Células NIH-3T3: Avanços nos estudos sobre fibroblastos e nas aplicações das células NIH-3T3

A linha celular NIH-3T3, estabelecida a partir do tecido de um embrião de rato albino suíço com 17 dias de idade em 1962 por Howard Green e George Todaro na Faculdade de Medicina da Universidade de Nova Iorque, tornou-se um recurso fundamental na investigação biomédica. Reconhecidas pela sua elevada receptividade à formação de focos do vírus da leucemia e do vírus do sarcoma, as células NIH-3T3 constituem uma ferramenta essencial para uma infinidade de investigações científicas, incluindo estudos de oncologia viral, análise da expressão génica e exploração da dinâmica do crescimento celular. A nomenclatura «3T3» reflete o método de cultura celular, denotando um intervalo de «transferência aos 3 dias» com uma densidade inicial de sementeamento de 3 × 10^5 células, destacando as condições padronizadas sob as quais estas células foram inicialmente cultivadas e expandidas.

Morfologias e aplicações diversas das células NIH-3T3

Uma das características distintivas das células NIH-3T3 é a sua adaptabilidade morfológica, que varia significativamente com a confluência da cultura. Em densidades mais baixas, estes fibroblastos apresentam uma estrutura celular solitária em forma de fuso, evoluindo para padrões densos e em espiral à medida que a população atinge a confluência. Com um diâmetro médio de cerca de 18 μm, as células NIH-3T3 constituem um modelo versátil para estudos aprofundados de biologia celular, que vão desde os mecanismos de reparação de tecidos até às complexas vias de regulação do ciclo celular.

Informações sobre a cultura

Rato albino suíço num laboratório.

Prós e contras da utilização de células NIH 3T3

Vantagens

• Eficiência de transfecção: Conhecidas pelas suas elevadas taxas de transfecção, as células NIH-3T3 são excelentes tanto para estudos de expressão génica transitória como estável, sendo compatíveis com uma variedade de técnicas de transfecção.

• Utilidade como camada de suporte: Estas células servem frequentemente como camada de suporte para coculturas com células como queratinócitos e células estaminais, graças à libertação de fatores de crescimento que promovem o crescimento das células em cocultura.

• Investigação com células estaminais: As células NIH-3T3 são a escolha preferida na investigação com células estaminais para induzir a pluripotência sem modificação genética e proporcionar um ambiente propício à diferenciação das células estaminais.

• Estabilidade da cultura: As células NIH-3T3 são conhecidas pela sua estabilidade e baixa frequência de transformação espontânea. No entanto, em determinadas condições ou após exposição a oncogenes ou mutagénicos específicos, as células NIH-3T3 podem sofrer transformação espontânea. Esta transformação pode levar à aquisição de propriedades cancerígenas, tais como crescimento descontrolado, perda da inibição de contacto e a capacidade de formar tumores quando injetadas em hospedeiros suscetíveis. 

Desvantagens

• Tamanho celular inconsistente: A morfologia alongada, semelhante a um fuso, das células NIH-3T3 pode variar, complicando as análises de imagem nos ensaios.

• Suscetibilidade a infeções: Estas células são propensas a infeções bacterianas e por micoplasmas se não forem mantidas em condições assépticas rigorosas, o que pode afetar a integridade experimental.

Aplicações de investigação das células NIH-3T3

• Estudos de transfecção de ADN: A robustez das células NIH-3T3 torna-as ideais para a introdução e o estudo da função de vários genes, como demonstrado em investigações que analisam proteínas como a NAB2-STAT6 e os seus papéis nos processos celulares.

• Ensaios baseados em células: A sua fiabilidade estende-se a vários ensaios, incluindo ensaios de viabilidade, apoptose e formação de focos, oferecendo informações sobre as respostas celulares em diferentes condições experimentais.

• Investigação do ciclo celular: A facilidade de manipulação do ciclo celular desta linha celular através dos níveis de soro torna-a um modelo potente para estudar a regulação do ciclo celular e as suas anomalias em contextos de doença.

Melhore a sua investigação com células NIH-3T3

Destaque para os principais estudos que envolvem a linha celular de fibroblastos NIH 3T3 

A linha celular NIH-3T3 tem sido fundamental em inúmeros projetos de investigação, abrangendo várias facetas da biologia celular. Seguem-se alguns estudos significativos que utilizam estas células:

• Exploração da proteína de fusão NAB2-STAT6: Publicado na revista «Biochemical and Biophysical Research Communications», este estudo analisa em profundidade o impacto da proteína de fusão NAB2-STAT6 nas células NIH-3T3, nomeadamente o seu papel no aumento do crescimento e da migração celular através da regulação da EGR-1.
• Investigação do APOBEC3 e do vírus da leucemia murina: Esta investigação, publicada na revista *Virology*, examina a hipermutação do vírus da leucemia murina AKV em células NIH-3T3 que expressam o gene APOBEC3 de ratinho.
• Avaliação do potencial antimetastático de fármacos epigenéticos: Na revista «Oncotargets and Therapy», este estudo avalia os efeitos antimetastáticos da hidralazina e do ácido valpróico em células NIH-3T3 transformadas por RAS.
• Impacto da baicaleína na proliferação das células NIH-3T3 e na síntese de colagénio: Esta investigação utiliza células NIH-3T3 para explorar como a baicaleína influencia a proliferação celular e a produção de colagénio através da modulação do eixo miR-9/fator de crescimento semelhante à insulina-1.
• Estudo da deficiência de riboflavina e da tumorigénese: Este estudo apresenta conclusões sobre a forma como a deficiência de riboflavina nas células NIH-3T3 contribui para a tumorigénese, promovendo a proliferação celular e desregulando os genes do ciclo celular.

Recursos essenciais para a investigação com células NIH-3T3

Para os investigadores interessados em trabalhar com células NIH-3T3, estão disponíveis vários recursos para orientar os protocolos de cultura e experimentais:

• Formação de esferóides em células NIH-3T3: Este vídeo fornece um guia detalhado sobre a formação de esferóides, uma técnica de cultura celular 3D que agrega células NIH-3T3 em aglomerados, oferecendo um modelo mais relevante do ponto de vista fisiológico para os estudos.
• Monitorização do crescimento das células NIH-3T3: Através do sistema de imagem de células vivas JuLI Br, este vídeo capta a dinâmica de crescimento das células NIH-3T3 ao longo de 65 horas, mostrando a proliferação celular em tempo real.

Estes recursos têm como objetivo apoiar os seus esforços de investigação com células NIH-3T3, proporcionando uma base para experiências e descobertas bem-sucedidas.

Referências

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