Sfaturi de siguranță privind azotul lichid pentru depozitarea sigură a celulelor

În laboratoarele de culturi celulare, azotul lichid este esențial pentru stocarea și conservarea pe termen lung a liniilor celulare valoroase. La Cytion, prioritizăm atât calitatea liniilor noastre celulare, cât și siguranța personalului de laborator care manipulează materiale criogenice. Acest ghid cuprinzător prezintă măsurile de siguranță esențiale și cele mai bune practici pentru lucrul cu azot lichid în aplicațiile de stocare a celulelor.

Echipament esențial de protecție individuală (EPI) pentru manipularea azotului lichid

Atunci când lucrați cu azot lichid pentru conservarea liniilor celulare, cum ar fi celulele HeLa sau celulele MCF-7, un echipament de protecție individuală adecvat nu este negociabil. O vizieră completă este obligatorie pentru a vă proteja împotriva stropilor și vaporilor care ar putea provoca leziuni grave ale ochilor și țesutului facial. Mănușile criogenice izolate termic trebuie să ajungă până la antebraț, deoarece mănușile standard de laborator nu oferă protecție suficientă împotriva frigului extrem. Ca strat exterior de protecție trebuie purtat un halat de laborator, completat în mod ideal de un șorț de plastic rezistent la stropi pentru a oferi protecție suplimentară împotriva scurgerilor accidentale. Atunci când transferați celulele din mediul nostru de congelare CM-1 în depozitul de azot lichid, asigurați-vă că EIP este în stare bună, fără semne de uzură sau deteriorare. Nu uitați, chiar și expunerile mici la azot lichid pot provoca leziuni imediate ale țesuturilor, ceea ce face ca un EPI complet să fie esențial pentru fiecare interacțiune cu sistemele de stocare LN2.

Cerințe de ventilație și monitorizarea oxigenului

Ventilația adecvată este esențială atunci când se depozitează materiale de cercetare valoroase, cum ar fi celulele U937 și celulele RAJI în azot lichid. Pe măsură ce LN2 se evaporă, acesta se extinde rapid - un litru de azot lichid produce aproximativ 700 de litri de azot gazos, care poate înlocui rapid oxigenul în spațiile închise. Zona dvs. de depozitare a azotului lichid trebuie să fie echipată cu sisteme de ventilație mecanică și dispozitive de monitorizare a oxigenului. Pentru instalațiile care stochează mai multe linii celulare și cantități mari de Freeze Medium CM-1 - 500 ml, recomandăm instalarea de monitoare permanente de oxigen cu alarme sonore setate să se declanșeze la o concentrație de oxigen de 18%. Zona de depozitare trebuie să aibă puncte de ventilație de nivel înalt, deoarece azotul gazos este ușor mai ușor decât aerul atunci când este încălzit. Nu vă bazați niciodată doar pe ventilația naturală - sistemele de ventilație mecanică trebuie inspectate periodic și întreținute în conformitate cu specificațiile producătorului pentru a asigura rate constante de schimb de aer.

Protocolul de siguranță pentru două persoane

Atunci când manipulați azot lichid pentru crioconservarea liniilor celulare sensibile, cum ar fi celulele HUVEC sau celulele stem mezenchimale umane - măduva osoasă, lucrați întotdeauna în perechi. Acest sistem de perechi este deosebit de important în timpul operațiunilor cheie, cum ar fi transferul probelor în depozit, reumplerea vaselor criogenice sau manipularea unor volume mari de Freeze Medium CM-1. A doua persoană are rolul de observator al siguranței și poate interveni imediat în caz de urgență, cum ar fi deversări, epuizarea oxigenului sau vătămări corporale. Aceștia ar trebui să fie poziționați în apropierea ieșirii din laborator, menținând contactul vizual în timp ce rămân departe de zona de lucru imediată. Ambii membri ai echipei trebuie să fie pe deplin instruiți în ceea ce privește procedurile de urgență și să cunoască locația echipamentelor de siguranță. Programați operațiunile de manipulare a azotului lichid în timpul orelor de lucru obișnuite, atunci când personalul de sprijin este prezent, și nu încercați niciodată să efectuați operațiuni criogenice în afara orelor de lucru sau în weekend.

Cerințe obligatorii de formare pentru manipularea LN2

Înainte de manipularea sistemelor de stocare a azotului lichid care conțin probe valoroase, cum ar fi celulele HeLa, sau de operarea cu mediul de congelare CM-ACF, fără ser, este obligatorie o formare completă. Această formare trebuie să acopere tehnicile adecvate de manipulare, înțelegerea pericolelor criogenice și procedurile de răspuns în caz de urgență. Membrii personalului care lucrează cu liniile noastre celulare trebuie să demonstreze competență în ceea ce privește procedurile de umplere în condiții de siguranță, utilizarea corectă a echipamentului de protecție individuală și înțelegerea riscurilor de epuizare a oxigenului. Formarea ar trebui să includă practici practice cu volume mai mici sub supraveghere înainte de manipularea unor cantități mai mari. Trebuie păstrată documentația privind finalizarea formării și trebuie programate sesiuni regulate de perfecționare. Noii membri ai personalului trebuie să urmărească personalul cu experiență pentru cel puțin trei proceduri complete de manipulare a LN2 înainte de a lucra independent ca parte a unei echipe. Nu uitați, chiar și personalul cu experiență are nevoie de cursuri periodice de perfecționare pentru a se asigura că protocoalele de siguranță rămân actualizate și la zi.

Sisteme de monitorizare a oxigenului și de alarmă

Atunci când se depozitează materiale de cercetare esențiale, cum ar fi celulele stem mezenchimale umane - țesut adipos și celulele stem mezenchimale umane - Whartons Jelly în azot lichid, sistemele fiabile de monitorizare a oxigenului nu sunt negociabile. Trebuie instalate monitoare fixe de oxigen cu alarme setate pentru a se declanșa la o concentrație de oxigen de 18% (v/v). Aceste sisteme necesită o amplasare strategică: aproape de nivelul podelei, unde se colectează inițial gazele mai grele decât aerul, la înălțimea de lucru și în apropierea recipientelor de depozitare a LN2. În cazul conservării probelor în mediul de congelare CM-ACF - fără ser - 500 ml, asigurați-vă că zonele de depozitare sunt echipate cu alarme acustice și vizuale care pot fi recunoscute peste zgomotul de fond din laborator. Implementați un program lunar de testare pentru toate sistemele de monitorizare a oxigenului, păstrați înregistrările de calibrare și stabiliți proceduri clare de evacuare atunci când se declanșează alarmele. Personalul nu trebuie să încerce niciodată să anuleze sau să dezactiveze aceste sisteme de siguranță, indiferent de durata planificată a activității sale cu azot lichid.