BEWO-cellijn

BeWo is een menselijke choriocarcinoom-afgeleide cellijn die veel gebruikt wordt in biomedisch onderzoek. Het is een waardevol in vitro model voor het onderzoeken van het ingewikkelde proces van placentale ontwikkeling en syncytialisatie van menselijke trofoblasten. Onderzoekers gebruiken deze cellen ook om het gedrag van trofoblasten, de hormoonproductie en het transport van stoffen door de placenta te bestuderen. Daarnaast bieden BeWo cellen ook toepassingen in de toxicologie, infectie en ziekteoverdracht studies.

Dit artikel bevat fundamentele kennis over de BeWo-cellen die je kan helpen om ermee om te gaan in je onderzoek. Het omvat:

Algemene kenmerken en oorsprong van BeWo-cellen
BeWo cellijn: Informatie over het kweken
Voordelen en nadelen van BeWo-cellijnen
Onderzoekstoepassingen van BeWo cellen
Onderzoek Publicaties met BeWo cellen
Hulpmiddelen voor BeWo cellijn: Protocollen, video's en meer

1. Algemene kenmerken en oorsprong van BeWo cellen

Voorkennis over de oorsprong en algemene kenmerken van een cellijn is cruciaal voor het gebruik ervan in uw onderzoek. Dit deel van het artikel verkent de oorsprong van de BeWo cellijn, karakteristieke kenmerken en nog veel meer. Hier leer je het volgende: Wat is de BeWo choriocarcinoom cellijn? Wat is BeWo syncytialisatie? Waar komen BeWo cellen vandaan? Wat is de morfologie van de BeWo cel? Wat is de ploïdie van BeWo?

De placenta cellijn, BeWo, is ontstaan uit het kwaadaardige zwangerschaps-choriocarcinoom van een mannelijke foetale placenta in 1968 [1]. Het is dus een model van onschatbare waarde voor placenta-onderzoek.
BeWo-cellen vertonen een epitheelachtige morfologie.
BeWo-cellen zijn relatief klein, variërend tussen 20 en 30 µM [2].
BeWo-cellen vertonen een stabiel karyotype. Hun stamnummer is hypo-tetraploïd. Het modale chromosoomnummer van BeWo cellen is 86. Het kan variëren van 71 tot 178. Het kan variëren van 71 tot 178.
BeWo-cellen produceren verschillende hormonen, zoals humaan chorion-somatomammotropine, humaan choriongonadotrofine (hCG) en steroïdhormonen.
BeWo-cellen brengen moleculaire markers tot expressie, waaronder CK 7, E-cadherine en VE-cadherine.

B30-sublijn

B30 is de sublijn van BeWo-cellen. Ze wordt gebruikt om de opname en het transport van voedingsstoffen te onderzoeken. Dit wordt toegeschreven aan hun krachtige groei op poreuze membranen.

BeWo en JEG-3

BeWo JEG-3 cellijnen zijn afgeleid van choriocarcinomen en worden gebruikt bij placenta-onderzoek. BeWo cellen produceren hormonen op lagere niveaus dan JEG-3, zoals humaan choriongonadotrofine (hCG) en oestradiol.

Time-lapse visualisatie van de vruchtbaarheid van menselijke eicellen, ter illustratie van de stadia van blastocystvorming, zoals waargenomen onder een microscoop.

2. BeWo cellijn: Informatie over het kweken

Het onderhouden van een celkweek kan lastig zijn, tenzij je de belangrijkste details kent. Zoals: Wat is de verdubbelingstijd van BeWo? Wat is het BeWo celmedium? Hoe kweek je de BeWo cellijn?, en Hoe vries je BeWo cellen in?

Belangrijke punten voor het kweken van BeWo cellen

Verdubbelingstijd:	De populatieverdubbelingstijd voor de BeWo cellen is ongeveer 30 uur.
Adherent of in suspensie:	BeWo is een adherente cellijn.
Zaaidichtheid van de cellen:	De aanbevolen zaaidichtheid voor BeWo cellen is 1 x¹⁰⁴ ^cellen/cm2. Voor het zaaien wordt oude media van de cellen verwijderd en worden de cellen gespoeld met 1 x PBS. Daarna wordt Accutase (passaging-oplossing) toegevoegd en worden de cellen gedurende 8 tot 10 minuten bij omgevingstemperatuur geïncubeerd. Vervolgens worden losgemaakte cellen toegevoegd met kweekmedia en gecentrifugeerd. De geoogste cellen worden vervolgens geresuspendeerd en in een nieuwe kolf gegoten.
Groeimedium:	Ham's F12K media met 10% FBS, 2,0 mM L-Glutamine, 2,0 mM natriumpyruvaat en 2,5 g/L NaHCO3 wordt gebruikt om BeWo cellen te kweken. Het BeWo celmedium moet 2 tot 3 keer per week worden vervangen.
Groeicondities:	BeWo cellen worden onderhouden in een vochtige incubator op een temperatuur van 37 graden Celcius en met een toevoer van 5% CO2.
Opslag:	Bevroren BeWo cellen worden bewaard bij een temperatuur van minder dan -150°C in een elektrische vriezer voor ultralage temperaturen of in de dampfase van vloeibare stikstof.
Invriesproces en -medium:	BeWo cellen worden aanbevolen om in te vriezen in CM-1 of CM-ACF invriesmedium. De cellen worden langzaam ingevroren. Deze methode laat slechts een temperatuurdaling van 1 graad per minuut toe, waardoor de cellen geen schok krijgen en de levensvatbaarheid van de cellen wordt beschermd.
Ontdooiproces:	Bevroren cellen worden ontdooid door ze 40 tot 60 seconden onder te dompelen in een vooraf ingesteld waterbad van 37°C totdat er een klein ijsklontje overblijft. Vervolgens wordt verse groeimedia toegevoegd en worden de cellen gecentrifugeerd om de bestanddelen van de vriesmedia te verwijderen. De verzamelde celpellet wordt geresuspendeerd en in een kweekkolf gedaan om te groeien.
Bioveiligheidsniveau:	Biosafety Level 1-laboratorium is nodig voor het hanteren en onderhouden van BeWo-celculturen.

Het vastleggen van de epitheliale, polygonale morfologie en eilandachtige groei van de menselijke choriocarcinoomcellijn BEWO onder de microscoop met een vergroting van 10x en 20x.

3. Voordelen & nadelen van BeWo cellijn

BeWo cellen hebben unieke eigenschappen en specifieke voor- en nadelen. In deze sectie zullen we enkele van de opmerkelijke onderzoeken.

Voordelen

De belangrijkste voordelen van de BeWo choriocarcinoom cellijn zijn:

In vitro placentacelmodel
BeWo cellen bieden een in vitro model voor het bestuderen van trofoblastcelgedrag en placentasyncytialisatie, waarbij processen worden nagebootst die in vivo moeilijk te observeren zijn.
Hormoonproductie
BeWo cellen scheiden hormonen af, zoals hCG en placentalactogen, waardoor ze waardevol zijn voor hormonale regulatiestudies en onderzoek naar voortplantingsbiologie.

Nadelen

De nadelen van BeWo trofoblastcellen zijn:

Kanker cellijn
BeWo cellen zijn afkomstig van choriocarcinoom, een placentatumor. Deze oorsprong vertegenwoordigt mogelijk niet volledig de normale placentale celfunctie.

4. Onderzoekstoepassingen van BeWo cellen

De BeWo cellijn wordt veel gebruikt in placenta-onderzoek. Enkele specifieke toepassingen van deze cellijn worden hier genoemd:

Placenta- en zwangerschapsgerelateerd onderzoek: BeWo cellen zijn cruciaal in placenta- en zwangerschapsgerelateerd onderzoek. Zoals onderzoekers gebruik maken van deze cellen om het transport van stoffen, waaronder drugs, voedingsstoffen en toxines, over de placentabarrière te bestuderen. Daarnaast onderzoeken ze ook de productie en regulatie van hormonen, waaronder humaan choriongonadotrofine (hCG), placentalactogeen en steroïdhormonen. Dit is belangrijk om hormonale veranderingen tijdens de zwangerschap te begrijpen. Onderzoek dat in 2018 werd uitgevoerd, onderzocht het effect van broomhoudende vlamvertragers (BFR's) op de activiteit van sulfotransferase in de menselijke trofoblastische cellijn (BeWo). Dit enzym is betrokken bij het reguleren van de intracellulaire niveaus van het schildklierhormoon [3].
Infectie- en ziekteonderzoek: BeWo-cellen worden ook gebruikt om de interactie tussen pathogenen en placentacellen te onderzoeken. Dit onderzoek is waardevol voor het begrijpen van ziekten die van moeder op foetus kunnen worden overgedragen en voor het ontwikkelen van strategieën om de gezondheid van de foetus te beschermen. Bovendien helpt deze cellijn onderzoekers bij het onderzoeken van complicaties die zich voordoen tijdens de zwangerschap, zoals zwangerschapsvergiftiging. Een studie uitgevoerd door Michalina Bralewska in 2023 maakte bijvoorbeeld gebruik van het trofoblastcelmodel BeWo en ontdekte dat zowel chromogranine A (CgA) als het daarvan afgeleide peptide catestatine (CST) een rol kunnen spelen in het ingewikkelde proces van de pathogenese van zwangerschapsvergiftiging (PE) [4]. Een andere studie onderzocht het kankerbestrijdende potentieel van trichosanthine met behulp van de BeWo choriocarcinoom cellijn. Het onderzoek deed ook een extra inspanning om biomarkers te ontdekken door het uitvoeren van vergelijkende proteomische analyse voor en na het experiment [5].

€ 430,00*

Inhoud: 1.5 milliliter

Prijzen excl. btw plus verzendkosten

cryovial

Productnummer: 300123

5. Onderzoekspublicaties met BeWo cellen

Hier zijn enkele belangrijke onderzoekspublicaties waarin de BeWo trophoblastcellen voorkomen.

AMPK-signalering reguleert mitofagie en mitochondriale ATP productie in humane trofoblastcellijn BeWo

Deze studie in Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) stelde dat AMPK-signalering mitofagie activeert in BeWo trophoblastcellen via FUNDC1 en PRKN-gefaciliteerde mitofagiewegen. Als gevolg hiervan helpt mitofagie de ATP-productie en het mitochondriale membraanpotentieel in stand te houden.

Ethylparaben induceert apoptotische celdood in menselijke placenta BeWo-cellen via de Caspase-3-route

Dit artikel is gepubliceerd in Animal Cells and Systems (2020). De studie stelde voor dat ethylparaben de apoptose van BeWo-cellen medieert via de regulering van de caspase-3-pathway.

Karakterisering van het xenobiotische en steroïde dispositiepotentieel van menselijk placentaweefsel en cellijnen (BeWo, JEG-3, JAR en HTR-8/SVneo) door kwantitatieve proteomics

In dit onderzoek in Drug Metabolism and Disposition (2023) werden placentale cellijnen, waaronder BeWo, JAR, JEG-3 en HTR-8/SVneo, gebruikt om de afzetting van xenobiotica en steroïden in cellen te onderzoeken.

Apeline en apelinereceptor in de menselijke placenta: Expressie, signaalweg en regulatie van trofoblast JEG-3 en BeWo cellen proliferatie en celcyclus

In dit onderzoeksartikel in het International Journal of Molecular Medicine (2020) wordt voorgesteld dat apeline, het ligand van de APJ-receptor, de proliferatie van BeWo-cellen bevordert via APJ en ERK1/2, stat3 en AMPK signalering. Het zou dus een essentieel adipokine kunnen zijn dat de ontwikkeling van de placenta reguleert.

Antiseizuurmedicijnen en foetale voedingsstoffen: effecten op choline transporters in een humane placentale cellijn

Deze studie in Epilepsia (2021) onderzocht de effecten van foetale voedingsstoffen en anti-aanvallen op choline transporters in de van mensen afgeleide trofoblastische cellijn BeWo.

6. Bronnen voor BeWo cellijn: Protocollen, video's en meer

Hier zijn enkele online bronnen beschikbaar over de BeWo cellen:

In vitro transfectie: Deze video helpt u bij het leren van het in vitro plasmide DNA-transfectieprotocol voor adherente cellen.

De volgende link bevat informatie over celkweek voor BeWo-cellen:

BeWo-cellen: Deze website bevat essentiële celkweekinformatie over de BeWo cellijn. Dit omvat informatie over celmedia en kweekomstandigheden. Het bevat ook protocollen voor subculturen en het omgaan met cryobewaarde en proliferatieve culturen.

Referenties

Weber, M., et al., Cytogenomics van zes menselijke trofoblastische cellijnen. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
Kolokol'tsova, T., et al., Kenmerken van trofoblasten in langetermijncultuur. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2017. 164: p. 259-265.
Leonetti, C.P., C.M. Butt, and H.M. Stapleton, Disruption of thyroid hormone sulfotransferase activity by brominated flame retardant chemicals in the human choriocarcinoma placenta cell line, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
Bralewska, M., T. Pietrucha, and A. Sakowicz, Reduction in CgA-Derived CST Protein Level in HTR-8/SVneo and BeWo Trophoblastic Cell Lines Caused by the Preeclamptic Environment. Internationaal Tijdschrift voor Moleculaire Wetenschappen, 2023. 24(8): p. 7124.
Hu, Y., et al., Comparative proteomic analysis of drug trichosanthin addition to BeWo cell line. Moleculen, 2022. 27(5): p. 1603.