U87MG ląstelės – glioblastomos tyrimai naudojant U87MG ir jų įtaka smegenų vėžio tyrimams
U-87 MG, žmogaus pirminė glioblastomos ląstelių linija, plačiai naudojama biologiniuose tyrimuose. Visų pirma šios ląstelės naudojamos neurobiologijos ir imunoonkologijos srityse.
- Auginimo terpė
- U-87 MG ląstelių linija auginama EMEM (Eagle's minimal essential medium) terpėje, papildytoje 1,0 g/l L-gliukozės, 2,0 mM L-glutamino, 2,2 g/l NaHCO₃, 1 % NEAA, 1 mM natrio piruvato ir 10 % FBS tirpalu. Terpę reikia keisti kas 2–3 dienas.
- Padvigubėjimo laikas
- U 87 MG ląstelių populiacijos dvigubėjimo laikas svyruoja nuo 18 iki 38 valandų.
- Augimo tipas
- U 87 MG yra adhezyvinė ląstelių linija. Ląstelės yra pailgos formos ir auga monosluoksniais.
- Biologinio saugumo lygis
- BSL-1
- Galima įsigyti iš
- „Cytion“ — Užsisakykite U-87 MG
- U-87 MG ląstelių linijos bendrosios charakteristikos ir kilmė
- U-87 MG ląstelių auginimo informacija
- U-87 MG ląstelių privalumai ir trūkumai
- Moksliniai tyrimai, kuriuose naudojamos U-87 MG ląstelės
- Užsisakykite U-87 MG gliomos ląstelių liniją jau šiandien
- U-87 MG ląstelių linija: moksliniai straipsniai
- Ištekliai, susiję su U-87 MG ląstelėmis: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
- Įžvalgos apie U-87 MG gliomos tyrimus: dažnai užduodami klausimai
- Nuorodos
- Dažnai užduodami klausimai
U-87 MG ląstelių linijos bendrosios charakteristikos ir kilmė
Šiame skyriuje bus aptariama U87 ląstelių linijos kilmė ir bendrosios charakteristikos. Sužinosite: Kas yra U-87 MG ląstelės? Iš kur kilusios U87 ląstelės? Kokia yra pilna U-87 MG forma? Kokio dydžio yra U87 ląstelės? Kokia yra U87 ląstelių linijos morfologija?
- U87 ląstelių linija yra glioblastomos, astrocitomos ląstelių linija. Ji buvo sukurta 1966 m. Upsalos universitete. Ląstelės buvo paimtos iš 44 metų amžiaus kaukazietiškos kilmės vyro, sergančio glioblastoma. Ši ląstelių linija oficialiai vadinama U 87 MG, o tai reiškia „Upsalos 87 piktybinė glioma“.
- U 87 MG ląstelės pasižymi epitelinėms ląstelėms būdinga morfologija.
- U 87 MG ląstelių skersmuo svyruoja nuo 12 iki 14 µm.
- Ši žmogaus glioblastomos ląstelių linija yra hipodiploidinė, o maždaug 48 % ląstelių populiacijos modalusis chromosomų skaičius yra 44. Tačiau 5,9 % ląstelių populiacijos pasitaiko ir didesnių ploidijų.
Informacija apie U-87 MG ląstelių auginimą
Prieš pradėdami dirbti su U 87 MG ląstelėmis, turėtumėte susipažinti su šiais pagrindiniais šių glioblastomos ląstelių kultivavimo aspektais. Visų pirma turėtumėte žinoti: koks yra U 87 MG ląstelių populiacijos padvigubėjimo laikas? Kokios terpės naudojamos U87 ląstelių kultivavimui? Koks yra U-87 MG ląstelių linijos pasėjimo tankis?
Pagrindiniai U-87 MG ląstelių auginimo aspektai
Populiacijos padvigubėjimo laikas:
U 87 MG ląstelių populiacijos padvigubėjimo laikas svyruoja nuo 18 iki 38 valandų.
Adhezinės ar suspensinės:
U-87 MG yra adhezyvinė ląstelių linija. Ląstelės yra pailgos formos ir auga kaip monosluoksniai.
Sėjimo tankis:
Glioblastomos ląstelių liniją U 87 MG rekomenduojama sėti 1 x 104 ląstelių/cm² tankumu. Prisijungusios U87 ląstelės nuplaunamos 1 x PBS tirpalu ir inkubuojamos su „Accutase“ tirpalu. Po to atskirtos ląstelės centrifuguojamos ir surenkamos. Ląstelės atsargiai resuspenduojamos ir įdedamos į naujus kolbelius su auginimo terpe.
Augimo terpė:
U 87 MG ląstelių linija auginama EMEM (Eagle's minimal essential medium) terpėje, papildytoje 1,0 g/l L-gliukozės, 2,0 mM L-glutamino, 2,2 g/l NaHCO3, 1 % NEAA, 1 mM natrio piruvato ir 10 % FBS tirpalu. Terpę reikia keisti kas 2–3 dienas.
Auginimo sąlygos:
U-87 MG ląstelėms optimaliam augimui reikalingas drėkinamas inkubatorius su 5 % CO₂ tiekimu ir 37 °C temperatūra.
Laikymas:
U87 ląstelės laikomos skysto azoto garų fazėje arba žemesnėje nei -150 °C temperatūroje, siekiant išlaikyti maksimalų glioblastomos ląstelių gyvybingumą.
Užšaldymo procesas ir terpė:
U-87 MG ląstelėms užšaldyti tinka CM-1 arba CM-ACF užšaldymo terpės. Rekomenduojamas lėtas užšaldymo procesas, nes jis apsaugo ląsteles nuo šoko ir išsaugo jų gyvybingumą.
Atšildymo procesas:
Užšaldytos U-87 MG ląstelių linijos kolbos atšildomos 37 °C vandens vonioje. Į ląsteles įpilama auginimo terpės, jos resuspenduojamos ir perpilamos į naujas kolbas kultivavimui. Kita vertus, U87 ląstelės gali būti centrifuguojamos, siekiant pašalinti užšaldymo terpę, ir tik tada kultivuojamos.
Biologinio saugumo lygis:
Dirbant su U-87 MG ląstelių kultūromis, būtinas 1-ojo lygio biologinis saugumas.
U-87 MG ląstelių privalumai ir trūkumai
Kai galvojame apie ląstelių liniją, pirmas dalykas, kuris ateina į galvą, yra: kokie yra U-87 MG ląstelių naudojimo privalumai? Kokie yra U-87 ląstelių trūkumai?
Privalumai
U-87 MG ląstelių linijos plačiai naudojamos moksliniuose tyrimuose. Keletas su šia ląstelių linija susijusių privalumų:
Privalumai
- Lengva auginti: U-87 MG ląsteles lengva išlaikyti kultūroje. Joms nereikia sudėtingų ar ypatingų ląstelių kultivavimo sąlygų.
- Homogeniškumas: U-87 MG yra homogeniška ląstelių linija. Dauguma populiacijos ląstelių turi tą pačią genetinę sudėtį, todėl pasižymi panašiomis savybėmis. Šios ląstelės naudojamos ląstelių procesų tyrimams, vaistų atrankai ir bandymams.
- Gerai apibūdinta: ši glioblastomos ląstelių linija yra gerai apibūdinta pagal augimo savybes, morfologiją ir genų ekspresiją, todėl ji yra vertinga mokslinių tyrimų priemonė.
Trūkumai
- Ribotas pritaikomumas: U-87 MG yra glioblastomos ląstelių linija, todėl jos pritaikymas pirmiausia apsiriboja glioblastomų ir joms būdingų molekulinių mechanizmų tyrimais. Ji gali netikti kitų vėžio tipų tyrimams.
Moksliniai tyrimai, kuriuose naudojamos U-87 MG ląstelės
U87MG glioblastomos ląstelių linija plačiai naudojama vėžio tyrimuose, ypač glioblastomos tyrimuose. Kai kurie U 87 MG ląstelių taikymo mokslo tyrimams pavyzdžiai:
- Vėžio biologijos tyrimai: U87 ląstelių linija naudojama vėžio augimo ir vystymosi, pagrindinių molekulinių mechanizmų, signalizacijos kelių ir naviko mikroaplinkos tyrimams. 2020 m. paskelbtame tyrime buvo panaudotas glioblastomos in vitro modelis – U-87 MG ląstelių linija – siekiant ištirti BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) geną kaip terapinį taikinį. Tyrimo rezultatai parodė, kad BMAL1 genas slopina glioblastomos ląstelių proliferaciją, migraciją ir invaziją, slopindamas cikliną B1, metaloproteinazę-9 ir fosfo-AKT genų ekspresiją [1]. Kitas 2019 m. atliktas tyrimas, kuriame buvo naudojama U87 ląstelių linija, parodė, kad sumažinta lipopolisacharido indukuoto naviko nekrozės faktoriaus alfa (LITAF) transkripcijos faktoriaus ekspresija gali padidinti gliomos ląstelių jautrumą radiacijai per FOXO-1 kelio aktyvaciją. LITAF taip pat žinomas kaip p53 indukuotas genas 7 (PIG7) [2].
- Vaistų atradimas ir kūrimas: U-87 MG ląstelės gali būti naudojamos vaistų atrankai ir bandymams, leidžiant mokslininkams identifikuoti naujus potencialius vaistus nuo vėžio bei įvertinti jų veiksmingumą ir toksiškumą. Viename tyrime buvo naudojama U-87 MG glioblastomos ląstelių linija, siekiant įvertinti Inula helenium (L.) ekstrakto antioksidacinį ir priešvėžinį potencialą [3]. Panašiai, kitoje publikacijoje buvo paminėtas U-87 ląstelių linijos naudojimas augalų ekstraktų citotoksiniam ir apoptoziniam poveikiui tirti [4]. Be to, 2018 m. paskelbtame tyrime buvo tiriamas iš Nuphar augalų ekstrahuotų seskviterpeninių alkaloidų citotoksinis poveikis jautrioms ir vaistams atsparioms U-87 MG ląstelių linijoms [5].
Užsisakykite „U87 MG“ gliomos ląstelių liniją jau šiandien
U-87 MG ląstelių linija: moksliniai straipsniai
Čia pateikiami keli žymiausi moksliniai straipsniai, kuriuose aptariama U-87 MG ląstelių linija.
Šiame 2018 m. žurnale „Neuroreport“ paskelbtame straipsnyje teigiama, kad hipoksija gali padidinti žmogaus glioblastomos ląstelių migraciją ir invaziją, reguliuodama PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α signalinį kelią.
Šis tyrimas paskelbtas žurnale „Frontiers in Pharmacology“ 2020 m. Tyrimo rezultatai rodo, kad flavonoidas eriodiktioolis daro priešvėžinį poveikį U87 ląstelių linijai ir slopina ląstelių proliferaciją bei metastazavimą. Šis junginys savo priešvėžines savybes pasireiškia moduliuodamas PI3K/Akt/NF-κB signalinį kelią.
Šis tyrimas, paskelbtas žurnale „Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine“ (2018 m.), rodo, kad kinų žolelių preparatas, vadinamas „Xihuang“ tabletėmis, gali sukelti U87 ląstelių apoptozę, veikdamas per ROS aktyvuotą Akt/mTOR/FOXO1 kaskadą.
LITAF padidina žmogaus gliomos ląstelių jautrumą radiacijai per FoxO1 signalinį kelią
Šis mokslinis straipsnis buvo paskelbtas žurnale „Cellular and Molecular Neurobiology“ 2019 m. Tyrime teigiama, kad transkripcijos faktorius LITAF slopina FOXO-1 signalinį kelią ir taip padidina gliomos ląstelių jautrumą radiacijai.
Šis straipsnis buvo paskelbtas žurnale „Biointerface Research in Applied Chemistry“ (2019 m.). Tyrėjai naudojo U-87-MG ląsteles, kad ištirtų kurkuminu prisotintų PLGA nanodalelių citotoksinį poveikį.
Ištekliai apie U-87 MG ląsteles: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
U87MG glioblastomos ląstelių linija naudojama daugelyje vėžio tyrimų laboratorijų. Keletas išteklių, susijusių su šia ląstelių linija:
- U87 ląstelių linijos transfekcija: šiame dokumente aprašomas U87MG ląstelių transfekcijos protokolas.
- U 87 MG ląstelių linijos transfekcija: šiame vaizdo įraše pateikiamas žingsnis po žingsnio U87 ląstelių transfekcijos protokolo paaiškinimas.
Ištekliai, susiję su U87 ląstelių kultivavimo protokolu, pateikiami žemiau:
- U87 MG ląstelės: Šioje nuorodoje pateikiama pagrindinė informacija apie U87MG ląstelių liniją. Joje pateikiami trumpi ląstelių dalijimo, užšaldymo ir atšildymo protokolai.
Įžvalgos apie U87 MG gliomos tyrimus: Dažniausiai užduodami klausimai
Gliomos ląstelių linijos, pavyzdžiui, U87 glioblastomos ląstelės, yra kultivuojamos ląstelės, gautos iš žmogaus gliomų, kurios plačiai naudojamos vėžio tyrimuose tiriant naviko biologiją, genetiką ir reakciją į vaistus. Jos naudojamos kaip modeliai, padedantys suprasti naviko elgseną ir išbandyti gydymo strategijas.
Izogeninė ląstelių linija - tai ląstelės, gautos iš vienos ląstelės, užtikrinančios genetinį vienodumą. Tiriant gliomą, izogeninės linijos yra nuoseklus modelis genetiniams pokyčiams ir jų poveikiui naviko augimui bei atsakui į gydymą tirti.
Gliomos ląstelių linijų DNR profilis yra labai svarbus nustatant genetinius pokyčius, siekiant suprasti naviko evoliuciją ir kurti tikslingą gydymą. Jis padeda klasifikuoti navikus pagal genetinius žymenis, pavyzdžiui, IDH1 mutacijas.
Ląstelių kultūrų terpėje esantis serumas aprūpina gliomos ląsteles svarbiais augimo veiksniais, hormonais ir maistinėmis medžiagomis. Tačiau jo sudėtis gali turėti įtakos eksperimentų atkuriamumui, todėl vis dažniau naudojamos sąlygos be serumo arba su apibrėžtu serumu.
Gliomos ląstelių linijų citotoksiškumas vertinamas naudojant tokius tyrimus, kaip srauto citometrija, kuri matuoja ląstelių būklę, gyvybingumą ir mirtį po gydymo vaistais arba imuninėmis ląstelėmis, pvz., natūraliomis ląstelėmis žudikėmis (NK).
NK ląstelių citotoksiškumas labai svarbus gliomos gydymo tyrimuose, nes NK ląstelės gali atpažinti ir naikinti naviko ląsteles be išankstinės sensibilizacijos. NK ląstelių sąveikos su gliomos ląstelėmis tyrimai padeda kurti strategijas, kaip pagerinti NK ląstelių valymą nuo navikų.
Kilmės navikas suteikia informacijos apie pirminę biologinę aplinką ir naviko savybes. Tai suprasti padeda susieti ląstelių linijų tyrimų rezultatus su tikrąja naviko elgsena ir paciento prognoze.
Elektroninė mikroskopija leidžia išsamiai vizualizuoti gliomos ląstelių linijų ląstelių ir subląstelių struktūras, o tai labai svarbu tiriant ląstelių morfologiją, organoidų būklę ir pokyčius po gydymo.
NKG2D ligandas yra išreikštas naviko ląstelėse ir prisijungia prie NK ląstelių NKG2D receptoriaus, sukeldamas citotoksinį atsaką. Šios sąveikos tyrimai padeda suprasti ir potencialiai sustiprinti imuninį atsaką į gliomą.
3D ląstelių kultūrų modeliai tiksliau imituoja naviko mikroaplinką, todėl galima geriau suprasti gliomos augimą, migraciją ir atsparumą vaistams. Šis metodas yra labai svarbus atliekant svarbesnius transliacinės onkologijos tyrimus.
Literatūra
- Gwon, D.H. ir kt., „BMAL1 slopina U87MG ląstelių proliferaciją, migraciją ir invaziją, mažindamas cikliną B1, fosfo-AKT ir metaloproteinazę-9“. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C. ir kt., „LITAF didina žmogaus gliomos ląstelių jautrumą radiacijai per FoxO1 signalinį kelią“. *Cell Mol Neurobiol*, 2019. 39(6): p. 871–882.
- Koc, K. ir kt., Inula helenium (L.) ekstrakto antioksidacinis ir priešvėžinis poveikis žmogaus U-87 MG glioblastomos ląstelių linijoje. „J Cancer Res Ther“, 2018. 14(3): p. 658–661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh ir A. Ghasempour, „Augalinių ekstraktų citotoksiškumas ir apoptozės indukcija krūties vėžio, odos vėžio ir glioblastomos ląstelėse“. „Mol Biol Rep“, 2019. 46(5): p. 5131–5142.
- Fukaya, M. ir kt., Nuphar augalų seskviterpeninių alkaloidų citotoksiškumas jautrioms ir vaistams atsparioms ląstelių linijoms. Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279–6286.