HL-60-cellen: essentiële informatie voor onderzoek naar acute myeloïde leukemie
HL-60 is een onsterfelijke menselijke leukemiecellijn. Deze wordt veel gebruikt om de biologie van kanker te bestuderen en de werkzaamheid van antikankermedicijnen te onderzoeken. Bovendien kan deze ook worden gebruikt om inzicht te krijgen in verschillende cellulaire en moleculaire mechanismen die betrokken zijn bij de proliferatie en differentiatie van leukemiecellen.
- Groeimedium
- Zie productpagina
- Verdubbelingstijd
- Zie productpagina
- Groeitype
- Adherent
- Bioveiligheidsniveau
- BSL-1
- Verkrijgbaar bij
- Cytion — Bestel HL-60
- HL-60-cellijn: Oorsprong en algemene informatie
- Informatie over de HL-60-celkweek
- HL-60-cellen: voor- en nadelen
- Toepassingen van de HL-60-cellijn in onderzoek: van kanker tot immunologie en verder
- HL-60-cellijn voor uw onderzoek
- HL-60-cellen: Onderzoekspublicaties
- Bronnen over de HL-60-cellijn: protocollen, video's en meer
- HL-60-cellijn: essentiële veelgestelde vragen voor onderzoekers
- Referenties
- Veelgestelde vragen
HL-60-cellijn: Oorsprong en algemene informatie
De HL-60-cellijn dient als een cruciaal model in hematologisch onderzoek en biedt diepgaande inzichten in de aard en behandeling van acute promyelocytische leukemie. Deze blogpost gaat dieper in op de oorsprong en onderscheidende kenmerken van de HL-60-cellijn en belicht de cruciale rol ervan in medisch onderzoek en therapeutische ontwikkelingen.
HL-60 werd voor het eerst geïsoleerd uit de leukemiecellen van een 36-jarige blanke vrouw bij wie acute promyelocytische leukemie was vastgesteld. Dit baanbrekende werk werd uitgevoerd door S.J. Collins en zijn team en betekende een belangrijke doorbraak, aangezien HL-60 de eerste myeloïde leukemiecellijn was die met succes werd geïsoleerd en in suspensie werd gekweekt. Deze prestatie heeft talrijke onderzoeksmogelijkheden bij het bestuderen van leukemie en andere gerelateerde ziekten mogelijk gemaakt. Wat de fysieke kenmerken betreft, vertonen HL-60-cellen een lymfoblastische morfologie en staan ze erom bekend dat ze in suspensie groeien, waarbij ze er rond uitzien. De grootte van deze cellen varieert, met diameters variërend van 9 tot 25 μm, wat hun heterogeniteit weerspiegelt. Op genomisch niveau is de HL-60-cellijn overwegend pseudodiploïd, met een modaal chromosoomaantal van 43. Interessant is dat een klein percentage (6,2%) van de cellen een 2S-component vertoont, wat hun genetische samenstelling nog complexer maakt [1].
Inzicht in deze fundamentele aspecten van HL-60-cellen vergroot niet alleen onze kennis van leukemie op cellulair niveau, maar ondersteunt ook lopende onderzoeksinspanningen om nieuwe behandelingsmodaliteiten te ontdekken. In de volgende paragrafen zullen we onderzoeken hoe de unieke eigenschappen van de HL-60-cellijn hebben bijgedragen aan belangrijke vooruitgang in medisch onderzoek.
Informatie over het kweken van HL-60-cellen
Het kweken van HL-60-cellen is eenvoudig en gemakkelijk. In dit gedeelte maakt u kennis met basisprincipes zoals: Wat is de verdubbelingstijd van de HL-60-cellijn? Is HL-60 een hechtende of een suspensiecultuur? Wat is de bezaaidichtheid van de HL-60-cellijn? Welk medium wordt gebruikt voor de groei van HL-60?
Verdubbelingstijd:
De verdubbelingstijd voor HL-60-cellen is ongeveer 36 tot 48 uur.
Hechtend of in suspensie:
HL-60-cellen groeien als suspensieculturen.
Uitzaaidichtheid:
Deze cellen worden gezaaid met een dichtheid van 1 x 106 cellen/ml bij subcultuur en met 2 x 105 cellen/ml bij het starten van een nieuwe kweek.
Groeimedium:
Voor het kweken van HL-60-cellen wordt RPMI 1640-groeimedium gebruikt, waaraan 10 % FBS en 2,5 mM L-glutamine is toegevoegd. Het medium moet 2 tot 3 keer per week worden ververst.
Groeiomstandigheden:
HL-60-cellen worden gekweekt in een bevochtigde incubator bij een temperatuur van 37 °C en een CO2-toevoer van 5 %.
Opslag:
HL-60-cellen worden bewaard bij een temperatuur van minder dan -150 °C of in de dampfase van vloeibare stikstof om een zo groot mogelijk aantal cellen levensvatbaar te houden.
Invriesmedium en -proces:
CM-1- of CM-ACF-invriesmedia worden gebruikt voor het invriezen van HL-60-cellen. Voor het invriezen van HL-60-cellen wordt de voorkeur gegeven aan een langzame invriesmethode.
Ontdooiproces:
De bevroren flacon met HL-60-cellen wordt snel geschud in een waterbad dat is ingesteld op een temperatuur van 37 °C. Daarna worden de cellen gecentrifugeerd om het invriesmedium te verwijderen. Er wordt nieuw kweekmedium toegevoegd en de cellen worden opnieuw gesuspendeerd om in een kweekfles te worden gedoseerd voor groei.
Bioveiligheidsniveau:
Voor het hanteren van HL-60-culturen wordt bioveiligheidsniveau 1 aanbevolen.
HL-60-cellen: voor- en nadelen
Voordat u met een cellijn gaat werken, wilt u wellicht weten wat de voor- en nadelen ervan zijn. In dit artikel worden enkele voor- en nadelen van het gebruik van HL-60-cellen besproken.
Voordelen
Enkele opvallende voordelen van de HL-60-cellijn zijn:
- Veelzijdigheid: HL-60-cellen kunnen zich onder de juiste groeiomstandigheden differentiëren tot verschillende celtypen, waaronder monocyten, macrofagen en granulocyten. Dit maakt ze geschikt voor het bestuderen van celdifferentiatie en andere celprocessen.
- Gemakkelijk te kweken: HL-60-cellen zijn gemakkelijk te kweken en te onderhouden in suspensieculturen, waardoor ze een handig hulpmiddel zijn voor het bestuderen van meerdere celprocessen.
- In-vitromodel van leukemie: Deze cellen zijn afkomstig van een patiënt met acute myeloïde leukemie en hebben dus genetische en moleculaire kenmerken die vergelijkbaar zijn met die van de ziekte.
Nadelen
De nadelen van de HL-60-cellijn zijn:
- Beperkt differentiatiepotentieel: HL-60 kan in reactie op prikkels differentiëren tot bepaalde myeloïde cellijnen, maar hun differentiatiepotentieel is beperkt in vergelijking met primaire cellen.
Toepassingen van de HL-60-cellijn in onderzoek: van kanker tot immunologie en verder
De HL-60-cellijn, afkomstig van een patiënt met acute promyelocytische leukemie, is een hoeksteen geworden in medisch onderzoek vanwege zijn veelzijdigheid en het gemak waarmee hij gekweekt kan worden. Deze onderhoudsarme culturen zijn cruciaal in een groot aantal onderzoekstoepassingen, en we willen enkele van de belangrijkste daarvan verkennen, waarbij we een breed scala aan onderzoekszoekwoorden gebruiken om een uitgebreid overzicht te bieden.
Kankeronderzoek
Op het gebied van de oncologie heeft de HL-60-cellijn een belangrijke rol gespeeld bij het ontrafelen van de fijne kneepjes van de signaaloverdracht in kankercellen, het vergroten van ons inzicht in de expressie van oncogenen en het stimuleren van de ontdekking van nieuwe therapeutische doelwitten. Deze cellijn maakt deel uit van het panel van leukemiecellijnen dat wordt gebruikt voor het screenen van nieuwe chemotherapeutische middelen. Een treffend voorbeeld is het gebruik van HL-60-cellen om de antileukemische eigenschappen vast te stellen van verbindingen die zijn geëxtraheerd uit mariene organismen, waarbij zowel antiproliferatieve als pro-apoptotische effecten aan het licht zijn gekomen [2]. Bovendien heeft de cellijn het onderzoek naar cruciale signaalroutes zoals JAK/STAT en hun invloed op de proliferatie van leukemiecellen vergemakkelijkt, naast het beoordelen van het therapeutisch potentieel van bioactieve verbindingen zoals thymoquinon [3].
Immunologie
HL-60-cellen vormen een robuust in-vitrosysteem om diverse immuunreacties te onderzoeken, waaronder het complexe proces van chemotaxis en de regulering van de expressie van belangrijke immuunmediatoren. Deze cellen kunnen differentiëren tot myeloïde cellen die lijken op macrofagen en neutrofielen, waardoor ze dienen als een veelzijdig model voor het onderzoeken van ontstekingsroutes. Zo werden van HL-60 afgeleide macrofaagachtige cellen gebruikt om het ontstekingsremmende potentieel van fytochemicaliën uit het geslacht Brassica te onderzoeken [4]. In een ander onderzoek stelde de differentiatie van HL-60-cellen tot neutrofielachtige cellen onderzoekers in staat om genen te identificeren die cruciaal zijn voor cellulaire differentiatie en gerelateerde immuunfuncties [5].
Ontdekking van geneesmiddelen
De myeloïde differentiatievermogen van HL-60 is ook benut bij de ontwikkeling van geneesmiddelen, met name bij het identificeren van kandidaat-geneesmiddelen die mogelijk de differentiatie-route kunnen moduleren, wat cruciaal is bij de behandeling van leukemie. Dit wordt geïllustreerd door studies waarin de HL-60-cellijn is gebruikt om het antikankerpotentieel van natuurlijke producten te evalueren [6].
Bovendien wordt de HL-60-cellijn gebruikt om verschillende aspecten van de biologie van myeloïde cellijnen te bestuderen, zoals het begrijpen hoe behandeling met middelen zoals retinoïnezuur kan leiden tot monocytische differentiatie, of hoe deze cellen primaire neutrofielen nabootsen bij het genereren van extracellulaire vallen. Het gebruik van het model voor het ophelderen van de moleculaire gebeurtenissen bij hematologische maligniteiten wordt verder uitgebreid door de toepassing ervan in studies met mutatiecelpanels, met name in de context van p53-hotspotanalyse bij leukemie.
Voor degenen die de cellulaire mechanica, de verdubbelingstijd van HL-60 en hun reactie op elektroporatie in microfluïdische kanalen onderzoeken, biedt de cellijn een betrouwbaar platform voor onderzoek.
HL-60-cellijn voor uw onderzoek
HL-60-cellen: Wetenschappelijke publicaties
Er zijn verschillende onderzoeksstudies beschikbaar over HL-60-cellen. Hier hebben we enkele opmerkelijke voorbeelden op een rijtje gezet:
Dit onderzoeksartikel beschreef het antitumorale effect van een verbinding, Stigmast-5-en-3-ol, op HL-60-leukemiecellen en MCF7-borstkankercellen.
Deze studie beschrijft de rol van JAK/STAT-signalering bij de proliferatie van HL-60-cellen. Daarnaast onderzoeken onderzoekers het therapeutisch potentieel van de verbinding thymoquinon met behulp van deze leukemiecellijn. De verbinding remt celproliferatie en induceert celdood door de expressie van negatieve regulatoren van de JAK/STAT-cascade te herstellen.
In deze studie werden HL-60-cellen gebruikt om een macrofaagachtig celmodel af te leiden voor het onderzoeken van de ontstekingsremmende werking van plantaardige verbindingen uit Brassica.
Deze studie, gepubliceerd in het tijdschrift International Immunopharmacology, ontwikkelde een neutrofielcelnabootsing uit de HL-60-cellijn door gebruik te maken van dimethylsulfoxide. De studie constateerde dat het ERK-gen betrokken is bij de differentiatie van deze cellen.
Dit onderzoeksartikel onderzoekt het antikankerpotentieel van plantaardige polyfenolverbindingen, namelijk galluszuur en ellaginezuur, op geneesmiddelgevoelige en resistente HL-60-leukemiecellen.
HL-60-cellijn Bronnen: protocollen, video's en meer
Er zijn meerdere online educatieve bronnen beschikbaar over de HL-60-cellijn. In dit gedeelte worden enkele bronnen besproken die de kweek en transfectie van deze cellijn beschrijven.
Protocollen voor celkweek
De bronnen die de kweekmethoden voor HL-60-cellen beschrijven, zijn:
- Kweek van HL-60: Dit document bevat informatie over het subcultiveren van HL-60-cellen.
- HL-60-cellijn: Deze website bevat basisinformatie over HL-60-cellen en protocollen, waaronder het kweken, invriezen en ontdooien van cellen.
Transfectieprotocollen
Hieronder vindt u enkele bronnen waarin de voor HL-60-cellen gekozen transfectiemethoden worden beschreven.
- Transfectie van HL-60-cellen: Deze link bevat een gedetailleerde transfectieprocedure voor HL-60-leukemiecellen.
- Transiënte transfectie van HL-60-cellen: Dit document bevat nuttige informatie over de cellijn en geeft een gedetailleerd protocol voor de transiënte transfectie van HL-60-cellen.
Video's met betrekking tot de HL-60-cellijn
Er zijn zeer weinig videobronnen over HL-60-cellen.
- Passeren van HL-60-cellen: Deze video legt het protocol uit voor het subcultiveren van HL-60-cellen.
We verwachten dat dit artikel u basisinformatie verschaft over het kweken en onderhouden van de HL-60-cellijn. Bovendien kan het uw kennis vergroten over de voordelen van het gebruik van deze leukemiecellen in onderzoek. Als u van plan bent deze cellijn te gebruiken, bestel dan bij ons.
HL-60-cellijn: essentiële veelgestelde vragen voor onderzoekers
De HL-60-cellijn is een promyelocytische leukemiecellijn die is afgeleid van een patiënt met acute promyelocytische leukemie. Deze cellijn wordt op grote schaal gebruikt in onderzoek naar de differentiatie van myeloïde cellen en de expressie van oncogenen.
Retinoïnezuur stimuleert de differentiatie in de HL-60-cellijn, waardoor de cellen uitgroeien tot granulocytachtige cellen. Dit proces is van cruciaal belang voor het onderzoek naar de mechanismen die ten grondslag liggen aan de myeloïde differentiatie.
Serum is een cruciaal bestanddeel van het kweekmedium voor hematopoëtische cellen en levert essentiële groeifactoren en voedingsstoffen die nodig zijn voor de proliferatie en het in stand houden van de HL-60-cellen in kweek.
Ja, de HL-60-cellijn is in staat tot chemotaxis, oftewel de beweging van cellen als reactie op chemische prikkels. Hierdoor zijn deze cellen geschikt voor chemotaxis-testen en voor het bestuderen van celmigratie.
De HL60-cellijn, die expressie van cellulaire oncogenen vertoont, dient als modelsysteem om de regulering van de expressie van oncogenen en hun rol bij het ontstaan van leukemie te onderzoeken.
De HL-60-cellijn is van onschatbare waarde voor onderzoek op het gebied van de celbiologie, met name voor het bestuderen van de celcyclus, cellulaire differentiatieprocessen en de moleculaire processen die tot leukemie leiden.
Met behulp van panels van leukemiecellijnen kunnen vergelijkende studies worden uitgevoerd naar verschillende leukemiecellijnen, waaronder hun genetische samenstelling, mutatieprofielen, reactie op geneesmiddelen en de moleculaire routes die een rol spelen bij het ontstaan van leukemie, zoals de MAPK-route.
Analysecertificaten en certificaten van oorsprong kunnen doorgaans worden gedownload of worden opgevraagd bij de leverancier of het depot dat de HL-60-cellijn levert, zodat onderzoekers gegarandeerd geauthenticeerde en contaminatievrije cellen ontvangen voor hun onderzoek.
De HL-60-cellijn kan worden gedifferentieerd om eigenschappen te verkrijgen die vergelijkbaar zijn met die van primaire neutrofielen, waaronder het vermogen om extracellulaire vallen te vormen, waardoor onderzoekers deze cellen kunnen gebruiken als surrogaatmodel om het gedrag en de functie van neutrofielen te bestuderen.
HL-60-cellen worden gebruikt als in-vitro-model voor onderzoek naar acute promyelocytische leukemie, de biologie van myeloïde cellijnen en de effecten van verschillende verbindingen op differentiatie en proliferatie. Ze worden ook ingezet bij experimenten waarin cellulaire reacties worden onderzocht, zoals chemotaxis, de expressie van oncogenen en de invloed van mutaties op cellulaire processen.
De afkorting "HL-60" staat voor "Human Leukemia 60". Het verwijst naar de 60e cellijn die ten tijde van de ontwikkeling ervan werd opgezet op basis van patiënten met leukemie. De afkorting "HL" duidt op de focus op menselijke leukemiecellen.
De verdubbelingstijd van HL-60-cellen bedraagt onder optimale groeiomstandigheden ongeveer 36 tot 48 uur. Dit kan echter variëren, afhankelijk van de kweekomstandigheden en het aantal passages van de cellen.
Wanneer HL-60-cellen worden behandeld met forbol-12-myristaat-13-acetaat (PMA), differentiëren ze doorgaans tot een celtype dat lijkt op macrofagen of monocyten. Deze differentiatie maakt deel uit van het onderzoek naar differentiatieprocessen van monocyten en het inzicht in de mechanismen van de differentiatie van myeloïde cellen.
Referenties
- Fleck, R., S. Romero-Steiner en M. Nahm, Gebruik van de HL-60-cellijn om de opsonische capaciteit van pneumokokkenantilichamen te meten. Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1): p. 19-27.
- Fernando, I.S., et al., Apoptotische en antiproliferatieve effecten van Stigmast-5-en-3-ol uit Dendronephthya gigantea op menselijke leukemie HL-60- en menselijke borstkanker MCF-7-cellen. Toxicology in Vitro, 2018. 52: p. 297-305.
- Almajali, B., et al., Thymoquinone onderdrukt celproliferatie en versterkt de apoptose van HL60-leukemiecellen door her-expressie van JAK/STAT-negatieve regulatoren. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention: APJCP, 2021. 22(3): p. 879.
- Ruiz-Alcaraz, A.J., et al., Analyse van het ontstekingsremmende potentieel van bioactieve verbindingen uit Brassica in een menselijk macrofaagachtig celmodel afgeleid van HL-60-cellen. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2022. 149: p. 112804.
- Wang, D., et al., ERK is betrokken bij de differentiatie en functie van door dimethylsulfoxide geïnduceerde HL-60-neutrofielachtige cellen, die inflammatoire neutrofielen nabootsen. International Immunopharmacology, 2020. 84: p. 106510.
- Núñez-Sánchez, M.Á., et al., Anti-leukemische activiteit van uit Brassica afkomstige bioactieve verbindingen in HL-60 myeloïde leukemiecellen. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): p. 13400.