CAL27-cellen - Gerichte inzichten in hoofd-halskanker met CAL27-cellen
CAL27 is een van de meest gebruikte cellijnen voor oraal plaveiselcelcarcinoom in biomedisch onderzoek. Het is een waardevol instrument voor het bestuderen van de fijne kneepjes van plaveiselcelcarcinomen, waaronder tumorgroei, ontwikkeling en onderliggende cellulaire en moleculaire mechanismen. Daarnaast vergemakkelijkt het ook het screenen en testen van medicijnen voor de ontwikkeling van medicijnen tegen kanker.
Dit artikel biedt je waardevolle inzichten in de CAL27 cellijn en behandelt de volgende onderwerpen:
- Oorsprong en algemene kenmerken van CAL27-cellen
- Kweekinformatie over CAL27-cellijn
- CAL27 cellijn: Voordelen & Nadelen
- Toepassingen van CAL27 cellen in onderzoek
- Publicaties met CAL27 cellijn
- Hulpmiddelen voor CAL27 cellijn: Protocollen, video's en meer
1. Oorsprong en algemene kenmerken van CAL27-cellen
Het eerste wat je moet weten over een cellijn is de oorsprong en de algemene kenmerken die hem onderscheiden van andere cellijnen. Dit gedeelte van het artikel bevat primaire informatie over CAL27 cellen. Je leert het volgende: Wat is het CAL27-celmodel? Wat is CAL27 HPV? Wat is de HER2-status van CAL27? Wat is de oorsprong van de CAL27-cellijn? Wat is de morfologie van CAL27-cellen? Wat is de grootte van CAL27-cellen?
- De orale plaveiselcelkankercellijn CAL27 werd ontwikkeld uit het tongweefsel van een 56-jarige blanke man met plaveiselcelcarcinoom van de tong. De cellijn werd in 1982 ontwikkeld door Gioanni en zijn collega's [1].
- De CAL27 kankercellen vertonen een epitheliale morfologie.
- Deze cellen hebben een aneuploïd karyotype. Ze bezitten een modaal chromosoomnummer van 43.
2.informatie over het kweken van de CAL27-cellijn
Voor eenvoudig en uitvoerbaar onderhoud van cellijnen moet u de belangrijkste eisen voor celkweek kennen. Deze sectie behandelt de belangrijke concepten voor het kweken van de CAL27-cellijn. U moet het volgende weten: Wat is de verdubbelingstijd van de cellijn CAL27? Wat is CAL27 celmedia? Wat is de subcultuurverhouding van de CAL27-cellijn? Wat zijn de CAL27 kweekomstandigheden? Hoe kweek je CAL27-cellen?
Belangrijkste punten voor het kweken van CAL27-cellen
|
Verdubbelingstijd: |
De CAL27-cellen vertonen een matige groeisnelheid met een populatieverdubbelingstijd van ongeveer 45 uur. |
|
Aanwezig of in suspensie: |
Deze veelhoekige CAL27 cellen hechten zich aan het oppervlak van het kweekvat en groeien uit tot monolayers. |
|
Splitsingsverhouding: |
CAL27-cellen worden gesubcultiveerd in een splitratio van 1:2 tot 1:4. Voor de subcultuur worden de adherente cellen gewassen met magnesium- en calciumvrije fosfaatbufferzout (1x). Daarna worden de cellen geïncubeerd met Accutase (passagingoplossing) bij omgevingstemperatuur gedurende 8 tot 10 minuten. Losgemaakte cellen worden toegevoegd met verse media en gecentrifugeerd. De verzamelde pellet werd vervolgens voorzichtig geresuspendeerd en in nieuwe kolven met groeimedia gegoten. |
|
Groeimedium: |
DMEM-media aangevuld met 10% FBS, 4,5 g/L glucose, 4 mM L-glutamine, 1,5 g/L NaHCO3 en 1,0 mM natriumpyruvaat wordt gebruikt om CAL27-cellijn te kweken. De media moeten 2 tot 3 keer per week worden vervangen. |
|
Groeicondities: |
CAL27-celculturen worden bewaard bij 37°C in een vochtige incubator met 5% CO2. |
|
Opslag: |
Bevroren CAL27-cellen worden langer bewaard in de dampfase van vloeibare stikstof of bij een temperatuur van minder dan -150°C in een vriezer met ultra-lage temperatuur. |
|
Invriesproces en medium: |
CM-1 of CM-ACF invriesmedium wordt aanbevolen voor het invriezen van CAL27 cellen. Hiervoor wordt een langzaam vriesproces aanbevolen dat slechts een temperatuurdaling van 1 °C per minuut toestaat om de levensvatbaarheid van de cellen te beschermen. |
|
Ontdooiproces: |
Bevroren celvaatjes worden 40-60 seconden in een op 37 °C ingesteld waterbad geplaatst totdat er een klein ijsklontje overblijft. De cellen worden toegevoegd met vers medium en gecentrifugeerd. Daarna wordt de vriesmedia verwijderd en wordt de celpellet toegevoegd met vers groeimedium en voorzichtig geresuspendeerd. De cellen worden vervolgens in nieuwe kolven gedistribueerd om te groeien. |
|
Bioveiligheidsniveau: |
Laboratoriuminstellingen van bioveiligheidsniveau 1 zijn nodig voor het hanteren en onderhouden van CAL27-celkweken. |
3.cAL27-cellijn: Voordelen en nadelen
CAL27 is een veelgebruikte cellijn voor oraal plaveiselcelcarcinoom. In dit gedeelte worden enkele belangrijke voor- en nadelen van deze kankercellen belicht.
Voordelen
De belangrijkste voordelen van de CAL27 cellijn zijn:
|
Tumorigeniciteit |
CAL27-cellijn heeft tumorigene potentie. Deze cellen kunnen tumoren ontwikkelen wanneer ze geïnjecteerd worden in naakte of immuungecompromitteerde muizen. Dit kan onderzoekers helpen om de tumorbiologie en micro-omgeving beter te begrijpen. |
|
Genetische mutaties |
CAL27-cellen bevatten specifieke genomische wijzigingen, zoals CAL27 P53, die vaak voorkomen in orale plaveiselcelcarcinomen. Het gebruik van CAL27 kan dus voordelig zijn voor onderzoekers die de impact van deze mutaties op de groei, ontwikkeling en progressie van kanker bestuderen. |
|
Eenvoudig te kweken |
De orale plaveiselcellijn CAL27 heeft geen lastige celkweekvereisten. Ze is dus gemakkelijk te kweken en te onderhouden in onderzoekslaboratoria. |
Nadelen
De nadelen van de CAL27 cellijn zijn:
|
In vitro model |
CAL27 cellen dienen als een in vitro model van oraal plaveiselcelcarcinoom. Het is echter belangrijk op te merken dat ze mogelijk niet nauwkeurig de kenmerken en complexiteit van de oorspronkelijke plaveiselceltumoren weerspiegelen. |
4.toepassingen van CAL27 cellen in onderzoek
CAL27-cellijn heeft een breed scala aan toepassingen in biomedisch onderzoek. Enkele van de belangrijke toepassingen voor onderzoek worden hier genoemd.
- Kankerbiologie: CAL27-cellen zijn op grote schaal gebruikt om de moleculaire en cellulaire mechanismen te onderzoeken die ten grondslag liggen aan de ontwikkeling en progressie van oraal plaveiselcelcarcinoom (OSCC). Onderzoekers bestuderen ook genetische mutaties, signaalroutes en belangrijke biomarkers met betrekking tot plaveiselceltumoren. Een onderzoek dat in 2021 werd uitgevoerd, maakte gebruik van CAL27-cellen en onderzocht de rol van CD147 in de ontwikkeling van orale plaveiselcelkanker. De onderzoeksresultaten toonden aan dat het uitschakelen van CD147 de proliferatie, migratie en invasie van CAL27-cellen remde. Bovendien belemmert de downregulatie ook de ontwikkeling van geneesmiddelenresistentie in kankercellen [2].
- Ontwikkeling van geneesmiddelen: CAL27-cellijn dient als waardevol instrument voor het screenen en testen van anti-tumor geneesmiddelen. Onderzoekers gebruiken deze cellen om de werkzaamheid van verschillende chemotherapeutische middelen, doelgerichte therapieën en experimentele geneesmiddelen te testen bij het remmen van de proliferatie, groei en levensvatbaarheid van orale kankercellen. Bovendien is het modulerende effect van de potentiële antikankermiddelen ook beoordeeld op de ontregelde signaalroutes van kankercellen. Dit kan helpen bij het ontwikkelen van effectieve en gepersonaliseerde behandelingen om de ziekte te bestrijden. In een onderzoek werd het anti-tumorpotentieel van zinkoxide nanodeeltjes onderzocht met CAL27 cellen. De resultaten van het onderzoek toonden aan dat zinkoxide nanodeeltjes cytotoxische effecten hadden en ook de PINK1/Parkin pathway-gemedieerde mitofagie in CAL27 tongkankercellen induceerden [3]. Op dezelfde manier observeerden onderzoekers het antikankerpotentieel van doxorubicine en de nano-geformuleerde vorm (Doxil) op CAL27 orale plaveiselcelkanker [4].
5.publicaties met CAL27-cellijn
In dit gedeelte van het artikel komen enkele interessante en meest geciteerde publicaties over CAL27 kankercellen aan bod:
Dit onderzoek werd gepubliceerd in Frontiers in Oncology (2020). De studie onderzocht de effecten van vismodegib of itraconazol tegen plaveiselcelcarcinoom met CAL27-cellen.
In dit artikel in Frontiers in Genetics (2021) wordt voorgesteld dat het plasminogeen activator, urokinase (PLAU) eiwit de proliferatie, migratie en epitheliale naar mesenchymale transitie (EMT) van CAL27 cellen bevordert.
MicroRNA-145-5p verergert celapoptose en oxidatieve stress in tong plaveiselcelcarcinoom
In dit artikel in Experimental and Therapeutic Medicine (2021) werd ontdekt dat miRNA-145-5p de oxidatieve stress en dood van CAL27-cellen verergert en de PI3K/AKT-signaleringsroute onderdrukt.
Antitumoractiviteit van het plantenextract morine in tong plaveiselcelcarcinoomcellen
Deze studie in Oncology Reports (2018) onderzocht de antikankeractiviteit van een bioflavonoïde genaamd morine, gebruikmakend van CAL27-cellen.
Dit artikel in het Journal of Ethnopharmacology (2023) onderzocht het therapeutische potentieel van extracten van Rosmarinus officinalis L. en Taraxacum officinale op CAL27-cellen.
6.bronnen voor CAL27-cellijn: Protocollen, video's en meer
Er zijn beperkte bronnen beschikbaar over de CAL27 cellijn. In deze sectie hebben we enkele algemene protocollen opgesomd die ook kunnen helpen bij het werken met CAL27-cellen:
- CAL27 celtransfectie: Deze video helpt je bij het leren van een algemeen protocol voor plasmide DNA transfectie.
- Subculturen van adherente cellen: Deze video begeleidt je uitgebreid bij het subkweken van adherente cellijnen.
De volgende link bevat het CAL27 celkweekprotocol.
- CAL27 cellijn: Deze website bevat informatie over CAL27 media, zaaidichtheid, verdubbelingstijd, enz. Daarnaast bevat het een protocol voor het subkweken en hanteren van woekerende en gecryopreserveerde culturen.
Referenties
- Liu, X., et al., LINC00472 onderdrukt de groei van orale plaveiselcelcarcinomen door miR-455-3p/ELF3-as te targeten. Bio-engineered, 2022. 13(1): p. 1162-1173.
- Pan, S., et al., Knock-out van CD147 remt de proliferatie, invasie en geneesmiddelenresistentie van CAL27-cellen van humane mondkanker in vitro en in vivo. International Journal of Biological Macromolecules, 2021. 181: p. 378-389.
- Wang, J., et al., Zinc oxide nanoparticles induce toxicity in CAL 27 oral cancer cell lines by activating PINK1/Parkin-mediated mitophagy. International Journal of Nanomedicine, 2018: p. 3441-3450.
- Abd El-Hamid, E.S., A.M. Gamal-Eldeen, and A.M.S. Eldeen, Liposome-coated nano doxorubicin induces apoptosis on oral squamous cell carcinoma CAL-27 cells. Archives of oral biology, 2019. 103: p. 47-54.