Linha celular BxPC-3
A BxPC-3 é uma linha celular de cancro do pâncreas derivada de seres humanos. É amplamente utilizada em estudos sobre o cancro. Os investigadores utilizam estas células principalmente para estudar a biologia do cancro do pâncreas, identificar alvos terapêuticos e desenvolver medicamentos anticancerígenos.
- Meio de crescimento
- O meio RPMI 1640 é utilizado para a cultura da linha celular BxPC-3. É suplementado com 10% de soro fetal bovino, 2,1 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO3 para alcançar o crescimento celular ideal. O meio deve ser substituído 2 a 3 vezes por semana.
- Tempo de duplicação
- O tempo de duplicação das células BxPC-3 varia entre 48 e 60 horas.
- Tipo de crescimento
- A BxPC-3 é uma linha celular aderente.
- Nível de biossegurança
- BSL-3
- Disponível em
- Cytion — Encomendar BxPC-3
Este artigo contém informações cruciais sobre a linha celular BxPC-3 que podem ajudá-lo significativamente a trabalhar com ela. Principalmente, irá abordar:
- Informações gerais e origem da linha celular BxPC-3
- Cultura de células BxPC-3
- Linha celular BxPC-3: Vantagens e Limitações
- Aplicações das células BxPC-3 na investigação
- Publicações de investigação sobre as células BxPC-3
- Recursos para a linha celular BxPC-3: protocolos, vídeos e muito mais
- Informações gerais e origem da linha celular BxPC-3
- Cultura de células BxPC-3
- Linha celular BxPC-3: vantagens e limitações
- Aplicações das células BxPC-3 na investigação
- 5. Publicações de investigação sobre as células BxPC-3
- Recursos para a linha celular BxPC-3: protocolos, vídeos e muito mais
- Perguntas frequentes
Informações gerais e origem da linha celular BxPC-3
Conhecer a origem de uma linha celular é fundamental para a sua aplicabilidade na investigação. A familiaridade com as suas características, incluindo morfologia, tamanho celular e ploidia, torna a sua utilização mais simples e conveniente. Aqui, irá conhecer a origem e as características gerais das células BxPC-3: O que são as células BxPC-3? O que é a linha celular BxPC-3? Qual é a origem da linha celular BxPC-3? Qual é a morfologia das células BxPC-3?
- As células BxPC-3, células de carcinoma pancreático humano, foram derivadas de uma mulher europeia de 61 anos com adenocarcinoma pancreático em 1986. Estas células revelaram-se tumorigénicas mesmo após a paciente ter sido submetida a várias sessões de radioterapia e quimioterapia. Assim, a linha celular estabelecida é um modelo inestimável para estudar o desenvolvimento e a progressão do cancro.
- As células BxPC-3 possuem uma morfologia semelhante à das células epiteliais.
- O número modal de cromossomas para o BxPC-3 é 59. Estas células apresentam uma deleção homozigótica no cromossoma 18q, que codifica a proteína SMAD4/DPC4. Além disso, a linha celular não apresenta a mutação BxPC-3 kras comum entre os tumores pancreáticos. A deleção do BRAF também é encontrada nestas células de cancro pancreático.
Qual é a diferença entre BxPC3 e PANC-1?
As células BxPC-3 PADC (adenocarcinoma ductal pancreático) e PANC-1 são linhas celulares de cancro pancreático primário com morfologia epitelial. No entanto, as primeiras possuem mais propriedades de tipo epitelial, enquanto as segundas apresentam mais atributos mesenquimais [1].
Cultivo de células BxPC-3
A linha celular BxPC-3 é amplamente utilizada em laboratórios de investigação oncológica. É necessário conhecer os seguintes pontos-chave para uma cultura eficiente desta linha celular de cancro do pâncreas. Irá aprender: Qual é o tempo de duplicação das células BxPC-3? Como se cultiva a linha celular BxPC-3?
Pontos-chave para a cultura de células BxPC-3
Tempo de duplicação da população:
O tempo de duplicação das células BxPC-3 varia entre 48 e 60 horas.
Adereentes ou em suspensão:
A BxPC-3 é uma linha celular aderente.
Rácio de divisão:
As células BxPC-3 são subcultivadas numa proporção de 1:2 a 1:4. As células são lavadas com PBS 1x e incubadas com uma solução de passagem chamada Accutase. Após 8 a 10 minutos, é adicionado meio fresco às células, que são então centrifugadas. O sedimento é novamente ressuspenso em meio e as células são transferidas para um novo recipiente de cultura para crescimento.
Meio de crescimento:
Utiliza-se o meio RPMI 1640 para a cultura da linha celular BxPC-3. Este é suplementado com 10% de soro fetal bovino, 2,1 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO3 para alcançar o crescimento celular ideal. O meio deve ser substituído 2 a 3 vezes por semana.
Condições de crescimento:
As culturas de células BxPC-3 são mantidas numa incubadora humidificada a 37 °C ligada a um fornecimento de 5% de CO2.
Armazenamento:
As células congeladas são geralmente armazenadas a temperaturas inferiores a -150 °C ou na fase de vapor de nitrogénio líquido para proteger a viabilidade das células.
Processo de congelação e meio:
Pode utilizar-se CM-1 ou CM-ACF para congelar culturas de células BxPC-3. Segue-se um processo de congelamento lento, que permite apenas uma descida de 1 °C na temperatura, para evitar qualquer choque nas células.
Processo de descongelação:
As células BxPC-3 congeladas são descongeladas num banho-maria pré-ajustado a 37 °C durante 40 a 60 segundos. Após a formação de um pequeno aglomerado de gelo, as células são adicionadas a meios de cultura frescos e centrifugadas para remover os elementos do meio de congelamento. Em seguida, o sedimento celular é ressuspenso e as células são dispensadas no frasco para crescimento.
Nível de biossegurança:
As culturas de células BxPC-3 são mantidas em laboratórios de nível de biossegurança 1.
Linha celular BxPC-3: Vantagens e limitações
A BxPC-3 é uma linha celular de adenocarcinoma pancreático bem conhecida, associada a várias vantagens e limitações. As principais vantagens e desvantagens da linha celular estão listadas aqui.
Vantagens
As principais vantagens das células BxPC-3 são:
-
Modelo in vitro do cancro do pâncreas
As células BxPC-3, derivadas de doentes com adenocarcinoma pancreático, apresentam características relevantes, tornando-as um modelo adequado para estudar o comportamento do cancro pancreático in vitro.
-
Linha Celular Tumorigénica
As células BxPC-3 possuem propriedades tumorigénicas e podem formar tumores quando injetadas em ratos nude ou imunocomprometidos. Estes tumores assemelham-se muito aos tumores primários de adenocarcinoma pancreático, tornando o modelo de xenoenxerto BxPC-3 ideal para estudar o crescimento e a progressão do cancro.
Limitações
As limitações associadas à linha celular BxPC-3 são:
-
Contaminação cruzada
A linha celular BxPC-3, tal como qualquer outra, acarreta um risco de contaminação cruzada. Os investigadores devem ter cuidado e seguir protocolos rigorosos de prevenção de contaminação ao manusear estas células.
-
Taxa de crescimento lenta
As células BxPC-3 apresentam uma taxa de proliferação relativamente lenta, com um tempo de duplicação que varia entre 48 e 60 horas. Esta característica pode exigir períodos de incubação mais longos para experiências específicas, podendo causar atrasos no progresso da investigação.
Aplicações das células BxPC-3 na investigação
As células BxPC-3 oferecem muitas aplicações na investigação do cancro. As aplicações mais comuns são:
- Investigação do cancro do pâncreas: as células BxPC-3 imitam o adenocarcinoma pancreático e, por isso, são utilizadas para explorar os mecanismos genéticos e moleculares subjacentes ao desenvolvimento e crescimento do tumor. Além disso, os investigadores descobrem novos biomarcadores e alvos terapêuticos utilizando estas células. Além disso, as células BxPC-3 expressam significativamente fatores angiogénicos, ou seja, interleucina-8 (IL-8), prostaglandina E2 (PGE2) e fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), o que as torna adequadas para o estudo da angiogénese. Neste contexto, a angiogênese é um processo crucial associado ao crescimento e à metástase do cancro. Um estudo publicado em 2022 demonstrou que a sobreexpressão de laminina-5 gama-2 (LAMC2) no BxPC3 PDAC (adenocarcinoma ductal pancreático) potencia a sua tumorigénese através da regulação da via de sinalização BxPC3 EGFR/ERK1/2/ AKT/mTOR [2].
- Descoberta e desenvolvimento de fármacos: a linha celular BxPC-3 serve como um modelo inestimável para o teste de fármacos anticancerígenos. Os investigadores examinam os efeitos citotóxicos, antimetastáticos e apoptóticos de potenciais fármacos no PDAC BxPC3. Um estudo conduzido por Alexandria Turner e colegas em 2020 explorou as propriedades apoptóticas dos extratos do fruto de Elaeocarpus reticulatus em células de cancro pancreático BxPC-3 [3]. Da mesma forma, foi realizada em 2020 uma investigação que determinou o potencial anticancerígeno de um extrato metanólico de uma planta chamada Oxialis obtriangulata em células BxPC-3. Além disso, os investigadores também estudaram a via mecânica celular através da qual o extrato vegetal exercia efeitos terapêuticos [4].
5. Publicações científicas sobre as células BxPC-3
Esta secção lista algumas das publicações mais citadas e interessantes que abordam a linha celular BxPC-3.
Esta publicação na revista Chemico-Biological Interactions (2020) explorou os efeitos apoptóticos de um produto natural, a licocumarona, nas células cancerígenas pancreáticas BxPC-3.
Este artigo de investigação foi publicado na revista Anticancer Research (2022). O estudo propôs que a hidroxicloroquina provoca a morte celular das células BxPC3 através da inibição do gene BCL-XL.
Esta investigação foi publicada em 2020 no Journal of Cellular Biochemistry. O estudo afirma que um composto natural, o salidrosídeo, exibe atividades anticancerígenas nas células BxPC-3 através da regulação do HIF-1α (fator induzível por hipóxia) e da cascata de sinalização LOXL2.
Este artigo publicado na revista Biomedicine & Pharmacotherapy sugere que o ibrutinib pode ser utilizado como um excelente radiossensibilizador em doentes com cancro do pâncreas. In vitro, um estudo em células BxPC-3 indica que diminui a fosforilação do EGFR nas células BxPC-3 e a expressão de pAKT e de genes a jusante regulados positivamente pela radioterapia.
Este estudo publicado na revista Integrative Cancer Therapies propôs que um produto natural, a chelidonina, exerce atividade apoptótica nas células pancreáticas humanas BxPC-3 através da regulação da sinalização de p53 e GADD45a nas células BxPC-3.
Recursos para a linha celular BxPC-3: protocolos, vídeos e muito mais
A linha celular BxPC-3 tem muitas vantagens cativantes que a tornam adequada para uso em investigação. Muitos recursos online sobre a linha celular BxPC-3 mencionam os seus protocolos de manuseamento, manutenção e transfecção.
- Transfecção de BxPC-3: Este vídeo é um guia passo a passo para aprender o protocolo de transfecção para células BxPC-3.
Esta secção do artigo inclui alguns links que explicam os protocolos de cultura celular BxPC3.
- Cultura celular BxPC-3: Este site irá ajudá-lo a aprender os protocolos para a subcultura e manuseamento de culturas BxPC-3 criopreservadas e proliferativas.
Referências
- Kim, Y., et al., Perfil proteómico comparativo de linhas celulares de adenocarcinoma ductal pancreático. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., A superexpressão de laminina-5 gama-2 promove a tumorigénese do adenocarcinoma ductal pancreático através da cascata EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Os extratos do fruto de Elaeocarpus reticulatus reduzem a viabilidade e induzem a apoptose em células de cancro do pâncreas in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Potencial anticancerígeno de Oxialis obtriangulata em células de cancro do pâncreas através da regulação da via mediada por ERK/Src/STAT3. Molecules, 2020. 25(10): p. 2301.