Células U87MG — Investigação sobre o glioblastoma utilizando as células U87MG e o seu impacto nos estudos sobre o cancro do cérebro
A U-87 MG, a linha celular primária de glioblastoma humano, é amplamente utilizada na investigação biológica. Em particular, estas células são utilizadas nos campos da neurociência e da imuno-oncologia.
- Meio de crescimento
- A linha celular U-87 MG é cultivada em EMEM (meio essencial mínimo de Eagle) enriquecido com 1,0 g/L de L-glicose, 2,0 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO₃, 1% de NEAA, 1 mM de piruvato de sódio e 10% de solução de FBS. O meio deve ser renovado a cada 2 a 3 dias.
- Tempo de duplicação
- As células U 87 MG têm um tempo de duplicação populacional que varia entre 18 e 38 horas.
- Tipo de crescimento
- A U 87 MG é uma linha celular aderente. As células apresentam uma forma alongada e crescem em monocamadas.
- Nível de biossegurança
- BSL-1
- Disponível na
- Cytion — Encomendar U-87 MG
- Características gerais e origem da linha celular U-87 MG
- Informações sobre o cultivo das células U-87 MG
- Vantagens e desvantagens das células U-87 MG
- Aplicações de investigação com as células U-87 MG
- Encomende hoje a sua linha celular de glioma U-87 MG
- Linha celular U-87 MG: Publicações de investigação
- Recursos para as células U-87 MG: protocolos, vídeos e muito mais
- Perspetivas sobre a investigação do glioma U-87 MG: Perguntas frequentes
- Referências
- Perguntas frequentes
Características gerais e origem da linha celular U-87 MG
Esta secção abordará a origem e as características gerais da linha celular U-87. Irá aprender o que são as células U-87 MG, de onde provêm as células U-87, qual é a forma completa de U-87 MG, qual é o tamanho das células U-87 e qual é a morfologia da linha celular U-87.
- A linha celular U87 é uma linha celular de glioblastoma e astrocitoma. Foi estabelecida em 1966 na Universidade de Uppsala. As células foram obtidas de um homem caucasiano de 44 anos que sofria de glioblastoma. Esta linha celular é formalmente designada por U 87 MG, sigla que significa «Uppsala 87 Malignant Glioma».
- As células U 87 MG apresentam uma morfologia semelhante à das células epiteliais.
- O diâmetro das células U 87 MG varia entre 12 e 14 µm.
- Esta linha celular de glioblastoma humano é hipodiplóide e possui um número modal de cromossomas de 44 em aproximadamente 48% da população celular. No entanto, também existem ploidias mais elevadas em 5,9% da população celular.
Informações sobre a cultura de células U-87 MG
Antes de trabalhar com células U 87 MG, deve informar-se sobre os seguintes pontos-chave relativos ao cultivo destas células de glioblastoma. Em particular, deve saber: Qual é o tempo de duplicação populacional das células U 87 MG? Que meio é utilizado para o cultivo das células U87? Qual é a densidade de sementeira da linha celular U-87 MG?
Pontos-chave para a cultura de células U-87 MG
Tempo de duplicação da população:
As células U 87 MG têm um tempo de duplicação da população que varia entre 18 e 38 horas.
Adesivas ou em suspensão:
A U 87 MG é uma linha celular aderente. As células apresentam uma forma alongada e crescem em monocamadas.
Densidade de sementeira:
Recomenda-se que a linha celular de glioblastoma U 87 MG seja semeada a uma densidade celular de 1 x 10⁴ células/cm². As células U87 aderentes são lavadas com PBS 1x e incubadas com solução de Accutase. Posteriormente, as células dissociadas são centrifugadas e recuperadas. As células são cuidadosamente ressuspensas e adicionadas a novos frascos contendo meio de crescimento.
Meio de crescimento:
A linha celular U 87 MG é cultivada em EMEM (meio essencial mínimo de Eagle) enriquecido com 1,0 g/L de L-glicose, 2,0 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO₃, 1% de NEAA, 1 mM de piruvato de sódio e uma solução a 10% de FBS. O meio deve ser renovado a cada 2 a 3 dias.
Condições de crescimento:
As células U-87 MG requerem uma incubadora humidificada com um fornecimento de 5% de CO₂ e a uma temperatura de 37 °C para um crescimento ótimo.
Armazenamento:
As células U87 são mantidas na fase de vapor de nitrogénio líquido ou a uma temperatura inferior a -150 °C, para manter a viabilidade máxima das células de glioblastoma.
Processo de congelação e meio:
Os meios de congelação CM-1 ou CM-ACF são adequados para congelar células U 87 MG. Recomenda-se um processo de congelação lenta, uma vez que evita que as células sofram qualquer choque e protege a sua viabilidade.
Processo de descongelação:
Os frascos da linha celular U-87 MG congelados são descongelados num banho-maria a 37 °C. As células são adicionadas a meios de crescimento, ressuspensas e transferidas para novos frascos de cultura. Em alternativa, as células U87 podem ser centrifugadas para remover o meio de congelação e, em seguida, cultivadas.
Nível de biossegurança:
É necessário o nível de biossegurança 1 para o manuseamento de culturas celulares U-87 MG.
Vantagens e desvantagens das células U-87 MG
Quando pensamos numa linha celular, a primeira coisa que nos vem à cabeça é: Quais são as vantagens de utilizar células U-87 MG? Quais são as desvantagens das células U-87?
Vantagens
As linhas celulares U-87 MG são amplamente utilizadas na investigação. Algumas das vantagens associadas a esta linha celular são:
Vantagens
- Fácil de cultivar: as células U-87 MG são fáceis de manter em cultura. Não exigem requisitos de cultura celular exigentes ou complicados.
- Homogeneidade: a U-87 MG é uma linha celular homogénea. A maioria das células de uma população possui a mesma composição genética e, por isso, partilha características semelhantes. Estas células são utilizadas para estudar processos celulares, triagem de fármacos e testes.
- Bem caracterizada: Esta linha celular de glioblastoma está bem caracterizada em termos de características de crescimento, morfologia e expressão génica, o que a torna uma valiosa ferramenta de investigação.
Desvantagens
- Aplicabilidade limitada: A U-87 MG é uma linha celular de glioblastoma, pelo que as suas aplicações se limitam principalmente ao estudo de glioblastomas e dos mecanismos moleculares subjacentes. Pode não ser adequada para a investigação de outros tipos de cancro.
Aplicações de investigação com células U-87 MG
A linha celular de glioblastoma U87MG é amplamente utilizada em estudos sobre o cancro, particularmente na investigação do glioblastoma. Algumas das aplicações de investigação das células U 87 MG são:
- Investigação em biologia do cancro: A linha celular U87 é utilizada para estudar o crescimento e o desenvolvimento do cancro, os mecanismos moleculares subjacentes, as vias de sinalização e o microambiente tumoral. Um estudo publicado em 2020 utilizou um modelo in vitro de glioblastoma, a linha celular U-87 MG, para investigar o gene BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) como alvo terapêutico. Os resultados revelaram que o gene BMAL1 inibe a proliferação, a migração e a invasão das células do glioblastoma, suprimindo a expressão dos genes da ciclina B1, da metaloproteinase-9 e da fosfo-AKT [1]. Outra investigação realizada em 2019 utilizou a linha celular U87 e demonstrou que a regulação negativa da expressão do fator de transcrição LITAF (fator de necrose tumoral alfa induzido por lipopolissacarídeo) pode aumentar a radiossensibilidade das células de glioma através da regulação positiva da via FOXO-1. O LITAF é também conhecido como gene 7 induzido por p53 (PIG7) [2].
- Descoberta e desenvolvimento de fármacos: as células U-87 MG podem ser utilizadas para fins de triagem e teste de fármacos, permitindo aos investigadores identificar novos fármacos anticancerígenos potenciais e avaliar a sua eficácia e toxicidade. Uma investigação utilizou a linha celular de glioblastoma U-87 MG para avaliar o potencial anticancerígeno e antioxidante do extrato de Inula helenium (L.) [3]. Da mesma forma, outra publicação referiu a utilização da linha celular U-87 para testar o efeito citotóxico e apoptótico de extratos vegetais [4]. Além disso, um estudo publicado em 2018 analisou o efeito citotóxico de alcalóides sesquiterpénicos extraídos de plantas do género Nuphar em linhas celulares U-87 MG sensíveis e resistentes aos fármacos [5].
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Linha celular U-87 MG: Publicações de investigação
Apresentamos aqui algumas publicações de investigação de destaque que abordam a linha celular U-87 MG.
Este artigo, publicado na revista «Neuroreport» em 2018, propôs que a hipoxia poderia aumentar a migração e a invasão das células do glioblastoma humano através da regulação da via de sinalização PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.
Este estudo foi publicado na revista «Frontiers in Pharmacology» em 2020. Os resultados da investigação indicam que um flavonoide, o eriodictiol, exerce efeitos anticancerígenos na linha celular U87 e suprime a proliferação celular e a metástase. O composto exerce as suas propriedades antitumorais através da modulação da via PI3K/Akt/NF-κB.
Esta investigação, publicada na revista «Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine» (2018), sugere que uma fórmula à base de ervas chinesas denominada «pílula Xihuang» pode induzir a apoptose nas células U87 ao atuar sobre a cascata Akt/mTOR/FOXO1 ativada pelas ROS.
O LITAF aumenta a radiosensibilidade das células de glioma humano através da via FoxO1
Este artigo de investigação foi publicado na revista «Cellular and Molecular Neurobiology» em 2019. O estudo propôs que um fator de transcrição, o LITAF, regula negativamente e aumenta a radiosensibilidade das células de glioma através da regulação da via de sinalização FOXO-1.
Este artigo foi publicado na revista «Biointerface Research in Applied Chemistry» (2019). Os investigadores utilizaram células U87MG para investigar o efeito citotóxico das nanopartículas de PLGA carregadas com curcumina.
Recursos para as células U-87 MG: protocolos, vídeos e muito mais
A linha celular de glioblastoma U87MG é utilizada em muitos laboratórios de investigação oncológica. Alguns recursos relacionados com esta linha celular são:
- Transfecção da linha celular U87: Este documento descreve um protocolo de transfecção para células U87MG.
- Transfecção da linha celular U 87 MG: Este vídeo é um tutorial que explica, passo a passo, o protocolo de transfecção das células U87.
O recurso relativo ao protocolo de cultura celular das células U87 MG encontra-se listado abaixo:
- Células U87 MG: Esta ligação contém informações básicas sobre a linha celular U87 MG. Inclui protocolos sucintos para divisão, congelação e descongelação das células.
Informações sobre a investigação do glioma U87 MG: Perguntas frequentes
As linhas celulares de glioma, como as células de glioblastoma U87, são células de cultura derivadas de gliomas humanos utilizadas extensivamente na investigação do cancro para estudar a biologia do tumor, a genética e as respostas aos medicamentos. Servem como modelos para compreender o comportamento do tumor e testar estratégias terapêuticas.
Uma linha celular isogénica refere-se a células derivadas de uma única célula, garantindo a uniformidade genética. Na investigação do glioma, as linhas isogénicas fornecem um modelo consistente para estudar as alterações genéticas e os seus impactos no crescimento do tumor e na resposta aos tratamentos.
O perfil de ADN das linhas celulares de glioma é fundamental para identificar alterações genéticas, compreender a evolução do tumor e desenvolver terapias direcionadas. Ajuda na classificação de tumores com base em marcadores genéticos como as mutações IDH1.
O soro nos meios de cultura de células fornece factores de crescimento, hormonas e nutrientes essenciais às células do glioma. No entanto, a sua composição pode afetar a reprodutibilidade experimental, razão pela qual as condições sem soro ou com soro definido são cada vez mais utilizadas.
A citotoxicidade celular em linhas celulares de glioma é avaliada através de ensaios como a citometria de fluxo, que mede a saúde, a viabilidade e a morte das células após o tratamento com medicamentos ou células imunitárias como as células assassinas naturais (NK).
A citotoxicidade das células NK desempenha um papel fundamental na investigação do tratamento do glioma, uma vez que as células NK podem reconhecer e matar células tumorais sem sensibilização prévia. O estudo das interações das células NK com as células do glioma ajuda a desenvolver estratégias para melhorar a eliminação do tumor mediada pelas células NK.
O tumor de origem fornece um contexto sobre o ambiente biológico original e as caraterísticas do tumor. A compreensão deste facto ajuda a correlacionar os resultados dos estudos de linhas celulares com o comportamento real do tumor e o prognóstico do doente.
A microscopia eletrónica oferece uma visualização detalhada das estruturas celulares e subcelulares em linhas celulares de glioma, o que é crucial para examinar a morfologia celular, a saúde dos organelos e as alterações após os tratamentos.
O ligando NKG2D é expresso nas células tumorais e liga-se ao recetor NKG2D nas células NK, desencadeando uma resposta citotóxica. O estudo desta interação ajuda a compreender e a melhorar potencialmente as respostas imunitárias contra o glioma.
os modelos de cultura de células em 3D imitam com maior exatidão o microambiente tumoral, proporcionando melhores conhecimentos sobre o crescimento, a migração e a resistência aos medicamentos dos gliomas. Esta técnica é crucial para estudos de oncologia translacional mais relevantes.
Referências
- Gwon, D.H., et al., «O BMAL1 suprime a proliferação, a migração e a invasão das células U87MG através da regulação negativa da ciclina B1, da fosfo-AKT e da metaloproteinase-9». Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al., «O LITAF aumenta a radiosensibilidade das células de glioma humano através da via FoxO1». Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al., Atividades antioxidantes e anticancerígenas do extrato de Inula helenium (L.) na linha celular humana de glioblastoma U-87 MG. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh e A. Ghasempour, Citotoxicidade e indução de apoptose em células de cancro da mama, cancro da pele e glioblastoma por extratos vegetais. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al., Citotoxicidade dos alcalóides sesquiterpénicos das plantas do género Nuphar em linhas celulares sensíveis e resistentes aos medicamentos. Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.