DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucoză, w: 2,5 mM L-Glutamină, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Piruvat de sodiu, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 este un mediu de bază larg recunoscut și utilizat pe scară largă în culturile celulare pentru cercetarea biologică. Acesta servește ca sursă fundamentală de nutrienți pentru creșterea diverselor linii celulare de mamifere, în special atunci când este suplimentat cu ser fetal bovin (FBS).
Această formulă unică combină Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) și Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) într-un raport precis de 1:1. Adăugarea de L-glutamină îmbunătățește și mai mult compoziția sa.
DMEM, derivat din mediu esențial minim Eagle (EMEM), oferă o concentrație crescută de aminoacizi și vitamine în comparație cu predecesorul său. În contrast, Ham's F-12 se bazează pe mediul Ham's F-10, oferind un set complementar de componente esențiale.
Pentru a susține creșterea celulară optimă, este o practică obișnuită să se suplimenteze DMEM:Ham's F12 cu FBS la o concentrație tipică de 5-10%. Această adăugare este necesară, deoarece mediul nu conține hormoni de creștere, lipide și proteine esențiale pentru dezvoltarea celulară.
DMEM:Ham's F12 încorporează un sistem tampon de pH și este adesea suplimentat cu roșu de fenol, un indicator de pH. Celulele cultivate în DMEM:Ham's F12 sau în orice mediu care utilizează sistemul tampon de bicarbonat necesită un mediu controlat de CO2 de 5-10% pentru a menține niveluri adecvate de pH.
Controlul calității
- Filtrat steril
Depozitare și termen de valabilitate
- A se păstra la +2 °C până la +8 °C, ferit de lumină.
- Odată deschis, a se păstra la 4 °C și a se utiliza în termen de 6–8 săptămâni.
Condiții de transport
- Temperatura ambiantă
Întreținere
- A se păstra la frigider la temperaturi cuprinse între +2 °C și +8 °C, la întuneric. A se evita înghețarea și încălzirea frecventă la +37 °C, deoarece acestea reduc calitatea produsului.
- Nu încălziți mediul peste 37 °C și nu utilizați surse de căldură necontrolate, cum ar fi aparatele cu microunde.
- Dacă se utilizează doar o parte din mediu, scoateți cantitatea necesară și încălziți-o la temperatura camerei înainte de utilizare.
Compoziție
| Categorie | Componente | Concentrație (mg/L) |
| Aminoacizi | Glicină | 18,75 |
| L-alanină | 4,45 | |
| L-arginina HCl | 147,50 | |
| L-asparagină H₂O | 7,50 | |
| Acid L-aspartic | 6,65 | |
| L-cisteină HCl H₂O | 17,56 | |
| L-cistină 2 HCl | 31,29 | |
| Acid L-glutamic | 7,35 | |
| L-glutamină | 365,00 | |
| L-histidină HCl H₂O | 31,48 | |
| L-izoleucină | 54,47 | |
| L-leucină | 59,05 | |
| L-lizină HCl | 91,25 | |
| L-metionină | 17,24 | |
| L-fenilalanină | 35,48 | |
| L-prolină | 17,25 | |
| L-serină | 26,25 | |
| L-treonină | 53,45 | |
| L-triptofan | 9,02 | |
| L-tirozină 2 Na 2 H2O | 55,79 | |
| L-valină | 52,85 | |
| Vitamine | D-biotină | 0,0035 |
| Clorură de colină | 8,98 | |
| D-pantotenat de calciu | 2,24 | |
| Acid folic | 2,66 | |
| Mio-inozitol | 12,60 | |
| Nicotinamidă | 2,02 | |
| Piridoxină HCl | 0,031 | |
| Piridoxal HCl | 2,00 | |
| Riboflavină | 0,219 | |
| Clorhidrat de tiamină | 2,17 | |
| Vitamina B12 | 0,68 | |
| Săruri anorganice | CaCl2 2 H2O | 154,50 |
| CuSO4 5 H2O | 0,0013 | |
| Fe(NO3)3 9 H2O | 0,05 | |
| FeSO4 7 H2O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl2 6 H2O | 61,20 | |
| MgSO4 7 H2O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO3 | 1200,00 | |
| Na2HPO4 | 71,02 | |
| NaH2PO4 2 H2O | 70,87 | |
| ZnSO4 7 H2O | 0,432 | |
| Alte componente | D-glucoză | 3151,00 |
| Hipoxantină | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Acid linoleic | 0,042 | |
| Acid lipoic | 0,105 | |
| Sare de sodiu a roșului fenol | 8,63 | |
| Putrescina 2 HCl | 0,081 | |
| Piruvat de sodiu | 55,00 | |
| Timidină | 0,365 |