Ramos Cellen - Onderzoek naar B-cel lymfoom: Het belang van Ramos cellen
Ramos cellen zijn een B-lymfocyt cellijn die veel wordt gebruikt in biomedisch onderzoek. Ze vinden vooral toepassingen in immunologie en kankeronderzoek. Onderzoekers gebruiken deze cellen voor het evalueren van cytotoxische geneesmiddelen en het bestuderen van oppervlakteantigenen van B cellen, mutaties en apoptotische mechanismen.
Oorsprong en algemene kenmerken van Ramos cellen s
Inzicht in de oorsprong en essentiële eigenschappen van een cellijn speelt een cruciale rol bij het bepalen van de geschiktheid voor je onderzoek. Daarom is het raadzaam om deze informatie grondig te beoordelen voordat je ermee aan de slag gaat. Dit gedeelte behandelt de volgende veelgestelde vragen: Wat is de Ramos kankercellijn? Wat is Ramos cellijn CD19? Wat is Ramos cellijn CD20? Wat is de oorsprong van Ramos cellen? Wat zijn de markers op de Ramos cellijn? Wat is de grootte van de Ramos cel? Wat is de morfologie van de Ramos cellijn?
- De Ramos cellijn werd in 1972 ontwikkeld. Deze cellen zijn afkomstig uit het ascitische vocht van een 3-jarige Kaukasische jongen met Amerikaans-type Burkitt lymfoom [1].
- Ze brengen de belangrijkste B-cel markers tot expressie, waaronder immunoglobuline M (IgM), CD19, CD20 en CD22.
- Ramos-cellen zijn Epstein-bar-virus-negatieve cellen. Ze kunnen echter permanent verschuiven naar Epstein-Barr virus-positieve cellen.
- Deze B-lymfoblastcellen hebben een ronde morfologie.
Ramos blauwe cellen vs. Ramos B cellen
Ramos blauwe cellen en Ramos B cellen zijn beide humane Burkitt lymfoom cellen. Beide zijn negatief voor Epstein bar virus. Het verschil tussen deze cellen is dat Ramos blauwe cellen een NF-κB/AP-1-induceerbaar reportergen genaamd SEAP (secreted embryonic alkaline phosphate) tot expressie brengen, terwijl witte Ramos cellen dat niet doen.
Ramos cellen kweken
Dit gedeelte van het artikel is bedoeld om je te helpen de nodige informatie over celkweek van de Ramos cellen te leren. Hier leer je het volgende: Wat is de verdubbelingstijd van de cellijnen? Wat is het aanbevolen medium? Hoe kweek je Ramos cellen?
Belangrijke punten voor het kweken van Ramos cellen
|
Verdubbelingstijd: |
De Ramos cellen verdubbelingstijd is ruwweg 20,4 ± 1,5 uur. Deze kan echter afwijken, afhankelijk van de omstandigheden waaronder de cellen worden gekweekt. |
|
Adherent of in suspensie: |
De Ramos cellen groeien in suspensie. |
|
Celdichtheid: |
De optimale celdichtheid voor de Ramos cellijn is 3 x105 cellen/ml . Voor subcultuur worden de gesuspendeerde cellen verzameld door middel van centrifugeren. De cellen worden toegevoegd met verse media en voorzichtig geresuspendeerd. Daarna werden de cellen in een nieuwe kolf gegoten met een dichtheid van 3 tot 9 x105 cellen/ml . |
|
Groeimedium: |
RPMI 1640 aangevuld met 10% foetaal runderserum, 2,1 mM stabiele glutamine en 2,0 g/L NaHCO3 wordt gebruikt om Ramos-cellen te kweken. media moet 2 keer per week worden vervangen. |
|
Groeicondities: |
De humane Burkitt lymfoom cellijn (Ramos) wordt bewaard in een vochtige incubator bij 5% CO2 en 37°C temperatuur. |
|
Opslag: |
Bevroren Ramos cellen worden bewaard bij temperaturen onder -150 graden Celsius of in de dampfase van vloeibare stikstof om de levensvatbaarheid van de cellen voor langere tijd te beschermen. |
|
Invriesproces en medium: |
CM-1 of CM-ACF invriesmedium wordt aanbevolen voor Ramos cellen. Er wordt een langzaam vriesproces gebruikt dat een geleidelijke temperatuurdaling van 1 graad Celsius per minuut mogelijk maakt. Deze langzame bevriezing beschermt de cellen tegen schokken en verhoogt hun levensvatbaarheid. |
|
Ontdooiproces: |
Voor het ontdooien worden bevroren cellen40 tot 60 seconden in een voorverwarmd waterbad bij 37°C gehouden totdat er een klein ijsklontje overblijft. Daarna wordt vers medium toegevoegd en worden de cellen gecentrifugeerd om de vriesmedia-elementen te verwijderen. De pellet wordt opnieuw gesuspendeerd en de cellen worden in een nieuwe kolf met kweekmedium gedaan. |
|
Bioveiligheidsniveau: |
Het Biosafety level 1-laboratorium is essentieel voor het onderhouden van Epstein-Barr virus-negatieve Ramos-celculturen. Het bioveiligheidsniveau wordt echter verschoven naar 2 wanneer Ramos cellen permanent Epstein-Barr viruspositief worden. |
Ramos: Voordelen en beperkingen
Net als andere cellijnen, hebben Ramos cellen ook duidelijke voordelen en beperkingen. In dit hoofdstuk worden enkele opvallende voordelen en beperkingen besproken die het gebruik in onderzoek aanzienlijk kunnen beïnvloeden.
Voordelen
- Burkitt lymfoom celmodel: Ramos cellen zijn ontwikkeld uit een Burkitt lymfoom patiënt, waardoor ze een relevant celmodel zijn voor het bestuderen van lymfoïde maligniteiten
- Gemakkelijke kweek: Ramos cellen zijn gemakkelijk te kweken en te onderhouden in het laboratorium. Ze hebben eenvoudige celkweekvereisten en -condities
Beperkingen
- In vitro model: Ramos cellen vertegenwoordigen mogelijk niet volledig de genetische complexiteit van patiënten tumoren, waardoor hun toepasbaarheid beperkt is. Bovendien weerspiegelen de resultaten van experimenten met de Ramos cellijn mogelijk niet volledig de in vivo omstandigheden, wat kan leiden tot translationele uitdagingen
toepassingen van Ramos cellen in onderzoek
Ramos biedt veelbelovende toepassingen op biomedisch gebied. Enkele van de noodzakelijke onderzoekstoepassingen van de Ramos cellen zijn:
- Lymfoombiologie: Ramos cellen worden breed gebruikt om de biologie van lymfomen te bestuderen. Ze worden gebruikt om genetische en moleculaire factoren te onderzoeken die ten grondslag liggen aan lymfoïde maligniteiten. Daarnaast krijgen onderzoekers inzicht in het ontstaan, de progressie en de heterogeniteit van ziekten door gebruik te maken van deze Burkitt lymfoomcellen. Genetische mutaties en signaalwegen worden ook onderzocht, wat mogelijk leidt tot de ontwikkeling van preciezere diagnostische en therapeutische benaderingen. Uit een onderzoek dat in 2019 werd uitgevoerd, bleek dat remming van GCN5 (General control non-depressible 5) histonacetyltransferase de tumorigeniciteit van humane Burkitt lymfoomcellen (Ramos) vermindert via verstoring van BCR-signalering. Daarom wordt GCN5 voorgesteld als een haalbaar doelwit voor de ontwikkeling van een behandeling tegen lymfeklierkanker [2].
- Screening en testen van geneesmiddelen: De Ramos cellijn wordt veel gebruikt voor het screenen en testen van medicijnen. Onderzoekers evalueren de werkzaamheid van potentiële therapeutische verbindingen bij het remmen van celproliferatie en -groei en het induceren van celdood in lymfoomcellen. Dit helpt bij het identificeren van veelbelovende kandidaat-geneesmiddelen en vergemakkelijkt zo de ontwikkeling van gerichte behandelingen voor lymfeklierkankerpatiënten. Zo toonde het onderzoek aan dat het methanol extract van de schil, pulp en zaden van de Annona-vrucht een matig effect had op de proliferatie van Ramos-cellen, terwijl het chloroform extract een robuust effect had. De studie stelde dus voor dat Annona-vruchten effectief zouden kunnen zijn bij de preventie en behandeling van lymfomen [3].
Ramos cellen voor uw onderzoek
Publicaties met Ramos cellen
In dit deel van het artikel staan enkele interessante onderzoekspublicaties waarin de Ramos cellijn voorkomt:
Continue signalering van CD 79b en CD 19 is nodig voor de fitheid van Burkitt lymfoom B-cellen
Dit onderzoek werd in 2018 gepubliceerd in The EMBO journal. Uit het onderzoek bleek dat Ramos B-cellen de expressie van Ramos-cellen CD19 en CD79b (BCR-signaleringscomponent Igβ) markers nodig hebben voor hun fitness en competitieve groei.
Dit onderzoek, gepubliceerd in Neoplasia (2021), maakte gebruik van Ramos-cellen en stelde dat het mixed lineage kinase domain (MLKL) epigenetisch wordt gereguleerd in Burkitt-lymfoomcellen. Het is dus een veelbelovende prognostische marker voor het behandelsucces van necroptose-gerelateerde therapieën.
Fosforylering van PBK/TOPK Tyr74 door JAK2 bevordert tumorgroei van Burkitt lymfoom
Dit onderzoeksartikel in Cancer Letters (2022) suggereert dat de JAK2/TOPK/histon H3-signaleringsas een cruciale rol speelt bij de proliferatie van B-lymfoomcellijnen in vitro.
Dit artikel werd in 2020 gepubliceerd in Toxins. De studie stelde dat behandeling met verotoxine-1 endoplasmatische reticulum (ER)-stress induceert in Ramos B-cellen. Dit leidt tot de initiatie van apoptotische of overlevingssignalering in lymfoomcellijnen.
Silymarine remt de genexpressie van de Toll-like receptor 8 en apoptose in de Ramos kankercellijn
Deze studie in het Avicenna Journal of Phytomedicine (2020) meldt dat een natuurlijke verbinding, silymarin, de expressie van TLR8 (Toll-like receptor 8) en apoptose in de Ramos cellijn onderdrukt.
Bronnen voor Ramos cellijn: Protocollen, video's en meer
Hieronder volgen enkele online bronnen over Ramos cellen:
- Ramos celtransfectie: Dit document helpt je bij het leren van het protocol voor transfectie van de Ramos cellijn.
De volgende link bevat het Ramos celcultuur protocol:
- Ramos cellen: Deze website bevat basisinformatie over de Ramos cellijn. Het bevat ook een protocol voor subcultuur Ramos cellen en de behandeling van prolifererende en cryobewaarde culturen. Bovendien is er ook informatie beschikbaar over Ramos celmedia, verdubbelingstijd en celdichtheid.
Belangrijke inzichten in Ramos Cellen: Veelgestelde vragen
Referenties
- Kerntke, C.G., Analyse van de organisatie en signaalcapaciteit van het membraan IgE tijdens de interactie met CD19 en CD23 in B-lymfocyten. 2021, Georg-August-Universität Göttingen.
- Farria, A.T., et al., GCN5 HAT-remming vermindert de overleving van menselijke Burkitt-lymfoomcellen door vermindering van MYC-doelgenexpressie en belemmering van BCR-signaalroutes. Oncotarget, 2019. 10(56): p. 5847.
- Al-Shaya, H.M., et al., Phytochemical profile and antioxidation activity of annona fruit and its effect on lymphoma cell proliferation. Food Science & Nutrition, 2020. 8(1): p. 58-68.