Neuro-2a cellijn

Neuro-2a is een muisgestuurde neurale cellijn die veel gebruikt wordt in neurowetenschappelijk onderzoek. Deze cellen worden voornamelijk gebruikt voor het bestuderen van neurale ontwikkeling, differentiatie, neurotoxiciteit, celsignaalroutes en axonale groei. Daarnaast worden ze gebruikt voor het ontwikkelen en screenen van medicijnen.

Dit artikel richt zich op belangrijke aspecten van Neuro-2a neuroblastoomcellen die je kunnen helpen voordat je ermee aan de slag gaat. Het gaat voornamelijk over:

Algemene eigenschappen en oorsprong van Neuro-2a cellen
Informatie over het kweken van de Neuro-2a cellijn
Voor- en nadelen van de Neuro-2a cellijn
Onderzoekstoepassingen van de Neuro-2a cellijn
Onderzoekspublicaties met Neuro-2a cellen
Hulpbronnen voor Neuro-2a cellen: Protocollen, video's en meer

1. Algemene eigenschappen en oorsprong van Neuro-2a cellen

Dit deel van het artikel gaat over de achtergrond en basiseigenschappen van de Neuro-2a cellijn die essentieel zijn om te weten voordat je ermee gaat werken. Hier leer je het volgende: Wat is de Neuro-2a cellijn? Wat is de oorsprong van de Neuro-2a cellijn? Wat is neuro-2a celdifferentiatie? Wat is de grootte van een Neuro-2a cel? Wat is de morfologie van Neuro-2a cellen?

Neuro-2a cellen zijn afkomstig van een spontane tumor (neuroblastoom) van een Albino muis (stam A). De cellijn werd gecreëerd door R.J. Klebe en F.H. Ruddle.
De neuroblastoomcellen van Neuro-2a vertonen een neuronale en amoeboïde stamcelmorfologie.
Neuro-2a cellen zijn 12 micrometer groot [1].
Het chromosoomnummer van Neuro-2a cellen kan variëren van 59 tot 193 met een modaal aantal van 95. Het karyotype van deze neuroblastoomcellen is instabiel binnen een bereik van 94 tot 98 chromosomen.

Neuronale signalering geïllustreerd: 3D-weergave van het vrijkomen van neurotransmitters in de synaptische spleet door het presynaptische neuron, geactiveerd door Ca2+-instroom, leidend tot geactiveerde ionenkanalen en Na+-instroom in het postsynaptische neuron.

2. Neuro-2a cellijn kweekinformatie

Neuro-2a cellen worden veel gebruikt in neurowetenschappelijke onderzoekslaboratoria. Voordat je met deze cellen gaat werken, moet je de onderstaande informatie over de noodzakelijke celkweek leren. Dit kan je helpen om er gemakkelijk mee om te gaan. Je zult het weten: Wat is een Neuro-2a celkweekmedium? Hoe kweek je Neuro-2a cellen? Wat is de verdubbelingstijd van Neuro-2a cellen? Wat is de zaaidichtheid van Neuro-2a? Wat is het Neuro-2a celkweekprotocol? Wat zijn de Neuro-2a cel media?

Belangrijkste punten voor het kweken van Neuro-2a cellen

Verdubbelingstijd:	De Neuro-2a celverdubbelingstijd is ongeveer 70 uur.
Adherent of in suspensie:	Neuro-2a is een adherente cellijn.
Zaaidichtheid:	De geoptimaliseerde celdichtheid voor de Neuro-2a cellijn is 1 x¹⁰⁴ ^cellen/cm2. Voor het zaaien worden de cellen gewassen met magnesium- en calciumvrije fosfaatbufferzout (1x). Vervolgens wordt een passagingoplossing (Accutase) toegevoegd en worden de cellen gedurende 8 tot 10 minuten bij omgevingstemperatuur geïncubeerd. Na celdissociatie wordt verse media toegevoegd en worden de cellen gecentrifugeerd. De geoogste celpellet wordt voorzichtig geresuspendeerd en de cellen worden in een kweekvat gegoten om te groeien.
Groeimedium:	EMEM wordt gebruikt voor het kweken van Neuro-2a cellen. Het bevat 10% FBS, 2 mM L-glutamine, 1,5 g/L NaHCO3, EBSS, 1 mM natriumpyruvaat en NEAA voor een ideale celgroei. De media moeten 1 tot 2 keer per week worden vervangen.
Groeicondities:	Neuro-2a culturen worden onderhouden in een 37°C bevochtigde incubator aangesloten op een 5% CO2 toevoer.
Opslag:	Cellen moeten worden opgeslagen bij een temperatuur van minder dan -150 °C in een elektrische vriezer met ultralage temperatuur of de dampfase van vloeibare stikstof voor de lange termijn.
Invriesproces en medium:	CM-1 of CM-ACF media worden gebruikt om Neuro-2a cellen in te vriezen. De cellen worden bevroren via een langzaam vriesproces dat slechts een daling van 1 °C per minuut toelaat. Dit beschermt de cellen tegen schokken en behoudt hun levensvatbaarheid.
Ontdooien Proces:	Om bevroren culturen te ontdooien, wordt het flesje gedurende 40 tot 60 seconden in een waterbad van 37 °C geplaatst tot er nog slechts een klein ijsklontje overblijft. Vervolgens wordt kweekmedium toegevoegd en worden de cellen gecentrifugeerd. Deze stap helpt bij het verwijderen van bevriezende mediacomponenten. De celpellet wordt vervolgens geresuspendeerd en de cellen worden overgebracht naar een nieuwe kolf gevuld met kweekmedium. Daarna worden de cellen gedurende minimaal 24 uur in een incubator bij 37 °C geplaatst.
Bioveiligheidsniveau:	Laboratoriuminstellingen met bioveiligheidsniveau 1 zijn verplicht voor het hanteren en onderhouden van Neuro-2a culturen.

Microscopisch beeld van een vroege passage van adherente Neuro 2a neuroblastoomcellen met hun morfologie bij een vergroting van 10x en 20x.

3. Voordelen en nadelen van de Neuro-2a cellijn

Neuro-2a cellen hebben een aantal voor- en nadelen die hen onderscheiden van andere neuronale cellijnen. Enkele opmerkelijke voor- en nadelen van deze cellen worden hier opgesomd.

Voordelen

De voordelen van de Neuro-2a murine neuroblastoom cellijn zijn:

Gemakkelijk te onderhouden
De Neuro-2a cellijn wordt niet geassocieerd met complexe of ingewikkelde celkweekprocedures. Ze zijn gemakkelijk te kweken en te onderhouden in onderzoekslaboratoria.
In vitro neuronaal celmodel
Neuro-2a is een handig neuronaal celmodel dat veel gebruikt wordt door onderzoekers in neuronontwikkeling en differentiatiestudies.

Nadelen

De nadelen van Neuro-2a cellen zijn:

Muizenherkomst
Neuro-2a is afkomstig van muizen en onderzoekers moeten voorzichtig zijn met het extrapoleren van resultaten van op muizen gebaseerde studies naar menselijke gezondheid en ziekte, aangezien de biologie van muizen en mensen aanzienlijk kan verschillen.

4. Onderzoekstoepassingen van de Neuro-2a cellijn

Neuro-2a cellen bieden veel toepassingen op het gebied van neurowetenschappelijk onderzoek. Enkele veelbelovende toepassingen van deze cellijn worden hier besproken:

Neurale ontwikkeling: Neuro-2a is een in vitro neuronaal celmodel dat veel wordt gebruikt voor het bestuderen van neuronale ontwikkeling en gerelateerde processen zoals differentiatie, axonale groei en synapsvorming. Een studie uitgevoerd in 2020 gebruikte Neuro-2a cellen om de rol van microRNA-124 in retinoïnezuur-geïnduceerde neuronale celdifferentiatie te onderzoeken [2]. Een andere studie onderzocht de expressie van de retinoïnezuurreceptor gamma (RARG) en miRNA-124 in de neuroblastoomcellijn (N2A) van Neuro-2a. Deze studie stelde voor dat RARG het doelwit is van miR-124 en de uitgroei van neurieten onderdrukt [3].
Neurotoxiciteit: Neuro-2a wordt ook gebruikt om de toxische effecten van geneesmiddelen, chemicaliën of omgevingsfactoren op neurale cellen te beoordelen. In een onderzoek uitgevoerd door Zhihong Yin en collega's werd bijvoorbeeld de neurotoxiciteit van bisfenol A (BPA), een chemische stof in het milieu, onderzocht met behulp van Neuro-2a cellen. Ze ontdekten dat BPA de differentiatie en proliferatie van neuronale cellen onderdrukt door hun cellulaire en synaptische integriteit te verstoren [4].
Screening op geneesmiddelen: Neuro-2a cellen worden ook gebruikt om de therapeutische activiteiten van verschillende geneesmiddelen, verbindingen en natuurlijke producten te evalueren. In een onderzoek werd bijvoorbeeld gebruik gemaakt van Neuro-2a cellen en werd het antioxidatieve potentieel van Gingko biloba plantenextract bestudeerd. Bovendien suggereerde het onderzoek dat het een afname van de Aβ-aggregatie veroorzaakt en een potentiële behandeling kan zijn voor de ziekte van Alzheimer [5].

€ 430,00*

Inhoud: 1.5 milliliter

Prijzen excl. btw plus verzendkosten

cryovial

Productnummer: 400394

5. Onderzoekspublicaties met Neuro-2a cellen

Hier zijn enkele interessante onderzoekspublicaties waarin de Neuro-2a cellijn voorkomt.

Piperine-achtige alkamiden uit Piper nigrum induceren BDNF-promotor en bevorderen neurietuitgroei in Neuro-2a-cellen

Deze studie in het Journal of Natural Medicines, 2018 onderzocht de therapeutische effecten van alkamiden geïsoleerd uit witte peper (P. nigrum) op Neuro-2a neuronale cellen.

Nkx2. 1-downregulatie is betrokken bij hersenafwijking geïnduceerd door een teveel aan retinoïnezuur

Dit onderzoek in Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 2020 stelde dat het Nkx2.1-gen een belangrijke rol speelt in de hersenontwikkeling bij muizen door de Shh-signaalcascade te reguleren.

Blootstelling aan bisfenol A induceert neurotoxiciteit geassocieerd met synaptische en cytoskeletale disfunctie in neuro-2a cellen

Dit artikel is gepubliceerd in Toxicology and Industrial Health (2023) en stelt dat een chemische stof uit het milieu, bisfenol A, neurotoxiciteit veroorzaakt in neuro-2a cellen en hun synaptische en cytoskeletale disfunctie verstoort.

Hexarelin Modulation of MAPK and PI3K/Akt Pathways in Neuro-2A Cells Inhibits Hydrogen Peroxide-Induced Apoptotic Toxicity

In dit artikel in Pharmaceuticals (2021) wordt voorgesteld dat een geneesmiddel, hexareline, de PI3K/AKT- en MAPK-cascade in neuroblastomacellen (Neuro-2a) moduleert en de door waterstofperoxide geïnduceerde apoptose van neuro-2a-cellen remt.

Ethanolisch fruitextract van Emblica officinalis onderdrukt neuroinflammatie in microglia en bevordert neurietuitgroei in Neuro2a cellen

In dit onderzoeksartikel in Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2021) wordt voorgesteld dat het fruitextract van Emblica officinalis neuro-inflammatie in Neuro-2a cellen onderdrukt en dus gunstig kan zijn voor neuro-inflammatoire ziekten.

6. Bronnen voor Neuro-2a cellen: Protocollen, video's en meer

Hieronder volgen de online bronnen die beschikbaar zijn over de Neuro-2a cellen. Ze omvatten Neuro-2a celkweek- en transfectieprotocollen.

Neuro-2a transfectieprotocol: Neuro-2a is een geschikte gastheer voor transfectie. Deze link zal u begeleiden met betrekking tot het transfectieprotocol van de cellijn. Neuro-2a transfectie efficiëntie varieert van reagens tot reagens.

De volgende link bevat het Neuro-2a celkweekprotocol.

Neuro-2a celkweekprotocol: Deze link helpt je om het neuro-2a cellen subcultuurprotocol te leren.
Neuro-2a cellen: De website bevat uitgebreide kennis over Neuro-2a celmedia, zaaidichtheid en protocollen voor subcultuur en behandeling van gecryopreserveerde en proliferatieve culturen.

Referenties

Lulevich, V., et al., Single-cell mechanics provides a sensitive and quantitative means for probing amyloid-beta peptide and neuronal cell interactions. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(31): p. 13872-7.
You, Q., et al., Role of miR-124 in the regulation of retinoic acid-induced Neuro-2A cell differentiation. Neural Regen Res, 2020. 15(6): p. 1133-1139.
Su, X., et al., Retinoic acid receptor gamma is targeted by microRNA-124 and inhibits neurite outgrowth. Neurofarmacologie, 2020. 163: p. 107657.
Yin, Z., et al., Bisphenol-A exposure induced neurotoxicity and associated with synapse and cytoskeleton in Neuro-2a cells. Toxicologie in Vitro, 2020. 67: p. 104911.
Chen, L., et al., Gingko biloba-extract (EGb) remt oxidatieve stress in neuro-2a-cellen met overexpressie van APPsw. BioMed research international, 2019. 2019.