Hep2-cellen en hun rol in het onderzoek naar strottenhoofdkanker
Hep2-cellen vormen een cruciaal in-vitromodel dat op grote schaal wordt gebruikt in diverse biomedische onderzoeksdomeinen, zoals reumatologie, kankeronderzoek en immunologie. Deze menselijke cellen, afkomstig van larynxcarcinomen, zijn van essentieel belang geweest voor het ophelderen van het oorspronkelijke weefsel en de specifieke kenmerken van neoplasmata van het strottenhoofd. Hun belang wordt algemeen erkend in translationeel kankeronderzoek, waar ze een grote bijdrage hebben geleverd aan ons begrip van de aard en oorsprong van keelkanker, en ze zijn dan ook prominent aanwezig in publicaties over keelkankeronderzoek [1].
- Groei-medium
- EMEM of Eagle's minimal essential medium wordt gebruikt om Hep 2-cellen te kweken. Dit medium wordt aangevuld met 10% FBS, 1,0 g/l glucose, 2,2 g/l NaHCO3, 2,0 mM L-glutamine, 1% NEAA en 1 mM natriumpyruvaat voor een optimale celgroei. Het medium moet 2 tot 3 keer per week worden ververst.
- Verdubbelingstijd
- De verdubbelingstijd die voor Hep 2-cellen wordt gerapporteerd, is ongeveer 40 uur.
- Groeitype
- Hep 2-cellen zijn hechtend en groeien uit tot monolaagjes.
- Bioveiligheidsniveau
- BSL-1
- Verkrijgbaar bij
- Cytion — Bestel Hep2
Herkomst en algemene kenmerken van de Hep 2-cellen
De oorsprong en algemene kenmerken van een cellijn bepalen de toepasbaarheid ervan in onderzoek. In dit gedeelte vindt u informatie over de oorsprong en enkele opvallende kenmerken van Hep 2-cellen. U komt bijvoorbeeld te weten: Wat is de HEp-2-cellijn? Wat is de bron van Hep 2-cellen? En wat is de morfologie van Hep 2?
- Hep 2, een onsterfelijke menselijke epitheelcellijn, werd in 1954 voor het eerst beschreven door H.W. Toolan als larynxcarcinoomcellen. Recent is echter gemeld dat de Hep 2-cellijn bestaat uit adenocarcinoomcellen van de baarmoederhals en is ontstaan door besmetting van de Hela-cellijn [2].
- Hep 2-cellen bevatten Hela-markerchromosomen en testen positief op keratine en DNA-sequenties van het humaan papillomavirus, zoals respectievelijk bevestigd door immunoperoxidase-kleuring en PCR.
- De van de Hela-cellijn afgeleide Hep 2-lijn bezit een epitheelachtige morfologie.
- De Hep 2-cellijn vertoont zowel structurele als numerieke chromosomale afwijkingen met een bijna-triploïde karyotype [3].
HEp-2-cellijn: informatie over het kweken
Voordat we met een cellijn gaan werken, moeten we de volgende belangrijke punten voor de kweek ervan kennen. Deze informatie kan nuttig zijn voor het effectief kweken en onderhouden van de cellijn. U moet weten: Wat is de verdubbelingstijd van HEp-2-cellen? Zijn Hep 2-cellen hechtend? Wat is de bezaaidichtheid van Hep2-cellen?
Verdubbelingstijd van de populatie:
De verdubbelingstijd die voor Hep-2-cellen wordt gerapporteerd, is ongeveer 40 uur.
Hechtend of in suspensie:
Hep-2-cellen zijn hechtend en groeien uit tot monolaagjes.
Zaaidichtheid:
Een bezaaidichtheid van 1 x 104 cellen/cm2 is ideaal voor Hep 2-celcultuur. Voor het bezaaien worden hechtende Hep 2-cellen gespoeld met 1 x PBS-oplossing, gevolgd door incubatie met Accutase-dissociatieoplossing. Na 8–10 minuten incubatie bij kamertemperatuur worden de cellen opnieuw gesuspendeerd in medium en gecentrifugeerd. De verzamelde cellen worden vervolgens gedoseerd in vers medium en in nieuwe flessen gegoten voor kweek.
Groeimedium:
EMEM of Eagle's minimal essential medium wordt gebruikt voor het kweken van Hep 2-cellen. Dit medium wordt aangevuld met 10% FBS, 1,0 g/l glucose, 2,2 g/l NaHCO3, 2,0 mM L-glutamine, 1% NEAA en 1 mM natriumpyruvaat voor een optimale celgroei. Het medium moet 2 tot 3 keer per week worden ververst.
Kweekomstandigheden:
Net als andere zoogdiercellijnen wordt Hep 2 ook gekweekt in een bevochtigde incubator ingesteld op een temperatuur van 37 °C en met een continue toevoer van 5% CO2.
Opslag:
Hep 2-cellen kunnen worden bewaard in elektrische vriezers met ultralage temperatuur (onder -150 °C) of in de dampfase van vloeibare stikstof voor langdurige opslag.
Invriesproces en medium:
De aanbevolen invriesmedia voor Hep 2-cellen zijn CM-1 of CM-ACF. Cellen moeten worden ingevroren met behulp van een langzaam invriesproces dat een geleidelijke temperatuurdaling van 1 °C mogelijk maakt en de levensvatbaarheid van de cellen beschermt.
Ontdooiproces:
Het flesje met bevroren cellen wordt snel ontdooid door het te schudden in een waterbad bij 37 °C totdat er een klein klompje ijs overblijft. De cellen worden vervolgens toegevoegd aan vers medium en gecentrifugeerd om componenten van het invriesmedium te verwijderen. Later wordt het celpellet opnieuw gesuspendeerd in medium en worden de cellen gedoseerd in kweekflessen. Cellen moeten bijna 24 uur rusten om aan te hechten.
Bioveiligheidsniveau
Voor het hanteren en onderhouden van Hep 2-celculturen wordt een laboratorium van bioveiligheidsniveau 1 aanbevolen.
Voordelen en beperkingen van Hep 2-cellen
Bijna alle cellijnen vertonen een unieke combinatie van voordelen en beperkingen die bijdragen aan hun gebruik in de onderzoekswereld. In dit gedeelte worden enkele belangrijke voor- en nadelen van de Hep 2-cellijn beschreven.
Voordelen
De belangrijkste voordelen van de Hep 2-cellijn zijn:
- Van menselijke oorsprong: Hep 2 is afgeleid van menselijke epitheelcellen, waardoor het een waardevol in-vitromodel is voor het bestuderen van menselijke ziekten en virale infecties.
- ANA-detectie: De Hep 2-cellijn bezit een natuurlijk eiwitarray dat talrijke antigenen presenteert, waardoor het een uitstekend substraat is voor het detecteren van antinucleaire antilichamen (ANA). Deze eigenschap maakt een specifieke en zeer gevoelige screening van ANA in serum mogelijk, waardoor het een cruciaal diagnostisch hulpmiddel is voor het identificeren van bindweefselaandoeningen.
Beperkingen
- Chromosomale afwijkingen: Hep 2-cellen vertonen meerdere numerieke en structurele chromosomale afwijkingen. Deze afwijkingen kunnen het celgedrag beïnvloeden en kunnen de toepasbaarheid ervan in bepaalde laboratoriumexperimenten beperken.
- Tumorigeniciteit: Hep 2, een van een tumor afkomstige menselijke epitheelcellijn, kan genetische afwijkingen vertonen die doorgaans niet voorkomen in epitheelcellen. Bijgevolg kan het gebruik van Hep 2-cellen beperkt zijn in specifieke studies die zich richten op normale cellulaire fysiologie.
Uitbreiding van de toepassingen van de Hep 2-cellijn in biomedisch onderzoek
De Hep 2-cellijn onderscheidt zich als een voorbeeldig model voor een veelheid aan toepassingen binnen het biomedisch onderzoek. Deze cellen staan bekend om hun veelzijdigheid en spelen een cruciale rol in in-vitro-experimenten, variërend van receptoranalyse tot het onderzoek naar complexe ziekten.
Onderzoek naar tumorogene mechanismen en therapeutische doelwitten met Hep 2-cellen
Hep 2-cellen zijn tumorigenisch en spelen een cruciale rol bij het doorgronden van de fijne kneepjes van de kankerbiologie. Ze bieden inzicht in kankersignaleringsroutes en mechanistische studies, en vormen een steunpilaar bij de screening en evaluatie van antikankermedicijnen. Zo werd in een verhelderend onderzoek gebruikgemaakt van Hep 2-cellen om de invloed van miRNA-33a op de proliferatie van kankercellen in kaart te brengen. De bevindingen brachten de antiproliferatieve effecten van miRNA-33a aan het licht via de interactie met PIM1, een bekend oncogen, wat een nieuw therapeutisch doelwit suggereert [4]. In een ander geval werd Hep 2 gebruikt bij het beoordelen van het therapeutisch potentieel van Marsdenia tenacissima-zinkoxide-nanodeeltjes, waarbij de nadruk lag op hun antiproliferatieve en apoptotische werkzaamheid [5].
Vooruitgang in virologisch onderzoek met inzichten uit Hep 2-cellen
De gevoeligheid van Hep 2-cellen voor verschillende menselijke virussen maakt ze tot een onschatbare bron voor virologisch onderzoek. Ze zijn effectief gebruikt bij de expressie van SARS-CoV-2-virale genen om de complexe wisselwerking tussen het virus en de cellulaire mechanismen van de gastheer te ontrafelen [6]. Deze toepassing is met name cruciaal in het huidige tijdperk, waarin het begrijpen en bestrijden van virale infecties zoals COVID-19 een wereldwijde prioriteit is.
Celfuncties ontcijferen: genmanipulatie in Hep 2-cellen
Het vermogen van de Hep 2-cellijn om zich aan te passen aan genetische manipulatie onderstreept het nut ervan in mechanistische studies. Onderzoekers maken gebruik van deze eigenschap om genexpressie te moduleren en de rol van specifieke genen in cellulaire functies te verduidelijken. Een opmerkelijk onderzoek betrof de overexpressie van het RNA-bindende eiwit RBM6 in Hep 2-cellen, wat het onderzoek naar het tumorsuppressorpotentieel ervan vergemakkelijkte en waardevolle inzichten opleverde in de moleculaire basis van kanker [7].
Verbetering van de diagnose van ziekten door toepassingen van de Hep 2-cellijn
Naast deze onderzoeksdomeinen worden Hep 2-cellen geprezen om hun diagnostische mogelijkheden, met name bij de detectie van ANA's, die cruciaal zijn bij de diagnose van auto-immuunziekten zoals systemische lupus erythematosus. De precisie waarmee Hep 2-cellen ANA's kunnen weergeven, ondersteunt de diagnose en de ontwikkeling van gerichte behandelingen, waardoor ons begrip van auto-immuunpathologieën wordt vergroot en de patiëntenzorg wordt verbeterd.
Door deze diverse toepassingen hebben Hep 2-cellen aanzienlijk bijgedragen aan vooruitgang in translationeel kankeronderzoek, de studie van virale infecties en het onderzoek naar cellulaire mechanismen. Hun bijdrage aan het genereren van klinisch relevante gegevens is van onschatbare waarde, wat hun onmisbare rol in zowel het laboratorium als de kliniek bevestigt. Naarmate het onderzoek zich verder ontwikkelt, zal de Hep 2-cellijn ongetwijfeld voorop blijven lopen en helpen bij de ontdekking van nieuwe behandelingen en de uitbreiding van onze kennis over de menselijke gezondheid en ziekte.
Bestel vandaag nog uw HEp-2-cellijn
Hep-2-cellen: Wetenschappelijke publicaties
Hieronder volgen enkele interessante en meest geciteerde onderzoekspublicaties over Hep-2-cellen.
- Synthese van zinkoxide-nanodeeltjes uit Marsdenia tenacissima remt de celproliferatie en induceert apoptose in larynxkankercellen (Hep-2)
Dit artikel, gepubliceerd in het Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2019), onderzocht het antikankerpotentieel van biosynthetische Marsdenia tenacissima-zinkoxide-nanodeeltjes in de Hep-2-cellijn. - Bioformuleerde PLGA-nanodeeltjes geladen met hesperidine gaan de mitochondriale intrinsieke apoptotische route in kankercellen
tegen Dit artikel is in 2021 gepubliceerd in het Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials. Deze studie onderzocht de antikankereigenschappen van bioformuleerde, met hesperidine geladen poly(melkzuur-co-glycolzuur) (PLGA)-nanodeeltjes in Hep 2-cellen. - Antivirale activiteit van ethanolextract van Lophatherum gracile tegen infectie
met het respiratoir syncytieel virus Deze publicatie in het Journal of Ethnopharmacology in 2019 gebruikte Hep 2-cellen om infectie met het respiratoir syncytieel virus te bestuderen en antivirale geneesmiddelen ertegen te screenen. De studie rapporteerde het veelbelovende antivirale potentieel van ethanolextract van een medicinale plant, namelijk Lophatherum gracile, tegen infectie met het respiratoir syncytieel virus. - Evaluatie van waterige extracten van vier aromatische planten op hun activiteit tegen de hechting van Candida albicans aan menselijke HEp-2-epitheelcellen
Dit onderzoek is gepubliceerd in Gene Reports (2020). Deze studie onderzocht het remmende potentieel van waterige extracten van vier aromatische planten tegen de adhesie van Candida albicans aan menselijke Hep 2-epitheelcellen. - Wnt1-induceerbaar signaalproteïne 1 reguleert de glycolyse en chemoresistentie van larynxplaveiselcelcarcinoom via de YAP1/TEAD1/GLUT1-route
Deze studie is in 2019 gepubliceerd in het Journal of Cellular Physiology. De studie meldt dat Wnt1-induceerbaar signaalproteïne 1 (WISP1) een interactie aangaat met de YAP1/TEAD1/GLUT1-route en het glucosemetabolisme en de chemoresistentie in de Hep 2-cellijn reguleert.
Bronnen voor de Hep2-cellijn: protocollen, video's en meer
Hep 2 is een bekende cellijn. Er zijn verschillende bronnen beschikbaar over de Hep 2-cellijn.
- Subcultivering van de Hep 2-cellijn: Deze video is een stapsgewijze handleiding voor het subcultiveren van Hep 2-cellen.
- ANA-screening van Hep 2-cellen: Deze video legt de screening op antinucleaire antilichamen (ANA) uit met behulp van de Hep 2-cellijn.
- Hep 2-kweek: Deze link bevat basisinformatie over de celkweek van Hep 2-cellen. Hierin worden het splitsen, invriezen en ontdooien van cellen behandeld.
Veelgestelde vragen over HEp-2 cellen in biomedisch onderzoek
Referenties
- Fusi, M. en S. Dotti, Aanpassing van de HEp-2-cellijn aan volledig dierproefvrije kweeksystemen en realtime analyse van celgroei. Biotechniques, 2021. 70(6): p. 319-326.
- Gorphe, P., Een uitgebreid overzicht van de Hep-2-cellijn in translationeel onderzoek naar strottenhoofdkanker. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): p. 644-649.
- Wang, M., et al., Kankergerelateerde fibroblasten in een door menselijke HEp-2 gevestigde larynx-xenotransplantaat-tumor zijn niet afgeleid van kankercellen via epitheliale-mesenchymale transitie, fenotypisch geactiveerd maar karyotypisch normaal. PLoS One, 2015. 10(2): p. e0117405.
- Karatas, O.F., Antiproliferatief potentieel van miR-33a in Hep-2-cellen van larynxkanker via het richten op PIM1. Head Neck, 2018. 40(11): p. 2455-2461.
- Wang, Y., et al., Synthese van zinkoxide-nanodeeltjes uit Marsdenia tenacissima remt de celproliferatie en induceert apoptose in larynxkankercellen (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: p. 111624.
- Zhang, J., et al., Een systemisch en moleculair onderzoek naar de subcellulaire lokalisatie van SARS-CoV-2-eiwitten. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): p. 269.
- Wang, Q., et al., Het RNA-bindende eiwit RBM6 onderdrukt als tumorsuppressorgen de groei en progressie van laryngocarcinoom. Gene, 2019. 697: p. 26-34.
