BxPC-3-cellijn
BxPC-3 is een van mensen afgeleide cellijn voor alvleesklierkanker. Het wordt breed toegepast in kankeronderzoek. Onderzoekers gebruiken deze cellen voornamelijk om de biologie van alvleesklierkanker te bestuderen, therapeutische doelwitten te identificeren en medicijnen tegen kanker te ontwikkelen.
Dit artikel bevat cruciale informatie over de BxPC-3 cellijn die je aanzienlijk kan helpen om ermee te werken. Er wordt voornamelijk ingegaan op
- Algemene informatie en oorsprong van de BxPC-3 cellijn
- Het kweken van BxPC-3 cellen
- BxPC-3 cellijn: Voordelen en beperkingen
- Toepassingen van BxPC-3 cellen in onderzoek
- Onderzoek Publicaties over BxPC-3 cellen
- Hulpmiddelen voor BxPC-3-cellijn: Protocollen, video's en meer
1. algemene informatie en oorsprong van de BxPC-3 cellijn
Kennis over de oorsprong van een cellijn is essentieel voor de toepasbaarheid in onderzoek. Vertrouwd zijn met de eigenschappen, waaronder morfologie, celgrootte en ploïdie, maakt het gebruik eenvoudiger en gemakkelijker. Hierin leert u de oorsprong en algemene eigenschappen van BxPC-3 cellen kennen: Wat zijn BxPC-3 cellen? Wat is de BxPC-3 cellijn? Wat is de oorsprong van de BxPC-3 cellijn? Wat is de morfologie van BxPC-3?
- BxPC-3, menselijke pancreascarcinoomcellen werden in 1986 afgeleid van een 61-jarige Europese vrouw met pancreasadenocarcinoom. Deze cellen bleken tumorigene cellen te zijn, zelfs nadat de patiënt verschillende radio- en chemotherapiesessies had ondergaan. De gevestigde cellijn is dus een model van onschatbare waarde om de ontwikkeling en progressie van kanker te bestuderen.
- BxPC-3 cellen hebben een epitheelcelachtige morfologie.
- Het modale chromosoomnummer voor BxPC-3 is 59. Deze cellen hebben een homozygote deletie op chromosoom 18q, dat codeert voor het eiwit SMAD4/DPC4. Daarnaast mist de cellijn de BxPC-3 kras-mutatie die veel voorkomt bij pancreastumoren. BxPC-3 braf-deletie wordt ook gevonden in deze alvleesklierkankercellen.
Wat is het verschil tussen BxPC3 en PANC-1?
BxPC-3 PADC (pancreatic ductal adenocarcinoma) en PANC-1 cellen zijn primaire pancreaskankercellijnen met een epitheliale morfologie. De eerste cellen hebben meer epitheliale eigenschappen, terwijl de latere meer mesenchymale eigenschappen vertonen [1].
2. kweken van BxPC-3 cellen
De BxPC-3 cellijn wordt veel gebruikt in kankeronderzoekslaboratoria. Voor een efficiënte kweek van deze alvleesklierkanker cellijn moet je de volgende belangrijke punten kennen. Je leert het volgende: Wat is de verdubbelingstijd voor bxpc3? Hoe kweek je de BxPC-3 cellijn?
Belangrijke punten voor het kweken van BxPC-3 cellen
|
Populatieverdubbelingstijd: |
De verdubbelingstijd van BxPC-3 cellen varieert tussen 48 en 60 uur. |
|
Adherent of in suspensie: |
BxPC-3 is een adherente cellijn. |
|
Splitsingsverhouding: |
BxPC-3 cellen worden gesubcultiveerd in een verhouding van 1:2 tot 1:4. De cellen worden gewassen met 1 x PBS en geïncubeerd met een passagingoplossing genaamd accutase. Na 8-10 minuten wordt verse media aan de cellen toegevoegd en worden de cellen gecentrifugeerd. De pellet wordt opnieuw gesuspendeerd in de media en de cellen worden in een nieuw kweekvat gegoten om te groeien. |
|
Groeimedium: |
RPMI 1640 media wordt gebruikt voor het kweken van de BxPC-3 cellijn. Het wordt aangevuld met 10% foetaal runderserum, 2,1 mM stabiele glutamine en 2,0 g/L NaHCO3 om een ideale celgroei te bereiken. De media moet 2 tot 3 keer per week worden vervangen. |
|
Groeicondities: |
BxPC-3 celculturen worden onderhouden in een 37 ° C bevochtigde incubator aangesloten op een 5% CO2 toevoer. |
|
Opslag: |
Bevroren cellen worden over het algemeen bewaard bij een temperatuur lager dan -150 °C of in de dampfase van vloeibare stikstof om de levensvatbaarheid van de cellen te beschermen. |
|
Invriesproces en medium: |
CM-1 of CM-ACF kan worden gebruikt om BxPC-3 celculturen in te vriezen. Er wordt een langzaam vriesproces gevolgd waarbij de temperatuur slechts met 1 °C daalt om te voorkomen dat de cellen een schok krijgen. |
|
Ontdooien Proces: |
Bevroren BxPC-3 cellen worden ontdooid in een vooraf ingesteld waterbad van 37 °C gedurende 40 tot 60 seconden. Nadat een klein ijsklontje is achtergebleven, worden de cellen toegevoegd met verse kweekmedia en gecentrifugeerd om bevriezingsmedia-elementen te verwijderen. Vervolgens wordt de celpellet geresuspendeerd en worden de cellen in de kolf gedoseerd om te groeien. |
|
Bioveiligheidsniveau: |
BxPC-3 celculturen worden onderhouden in laboratoria met bioveiligheidsniveau 1. |
3. bxPC-3 cellijn: Voordelen en beperkingen
BxPC-3 is een bekende pancreas adenocarcinoom cellijn die geassocieerd wordt met verschillende voordelen en beperkingen. De belangrijkste voor- en nadelen van de cellijn worden hier opgesomd.
Voordelen
De belangrijkste voordelen van BxPC-3 cellen zijn:
-
In vitro model van pancreaskanker
BxPC-3 cellen, afkomstig van patiënten met pancreasadenocarcinoom, vertonen relevante eigenschappen, waardoor ze een geschikt model zijn om het gedrag van pancreaskanker in vitro te bestuderen.
-
Tumorigene cellijn
BxPC-3 cellen bezitten tumorigene eigenschappen en kunnen tumoren vormen wanneer ze geïnjecteerd worden in naakte of immuungecompromitteerde muizen. Deze tumoren lijken sterk op primaire alvleesklieradenocarcinoom tumoren, waardoor het BxPC-3 xenograft model ideaal is voor het bestuderen van de groei en progressie van kanker.
Beperkingen
De beperkingen van de BxPC-3 cellijn zijn:
-
Kruisbesmetting
De BxPC-3 cellijn brengt, net als elke andere cellijn, een risico op kruisbesmetting met zich mee. Onderzoekers moeten voorzichtig zijn en zich houden aan strikte besmettingspreventieprotocollen bij het hanteren van deze cellen.
-
Trage groeisnelheid
BxPC-3 cellen vertonen een relatief trage proliferatiesnelheid, met een verdubbelingstijd tussen 48 en 60 uur. Deze eigenschap kan langere incubatieperioden vereisen voor specifieke experimenten, waardoor vertraging in de voortgang van het onderzoek kan optreden.
4. toepassingen van BxPC-3 cellen in onderzoek
BxPC-3 cellen bieden veel toepassingen in kankeronderzoek. De meest voorkomende toepassingen zijn:
- Onderzoek naar alvleesklierkanker: BxPC-3 cellen bootsen pancreasadenocarcinoom na en worden dus gebruikt om de genetische en moleculaire mechanismen te onderzoeken die ten grondslag liggen aan de ontwikkeling en groei van tumoren. Daarnaast ontdekken onderzoekers met behulp van deze cellen nieuwe biomarkers en therapeutische doelwitten. Bovendien brengen BxPC-3 cellen angiogene factoren tot expressie, zoals interleukine-8 (IL-8), prostaglandine E2 (PGE2) en vasculaire endotheliale groeifactor (VEGF), waardoor ze geschikt zijn voor het bestuderen van angiogenese. Hierin is angiogenese een cruciaal proces dat geassocieerd wordt met de groei en uitzaaiing van kanker. In een studie gepubliceerd in 2022 werd onderzocht dat laminine-5 gamma-2 (LAMC2) overexpressie in BxPC3 PDAC (pancreatic ductal adenocarcinoma) de tumorigenese versterkt via regulering van BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/ mTOR signaleringsroute [2].
- Ontdekking en ontwikkeling van geneesmiddelen: De BxPC-3 cellijn is van onschatbare waarde bij het testen van medicijnen tegen kanker. Onderzoekers onderzoeken de cytotoxische, anti-metastatische en apoptotische effecten van potentiële geneesmiddelen op BxPC3 PDAC. Een onderzoek uitgevoerd door Alexandria Turner en collega's in 2020 onderzocht de apoptotische eigenschappen van Elaeocarpus reticulatus fruitextracten in BxPC-3 pancreaskankercellen [3]. Op dezelfde manier werd in 2020 onderzoek uitgevoerd waarbij het antikankerpotentieel van een methanol extract van een plant genaamd Oxialis obtriangulata in BxPC-3 cellen werd vastgesteld. Daarnaast bestudeerden de onderzoekers ook de celmechanistische route waarlangs het plantenextract therapeutische effecten uitoefende [4].
5.publicaties over onderzoek naar BxPC-3 cellen
Deze sectie geeft een overzicht van enkele van de meest geciteerde en interessante publicaties met de BxPC-3 cellijn.
Licocumaron induceert celdood van BxPC-3 pancreasadenocarcinoom door DYRK1A te remmen
Deze publicatie in Chemico-Biological Interactions (2020) onderzocht de apoptotische effecten van een natuurproduct, licocoumarone, op BxPC-3 pancreaskankercellen.
Dit onderzoeksartikel werd gepubliceerd in Anticancer Research (2022). Het onderzoek stelde dat hydroxychloroquine de celdood van BxPC3 veroorzaakt door het BCL-XL-gen te remmen.
Dit onderzoek werd in 2020 gepubliceerd in het Journal of Cellular Biochemistry. Het onderzoek stelt dat een natuurlijke verbinding, salidroside, kankerbestrijdende activiteiten vertoont in BxPC-3 cellen door de HIF-1α (hypoxia-inducible factor) en LOXL2 signaalcascade te reguleren.
Dit artikel in Biomedicine & Pharmacotherapy suggereert dat ibrutinib kan worden gebruikt als een geweldige radiosensitizer bij patiënten met alvleesklierkanker. In vitro onderzoek in BxPC-3 cellen geeft aan dat het de BxPC3 EGFR-fosforylering en expressie van pAKT en downstream genen die door radiotherapie worden gereguleerd, vermindert.
Chelidonine induceert apoptose via GADD45a-p53-regulatie in menselijke alvleesklierkankercellen
In dit onderzoek in Integrative Cancer Therapies wordt voorgesteld dat een natuurproduct, chelidonine, apoptotische activiteit uitoefent in menselijke alvleesklierkankercellen BxPC-3 via regulering van BxPC3 p53 en GADD45a signalering.
6. bronnen voor BxPC-3-cellijn: Protocollen, video's en meer
BxPC-3 cellijn heeft veel boeiende voordelen die het geschikt maken voor onderzoek. Veel online bronnen over de BxPC-3 cellijn vermelden de behandeling, het onderhoud en het transfectieprotocols.
- BxPC3 transfectie: Deze video is een stap-voor-stap handleiding voor het leren van transfectie protocol voor BxPC-3 cellen.
Dit gedeelte van het artikel bevat een aantal links met uitleg over BxPC3 celkweekprotocollen.
- BxPC3 celkweek: Deze website helpt u bij het leren van protocollen voor het subkweken en hanteren van gecryopreserveerde en proliferatieve BxPC-3 culturen.
Referenties
- Kim, Y., et al., Comparative proteomic profiling of pancreatic ductal adenocarcinoma cell lines. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Overexpressie van laminine-5 gamma-2 bevordert tumorigenese van pancreas ductaal adenocarcinoom via EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR-cascade. Cellulaire en Moleculaire Levenswetenschappen, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Elaeocarpus reticulatus fruit extracts reduce viability and induce apoptosis in pancreatic cancer cells in vitro. Moleculaire biologie, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Anti-cancer potential of Oxialis obtriangulata in pancreatic cancer cell through regulation of the ERK/Src/STAT3-mediated pathway. Moleculen, 2020. 25(10): p. 2301.