Publicado: 17 de outubro de 2023 | Última revisão: maio de 2026
Células A431: Origem, Condições de Cultura e Aplicações de Investigação
A431 é uma linha celular de carcinoma epidermoide humano derivada da pele de uma paciente de 85 anos. É uma das linhas celulares mais utilizadas na investigação biomédica, particularmente na biologia do cancro, imuno-oncologia, dermatologia e descoberta de fármacos. As células A431 apresentam uma superexpressão massiva do recetor do fator de crescimento epidérmico (EGFR) — apresentando aproximadamente 2 a 3 milhões de recetores por célula, cerca de 20 a 50 vezes mais do que as células epiteliais normais — tornando-as o modelo in vitro de referência para estudos de sinalização do EGFR e para o teste de terapias direcionadas ao EGFR, tais como o cetuximab e o erlotinibe. As células A431 estão disponíveis exclusivamente na Cytion, o seu banco de células europeu independente.
- Espécie / Origem
Humana (mulher, 85 anos) - Tecido
Epiderme cutânea (carcinoma epidermoide) - Morfologia
Epithelial, aderente - Tempo de duplicação
80–100 horas - Meio de crescimento
DMEM + 10% de FBS - Nível de biossegurança
BSL-1 - Característica principal
Superexpressão de EGFR (~2–3 milhões de recetores/célula) - Biomarcadores principais
EGFR (amplificado), TP53 (mutante), KRAS (tipo selvagem), PTEN (expresso) - Número do produto
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- Células A431: Características gerais e origem
- Linha celular A431: Informações sobre cultura
- Vantagens e desvantagens da linha celular A431
- Aplicações de investigação das células A431
- A431 vs. outras linhas celulares de cancro da pele
- Publicações de investigação sobre as células A431
- Recursos, protocolos e vídeos
- Perguntas frequentes
Células A431: Características gerais e origem
Esta secção aborda as principais propriedades biológicas da linha celular A431 — incluindo a sua origem, morfologia, cariótipo e a sobreexpressão de EGFR que a torna excepcionalmente valiosa para a investigação.
Origem e história da linha celular A431
- A A431, uma linha celular de cancro da pele humana, foi obtida a partir da epiderme de uma doente de 85 anos com carcinoma epidermoide [1]. Foi estabelecida por D.J. Giard et al., que desenvolveram várias outras linhas celulares a partir de tumores sólidos.
- A linha celular tem sido amplamente distribuída e validada por bancos de células independentes em todo o mundo, incluindo a Cytion, como um modelo de investigação fiável e reprodutível.
Morfologia e cariotipo da A431
- As células A-431 possuem morfologia epitelial. Agregam-se e formam aglomerados celulares em condições de cultura padrão.
- A linha celular de cancro da pele A431 é hipertriplóide. O número modal de cromossomas é 74, ocorrendo em aproximadamente 36% das células. Ploidias mais elevadas também estão presentes em cerca de 1% da população celular.
Expressão de EGFR nas células A431
A superexpressão de EGFR é a característica definidora das células A431 e a principal razão para a sua utilização generalizada. As células A431 apresentam uma amplificação genómica do locus do gene EGFR, resultando em aproximadamente 2–3 milhões de recetores EGFR por célula — 20 a 50 vezes mais do que as células epiteliais normais. Isto torna as células A431 o controlo positivo de referência para:
- Validação de anticorpos anti-EGFR por Western blot, citometria de fluxo e imunofluorescência
- Teste de anticorpos monoclonais direcionados ao EGFR, tais como cetuximab e panitumumab
- Avaliação de inibidores da tirosina quinase (TKIs) do EGFR, tais como o erlotinibe, o gefitinibe e o afatinibe
- Estudo de vias de sinalização a jusante, incluindo PI3K/AKT/mTOR e RAS/MAPK/ERK
Linha celular A431: Informações sobre cultura
Conhecer os requisitos de cultura de uma linha celular facilita o seu manuseamento. Esta secção aborda o tempo de duplicação, o meio de crescimento, a passagem, a criopreservação e os requisitos de biossegurança para a linha celular A431.
Pontos-chave para a cultura de células A431
Tempo de duplicação:
O tempo de duplicação da população das células A431 varia entre 80 e 100 horas.
Adesiva ou em suspensão:
A A431 é uma linha celular aderente.
Densidade de sementeira:
1 x 10⁴ células/cm² é o ideal para a linha celular A431. As células atingem a confluência em aproximadamente 4 dias a esta densidade. As células aderentes são lavadas com PBS (1×) e incubadas com solução de passagem Accutase, depois ressuspensas em meio de cultura, centrifugadas e distribuídas em novos frascos.
Meio de crescimento:
Meio DMEM suplementado com 10% de soro fetal bovino (FBS), 4,5 g/L de glicose, 1,0 mM de piruvato de sódio, 1,5 g/L de NaHCO3 e 4 mM de L-glutamina. O meio deve ser substituído a cada 2–3 dias.
Condições de crescimento:
As células cancerígenas A431 são cultivadas numa incubadora humidificada com 5% de CO₂ a 37 °C.
Armazenamento:
Armazenar num congelador elétrico ou na fase de vapor de nitrogénio líquido a temperaturas inferiores a −150 °C para proteger a viabilidade celular.
Processo de congelação e meio:
CM-1 ou CM-ACF são os meios de congelamento recomendados para as células A431. Utilize um método de congelamento lento a taxa controlada (−1 °C/min).
Processo de descongelação:
Descongele rapidamente as células A431 congeladas num banho-maria a 37 °C (40–60 segundos). Quando restar um pequeno pedaço de gelo, adicione meio de cultura e centrifugue. Resuspende as células colhidas e transfira-as para frascos de cultura.
Nível de biossegurança:
Recomenda-se o Nível de Biossegurança 1 (BSL-1) para o manuseamento de culturas de A431.
Vantagens e desvantagens da linha celular A431
A linha celular A431 possui características distintivas que a tornam simultaneamente muito útil e contextualmente limitada. Aqui está um resumo equilibrado.
Vantagens
As principais vantagens da linha celular cancerígena A431 são:
Superexpressão de EGFR
As células A431 sobreexpressam o EGFR a uma taxa de 2–3 milhões de recetores por célula, servindo como controlo positivo de referência para estudos de sinalização do EGFR e validação de fármacos anti-EGFR (cetuximab, erlotinib, gefitinib).
Tumorigenicidade
As células A431 são tumorigénicas e formam facilmente tumores em ratos imunocomprometidos, tornando-as uma ferramenta fiável para modelos de cancro com xenoenxertos, para estudar a dinâmica do crescimento tumoral e avaliar novos tratamentos oncológicos in vivo.
Bem caracterizadas
Décadas de investigação publicada significam que as células A431 estão amplamente caracterizadas a nível genómico, proteómico e fenotípico, proporcionando uma base científica robusta para a conceção experimental.
Formação de esferóides 3D
As células A431 formam facilmente esferóides 3D compactos em condições de aderência ultrabaixa, tornando-as compatíveis com plataformas modernas de triagem de organóides e esferóides para estudos de penetração e eficácia de fármacos.
Desvantagens
As desvantagens das células A431 são:
Anomalias genéticas
A431 é uma linha celular cancerígena com mutações genéticas acumuladas e alterações cromossómicas (hipertriplóide, número modal 74) que podem não reproduzir totalmente as características originais do tumor.
Risco de contaminação microbiana
A A431 é propensa à contaminação bacteriana. A manutenção de uma técnica asséptica rigorosa e a realização de testes de rotina para detecção de micoplasma são essenciais para obter resultados fiáveis.
Não é representativa de todos os tumores EGFR
Uma vez que a expressão de EGFR na A431 é impulsionada pela amplificação genética e não por mutação (como no cancro do pulmão), os resultados podem não se aplicar diretamente a contextos de tumores com mutação de EGFR, tais como o cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC).
Aplicações de investigação das células A431
A linha celular A431 é amplamente utilizada em várias disciplinas de investigação. A sua biologia única do EGFR, a sua tumorigenicidade e o seu genoma bem caracterizado tornam-na uma das linhas celulares de cancro humano mais versáteis disponíveis.
- Biologia do cancro: A A431 é uma ferramenta poderosa para investigar os mecanismos celulares e moleculares que impulsionam o crescimento, a metástase e a invasão do cancro. Estudos mapearam as vias de sinalização PI3K/AKT/mTOR e RAS/MAPK/ERK nesta linha celular, tendo-se demonstrado que a inibição induz a apoptose nas células tumorais cutâneas A431 [2, 3].
- Testes de terapia direcionada ao EGFR: As células A431 são o padrão de referência para a avaliação de terapêuticas anti-EGFR — anticorpos monoclonais (cetuximab, panitumumab) e TKI de moléculas pequenas (erlotinib, gefitinib, afatinib, osimertinib).
- Testes e avaliação de fármacos: As células A431 são utilizadas para avaliar novos candidatos a fármacos anticancerígenos. Um estudo de 2022 realizado por Rahim et al. demonstrou efeitos antiproliferativos potentes de nanopartículas de prata sintetizadas biogenicamente a partir de Alstonia angustiloba nas células A431 [4].
- Modelos de xenoenxertos tumorais: As células A431 são tumorigénicas em ratos imunodeficientes, permitindo modelos de xenoenxertos subcutâneos e ortotópicos para estudos de eficácia in vivo. Lim et al. utilizaram xenoenxertos derivados de A431 para avaliar os efeitos radiossensibilizantes do EGF exógeno in vivo [5].
- Toxicidade cutânea e investigação dermatológica: As células A431 são amplamente utilizadas por empresas farmacêuticas e cosméticas para avaliar a toxicidade dérmica, a penetração cutânea e os perfis de segurança de compostos aplicados por via tópica.
- Modelos esferoidais e organóides 3D: As células A431 formam esferoides 3D compactos em condições de aderência ultrabaixa ou de gota suspensa, permitindo estudos de penetração e resistência a fármacos mais relevantes do ponto de vista fisiológico.
- Validação de anticorpos anti-EGFR: Devido à sua densidade extrema de EGFR, as células A431 são o controlo positivo padrão para a validação de anticorpos anti-EGFR em Western blot, imunofluorescência, IHC e citometria de fluxo.
A431 vs. outras linhas celulares de cancro da pele
A escolha da linha celular certa é fundamental para a validade experimental. Veja como a A431 se compara a outras linhas celulares de cancro da pele e do epitélio escamoso comumente utilizadas:
| Característica | A431 | A375 (Melanoma) | SCC-25 (Carcinoma espinocelular oral) | HaCaT (queratinócito) |
|---|---|---|---|---|
| Tipo de cancro | Carcinoma epidermoide | Melanoma maligno | Carcinoma espinocelular oral | Queratinócito imortalizado |
| Expressão de EGFR | +++ (~2–3M/célula) | + (baixa) | ++ (moderada) | ++ (moderada) |
| Tumorigenicidade | Sim | Sim | Sim | Não |
| Morfologia | Epithelial, aderente | Fusiforme, aderente | Epithelial, aderente | Epithelial, aderente |
| BSL | 1 | 1 | 1 | 1 |
| Utilização principal | Investigação sobre o EGFR, testes de medicamentos anticancerígenos | Biologia do melanoma, inibidores de BRAF | Cancro da cabeça e pescoço, estudos sobre radiação | Biologia da pele, função de barreira |
Publicações de investigação que apresentam as células A431
Aqui estão algumas publicações importantes, revistas por pares, que apresentam a linha celular de carcinoma cutâneo A431.
Publicado na Materials Today Communications (2020). Avaliou o potencial anticancerígeno de nanofibras de poli-ε-caprolactona carregadas com curcumina e de álcool polivinílico-AuNPs contra células cancerígenas A431.
O miRNA-221 promove a progressão do carcinoma espinocelular cutâneo ao atuar sobre o PTEN
Publicado na Cellular & Molecular Biology Letters (2019). Propôs que o microRNA-221 desempenha um papel oncogénico no carcinoma espinocelular cutâneo ao atuar sobre o gene supressor de tumores PTEN.
Publicado na BMC Complementary Medicine and Therapies (2016). Demonstrou que a vincristina do fungo Eutypella spp–CrP14 induz a apoptose nas células A431.
Publicado na revista Cells (2019). Identificou o CDC42SE1 como um potencial biomarcador da progressão do cancro da pele, sendo que a sua regulação negativa facilita a tumorigénese nas células A431.
Publicado na Experimental and Therapeutic Medicine (2015). Demonstrou que a metformina suprime a proliferação das células A431 através da regulação da via de sinalização PI3K/Akt.
Recursos para a linha celular A431: protocolos, vídeos e muito mais
Os recursos a seguir fornecem orientações práticas para trabalhar com células A431 em laboratório.
- Transfecção de células A-431 — Um guia em vídeo passo a passo para a transfecção de células cancerígenas A431.
- Linha celular cancerígena A431 — Página do produto da Cytion — Informações completas sobre cultura celular: meio de crescimento, densidade de sementeira, passagem, criopreservação e certificados de qualidade.
- Protocolo de cultura de células A431 — Um protocolo externo conciso para a cultura da linha celular A431 da Bio-Protocol.
- Explorar todas as linhas celulares de cancro da pele da Cytion — Explore a gama completa de linhas celulares de cancro da pele disponíveis na Cytion.