Células NCI-H460 - A exploração da investigação sobre o cancro do pulmão com base nas informações sobre as células NCI-H460
As células NCI-H460 são células de cancro do pulmão de células não pequenas, derivadas de seres humanos, frequentemente utilizadas na investigação do carcinoma pulmonar e em toxicologia. Esta linha celular constitui uma ferramenta valiosa para o estudo de vários aspetos da biologia do cancro, incluindo o desenvolvimento, o crescimento e a resistência aos medicamentos. Além disso, as células NCI-H460 constituem um modelo adequado para o desenvolvimento de reagentes anticancerígenos.
- Meio de crescimento
- Utiliza-se RPMI 1640 como meio de cultura das NCI-H460. Este é suplementado com 10% de soro fetal bovino, 2,1 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃. O meio deve ser substituído 2 a 3 vezes por semana.
- Tempo de duplicação
- O tempo de duplicação da NCI-H460 é de aproximadamente 33 horas.
- Tipo de crescimento
- As células de cancro do pulmão NCI-H460 são aderentes.
- Nível de biossegurança
- BSL-4
- Disponível na
- Cytion — Encomendar NCI-H460
Células NCI-H460: Origem e características gerais
A origem e as características gerais de uma linha celular contribuem significativamente para as suas aplicações na investigação. Esta secção do artigo irá ajudá-lo a conhecer a origem e as características mais relevantes das células de cancro do pulmão NCI-H460. Irá saber: O que são as células NCI-H460? Qual é o tipo de linha celular NCI-H460? Qual é a morfologia das células NCI-H460?
- A linha celular NCI-H460 teve origem no derrame pleural de um homem europeu com cancro do pulmão de células grandes. Foi estabelecida em 1982 por A.F. Gazdar e colegas.
- As células de cancro do pulmão NCI-H460 apresentam uma morfologia epitelial.
- A NCI-H460 é uma linha celular tumorigénica com um cariótipo hipotriploide. O número modal de cromossomas destas células é 57. As células NCI-H460 também apresentam 58 números modais de cromossomas em proporções comparáveis.
- Estas células de cancro do pulmão apresentam muitas mutações semelhantes às dos tumores pulmonares de células não pequenas, tais como a mutação KRAS da NCI-H460, que estão envolvidas na proliferação, crescimento, invasão e metástase celular.
Informações sobre a cultura das células NCI-H460
Deve ter em conta os seguintes pontos-chave para o manuseamento e manutenção adequados da linha celular NCI-H460. Estas informações abrangem o tempo de duplicação das células NCI-H460, o meio de cultura NCI-H460 e os procedimentos básicos de cultura celular para as células de cancro do pulmão NCI-H460.
Pontos-chave para a cultura de células NCI-H460
Tempo de duplicação:
O tempo de duplicação das células NCI-H460 é de aproximadamente 33 horas.
Adesivas ou em suspensão:
As células de cancro do pulmão NCI-H460 são aderentes.
Rácio de subcultura:
A proporção de divisão recomendada para a linha celular NCI-H460 é de 1:2 e 1:4. Após a remoção do meio antigo, as células aderentes são enxaguadas com solução salina tamponada com fosfato 1x. Posteriormente, as células são incubadas com solução de passagem Accutase durante 8 a 10 minutos à temperatura ambiente. As células dissociadas são ressuspensas num meio de cultura e centrifugadas. As células colhidas são novamente ressuspensas e transferidas para um novo frasco para cultura.
Meio de crescimento:
Utiliza-se RPMI 1640 como meio de cultura para as células NCI-H460. Este é suplementado com 10% de soro fetal bovino, 2,1 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃. O meio deve ser substituído 2 a 3 vezes por semana.
Condições de crescimento:
As culturas de NCI-H460 são mantidas a uma temperatura de 37 °C numa incubadora humidificada com um fornecimento contínuo de 5% de CO₂.
Armazenamento:
As células de cancro do pulmão NCI-H460 podem ser armazenadas na fase de vapor de azoto líquido ou a uma temperatura inferior a -150 °C num congelador elétrico de temperatura ultrabaixa para armazenamento a longo prazo.
Processo de congelação e meio:
Utiliza-se o meio CM-1 ou CM-ACF para congelar e armazenar as células NCI-H460. Recomenda-se um método de congelação lenta para proteger ao máximo a viabilidade celular.
Processo de descongelação:
As células NCI-H460 congeladas são descongeladas num banho-maria pré-aquecido (à temperatura de 37 °C) durante 40 a 60 segundos, até restar apenas um pequeno pedaço de gelo. Às células descongeladas é adicionado meio fresco e são centrifugadas para remover os componentes do meio de congelação. O sedimento celular recolhido é novamente ressuspenso e as células são transferidas para novos frascos contendo meio de crescimento. As células NCI-H460 podem demorar cerca de 24 horas a aderir à superfície do frasco.
Nível de biossegurança:
As células de cancro do pulmão NCI-H460 são manuseadas e mantidas em laboratórios de nível de biossegurança 1.
Publicado: 2023 | Última revisão: maio de 2026
Vantagens e desvantagens das células NCI-H460
A NCI-H460 é uma linha celular amplamente utilizada na investigação do cancro do pulmão. Esta secção abordará as vantagens e desvantagens gerais relacionadas com as células de cancro do pulmão NCI-H460.
Vantagens
As vantagens da linha celular NCI-H460 de cancro do pulmão de células não pequenas são:
-
Origem do tumor
A linha celular NCI-H460 foi derivada de um doente com carcinoma pulmonar de células grandes, representando este tipo específico de cancro do pulmão. Estas células são utilizadas como modelo para estudar a biologia do cancro do pulmão e desenvolver tratamentos novos e eficazes. As células NCI-H460 têm potencial tumorigénico e podem ser injetadas em ratos imunodeficientes para criar modelos tumorais in vivo, com vista ao estudo do crescimento e desenvolvimento do tumor, bem como da eficácia de potenciais fármacos.
-
Elevadas taxas de proliferação
A linha NCI-H460 apresenta taxas de crescimento mais elevadas do que outras linhas celulares de cancro do pulmão de células não pequenas, como a A549. Esta vantagem aumenta a sua disponibilidade e ajuda os investigadores a realizar experiências reprodutíveis e sensíveis ao fator tempo.
Desvantagens
As desvantagens associadas às células de cancro do pulmão NCI-H460 são:
-
Homogeneidade
As células NCI-H460 são homogéneas, uma vez que foram obtidas a partir do tumor de um único doente. Por conseguinte, carecem geralmente da complexidade e heterogeneidade observadas nos tumores dos doentes.
Aplicações de investigação das células NCI-H460
As células de cancro do pulmão NCI-H460 são amplamente utilizadas em estudos relacionados com o carcinoma pulmonar. Aqui estão algumas das principais aplicações de investigação das células NCI-H460:
- Investigação do cancro do pulmão: as células NCI-H460 constituem um modelo inestimável para investigar os mecanismos celulares e moleculares envolvidos no desenvolvimento, crescimento e metástase do tumor. Além disso, são utilizadas para estudar vias de sinalização essenciais, alvos moleculares e várias mutações genéticas associadas à progressão do cancro do pulmão. Foram realizados vários estudos com as células NCI-H460 para analisar estes fatores de forma eficaz. Um estudo realizado em 2019 sugeriu que a caseína nuclear ubíqua e o substrato das cinases dependentes de ciclina (NUCKS), quando sobreexpressos, estão envolvidos no crescimento das células tumorais através da regulação da via de sinalização PI3K/AKT [1]. De forma semelhante, um estudo in vitro e in vivo utilizou células NCI-H460 para estudar o papel do gene eIF4E. Os resultados revelaram que o gene eIF4E está envolvido no crescimento do carcinoma pulmonar e na angiogénese, podendo ser alvo de desenvolvimento de medicamentos promissores contra o cancro do pulmão [2].
- Descoberta e desenvolvimento de fármacos: a NCI-H460, uma linha celular de cancro do pulmão humano, é amplamente utilizada em estudos de descoberta e desenvolvimento de fármacos. Os investigadores utilizam estas células para investigar a toxicidade e a eficácia de novos candidatos a fármacos, terapias direcionadas e tratamentos que visam principalmente as mutações KRAS da NCI-H460. Um estudo realizado por Haoyue Hu e colegas em 2023 utilizou células NCI-H460 para estudar os efeitos anticancerígenos do fármaco anlotinib. Os resultados demonstraram que o anlotinib afetou parcialmente o crescimento das células de cancro do pulmão com mutação no KRAS, através da inibição da cascata de sinalização MEK/ERK [3]. Da mesma forma, um composto fenólico, o ácido carnósico, foi submetido a um rastreio para avaliar as suas atividades antiproliferativas e pró-apoptóticas utilizando células NCI-H460 [4].
- Resistência aos medicamentos: A linha celular NCI-H460 é ideal para estudar o mecanismo de resistência aos medicamentos do carcinoma pulmonar. Os investigadores utilizam estas células para desenvolver modelos de resistência aos medicamentos, com o objetivo de identificar genes subjacentes, fatores moleculares e vias de sinalização. Por exemplo, num estudo, foram utilizadas células NCI-H460 resistentes ao pemetrexed — um agente antifolato multialvo — para estudar os mecanismos moleculares subjacentes à resistência ao pemetrexed em células de cancro do pulmão de células não pequenas [5].
Adquira a linha celular NCI-H460: a sua porta de entrada para a investigação sobre o cancro do pulmão
Publicações científicas que abordam as células NCI-H460
Aqui estão algumas publicações de investigação interessantes sobre a linha celular de carcinoma pulmonar NCI-H460.
Este estudo publicado na revista *Molecules* (2023) propôs que um α-1,6-glucano natural, o BBWPW, proveniente do feijão preto, inibe a proliferação das células NCI-H460 através da regulação da via PI3K/AKT/MAPK.
Este artigo publicado na revista «Phytomedicine» (2019) demonstrou que o dioscina-6′-O-acetato, um novo composto natural, exerce um efeito antiproliferativo nas células de cancro do pulmão NCI-H460.
Uma investigação publicada na revista «BMC Pulmonary Medicine» (2020) afirma que o microRNA-425-5p potencia a tumorigénese do carcinoma pulmonar através da via PTEN/PI3K/AKT.
Este artigo publicado na revista *Molecular Medicine Reports* (2017) propôs o potencial antitumoral e os mecanismos subjacentes do composto quinalizarina nas células NCI-H460 e noutras células de cancro do pulmão.
Esta investigação publicada na revista «Food and Function» (2019) destaca o potencial efeito anticancerígeno do extrato de Eucalyptus globulus Labill. utilizando células NCI-H460. Os resultados revelaram que o extrato vegetal exerceu estes efeitos ao aumentar a expressão de p53 nas células NCI-H460 e ao modular o perfil do ciclo celular.
Recursos para a linha celular NCI-H460: protocolos, vídeos e muito mais
Aqui estão alguns recursos online sobre as células de cancro do pulmão NCI-H460.
- Transfecção de células NCI-H460: Este tutorial em vídeo é um guia passo a passo para a transfecção de células NCI-H460 com ADN plasmídeo.
As ligações seguintes contêm informações essenciais sobre a cultura celular das células H460.
- Células NCI-H460: Este site fornece informações importantes sobre os meios de cultura das células NCI-H460, bem como sobre os procedimentos de subcultura, congelação e descongelação.
- Passagem de células NCI-H460: Este documento irá orientá-lo sobre a passagem e a subcultura da linha celular NCI-H460. Além disso, irá também ajudá-lo a aprender o protocolo de transfecção para as células NCI-H460.
Explorar a linha celular NCI-H460: Perguntas frequentes e informações úteis
A linha celular NCI-H460 é originária de um doente com carcinoma pulmonar de grandes células, o que a torna um modelo valioso para o estudo deste tipo de cancro do pulmão.
As células NCI-H460 são utilizadas para investigar a biologia do cancro do pulmão, desenvolver novos tratamentos e avaliar a eficácia de potenciais medicamentos. Também podem ser injectadas em ratinhos imunodeficientes para criar modelos de tumores in vivo para estudar o crescimento e o desenvolvimento de tumores.
Ambas as linhas celulares NCI-H460 e A549 são derivadas de carcinomas pulmonares, mas a NCI-H460 representa o carcinoma de células grandes, enquanto a A549 representa o adenocarcinoma. Esta diferença no subtipo histológico influencia as suas caraterísticas e comportamento.
Sim, as células NCI-H460 têm potencial tumorigénico e podem ser implantadas em ratinhos imunodeficientes para criar modelos de xenoenxertos, facilitando o estudo do carcinoma do pulmão de grandes células in vivo.
A combinação do paclitaxel com outros compostos pode aumentar os seus efeitos citotóxicos nas células NCI-H460, melhorando potencialmente os resultados do tratamento do cancro do pulmão.
Sim, as células NCI-H460 expressam hipoxantina guanina fosforibosiltransferase, que é essencial para o metabolismo dos nucleótidos e a proliferação celular.
As células NCI-H460 são normalmente utilizadas na investigação sobre cancro e toxicologia para estudar o crescimento tumoral, avaliar os efeitos citotóxicos dos compostos e investigar os mecanismos de resistência aos medicamentos.
As células NCI-H460 expressam tipicamente proteínas de neurofilamento tripleto, que estão envolvidas na manutenção da estrutura do citoesqueleto e podem desempenhar um papel na migração e invasão das células cancerígenas.
A via κB, entre outras, está implicada na regulação da proliferação e sobrevivência das células NCI-H460, oferecendo potenciais alvos para intervenção terapêutica no cancro do pulmão.
Sim, as células NCI-H460 são modelos in vitro habitualmente utilizados para avaliar os efeitos citotóxicos dos agentes quimioterapêuticos, incluindo o paclitaxel e a carboplatina, ajudando no desenvolvimento de tratamentos eficazes contra o cancro.
Referências
- Hu, C., et al., O NUCKS promove a proliferação, migração e invasão de células cancerígenas do pulmão através da via de sinalização Pi3k/Akt. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): p. E55-61.
- Qi, X., et al., O EGPI-1, um novo inibidor da interação eIF4E/eIF4G, inibe o crescimento das células cancerígenas do pulmão e a angiogénese através da via de sinalização Ras/MNK/ERK/eIF4E. Interações Químico-Biológicas, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H., et al., O anlotinib exerce efeitos anticancerígenos em células de cancro do pulmão com mutação no KRAS através da supressão da via MEK/ERK. Cancer Management and Research, 2020: p. 3579-3587.
- Corveloni, A.C., et al., O ácido carnósico exibe efeitos antiproliferativos e pró-apoptóticos em células pulmonares tumorais NCI-H460 e não tumorais IMR-90. Journal of Toxicology and Environmental Health, Parte A, 2020. 83(10): p. 412-421.
- Xu, Y.-L., et al., Estabelecimento e caracterização de células NCI-H460/PMT resistentes ao pemetrexed. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (anteriormente Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): p. 731-739.