Celulele Ramos - Cercetarea limfomului cu celule B: Importanța celulelor Ramos
CeluleleRamos sunt o linie celulară de limfocite B utilizată pe scară largă în cercetarea biomedicală. În special, acestea își găsesc aplicații principale în imunologie și în studiile privind cancerul. Cercetătorii utilizează aceste celule pentru evaluarea medicamentelor citotoxice și studierea antigenelor de suprafață ale celulelor B, a mutațiilor și a mecanismelor apoptotice.
Originea și caracteristicile generale ale celulelor Ramos s
Înțelegerea originii și a atributelor esențiale ale unei linii celulare joacă un rol crucial în decizia privind adecvarea acesteia pentru cercetarea dumneavoastră. Prin urmare, este recomandabil să evaluați temeinic aceste informații înainte de a începe orice activitate pe baza lor. Această secțiune acoperă următoarele întrebări frecvente: Ce este linia celulară canceroasă Ramos? Ce este linia celulară Ramos CD19? Ce este linia celulară Ramos CD20? Care este originea celulelor Ramos? Care sunt markerii de pe linia celulară Ramos? Care este dimensiunea celulelor Ramos? Care este morfologia liniei celulare Ramos?
- Linia celulară Ramos a fost creată în 1972. Aceste celule au fost derivate din lichidul ascitic al unui băiat caucazian de 3 ani cu limfom Burkitt de tip american [1].
- Ele exprimă markeri cheie ai celulelor B, inclusiv imunoglobulina M (IgM), CD19, CD20 și CD22.
- Celulele Ramos sunt celule negative la virusul Epstein bar. Cu toate acestea, ele pot fi schimbate permanent în celule pozitive la virusul Epstein-Barr.
- Aceste celule limfoblaste B posedă o morfologie de formă rotundă.
Celulele albastre Ramos vs. celulele B Ramos
Celulele albastre Ramos și celulele B Ramos sunt ambele celule de limfom Burkitt uman. Ambele sunt negative pentru virusul Epstein bar. Diferența dintre aceste celule este că celulele albastre Ramos exprimă o genă reporter inductibilă NF-κB/AP-1 numită SEAP (fosfat alcalin embrionar secretat), în timp ce celulele albe Ramos nu o fac.
Cultivarea celulelor Ramos
Această secțiune a articolului este dedicată să vă ajute să aflați informații imperative despre cultura celulară a celulelor Ramos. Aici, veți afla: Care este timpul de dublare al liniilor celulare? Care este mediul recomandat? Cum se fac culturile de celule Ramos?
Puncte-cheie pentru cultivarea celulelor Ramos
|
Timpul de dublare: |
Timpul de dublare a celulelor Ramos este de aproximativ 20,4 ± 1,5 ore. Cu toate acestea, acesta poate varia în funcție de condițiile de cultură celulară furnizate. |
|
Aderente sau în suspensie: |
Celulele Ramos cresc în suspensie. |
|
Densitate celulară: |
Densitatea celulară optimă pentru linia celulară Ramos este de 3 x105 celule/ml . Pentru subcultură, celulele în suspensie sunt colectate prin centrifugare. Celulele sunt adăugate cu mediu proaspăt și resuspendate cu atenție. Ulterior, celulele au fost turnate în flacoane noi la o densitate de 3 până la 9 x105 celule/ml . |
|
Mediu de creștere: |
RPMI 1640 suplimentat cu 10% ser fetal bovin, 2,1 mM glutamină stabilă și 2,0 g/L NaHCO3 este utilizat pentru cultivarea celulelor Ramos. mediul trebuie înlocuit de 2 ori pe săptămână. |
|
Condiții de creștere: |
Linia celulară de limfom Burkitt uman (Ramos) este păstrată într-un incubator umidificat la 5% CO2 și 37°C temperatură. |
|
Depozitare: |
Celulele Ramos congelate sunt păstrate la temperaturi sub -150 grade Celsius sau în faza de vapori a azotului lichid pentru a proteja viabilitatea celulelor pentru perioade mai lungi. |
|
Procesul de congelare și mediul: |
Mediul de congelare CM-1 sau CM-ACF este recomandat pentru celulele Ramos. Se utilizează un proces lent de congelare care permite o scădere treptată a temperaturii cu 1 grad Celsius pe minut. Această congelare lentă protejează celulele de orice șoc și le sporește viabilitatea. |
|
Procesul de decongelare: |
Pentru decongelare, celulelecongelate sunt ținute într-o baie de apă preîncălzită la 37°C timp de 40-60 de secunde, până când rămâne o mică aglomerare de gheață. După aceea, se adaugă mediu proaspăt, iar celulele sunt centrifugate pentru a îndepărta elementele de mediu înghețat. Peletul este din nou resuspendat și celulele sunt distribuite într-un nou balon care conține mediu de cultură. |
|
Nivelul de biosecuritate: |
Laboratorul cu nivel de biosecuritate 1 este esențial pentru menținerea culturilor de celule Ramos negative la virusul Epstein-Barr. Cu toate acestea, nivelul de biosecuritate este trecut la 2 atunci când celulele Ramos sunt transformate permanent în celule pozitive la virusul Epstein-Barr. |
Ramos: Avantaje și limitări
Ca și alte linii celulare, celulele Ramos prezintă avantaje și limitări distincte. Această secțiune va analiza câteva dintre acestea, care pot influența semnificativ utilizarea lor în cercetare.
Avantaje
- Model celular de limfom Burkitt: Celulele Ramos au fost dezvoltate de la un pacient cu limfom Burkitt, ceea ce le face un model celular relevant pentru studiul malignităților limfoide
- Cultivare ușoară: Celulele Ramos sunt ușor de cultivat și de întreținut în laborator. Ele au cerințe și condiții simple de cultură celulară
Limitări
- Model in vitro: Este posibil ca celulele Ramos să nu reprezinte complet complexitatea genetică a tumorilor pacienților, limitând astfel aplicabilitatea lor. În plus, este posibil ca rezultatele experimentelor care utilizează linia celulară Ramos să nu reflecte în totalitate condițiile in vivo, ceea ce ar putea conduce la provocări translaționale
aplicații ale celulelor Ramos în cercetare
Ramos oferă aplicații promițătoare în domeniul biomedical. Unele dintre utilizările imperative în cercetare ale celulelor Ramos includ:
- Biologia limfomului: Celulele Ramos sunt utilizate pe scară largă pentru a studia biologia limfomului. Ele sunt utilizate pentru a explora factorii genetici și moleculari care stau la baza malignităților limfoide. În plus, cercetătorii obțin informații despre inițierea, progresia și eterogenitatea bolii utilizând aceste celule de limfom Burkitt. Mutațiile genetice și căile de semnalizare sunt, de asemenea, investigate, conducând potențial la dezvoltarea unor abordări diagnostice și terapeutice mai precise. Un studiu efectuat în 2019 a constatat că inhibarea histone acetiltransferazei GCN5 (General control non-depressible 5) scade tumorigenitatea celulelor limfomului Burkitt uman (Ramos) prin întreruperea semnalizării BCR. Prin urmare, GCN5 este sugerată ca o țintă fezabilă pentru dezvoltarea terapiei medicamentoase pentru limfom [2].
- Screeningul și testarea medicamentelor: Linia celulară Ramos este utilizată pe scară largă în scopuri de screening și testare a medicamentelor. Cercetătorii evaluează eficacitatea compușilor terapeutici potențiali în inhibarea proliferării și creșterii celulare și în inducerea morții celulare în celulele limfomului. Acest lucru ajută la identificarea candidaților promițători la medicamente, facilitând astfel dezvoltarea de tratamente țintite pentru pacienții cu limfom. O astfel de cercetare a arătat că extractul metanolic de piele, pulpă și semințe de fructe Annona a exercitat efecte moderate, în timp ce extractul cloroform a prezentat efecte robuste asupra proliferării celulelor Ramos. Astfel, studiul a propus că fructele Annona s-ar putea dovedi eficiente în prevenirea și tratarea limfomului [3].
Celule Ramos pentru cercetarea dumneavoastră
Publicații cu celule Ramos
Această secțiune a articolului enumeră câteva publicații de cercetare interesante care prezintă linia celulară Ramos:
Această cercetare a fost publicată în revista The EMBO în 2018. Studiul a constatat că celulele B Ramos necesită expresia markerilor CD19 și CD79b (componentă de semnalizare BCR Igβ) pentru fitness-ul și creșterea competitivă a celulelor Ramos.
Acest studiu publicat în Neoplasia (2021) a utilizat celule Ramos și a propus că domeniul kinazei liniei mixte (MLKL) este reglementat epigenetic în celulele limfomului Burkitt (Ramos). Astfel, acesta este un marker prognostic promițător pentru succesul tratamentului terapiilor legate de necroptoză.
Fosforilarea PBK/TOPK Tyr74 de către JAK2 promovează creșterea tumorală a limfomului Burkitt
Acest articol de cercetare din Cancer Letters (2022) a sugerat că axa de semnalizare JAK2/TOPK/histona H3 joacă un rol crucial în proliferarea liniilor celulare de limfom B in vitro.
Acest articol a fost publicat în 2020 în Toxins. Studiul a propus că tratamentul cu verotoxină-1 induce stresul reticulului endoplasmatic (ER) în celulele B Ramos. Acest lucru duce la inițierea semnalizării apoptotice sau de supraviețuire în liniile celulare de limfom.
Acest studiu din Avicenna Journal of Phytomedicine (2020) a raportat că un compus natural, silimarina, suprimă expresia TLR8 (Toll-like receptor 8) și apoptoza în linia celulară Ramos.
Resurse pentru linia celulară Ramos: Protocoale, videoclipuri și multe altele
Următoarele sunt câteva resurse online privind celulele Ramos:
- Transfecția celulelor Ramos: Acest document vă va ajuta să învățați protocolul de transfecție a liniei de celule Ramos.
Următorul link conține protocolul de cultură a celulelor Ramos:
- Celule Ramos: Acest site web conține informații de bază despre linia celulară Ramos. Acesta conține, de asemenea, un protocol de subcultură a celulelor Ramos și de manipulare a culturilor proliferante și crioprezervate. În plus, sunt disponibile și informații privind mediul celulelor Ramos, timpul de dublare și densitatea celulară.
Perspective cheie asupra celulelor Ramos: Întrebări frecvente
Referințe
- Kerntke, C.G., Analysis of the organization and signaling capacity of the membrane IgE during its interaction with CD19 and CD23 in B limfocite. 2021, Georg-August-Universität Göttingen.
- Farria, A.T., și colab. inhibarea GCN5 HAT reduce supraviețuirea celulelor limfomului Burkitt uman prin reducerea expresiei genei țintă MYC și împiedicarea căilor de semnalizare BCR. Oncotarget, 2019. 10(56): p. 5847.
- Al-Shaya, H.M., și colab. profilul fitochimic și activitatea de antioxidare a fructului annona și efectul său asupra proliferării celulelor limfomatice. Știința alimentară și nutriție, 2020. 8(1): p. 58-68.