Linia celulară Neuro-2a

Neuro-2a este o linie celulară neuronală condusă de șoarece utilizată pe scară largă în cercetarea neuroștiințifică. În principal, aceste celule sunt utilizate pentru a studia dezvoltarea neuronală, diferențierea, neurotoxicitatea, căile de semnalizare celulară și creșterea axonală. În plus, acestea sunt utilizate pentru dezvoltarea și screeningul medicamentelor.

Acest articol se concentrează pe aspectele importante ale celulelor neuroblastomului Neuro-2a care v-ar putea ajuta înainte de a începe lucrul cu acestea. Acesta va acoperi în principal:

Atributele generale și originea celulelor Neuro-2a
Informații privind cultivarea liniei celulare Neuro-2a
Avantaje și dezavantaje ale liniei celulare Neuro-2a
Aplicații de cercetare ale liniei celulare Neuro-2a
Publicații de cercetare cu celule Neuro-2a
Resurse pentru celulele Neuro-2a: Protocoale, videoclipuri și multe altele

1. Atribute generale și originea celulelor Neuro-2a

Această parte a articolului va acoperi contextul și caracteristicile de bază ale liniei celulare Neuro-2a care sunt esențiale de cunoscut înainte de a lucra cu aceasta. Aici, veți afla: Ce este linia celulară Neuro-2a? Care este originea liniei celulare Neuro-2a? Ce este diferențierea celulelor Neuro-2a? Care este dimensiunea unei celule Neuro-2a? Care este morfologia celulelor Neuro-2a?

Celulele Neuro-2a provin dintr-o tumoare spontană (neuroblastom) a unui șoarece albinos (tulpina A). Linia celulară a fost stabilită de R.J. Klebe și F.H. Ruddle.
Celulele neuroblastomului Neuro-2a prezintă morfologia celulelor stem neuronale și amoeboide.
Dimensiunea celulelor Neuro-2a este de 12 micrometri în înălțime [1].
Numărul de cromozomi al celulelor Neuro-2a poate varia de la 59 la 193, cu un număr modal de 95. Cariotipul acestor celule de neuroblastom este instabil în intervalul 94-98 cromozomi.

Semnalarea neuronală ilustrată: reprezentare 3D a eliberării neurotransmițătorului în spațiul sinaptic de către neuronul presinaptic, declanșată de influxul de Ca2+, care duce la activarea canalelor ionice și influxul de Na+ în neuronul postsinaptic.

2. Informații privind cultivarea liniei celulare Neuro-2a

Celulele Neuro-2a sunt utilizate pe scară largă în laboratoarele de cercetare în neuroștiințe. Înainte de a lucra cu aceste celule, ar trebui să învățați informațiile imperative privind cultura celulară menționate mai jos. Acest lucru vă poate ajuta să vă descurcați mai ușor cu ele. Veți ști: Ce este un mediu de cultură celulară Neuro-2a a? Cum se fac culturile de celule Neuro-2a? Care este timpul de dublare a celulelor Neuro-2a? Care este densitatea de însămânțare a celulelor Neuro-2a ? Care este protocolul de cultivare a celulelor Neuro-2a? Care este mediul de cultură al celulelor Neuro-2a?

Puncte-cheie pentru cultivarea celulelor Neuro-2a

Timpul de dublare:	Timpul de dublare a celulelor Neuro-2a este de aproximativ 70 de ore.
Aderente sau în suspensie:	Neuro-2a este o linie celulară aderentă.
Densitatea de însămânțare:	Densitatea optimizată de însămânțare celulară pentru linia celulară Neuro-2a este de 1 x¹⁰⁴ ^celule/cm2. Pentru însămânțare, celulele sunt spălate cu soluție salină tampon fosfat fără magneziu și calciu (1x). Ulterior, se adaugă o soluție de transfer (Accutase), iar celulele sunt incubate timp de 8 până la 10 minute la o temperatură ambiantă. După disocierea celulelor, se adaugă mediu proaspăt, iar celulele sunt centrifugate. Peletul celular recoltat este resuspendat cu grijă, iar celulele sunt turnate într-un vas de cultură pentru creștere.
Mediu de creștere:	EMEM este utilizat pentru cultivarea celulelor Neuro-2a. Acesta conține 10% FBS, 2 mM L-Glutamină, 1,5 g/L NaHCO3, EBSS, 1 mM piruvat de sodiu și NEAA pentru o creștere celulară ideală. Mediul trebuie înlocuit de 1 până la 2 ori pe săptămână.
Condiții de creștere:	Culturile de Neuro-2a sunt menținute într-un incubator umidificat la 37°C conectat la o sursă de 5% CO2.
Depozitare:	Celulele trebuie depozitate pe termen lung la o temperatură de sub -150 °C într-un congelator electric cu temperatură foarte scăzută sau în faza de vapori a azotului lichid.
Procesul de congelare și mediul:	Mediile CM-1 sau CM-ACF sunt utilizate pentru a congela celulele Neuro-2a. Celulele sunt congelate printr-un proces lent de congelare care permite o scădere de numai 1 °C pe minut. Aceasta protejează celulele de șoc și le menține viabilitatea.
Procesul de decongelare:	Pentru a dezgheța culturile congelate, flaconul este plasat într-o baie de apă la 37 °C timp de 40 până la 60 de secunde, până când rămâne doar o mică bucată de gheață. Apoi, se adaugă mediul de cultură, iar celulele sunt supuse centrifugării. Această etapă ajută la îndepărtarea componentelor mediului de congelare. Peletul celular este apoi resuspendat, iar celulele sunt transferate într-un nou balon umplut cu mediu de cultură. Ulterior, celulele sunt plasate într-un incubator la 37 °C timp de cel puțin 24 de ore.
Nivelul de biosecuritate:	Pentru manipularea și întreținerea culturilor de Neuro-2a sunt obligatorii condiții de laborator de nivel 1 de biosecuritate.

Imagine microscopică a unui pasaj timpuriu de celule neuroblastom Neuro 2a aderente, care prezintă morfologia acestora la măriri de 10x și 20x.

3. Avantaje și dezavantaje ale liniei celulare Neuro-2a

Celulele Neuro-2a posedă unele avantaje și dezavantaje care le diferențiază de alte linii celulare neuronale. Unele avantaje și dezavantaje notabile ale acestor celule sunt enumerate aici.

Avantaje

Avantajele liniei celulare de neuroblastom murin Neuro-2a sunt:

Ușor de întreținut
Linia celulară Neuro-2a nu este asociată cu proceduri complexe sau complicate de cultură celulară. Acestea sunt ușor de cultivat și de întreținut în laboratoarele de cercetare.
Model celular neuronal in vitro
Neuro-2a este un model celular neuronal convenabil utilizat pe scară largă de cercetători în studiile privind dezvoltarea și diferențierea neuronilor.

Dezavantaje

Dezavantajele celulelor Neuro-2a sunt:

Origine murină
Neuro-2a provine de la șoareci, iar cercetătorii ar trebui să fie precauți atunci când extrapolează rezultatele studiilor bazate pe șoareci la sănătatea și bolile umane, deoarece biologia șoarecilor și cea umană pot diferi semnificativ.

4. Aplicații de cercetare ale liniei celulare Neuro-2a

Celulele Neuro-2a oferă numeroase aplicații în domeniul cercetării în neuroștiințe. Câteva utilizări promițătoare ale acestei linii celulare sunt discutate aici:

Dezvoltarea neuronală: Neuro-2a este un model celular neuronal in vitro care este utilizat pe scară largă pentru studierea dezvoltării neuronale și a proceselor conexe, cum ar fi diferențierea, creșterea axonală și formarea sinapselor. Un studiu efectuat în 2020 a utilizat celulele Neuro-2a pentru a explora rolul microARN-124 în diferențierea celulelor neuronale indusă de acidul retinoic [2]. Un alt studiu a investigat neuro 2a receptorul gamma al acidului retinoic (RARG) și expresia miRNA-124 în linia celulară de neuroblastom (N2A). Acest studiu a propus că RARG este vizat de miR-124 și suprimă creșterea neuronilor [3].
Neurotoxicitate: Neuro-2a este, de asemenea, utilizat pentru a evalua efectele toxice ale medicamentelor, substanțelor chimice sau factorilor de mediu asupra celulelor neuronale. De exemplu, un studiu efectuat de Zhihong Yin și colaboratorii săi a investigat neurotoxicitatea bisfenolului A (BPA), o substanță chimică de mediu, utilizând celule Neuro-2a. Ei au observat că BPA reprimă diferențierea și proliferarea celulelor neuronale prin perturbarea integrității lor celulare și sinaptice [4].
Screeningul medicamentelor: Celulele Neuro-2a sunt, de asemenea, utilizate pentru a evalua activitățile terapeutice ale mai multor medicamente, compuși și produse naturale. De exemplu, un studiu a utilizat celule Neuro-2a și a studiat potențialul antioxidant al extractului din planta Gingko biloba. Mai mult, cercetarea a propus că acesta determină o scădere a agregării Aβ și poate fi un potențial tratament pentru boala Alzheimer [5].

430,00 EUR*

Conținut: 1.5 milliliter

Prețuri fără taxe plus costuri de expediere

cryovial

Numărul produsului: 400394

5. Publicații de cercetare cu celule Neuro-2a

Iată câteva lucrări de cercetare interesante care prezintă linia celulară Neuro-2a.

Alkamidele asemănătoare piperinei din Piper nigrum induc promotorul BDNF și promovează creșterea neuronilor în celulele Neuro-2a

Acest studiu din Journal of Natural Medicines, 2018 a investigat efectele terapeutice ale alkamidelor izolate din piper alb (P. nigrum) asupra celulelor neuronale Neuro-2a.

Reglementarea Nkx2. 1 este implicată în anomalia creierului indusă de excesul de acid retinoic

Această cercetare din Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 2020 a propus că gena Nkx2.1 joacă un rol important în dezvoltarea creierului de șoarece prin reglarea cascadei de semnalizare Shh.

Expunerea la bisfenol A induce neurotoxicitate asociată cu disfuncții sinaptice și citoscheletice în celulele neuro-2a

Acest articol a fost publicat în Toxicology and Industrial Health (2023) și a propus că o substanță chimică de mediu bisfenol A, declanșează neurotoxicitate în celulele neuro-2a și perturbă disfuncția lor sinaptică și citoscheletală.

Modularea Hexarelin a căilor MAPK și PI3K/Akt în celulele Neuro-2A inhibă toxicitatea apoptotică indusă de peroxidul de hidrogen

Această lucrare din Pharmaceuticals (2021) a propus că un medicament, hexarelin, modulează cascada PI3K/AKT și MAPK în celulele neuroblastomului (Neuro-2a) și inhibă apoptoza celulelor Neuro-2a indusă de peroxidul de hidrogen.

Extractul etanolic de fructe de Emblica officinalis suprimă neuroinflamarea în microglie și promovează creșterea neuronilor în celulele Neuro2a

Această lucrare de cercetare din Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2021) a propus că extractul de fructe Emblica officinalis suprimă neuroinflamarea în celulele Neuro-2a și, astfel, poate fi benefic pentru bolile neuroinflamatorii.

6. Resurse pentru celulele Neuro-2a: Protocoale, videoclipuri și multe altele

Următoarele sunt resursele online disponibile privind celulele Neuro-2a. Acestea includ cultura celulelor Neuro-2a și protocolul de transfecție.

Protocolul de transfecție Neuro-2a: Neuro-2a este o gazdă de transfecție adecvată. Acest link vă va ghida cu privire la protocolul de transfecție al liniei celulare. Eficiența transfecției Neuro 2a variază de la reactiv la reactiv.

Următorul link conține protocolul de cultură celulară Neuro-2a.

Protocolul de cultură celulară Neuro-2a: Acest link vă va ajuta să aflați protocolul de subcultură a celulelor Neuro 2a.
Celule neuro-2a: Site-ul web conține cunoștințe complete despre mediul de cultură al celulelor Neuro-2a, densitatea de însămânțare și protocoalele de subcultură și manipulare a culturilor crioprezervate și proliferative.

Referințe

Lulevich, V., et al., Single-cell mechanics provides a sensitive and quantitative means for probing amyloid-beta peptide and neuronal cell interactions. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(31): p. 13872-7.
You, Q., și colab. rolul miR-124 în reglarea diferențierii celulelor Neuro-2A induse de acidul retinoic. Neural Regen Res, 2020. 15(6): p. 1133-1139.
Su, X., și colab., Receptorul gamma al acidului retinoic este vizat de microARN-124 și inhibă creșterea neuronilor. Neurofarmacologie, 2020. 163: p. 107657.
Yin, Z. și colab., Expunerea la bisfenol-A a indus neurotoxicitate și asociată cu sinapsa și citoscheletul în celulele Neuro-2a. Toxicologie in Vitro, 2020. 67: p. 104911.
Chen, L., și colab. extractul de Gingko biloba (EGb) inhibă stresul oxidativ în celulele neuro 2A supraexprimând APPsw. BioMed research international, 2019. 2019.