Células PANC1: Desvendando o seu papel crucial na investigação do cancro do pâncreas
A PANC1 é uma linha celular tumoral epitelóide humana frequentemente utilizada na investigação do cancro. É utilizada como modelo in vitro para estudar a biologia do cancro do pâncreas, a carcinogénese e os mecanismos celulares e moleculares subjacentes, bem como para avaliar potenciais terapias anticancerígenas.
- Meio de crescimento
- Para a cultura das células PANC1, utiliza-se DMEM com 10% de soro fetal bovino (FBS), 4,5 g/L de glicose, 4 mM de L-glutamina, 1,5 g/L de NaHCO₃ e 1,0 mM de piruvato de sódio. O meio de cultura das células PANC1 deve ser substituído 2 a 3 vezes por semana.
- Tempo de duplicação
- A linha celular pancreática PANC 1 apresenta taxas de proliferação moderadas, com um tempo de duplicação de 25,83 ± 2,03 horas.
- Tipo de crescimento
- A PANC1 é uma linha celular epitelial aderente.
- Nível de biossegurança
- BSL-1
- Disponível em
- Cytion — Encomendar PANC1
Características gerais e origem da linha celular PANC1
Esta secção do artigo fornecerá conhecimentos básicos sobre a linha celular PANC1. Por exemplo: o que significa PANC-1? O que são as células PANC-1? Qual é a origem da PANC1? Qual é a morfologia da PANC1? Qual é o tamanho das células PANC1?
- A linha celular PANC1 de cancro do pâncreas foi obtida de um homem caucasiano de 56 anos com carcinoma do ducto pancreático. Esta linha celular tumoral contínua foi estabelecida por Michael Lieber e colegas em 1975 [1].
- As células PANC1 apresentam fraca capacidade de diferenciação, mas têm potencial para metastizar.
- Estas células de cancro pancreático humano apresentam uma morfologia semelhante à das células epiteliais.
- A PANC 1 possui um cariótipo hipertriploide. O número modal de cromossomas relatado para a linha celular PANC 1 é 63. O genoma possui um pequeno cromossoma em anel e três cromossomas marcadores distintos.
Informações sobre a cultura celular PANC1
Esta secção é inteiramente dedicada a informações sobre a cultura de células PANC1. Conhecer as condições de cultura de uma linha celular pode facilitar-lhe o trabalho. Iremos abordar os seguintes temas: Qual é o tempo de duplicação das células PANC-1? Como se cultivam as células PANC1? As células PANC-1 são aderentes? Qual é o meio de cultura das células PANC-1?
Pontos-chave para a cultura de células PANC1
Tempo de duplicação:
A linha celular pancreática PANC-1 apresenta taxas de proliferação moderadas, com um tempo de duplicação de 25,83 ± 2,03 horas.
Adesivas ou em suspensão:
A PANC-1 é uma linha celular epitelial aderente.
Densidade de semeadura:
As células PANC1 são semeadas a uma densidade de 1 x 10⁴ células/cm². Para a sementeira, as células são lavadas com PBS (solução salina tamponada com fosfato) e incubadas com solução de dissociação, ou seja, Accutase, durante 8 a 10 minutos à temperatura ambiente. As células desprendidas são ressuspensas em meio fresco e centrifugadas. O sedimento celular é cuidadosamente ressuspenso em meio de cultura e as células são transferidas para novos frascos para crescimento.
Meio de crescimento:
Para a cultura das células PANC1, utiliza-se DMEM com 10% de soro fetal bovino (FBS), 4,5 g/L de glicose, 4 mM de L-glutamina, 1,5 g/L de NaHCO₃ e 1,0 mM de piruvato de sódio.
O meio de cultura das células PANC1 deve ser substituído 2 a 3 vezes por semana.
Condições de crescimento:
As células PANC1 são cultivadas numa incubadora humidificada a uma temperatura de 37 °C e com uma concentração de 5% de CO₂.
Armazenamento:
As células PANC são armazenadas na fase de vapor de azoto líquido ou num congelador elétrico de ultra-baixa temperatura (a uma temperatura inferior a -150 °C) para proteger a viabilidade celular.
Processo de congelação e meio:
As células PANC1 são congeladas em meios CM-1 ou CM-ACF. Para congelar as células PANC1, é utilizado um método de congelação lenta que permite apenas uma descida de temperatura de 1 °C por minuto.
Processo de descongelação:
As células são descongeladas num banho-maria a 37 °C até restar apenas um pequeno aglomerado de gelo. As células descongeladas são ressuspensas no meio de cultura e centrifugadas para remover os resíduos do meio de congelamento. A pasta celular é cuidadosamente ressuspensa e as células são distribuídas a uma densidade de 5 x 10⁴ células/cm² em novos frascos para cultura. As células PANC1 demoram cerca de 48 horas a aderir.
Nível de biossegurança:
Recomenda-se o nível de biossegurança 1 para a cultura de células PANC1.
Vantagens das células PANC1
Cada linha celular apresenta certas vantagens e desvantagens que a distinguem das outras. Esta secção irá esclarecer as vantagens e desvantagens associadas à linha celular PANC1.
Vantagens
As principais vantagens das células PANC1 são:
-
Modelo in vitro de cancro do pâncreas
A PANC1 representa as características do adenocarcinoma do ducto pancreático humano. Por conseguinte, é utilizada como modelo in vitro para estudar o desenvolvimento e o crescimento do tumor pancreático, bem como os mecanismos moleculares associados.
-
Mutações genéticas
As células PANC1 possuem muitas mutações encontradas em tumores pancreáticos, o que as torna valiosas para o estudo das vias relacionadas com a doença. Estas mutações incluem principalmente as mutações KRAS e P53 nas células PANC1.
PANC1
A linha celular cancerígena humana PANC1 é frequentemente utilizada na investigação do cancro do pâncreas. Aqui, mencionamos algumas áreas comuns de investigação.
- Biologia do cancro: As células PANC1 são utilizadas para estudar o desenvolvimento e o crescimento do cancro do pâncreas, bem como muitos outros processos celulares, incluindo a proliferação, a invasão, a migração e a morte celular. Além disso, são também estudadas diferentes vias de sinalização celular, mutações genéticas e mecanismos moleculares envolvidos na carcinogénese pancreática. Um estudo realizado em 2018 utilizou células PANC1 e descobriu que o omeprazol suprime a invasão das células tumorais pancreáticas através da indução da JNK mediada pelo recetor de hidrocarbonetos arílicos. A ativação da JNK, por sua vez, modula outros genes celulares e provoca a inibição de fatores pró-oncogénicos [3]. Da mesma forma, outro estudo revelou que as vias de sinalização AKT e ERK estão envolvidas na proliferação, invasão e migração das células PANC1 do cancro pancreático humano [4].
- Triagem de fármacos: A linha celular PANC1 serve como uma ferramenta valiosa para a triagem de potenciais fármacos ou terapias anticancerígenas. Os investigadores costumam explorar a resistência aos fármacos e estudar os mecanismos de ação de potenciais candidatos a fármacos. Uma investigação conduzida por Samira Alipour e colegas em 2022 sugeriu que o extrato de Portulaca oleracea exerce efeitos apoptóticos e citotóxicos nas células PANC1, podendo, assim, constituir um potencial tratamento para o cancro do pâncreas. A planta exerce estes efeitos antitumorais através da regulação dos genes CDK1 e P53 [5].
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Publicações sobre as células PANC1
Nesta secção são mencionadas algumas publicações de investigação interessantes e frequentemente citadas que abordam as células PANC1.
Esta investigação foi publicada numa revista internacional intitulada «Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology» em 2019. O estudo propôs que as nanopartículas de ouro sintetizadas de forma ecológica a partir da planta Scutellaria barbata exercem efeitos antitumorais contra a linha celular de cancro do pâncreas PANC1.
Esta publicação na revista «Toxicology and Environmental Health Sciences» (2020) explorou o potencial anticancerígeno do extrato de Delonix regia e das nanopartículas de prata em duas linhas celulares cancerígenas humanas, nomeadamente PANC1 e MCF7.
Síntese de nanopartículas de ouro a partir de folhas de Panax notoginseng e a sua atividade anticancerígena em linhas celulares PANC-1 de cancro do pâncreas
Este artigo foi publicado na revista internacional «Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology» em 2019. Este estudo analisou os efeitos terapêuticos das nanopartículas de ouro sintetizadas a partir do extrato de folhas da planta Panax notoginseng contra a linha celular PANC1 de cancro do pâncreas.
Este estudo foi publicado na revista «Nature Scientific Reports» (2020). Neste trabalho, os investigadores geraram um péptido, o KS-58, que inibe seletivamente a mutação KRAS G12D na linha celular PANC-1 in vitro.
Esta investigação foi publicada na revista «Biomedicine & Pharmacotherapy» em 2018. O estudo propôs que a isorhamnetina, um flavonoide, inibe a proliferação das células PANC-1 através da paragem na fase S do ciclo celular.
Novo inibidor da LIMK2 bloqueia o crescimento do tumor Panc-1 num modelo de xenoenxerto em ratos
Este estudo, publicado na revista «Oncoscience» (2014), propôs que um novo inibidor da LIMK2 suprime o crescimento tumoral num modelo de xenoenxerto em ratos com PANC-1.
Recursos para a linha celular PANC-1: protocolos, vídeos e muito mais
Alguns recursos disponíveis sobre as células PANC 1 estão listados abaixo.
- Transfecção de PANC-1: Este vídeo é um tutorial para aprender o protocolo de transfecção de PANC-1.
- Subcultivo de uma linha celular: Este vídeo explica um protocolo geral para o subcultivo de linhas celulares aderentes.
As ligações seguintes contêm o protocolo de cultura celular para as células PANC 1.
- Células PANC 1: Este link contém o protocolo para descongelamento e subcultura da linha celular PANC 1.
- Cultura de células PANC 1: Este site pode ajudá-lo a conhecer todas as informações essenciais sobre a cultura de células PANC 1, incluindo meios de cultura para células PANC 1, descongelamento e congelamento de células, bem como o protocolo de subcultura.
Perguntas frequentes: Compreender as células PANC-1 e as suas aplicações
Referências
- Lieber, M., et al., Estabelecimento de uma linha celular tumoral contínua (PANC-1) a partir de um carcinoma humano do pâncreas exócrino. International Journal of Cancer, 1975. 15(5): p. 741-747.
- Kim, Y., et al., Perfil proteómico comparativo de linhas celulares de adenocarcinoma ductal pancreático. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Jin, U.-H., et al., A inibição da migração das células Panc1 do cancro do pâncreas pelo omeprazol depende da ativação da JNK pelo recetor de hidrocarbonetos arílicos. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2018. 501(3): p. 751-757.
- Yuetong, L., et al., A salidrosida inibe a proliferação, a migração e a invasão das células PANC1 e SW1990 do cancro pancreático humano através das vias de sinalização AKT e ERK. Die Pharmazie — Revista Internacional de Ciências Farmacêuticas, 2020. 75(8): p. 385-388.
- Alipour, S., L. Pishkar e V. Chaleshi, «Efeito citotóxico do extrato de Portulaca oleracea na regulação da expressão dos genes CDK1 e P53 numa linha celular de cancro do pâncreas». Nutrition and Cancer, 2022. 74(5): p. 1792-1801.