Hep2-cellen en hun rol in onderzoek naar larynxkanker
Hep2-cellen zijn een centraal in vitro model dat veel wordt gebruikt in biomedisch onderzoek, zoals reumatologie, kankeronderzoek en immunologie. Deze menselijke cellen zijn afkomstig van larynxcarcinoom en hebben een belangrijke rol gespeeld bij het ophelderen van het weefsel van oorsprong en de specifieke kenmerken van larynxneoplasma. Hun belang wordt goed erkend in translationeel kankeronderzoek, waar ze in hoge mate hebben bijgedragen aan ons begrip van de laryngeale aard en oorsprong van kankers, en een substantiële aanwezigheid markeren in onderzoekspublicaties over larynxkanker [1].
Oorsprong en algemene kenmerken van de Hep 2 cellen
De oorsprong en algemene eigenschappen van een cellijn bepalen de toepasbaarheid in onderzoek. In dit gedeelte kom je meer te weten over de oorsprong en enkele opvallende kenmerken van Hep 2 cellen. Zo kom je bijvoorbeeld te weten Wat is de HEp-2 cellijn? Wat is de bron van Hep 2 cellen? En wat is de morfologie van Hep 2?
- Hep 2, een onsterfelijke menselijke epitheelcellijn, werd voor het eerst beschreven door H.W. Toolan als larynxcarcinoomcellen in 1954. De laatste tijd is echter gerapporteerd dat de Hep 2 cellijn is samengesteld uit baarmoederhals adenocarcinoom cellen en is ontstaan door besmetting van de Hela cellijn [2].
- Hep 2 cellen bevatten Hela markerchromosomen en zijn positief bevonden voor Keratine en humaan papillomavirus DNA-sequenties, zoals bevestigd via respectievelijk immunoperoxidase kleuring en PCR.
- De Hela-cellijnderivaat Hep 2 heeft een epitheliale morfologie.
- De Hep 2 cellijn vertoont zowel structurele als numerieke chromosomale schaafwonden met een bijna-triploïde karyotype [3].
Hep 2 cellijn: Informatie over het kweken
Voordat we met een cellijn werken, moeten we de volgende belangrijke punten voor het kweken ervan kennen. Deze informatie kan nuttig zijn voor het effectief kweken en onderhouden van de cellijn. Je moet het weten: Wat is de verdubbelingstijd van HEp-2 cellen? Zijn Hep-2 cellen adherent? Wat is de zaaidichtheid van Hep2-cellen?
|
Populatieverdubbelingstijd: |
De verdubbelingstijd voor Hep 2 cellen is ongeveer 40 uur. |
|
Adherent of in suspensie: |
Hep 2 cellen zijn adherent en groeien uit tot monolagen. |
|
Zaaidichtheid: |
Een zaaidichtheid van 1 x104 cellen/cm2 is ideaal voor Hep 2-celkweek. Voor het zaaien worden adherente Hep 2-cellen gespoeld met 1 x PBS-oplossing, gevolgd door incubatie met Accutase-dissociatieoplossing. Na een incubatie van 8-10 minuten bij omgevingstemperatuur worden de cellen geresuspendeerd in media en gecentrifugeerd. De verzamelde cellen worden vervolgens in vers medium gedoseerd en in nieuwe kolven gegoten om te worden gekweekt. |
|
Groeimedium: |
EMEM of Eagle's minimaal essentieel medium wordt gebruikt om Hep 2 cellen te kweken. Deze media wordt aangevuld met 10% FBS, 1,0 g/L glucose, 2,2 g/L NaHCO3, 2,0 mM L-glutamine, 1% NEAA en 1 mM natriumpyruvaat voor ideale celgroei. Het medium moet 2 tot 3 keer per week worden ververst. |
|
Groeicondities: |
Net als andere zoogdiercellijnen wordt ook Hep 2 gekweekt in een vochtige incubator bij een temperatuur van 37°C en met een continue toevoer van 5% CO2. |
|
Opslag: |
Hep 2 cellen kunnen worden opgeslagen in elektrische vriezers met ultralage temperaturen (lager dan -150 °C) of in de dampfase van vloeibare stikstof voor langdurige opslag. |
|
Invriesproces en medium: |
De aanbevolen invriesmedia voor Hep 2 cellen zijn CM-1 of CM-ACF. De cellen moeten worden ingevroren met een langzaam vriesproces dat een geleidelijke temperatuurdaling van 1 °C mogelijk maakt en de levensvatbaarheid van de cellen beschermt. |
|
Ontdooien Proces: |
Het flesje bevroren cellen wordt snel ontdooid door het te schudden in een waterbadbij 37 °Ctotdat er een klein ijsklontje overblijft. De cellen worden dan toegevoegd aan verse media en gecentrifugeerd om de bestanddelen van de vriesmedia te verwijderen. Later wordt de celpellet geresuspendeerd in media en worden de cellen in kweekflesjes gedistribueerd. De cellen moeten bijna 24 uur rusten om te kunnen hechten. |
|
Bioveiligheidsniveau |
Een laboratorium met bioveiligheidsniveau 1 wordt aanbevolen voor het hanteren en onderhouden van Hep 2 celculturen. |
Voordelen en beperkingen van Hep 2 cellen
Bijna alle cellijnen vertonen een unieke combinatie van voordelen en beperkingen die bijdragen aan hun gebruik in het onderzoeksveld. In dit gedeelte worden enkele belangrijke voor- en nadelen van de Hep 2 cellijn beschreven.
Voordelen
De belangrijkste voordelen van de Hep 2 cellijn zijn:
- Menselijke oorsprong: Hep 2 is afgeleid van menselijke epitheelcellen, waardoor het een waardevol in vitro model is voor het bestuderen van menselijke ziekten en virale infecties
- ANA-detectie: De Hep 2 cellijn bezit een natieve eiwit array die talrijke antigenen bevat, waardoor het een uitstekend substraat is voor het detecteren van antinucleaire antilichamen (ANA). Deze eigenschap maakt een specifieke en zeer gevoelige screening van ANA in serum mogelijk, waardoor het een cruciaal diagnostisch hulpmiddel is voor het identificeren van bindweefselziekten
Beperkingen
- Chromosomale afwijkingen: Hep 2 cellen vertonen meerdere numerieke en structurele chromosomale afwijkingen. Deze afwijkingen kunnen het gedrag van de cellen beïnvloeden en de toepasbaarheid in bepaalde laboratoriumexperimenten beperken
- Tumorigeniciteit: Hep 2, een van tumoren afgeleide menselijke epitheelcellijn, kan genetische afwijkingen vertonen die gewoonlijk niet voorkomen in epitheelcellen. Bijgevolg kan het gebruik van Hep 2 cellen beperkt zijn in specifieke studies die zich richten op de normale cellulaire fysiologie.
Uitbreiding van toepassingen van Hep 2 cellijn in biomedisch onderzoek
De Hep 2 cellijn is een voorbeeldmodel voor een groot aantal toepassingen binnen het biomedisch onderzoek. Deze cellen staan bekend om hun veelzijdigheid en spelen een cruciale rol in in vitro experimenten, variërend van receptoranalyse tot de studie van complexe ziekten.
Tumorigene mechanismen en therapeutische doelwitten onderzoeken met Hep 2 cellen
Omdat Hep 2-cellen tumorigene cellen zijn, zijn ze van cruciaal belang om de fijne kneepjes van de kankerbiologie te onderzoeken. Ze bieden inzicht in kankersignaleringsroutes, mechanistische studies en zijn een steunpilaar bij het screenen en evalueren van medicijnen tegen kanker. In een inzichtelijk onderzoek werd bijvoorbeeld Hep 2 gebruikt om de invloed van miRNA-33a op de proliferatie van kankercellen te bepalen. De bevindingen onthulden de antiproliferatieve effecten van miRNA-33a via de interactie met PIM1, een bekend oncogen, wat een nieuw therapeutisch doelwit suggereert [4]. In een ander geval werd Hep 2 gebruikt bij het beoordelen van het therapeutische potentieel van Marsdenia tenacissima zinkoxide nanodeeltjes, waarbij hun antiproliferatieve en apoptotische werking werd benadrukt [5].
Virologisch onderzoek bevorderen met inzichten in Hep 2-cellen
De gevoeligheid van Hep 2 cellen voor verschillende menselijke virussen maakt ze van onschatbare waarde voor virologisch onderzoek. Ze zijn effectief gebruikt voor de expressie van SARS-CoV-2 virusgenen om de complexe wisselwerking tussen het virus en de celmechanismen van de gastheer te ontrafelen [6]. Deze toepassing is vooral cruciaal in het huidige tijdperk, waarin het begrijpen en bestrijden van virale infecties zoals COVID-19 een wereldwijde prioriteit is.
Het ontcijferen van cellulaire functies: Genmanipulatie in Hep 2-cellen
Het aanpassingsvermogen van de Hep 2 cellijn aan genetische manipulatie onderstreept het nut ervan in mechanistische studies. Onderzoekers maken gebruik van deze eigenschap om genexpressie te moduleren en de rol van specifieke genen in cellulaire functies op te helderen. Een opmerkelijke studie betrof de overexpressie van het RNA-bindende eiwit RBM6 in Hep 2 cellen, wat het onderzoek naar het tumorsuppressorpotentieel vergemakkelijkte en waardevolle inzichten verschafte in de moleculaire onderbouwing van kanker [7].
Verbetering van ziektediagnose door toepassingen van Hep 2 cellijnen
Naast deze onderzoeksdomeinen worden Hep 2 cellen geprezen om hun diagnostische capaciteiten, vooral in de detectie van ANA's, die cruciaal zijn bij de diagnose van auto-immuunziekten zoals systemische lupus erythematosus. De precisie waarmee Hep 2 cellen ANA's kunnen aantonen, ondersteunt de diagnose en ontwikkeling van gerichte behandelingen, waardoor ons begrip van auto-immuunziekten toeneemt en de patiëntenzorg verbetert.
Door deze diverse toepassingen hebben Hep 2 cellen aanzienlijk bijgedragen aan de vooruitgang in translationeel kankeronderzoek, de studie van virale infecties en de verkenning van cellulaire mechanismen. Hun bijdrage aan het genereren van klinisch relevante gegevens is van onschatbare waarde en bevestigt hun onmisbare rol in zowel het laboratorium als de kliniek. Naarmate het onderzoek zich blijft ontwikkelen, zal de Hep 2 cellijn zeker in de voorhoede blijven, helpen bij de ontdekking van nieuwe behandelingen en onze kennis van menselijke gezondheid en ziekte uitbreiden.
Stel uw HEp-2 cellijn vandaag nog veilig
Hep 2 cellen: Publicaties
Hieronder volgen enkele interessante en meest geciteerde onderzoekspublicaties over Hep 2 cellen.
- Synthese van zinkoxide nanodeeltjes van Marsdenia tenacissima remt de celproliferatie en induceert apoptose in laryngeale kankercellen (Hep-2)
Dit artikel, gepubliceerd in het Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2019), onderzocht het antikankerpotentieel van biosynthesized Marsdenia tenacissima zinkoxide nanodeeltjes in de Hep-2 cellijn. - Bio-geformuleerde hesperidine-geladen PLGA-nanodeeltjes gaan de mitochondriaal-gemedieerde intrinsieke apoptotische route in kankercellen tegen
Dit artikel werd gepubliceerd in het Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials in 2021. Deze studie onderzocht de antikankereigenschappen van bio-geformuleerde hesperidine-geladen Poly (lactic-co-glycolic acid) (PLGA) nanodeeltjes in Hep 2 cellen. - Antivirale activiteit van ethanolextract van Lophatherum gracile tegen respiratoire syncytiële virusinfectie
In deze publicatie in het Journal of Ethnopharmacology in 2019 werden Hep 2-cellen gebruikt om respiratoir syncytieel virusinfectie te bestuderen en antivirale geneesmiddelen ertegen te screenen. De studie meldde het veelbelovende antivirale potentieel van ethanolextract van een medicinale plant, namelijk Lophatherum gracile, tegen respiratoire syncytiale virusinfectie. - Evaluatie van waterige extracten van vier aromatische planten op hun activiteit tegen de hechting van Candida albicans aan humane HEp-2 epitheelcellen
Dit onderzoek is gepubliceerd in Gene Reports (2020). Deze studie onderzocht het remmende vermogen van waterige extracten van vier aromatische planten tegen de aanhechting van Candida albicans aan humane HEp-2 epitheelcellen. - Wnt1-induceerbaar signaaleiwit 1 reguleert de glycolyse en chemoresistentie van larynx squameus celcarcinoom via de YAP1/TEAD1/GLUT1 pathway
Deze studie werd in 2019 gepubliceerd in het Journal of Cellular Physiology. De studie meldt dat Wnt1-induceerbaar signaleringseiwit 1 (WISP1) interageert met YAP1/TEAD1/GLUT1-pathway en glucosemetabolisme en chemoresistentie reguleert in de Hep2-cellijn.
Bronnen voor Hep2-cellijn: Protocollen, video's en meer
Hep 2 is een bekende cellijn. Er zijn verschillende bronnen beschikbaar met de Hep 2 cellijn.
- Subculturen van de Hep2-cellijn: Deze video is een stapsgewijze handleiding voor het subkweken van Hep 2 cellen.
- Hep 2 cellen ANA screening: Deze video geeft uitleg over anti-nucleaire antilichamen (ANA) screening met behulp van de Hep 2 cellijn.
- Hep 2 kweken: Deze link bevat basisinformatie over celkweek met Hep 2 cellen. Het omvat het splitsen van cellen, invriezen en ontdooien.
Veelgestelde vragen over HEp-2 cellen in biomedisch onderzoek
Referenties
- Fusi, M. and S. Dotti, Adaptation of the HEp-2 cell line to totally animal-free culture systems and real-time analysis of cell growth. Biotechniques, 2021. 70(6): p. 319-326.
- Gorphe, P., A comprehensive review of Hep-2 cell line in translational research for laryngeal cancer. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): p. 644-649.
- Wang, M., et al., Cancer-associated fibroblasts in a human HEp-2 established laryngeal xenografted tumor are not derived from cancer cells through epithelial-mesenchymal transition, phenotypically activated but karyotypically normal. PLoS One, 2015. 10(2): p. e0117405.
- Karatas, O.F., Antiproliferatief potentieel van miR-33a in laryngeale kanker Hep-2 cellen via targeting van PIM1. Hoofd Hals, 2018. 40(11): p. 2455-2461.
- Wang, Y., et al., Synthesis of Zinc oxide nanoparticles from Marsdenia tenacissima inhibits the cell proliferation and induces apoptosis in laryngeal cancer cells (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: p. 111624.
- Zhang, J., et al., A systemic and molecular study of subcellular localization of SARS-CoV-2 proteins. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): p. 269.
- Wang, Q., et al., RNA-bindend eiwit RBM6 als tumorsuppressorgen onderdrukt de groei en progressie in laryngocarcinoom. Gen, 2019. 697: p. 26-34.