilor necesari pentru activitățile celulare.
  • Carbohidrați: Servesc ca surse de energie; glucoza este cel mai frecvent utilizat zahăr.
  • Aminoacizi: Elementele de bază ale proteinelor; unele sunt esențiale și nu pot fi sintetizate de celule.
  • Vitamine: Acționează ca co-factori pentru reacțiile enzimatice; vitaminele B sunt esențiale pentru metabolismul celular.
  • Acizi grași și lipide: Componente esențiale pentru integritatea și funcționarea membranei celulare.
  • Proteine și peptide: În mediile fără ser, acestea înlocuiesc factorii de creștere și proteinele de legare furnizate de obicei de ser.
  • Serul: Adesea inclus ca sursă de factori de creștere, deși alternativele fără ser câștigă popularitate pentru a reduce variabilitatea și riscurile de contaminare.
  • stabilitatea pH-ului și a temperaturii: Celulele au nevoie de obicei de un pH cuprins între 7,2 și 7,4 pentru o creștere optimă. Aceasta este reglată prin sisteme tampon, care pot fi pe bază de CO2/bicarbonat sau pot fi obținute chimic folosind agenți precum HEPES. Temperatura este menținută în jurul valorii de 37°C pentru a imita condițiile fiziologice.

Variante de mediu și optimizare

De-a lungul anilor, au fost dezvoltate diverse medii bazale pentru a satisface anumite tipuri de celule:

  • Soluții saline echilibrate: Formează baza unor formulări de medii mai complexe.
  • Medii bazale, cum ar fi mediul minim esențial (MEM), sunt utilizate pentru culturi primare și celule diploide.
  • Medii complexe: Ca RPMI 1640, sunt potrivite pentru o gamă mai largă de celule de mamifere.
  • Medii fără ser: Adaptate pentru aplicații specifice, reducând riscul de contaminare cu componente de origine animală.

Prepararea mediului și controlul calității

Mediile pot fi preparate intern din ingrediente esențiale sau achiziționate ca soluții gata preparate. Controlul calității presupune asigurarea absenței contaminanților și a concentrației adecvate a ingredientelor. Reconstituirea mediilor sub formă de pudră necesită apă de calitate superioară, iar mediile preparate trebuie sterilizate, de obicei prin filtrare.

Utilizarea serului și considerații de siguranță

Utilizarea serului, în special a serului fetal bovin (FBS), este frecventă datorită conținutului său bogat în factori de creștere. Cu toate acestea, din cauza preocupărilor legate de boli precum ESB, se respectă protocoale stricte de testare și aprovizionare pentru a se asigura siguranța.

Orientări și tendințe în materie de reglementare

Reglementările reglementează materialele de origine animală în culturi, subliniind importanța aprovizionării și testării. Tendința de eliminare a acestor materiale, acolo unde este posibil, se reflectă în dezvoltarea de medii alternative fără ser și fără animale.

În concluzie, mediile de cultură celulară joacă un rol fundamental în creșterea și menținerea celulelor in vitro. Fiecare componentă este atent selectată și optimizată pentru a imita mediul in vivo, asigurând celulelor condiții de creștere, supraviețuire și funcționalitate.

DMEM, w: 4,5 g/L Glucoză, w: 4 mM L-Glutamină, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Piruvat de sodiu
DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) este un mediu bazal foarte versatil și utilizat pe scară largă, conceput pentru a susține creșterea unei game variate de celule de mamifere în cercetarea biologică. Este un mediu ideal pentru cultivarea fibroblastelor primare, a neuronilor, a celulelor gliale, a HUVEC-urilor, a celulelor musculare netede, precum și a liniilor celulare populare precum HeLa, 293, Cos-7 și PC-12.
Ceea ce diferențiază DMEM de alte medii este compoziția sa unică. Acesta conține o creștere impresionantă de patru ori a concentrației de aminoacizi și vitamine în comparație cu Eagle's Minimal Essential Medium original. Dezvoltat inițial cu un nivel scăzut de glucoză (1 g/L) și piruvat de sodiu, DMEM este frecvent utilizat cu niveluri mai ridicate de glucoză, fie cu piruvat de sodiu, fie fără acesta. În special, DMEM nu conține proteine, lipide sau factori de creștere, fiind necesară suplimentarea. Pentru a obține o creștere optimă, o abordare comună este suplimentarea DMEM cu 10% ser fetal bovin (FBS). În plus, DMEM utilizează un sistem tampon de bicarbonat de sodiu, care necesită un mediu cu 5-10% CO2 pentru a menține un pH fiziologic.
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) este foarte apreciat printre mediile definite pentru cultura de celule și țesuturi, răspunzând nevoilor de creștere ale diferitelor fenotipuri de celule aderente. Acesta depășește mediul Eagle original, dezvoltat în anii 1950 pentru cultivarea celulelor de pui, prin formularea suplimentară îmbunătățită cunoscută sub numele de modificarea Dulbecco. Această modificare mărește semnificativ conținutul de aminoacizi și vitamine selecționate, de până la patru ori față de mediul original.
În domeniul culturii de celule, DMEM joacă un rol vital ca mediu de creștere pentru diferite tipuri de celule, inclusiv celule primare, celule stem și celule transformate. De asemenea, cercetătorii utilizează versiunea modificată a DMEM pentru o gamă largă de aplicații de cercetare, cum ar fi descoperirea de medicamente, ingineria țesuturilor și studiul căilor de semnalizare celulară.

Controlul calității

Steril-filtrat


Depozitare și termen de valabilitate

A se păstra la +2°C până la +8°C, ferit de lumină.
Odată deschis, depozitați la 4°C și utilizați în termen de 6-8 săptămâni.


Condiții de transport

Temperatură ambiantă


Întreținere

Păstrați la frigider la +2°C până la +8°C, în întuneric. Evitați înghețarea și încălzirea frecventă la +37°C, deoarece aceasta reduce calitatea produsului.
Nu încălziți mediul peste 37°C și nu utilizați surse de căldură necontrolate, cum ar fi aparatele cu microunde.
În cazul în care urmează să se utilizeze doar o parte din mediu, se îndepărtează cantitatea necesară și se încălzește la temperatura camerei înainte de utilizare.


Compoziție



Categoria
Componente
Concentrație (mg/L)


Aminoacizi
Glicină
30.00



L-arginină HCl
84.00



L-cistină 2 HCl
62.57



L-Glutamină
584.00



L-histidină HClH2O
42.00



L-Isoleucină
105.00



L-Leucină
105.00



L-lizină HCl
146.00



L-Metionină
30.00



L-fenilalanină
66.00



L-serină
42.00



L-Treonină
95.00



L-triptofan
16.00



L-tirozină 2 Na 2H2O
103.79



L-Valină
94.00


Vitamine
Clorură de colină
4.00



Pantotenat D-calcic
4.00



Acid folic
4.00



mio-Inositol
7.20



Nicotinamidă
4.00



Piridoxal HCl
4.00



Riboflavină
0.40



Tiamină HCl
4.00


Săruri anorganice
CaCl2 2H2O
265.00



Fe(NO3)3 9H2O
0.10



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
200.10



NaCl
6400.00



NaHCO3
3700.00



NaH2PO4 2H2O
141.73


Alte componente
D-glucoză
4500.00



Fenol roșu sare de sodiu
15.90



Piruvat de sodiu
110.00

25,00 EUR*
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamină, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
Unul dintre cele mai utilizate medii sintetice de cultură celulară este Minimum Essential Medium Eagle (MEM). Dezvoltat de Harry Eagle, acest mediu a fost introdus pentru prima dată în 1959 și de atunci a devenit o alegere populară pentru diverse tipuri de celule cultivate în straturi monolaterale și linii de celule aderente.
Ce conține EMEM?
EMEM este o versiune modificată a mediului minim esențial Eagle, care conține Earle's Balanced Salt Solution, aminoacizi neesențiali, L-glutamină, piruvat de sodiu și bicarbonat de sodiu. Este important de reținut că acest nivel de bicarbonat de sodiu este destinat utilizării în mediu cu 5% CO2 în aer. Pentru a-și menține eficiența, se recomandă depozitarea mediului la o temperatură cuprinsă între 2 și 8 °C, în întuneric, atunci când nu este utilizat.
Pentru ce este utilizat EMEM?
Mediul esențial minim Eagle (EMEM) este un mediu de cultură celulară care poate menține celulele în cultura de țesuturi. Mediul conține concentrații mai mari de aminoacizi, permițând o aproximare mai exactă a compoziției proteice a celulelor de mamifere cultivate. EMEM poate fi utilizat pentru cultivarea diferitelor celule, inclusiv fibroblaste, celule din linia celulară de cancer hepatic uman (HepG2) și celule astrocite derivate din progenitorii creierului fetal uman (PDA). Se utilizează de obicei în prezența serului fetal bovin (FBS), a serului de vițel sau de cal.
Prin ce se deosebește EMEM de alte medii de cultură celulară?
În timp ce EMEM și mediul Dulbecco's Eagle modificat (DMEM) au unele asemănări, ele sunt, de asemenea, diferite. Ambele medii nu conțin proteine și conțin aminoacizii, sărurile, glucoza și vitaminele necesare pentru a furniza energie unei celule și pentru a o menține în cultura de țesuturi. Cu toate acestea, formula DMEM este modificată pentru a conține de până la patru ori mai multe vitamine și aminoacizi și de două până la patru ori mai multă glucoză decât EMEM. Este demn de remarcat faptul că EMEM este, de asemenea, diferit de formularea MEM originală.


Controlul calității

Steril-filtrat


Depozitare și termen de valabilitate

A se păstra la +2°C până la +8°C, ferit de lumină.
Odată deschis, depozitați la 4°C și utilizați în termen de 6-8 săptămâni.


Condiții de transport

Temperatură ambiantă


Întreținere

Păstrați la frigider la +2°C până la +8°C, în întuneric. Evitați înghețarea și încălzirea frecventă la +37°C, deoarece aceasta reduce calitatea produsului.
Nu încălziți mediul peste 37°C și nu utilizați surse de căldură necontrolate, cum ar fi aparatele cu microunde.
În cazul în care urmează să se utilizeze doar o parte din mediu, se îndepărtează cantitatea necesară și se încălzește la temperatura camerei înainte de utilizare.



Compoziție



Categoria
Componente
Concentrație (mg/L)


Aminoacizi
L-arginină HCl
126.00


L-cistină 2 HCl
31.30


L-Glutamină
292.00


L-histidină HClH2O
42.00


L-Isoleucină
52.00


L-Leucină
52.00


L-lizină HCl
72.50


L-Metionină
15.00


L-fenilalanină
32.00


L-Treonină
48.00


L-triptofan
10.00


L-tirozină 2 Na 2H2O
51.90


L-Valină
46.00


Vitamine
Clorură de colină
1.00


Vitamine
Pantotenat D-calcic
1.00


Acid folic
1.00


mio-Inositol
2.00


Nicotinamidă
1.00


Piridoxal HCl
1.00


Riboflavină
0.10


Tiamină HCl
1.00


Săruri anorganice
CaCl2 2H2O
265.00


Săruri anorganice
KCl
400.00


MgSO4
97.67


NaCl
6800.00


NaHCO3
2200.00


NaH2PO4
122.00


Alte componente
D-glucoză
1000.00


Alte componente
Fenol roșu sare de sodiu
11.00

25,00 EUR*
Mediu Ham's F12, w: 1,0 mM glutamină stabilă, w: 1,0 mM piruvat de sodiu, w: 1,176 g/L NaHCO3
Mediul Ham's F-12, cunoscut și sub denumirea de Ham's F-12 Nutrient Mix, este un mediu bazal utilizat pe scară largă, conceput special pentru cultura celulară. Acesta a fost utilizat pe scară largă pentru însămânțarea fără ser, cu o singură celulă, a celulelor de ovar de hamster chinezesc (CHO), a celulelor pulmonare și a celulelor L de șoarece. În plus, Ham's F-12 este mediul de elecție pentru un test de toxicitate clonală (CTA).
Unul dintre avantajele sale notabile este capacitatea de a susține creșterea celulară fără a fi necesară suplimentarea cu ser. Acest lucru elimină interferențele potențiale cauzate de componentele serice, asigurând rezultate experimentale consecvente și fiabile. Prin furnizarea unui mediu de cultură fără ser, mediul Ham's F-12 oferă cercetătorilor un control mai mare asupra investigațiilor lor.
O altă caracteristică cheie a mediului Ham's F-12 este capacitatea sa de a fi utilizat pentru plantarea de celule unice. Acest lucru îl face o alegere excelentă pentru o varietate de linii celulare, inclusiv celule CHO, celule pulmonare și celule L de șoarece. Compoziția nutritivă optimizată a mediului facilitează atașarea și creșterea eficientă a celulelor individuale, permițând stabilirea de culturi celulare omogene cu reproductibilitate îmbunătățită.
În plus, mediul Ham's F-12 a devenit recunoscut ca fiind mediul preferat pentru testul de toxicitate clonală (CTA). Acest test joacă un rol esențial în evaluarea efectelor citotoxice ale substanțelor asupra celulelor. Prin utilizarea mediului Ham's F-12 în CTA, cercetătorii pot evalua cu exactitate impactul diferiților compuși sau tratamente asupra celulelor individuale, oferind informații valoroase privind profilurile toxicologice.
Controlul calității

pH = 7,2 +/
- 0,02 la 20-25°C.
Fiecare lot a fost testat pentru sterilitate și absența micoplasmei și a bacteriilor.

Păstrare

A se păstra la frigider între +2°C și +8°C în întuneric. Înghețarea și încălzirea până la +37° C minimizează calitatea produsului.
Nu încălziți mediul la mai mult de 37° C și nu utilizați surse necontrolabile de căldură (de exemplu, aparate cu microunde).
În cazul în care urmează să se utilizeze doar o parte din mediu, scoateți această cantitate din flacon și încălziți-o la temperatura camerei.
Termenul de valabilitate pentru orice mediu, cu excepția mediului de bază, este de 8 săptămâni de la data fabricării.

Compoziție




Componente
mg/L


Săruri anorganice
Clorură de calciu x 2H2O
44,00



Sulfat de cupru(II) x 5H2O
0,00



Sulfat de fier (II) x 7H2O
0,83



Clorură de magneziu x 6H2O
122,00



Clorură de potasiu
223,65



Clorură de sodiu
7599,00



hidrogenofosfat de di-sodiuanhidru
142,04



Sulfat de zinc x 7H2O
0,86


Alte componente
D(+)-Glucoză anhidră
1801,60



Hipoxantină
4,08



Acid linoleic
0,08



Acid DL-α-Lipoic
0,21



Fenol roșu
1,20



Putrescină x 2HCl
0,16



Pirovat de sodiu
110,00



Timidină
0,73



NaHCO3
1176,00


Aminoacizi
L-Alanină
8,91



L-arginină x HCl
210,70



L-Asparagină x H2O
15,01



Acid L-aspartic
13,31



L-cisteină x HCl x H2O
35,12



L-Alanil-L-Glutamină
217,30



Acid L-glutamic
14,71



Glicină
7,51



L-histidină x HCl x H2O
20,96



L-Isoleucină
3,94



L-leucină
13,12



L-lizină x HCl
36,54



L-Metionină
4,48



L-fenilalanină
4,96



L-Prolină
34,53



L-serină
10,51



L-Treonină
11,91



L-triptofan
2,04



L-tirozină
5,44



L-Valină
11,71


Vitamine
D(+)-Biotină
0,01



Pantotenat de D-calciu
0,24



Clorură de colină
13,96



Acid folic
1,32



mio-Inositol
18,02



Nicotinamidă
0,04



Piridoxină x HCl
0,06



Riboflavină
0,04



Tiamină x HCl
0,34



Vitamina B12
1,36

25,00 EUR*
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucoză, w: 2,5 mM L-Glutamină, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Piruvat de sodiu, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 este un mediu bazal recunoscut pe scară largă și utilizat pe scară largă în cultura celulară pentru cercetarea biologică. Acesta servește ca sursă fundamentală de nutrienți pentru creșterea diferitelor linii de celule de mamifere, în special atunci când este suplimentat cu ser fetal bovin (FBS).

Această formulă unică combină Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) și Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) într-un raport precis 1:1. Adaosul de L-glutamină îmbunătățește și mai mult compoziția sa.

DMEM, derivat din Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), oferă o concentrație crescută de aminoacizi și vitamine comparativ cu predecesorul său. În schimb, Ham's F-12 se bazează pe mediul Ham's F-10, oferind un set complementar de componente esențiale.

Pentru a susține creșterea celulară optimă, este o practică obișnuită să se suplimenteze DMEM:Ham's F12 cu FBS la o concentrație tipică de 5-10%. Acest adaos este necesar deoarece mediul este lipsit de hormoni de creștere, lipide și proteine esențiale pentru dezvoltarea celulară.

DMEM:Ham's F12 încorporează un sistem tampon de pH și este adesea suplimentat cu roșu de fenol, un indicator de pH. Celulele cultivate în DMEM:Ham's F12 sau în orice mediu care utilizează sistemul tampon de bicarbonat necesită un mediu controlat de CO2 de 5-10% pentru a menține niveluri adecvate de pH.


Controlul calității

Steril-filtrat


Depozitare și termen de valabilitate

A se păstra la +2°C până la +8°C, ferit de lumină.
Odată deschis, depozitați la 4°C și utilizați în termen de 6-8 săptămâni.


Condiții de transport

Temperatură ambiantă


Întreținere

Păstrați la frigider la +2°C până la +8°C, în întuneric. Evitați înghețarea și încălzirea frecventă la +37°C, deoarece aceasta reduce calitatea produsului.
Nu încălziți mediul peste 37°C și nu utilizați surse de căldură necontrolate, cum ar fi aparatele cu microunde.
În cazul în care urmează să se utilizeze doar o parte din mediu, se îndepărtează cantitatea necesară și se încălzește la temperatura camerei înainte de utilizare.


Compoziție



Categoria
Componente
Concentrație (mg/L)


Aminoacizi
Glicină
18.75


L-Alanină
4.45


L-arginină HCl
147.50


L-Asparagină H₂O
7.50


Acid L-Aspartic
6.65


L-cisteină HCl H₂O
17.56


L-cistină 2 HCl
31.29


Acid L-glutamic
7.35


L-Glutamină
365.00


L-histidină HCl H₂O
31.48


L-Isoleucină
54.47


L-Leucină
59.05


L-lizină HCl
91.25


L-Metionină
17.24


L-fenilalanină
35.48


L-Prolină
17.25


L-serină
26.25


L-Treonină
53.45


L-triptofan
9.02


L-tirozină sare disodică
48.10


L-Valină
52.85


Vitamine
D-Biotină
0.0035


Clorură de colină
8.98


Pantotenat D-calcic
2.24


Acid folic
2.66


mio-Inositol
12.60


Nicotinamidă
2.02


Piridoxină HCl
0.031


Piridoxal HCl
2.00


Riboflavină
0.219


Tiamină HCl
2.17


Vitamina B12
0.68


Săruri anorganice
CaCl₂ 2 H₂O
154.50



CuSO₄ 5 H₂O
0.0013



Fe(NO₃)₃ 9 H₂O
0.05



FeSO₄ 7 H₂O
0.417



KCl
311.80



MgCl₂ 6 H₂O
61.20



MgSO₄
48.84



NaCl
6996.00



NaHCO₃
1200.00



Na₂HPO₄
71.02



NaH₂PO₄
54.30



ZnSO₄ 7 H₂O
0.432


Alte componente
D-glucoză
3151.00


Hipoxantină
2.40


HEPES
3574.50


Acid linoleic
0.042


Acid lipoic
0.105


Fenol roșu sare de sodiu
8.63


Putrescină 2 HCl
0.081


Piruvat de sodiu
55.00


Timidină
0.365

25,00 EUR*
Mediu Ham's F12K, w: 2.0 mM L-Glutamină, w: 2.0 mM piruvat de sodiu, w: 2.5 g/L NaHCO3
Vă prezentăm mediul Ham's F-12K (Kaighn's), o modificare specializată a mediului Ham's F-12 conceput pentru a satisface cerințele unice ale cercetării biologice. Acest mediu avansat oferă avantaje distincte, îmbunătățind cultivarea hepatocitelor umane primare, precum și a celulelor hepatice de șobolan și pui, în special în condiții de ser redus.

Mediul Ham's F-12K (Kaighn's) este atent formulat pentru a optimiza condițiile de cultură celulară. Acesta are o compoziție îmbogățită, oferind niveluri ridicate de componente esențiale, cum ar fi aminoacizii și piruvatul de sodiu, precum și elemente suplimentare, inclusiv putrescina, timidina, hipoxantina și zincul. Aceste adaosuri permit cercetătorilor să completeze mediul cu ser minim sau cu componente definite pentru anumite tipuri de celule, facilitând condiții experimentale precise.

În special, mediul Ham's F-12K (Kaighn's) nu conține proteine sau factori de creștere. În consecință, suplimentarea cu factori de creștere și ser fetal bovin (FBS) este adesea necesară, permițând cercetătorilor să adapteze mediul la cerințele liniilor lor celulare specifice. Pentru o performanță optimă, concentrația de FBS trebuie să fie atent optimizată pentru fiecare linie celulară, asigurând creșterea și funcționalitatea optime.

Pentru a menține pH-ul fiziologic, mediul Ham's F-12K (Kaighn's) utilizează un sistem tampon de bicarbonat de sodiu (2,5 g/L), necesitând un mediu controlat cu 5-10% CO2 în timpul cultivării. Acest lucru asigură menținerea pH-ului mediului în intervalul ideal pentru creșterea și viabilitatea celulelor
Controlul calității

pH = 7,2 +/
- 0,02 la 20-25°C.
Fiecare lot a fost testat pentru sterilitate și absența micoplasmei și a bacteriilor.

Păstrare

A se păstra la frigider între +2°C și +8°C în întuneric. Înghețarea, precum și încălzirea până la +37°C minimizează calitatea produsului.
Nu încălziți mediul la mai mult de 37°C și nu utilizați surse necontrolabile de căldură (de exemplu, aparate cu microunde).
În cazul în care urmează să se utilizeze doar o parte din mediu, scoateți această cantitate din flacon și încălziți-o la temperatura camerei.
Termenul de valabilitate pentru orice mediu, cu excepția mediului de bază, este de 8 săptămâni de la data fabricării.

Compoziție




Componente
mg/L


Săruri anorganice
Clorură de calciu x 2H2O
135,24



Sulfat de cupru(II) x 5H2O
0,00



Sulfat de fier (II) x 7H2O
0,83



Clorură de magneziu x 6H2O
105,72



Sulfat de magneziu x 7H2O
394,49



Clorură de potasiu
283,29



Dihidrogenfosfat de potasiu
58,52



Clorură de sodiu
7597,20



hidrogenofosfat de di-sodiuanhidru
115,02



Sulfat de zinc x 7H2O
0,14


Alte componente
D(+)-Glucoză anhidră
1260,00



Hipoxantină
4,08



Acid DL-α-Lipoic
0,21



Fenol roșu
3,00



Putrescină x 2HCl
0,32



Pirovat de sodiu
220,00



NaHCO3
2500,00



Timidină
0,73


Aminoacizi
L-Alanină
17,82



L-arginină x HCl
421,40



L-Asparagină x H2O
30,02



Acid L-aspartic
26,62



L-cisteină x HCl x H2O
70,24



L-Glutamină
292,20



Acid L-glutamic
29,42



Glicină
15,01



L-histidină x HCl x H2O
41,92



L-Isoleucină
7,87



L-leucină
26,24



L-lizină x HCl
73,04



L-Metionină
8,95



L-fenilalanină
9,91



L-Prolină
69,06



L-serină
21,02



L-Treonină
23,82



L-triptofan
4,08



L-tirozină
10,87



L-Valină
23,42


Vitamine
D(+)-Biotină
0,07



Pantotenat de D-calciu
0,48



Clorură de colină
13,96



Acid folic
1,32



mio-Inositol
18,02



Nicotinamidă
0,04



Piridoxină x HCl
0,06



Riboflavină
0,04



Tiamină x HCl
0,34



Vitamina B12
1,36

108,00 EUR*
Mediu McCoys 5A (modificat), w: 3,0 g/L glucoză, w: glutamină stabilă, w: 2,0 mM piruvat de sodiu, w: 2,2 g/L NaHCO3
Mediumul McCoy 5A este un mediu specializat, foarte recomandat, conceput pentru a facilita creșterea și replicarea virusurilor în culturi celulare primare. Acesta a câștigat o recunoaștere semnificativă pentru performanțele sale excepționale în diverse aplicații de cercetare biologică. O aplicație importantă a mediului McCoy's 5A este utilizarea sa în cultivarea liniilor celulare de carcinom colonic uman. Mai precis, a fost utilizat în studiul receptorului cuplat la proteina G bogat în leucină (LGR5) și rolul său în metastazarea cancerului de colon. Acest mediu a fost utilizat în mod eficient în cultivarea mai multor linii celulare de carcinom de colon, inclusiv HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b și TENN, permițând cercetătorilor să aprofundeze mecanismele care stau la baza metastazelor cancerului de colon. Pe lângă aplicarea sa în cercetarea cancerului, mediul McCoy's 5A s-a dovedit a fi indispensabil în studiul osteoblastelor. Cercetătorii care investighează reactivitatea ionică a hidroxiapatitei cu deficit de calciu în mediile standard de cultură celulară au utilizat acest mediu pentru a cultiva osteoblaste. Această aplicație a facilitat o mai bună înțelegere a interacțiunilor dintre osteoblaste și hidroxiapatita cu deficit de calciu, contribuind la progresele în domeniul cercetării osoase. Mediumul McCoy 5A a fost formulat meticulos prin modificarea aminoacizilor din mediumul bazal Eagle pentru a oferi un suport optim celulelor tumorale hepatice. Această formulă îmbogățită îl face potrivit pentru o gamă diversă de linii celulare stabilite, precum și pentru celule primare, sporind și mai mult versatilitatea și aplicabilitatea sa în diverse contexte de cercetare. Mediumul McCoy's 5A extinde efectele sale biochimice și fiziologice dincolo de celulele tumorale hepatice. Acesta a fost utilizat cu succes pentru a susține creșterea în culturi primare de măduvă osoasă, piele, gingie, rinichi, omentum, suprarenală, plămân, splină, embrion de șobolan și alte tipuri de celule. Această gamă largă de aplicații atestă utilitatea extinsă a mediumului McCoy's 5A în susținerea creșterii și menținerii diverselor tipuri de celule pentru cercetarea biologică cuprinzătoare. Formulă Acest mediu McCoy's 5A (modificat) conține 3,0 g/L de glucoză, glutamină stabilă, 2,0 mM de piruvat de sodiu și 2,2 g/L de NaHCO3. Controlul calității pH = 7,2 +/
- 0,02 la 20-25 °C.  Fiecare lot a fost testat pentru sterilitate și absența micoplasmei și bacteriilor. Întreținere A se păstra la frigider la +2 °C până la +8 °C, la întuneric. Congelarea și încălzirea până la +37 °C diminuează calitatea produsului.  Nu încălziți mediul la peste 37 °C și nu utilizați surse de căldură incontrolabile (de exemplu, aparate cu microunde).  Dacă se utilizează doar o parte din mediu, scoateți această cantitate din flacon și încălziți-o la temperatura camerei. Termenul de valabilitate pentru orice mediu, cu excepția mediului de bază, este de 6 până la 8 săptămâni de la data deschiderii. Compoziție Componente mg/L Săruri anorganiceClorură de calciu x 2H2O132,00 Sulfat de magneziu97,67 Clorură de potasiu400 Clorură de sodiu6.460 Hidrogen fosfat disodic (anhidru)504,00 Alte componenteD(+)-Glucoză (anhidră)3.000 Glutation (redus)0,5 Peptone din carne600,00 Sare de sodiu fenol roșu11 AminoaciziL-alanină13,3 L-arginina x HCl42,14 L-asparagină x H2O45,03 Acid L-aspartic19,97 L-Cisteină x HCl x H2O31,75 L-glutamină (stabilă)219,15 Acid L-glutamic22,07 Glicină7,51 L-histidină x HCl x H2O20,96 L-hidroxiprolină19,67 L-izoleucină39,3 L-leucină39,36 L-lizină x HCl36,54 L-metionină14,92 L-fenilalanină16,52 L-Prolină17,27 L-serină26,28 L-treonină17,87 L-triptofan3,06 Sare disodică de L-tirozină26,10 L-valină17,57 VitamineAcid p-aminobenzoic1 Acid ascorbic0,56 D(+)-Biotină0,2 D-pantotenat de calciu0,2 Clorură de colină5 Acid folic10 Mio-inozitol36 Nicotinamidă0,5 Acid nicotinic0,5 Clorhidrat de piridoxal0,5 Clorhidrat de piridoxină0,5 Riboflavină0,2 Tiamină HCl0 Vitamina B122,0

30,00 EUR*
IMDM, w: 4,5 g/L Glucoză, w: 4 mM L-Glutamină, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM piruvat de sodiu, w: 3,024 g/L NaHCO3
Mediul Dulbecco modificat de Iscove (IMDM) este un mediu de creștere complex și îmbogățit pentru cultura celulară. IMDM este o modificare a DMEM care conține seleniu și are aminoacizi, vitamine și săruri anorganice suplimentare față de DMEM. Îi lipsește fierul și necesită suplimentarea cu ser fetal bovin (FBS). IMDM utilizează un sistem tampon de bicarbonat de sodiu și necesită un mediu cu 5-10% CO2 pentru a menține pH-ul fiziologic.
IMDM este potrivit pentru culturile de celule cu proliferare rapidă și densitate mare, inclusiv celulele Jurkat, COS-7 și macrofage. Diversele modificări ale IMDM disponibile pentru o gamă largă de aplicații de cultură celulară pot fi găsite utilizând instrumentul de selectare a mediilor. Mediile lichide furnizează nutrienți esențiali pentru toate aplicațiile de cultură celulară. Fiecare dintre mediile noastre de cultură celulară de înaltă calitate este fabricat în conformitate cu formula publicată inițial sau cu modificările necesare pentru performanța constantă și stabilitatea mediului de cultură.
IMDM vs. DMEM
IMDM conține nitrat de potasiu în loc de nitrat ferric și HEPES și piruvat de sodiu. Componentele suplimentare din IMDM îl fac mai potrivit decât DMEM pentru tipuri de celule specializate și aplicații specifice.
IMDM vs. RPMI
IMDM și RPMI au formulări diferite care pot fi relevante pentru stimularea cu PMA/ionomicină. O diferență semnificativă este concentrația de Ca2+. În timp ce RPMI conține 0,42 mM Ca2+, IMDM conține 1,49 mM.
Controlul calității

pH = 7,2 +/
- 0,02 la 20-25°C.
Fiecare lot a fost testat pentru sterilitate și absența micoplasmei și a bacteriilor.

Păstrare

A se păstra la frigider la +2°C până la +8°C în întuneric. Înghețarea și încălzirea până la +37° C minimizează calitatea produsului.
Nu încălziți mediul la mai mult de 37° C și nu utilizați surse necontrolabile de căldură (de exemplu, aparate cu microunde).
În cazul în care urmează să se utilizeze doar o parte din mediu, scoateți această cantitate din flacon și încălziți-o la temperatura camerei.
Termenul de valabilitate pentru orice mediu, cu excepția mediului de bază, este de 8 săptămâni de la data fabricării.
Compoziție




Componente
mg/L


Săruri anorganice
Clorură de calciu x 2 H2O
219,00



Clorură de potasiu
330,00



Nitrat de potasiu
0.076



Sulfat de magneziu anhidru
97,73



Clorură de sodiu
4,505.00



Dihidrogenfosfat de sodiu anhidru
109,00



Selenit de sodiu
0,02


Alte componente
D(+)-Glucoză anhidră
4,500.00



HEPES
5,958.00



Piruvat de sodiu
110,00



Fenol roșu
15,00


Aminoacizi
L-Alanină
25,00



L-arginină x HCl
84,00



L-Asparagină x H2O
25,00



Acid L-aspartic
30,00



L-cistină x 2HCl
91,24



L-Glutamină
584,00



Acid L-glutamic
75,00



Glicină
30,00



L-histidină x HCl x H2O
42,00



L-Isoleucină
104,80



L-leucină
104,80



L-lizină x HCl
146,20



L-Metionină
30,00



L-fenilalanină
66,00



L-Prolină
40,00



L-serină
42,00



L-Treonină
95,20



L-triptofan
16,00



L-tirozină x 2Na
104,20



L-Valină
93,60


Vitamine
D(+)-Biotină
0.013



Pantotenat de D-calciu
4,00



Clorură de colină
4,00



Acid folic
4,00



mio-Inositol
7,20

25,00 EUR*
RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamină stabilă, w: 2,0 g/L NaHCO3
Mediul RPMI 1640, cunoscut și ca mediu RPMI, este un mediu de cultură celulară extrem de versatil, utilizat pe scară largă în cercetarea biologică pentru cultivarea diferitelor celule de mamifere. Dezvoltat de George E. Moore, Robert E. Gerner și H. Addison Franklin în 1966 la renumitul Roswell Park Comprehensive Cancer Center, acest mediu își trage numele de la originea sa la Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
Inițial conceput pentru a susține creșterea celulelor leucemice umane atât în suspensie, cât și în culturi monocelulare, mediul RPMI 1640 a evoluat prin modificările aduse de cercetători și de furnizorii comerciali, devenind adecvat pentru o gamă variată de celule de mamifere. Este extrem de compatibil cu linii celulare precum HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocite și carcinoame.
Mediul RPMI 1640 se distinge de alte medii de cultură celulară datorită compoziției sale unice. Acesta conține o cantitate substanțială de fosfat, aminoacizi și vitamine. În special, acesta conține biotină, vitamina B12 și PABA, absente din Eagle's Minimal Essential Medium sau Dulbecco's Modified Eagle Medium. În plus, mediul RPMI 1640 prezintă concentrații semnificativ ridicate de vitamine inositol și colină. Cu toate acestea, acesta nu conține proteine, lipide sau factori de creștere. În consecință, suplimentarea cu 10% ser fetal bovin (FBS) este de obicei necesară pentru a oferi condiții optime de creștere celulară.
Sistemul tampon al mediului RPMI 1640 se bazează pe bicarbonat de sodiu și necesită un mediu cu 5-10% CO2 pentru a menține un pH adecvat fiziologic. Includerea agentului reducător glutation distinge și mai mult acest mediu de altele.
Controlul calității

Steril-filtrat


Depozitare și termen de valabilitate

A se păstra la +2°C până la +8°C, ferit de lumină.
Odată deschis, depozitați la 4°C și utilizați în termen de 6-8 săptămâni.


Condiții de transport

Temperatură ambiantă


Întreținere

Păstrați la frigider la +2°C până la +8°C, în întuneric. Evitați înghețarea și încălzirea frecventă la +37°C, deoarece aceasta reduce calitatea produsului.
Nu încălziți mediul peste 37°C și nu utilizați surse de căldură necontrolate, cum ar fi aparatele cu microunde.
În cazul în care urmează să se utilizeze doar o parte din mediu, se îndepărtează cantitatea necesară și se încălzește la temperatura camerei înainte de utilizare.



Compoziție




Categoria
Componente
Concentrație (mg/L)


Aminoacizi
Glicină
10.00



L-Alanil-L-Glutamină
434.40



L-arginină
200.00



L-AsparaginăH2O
56.82



Acid L-Aspartic
20.00



L-cistină 2HCl
65.20



Acid L-glutamic
20.00



L-histidină HClH2O
20.27



L-hidroxi-L-prolină
20.00



L-Isoleucină
50.00



L-leucină
50.00



L-lizină HCl
40.00



L-Metionină
15.00



L-fenilalanină
15.00



L-Prolină
20.00



L-serină
30.00



L-Treonină
20.00



L-triptofan
5.00



L-tirozină 2Na 2H2O
28.83



L-Valină
20.00


Vitamine
acid p-amino benzoic
1.00



D-Biotină
0.20



Clorură de colină
3.00



Pantotenat D-calcic
0.25



Acid folic
1.00



mio-Inositol
35.00



Nicotinamidă
1.00



Piridoxină HCl
1.00



Riboflavină
0.20



Tiamină HCl
1.00



Vitamina B12
0.005


Săruri anorganice
Ca(NO3)2 4H2O
100.00



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
100.00



NaCl
6000.00



NaHCO3
2000.00



Na2HPO4
800.00


Alte componente
D-glucoză
2000.00



L-Glutation redus
1.00



Fenol roșu sare de sodiu
5.30

25,00 EUR*

Am detectat că vă aflați într-o altă țară sau că utilizați o altă limbă de browser decât cea selectată în prezent. Doriți să acceptați setările sugerate?

Închidere