T98G ląstelių linija
T98G ląstelės sudaro žmogaus glioblastomos ląstelių liniją, kuri paprastai naudojama biomedicininiuose tyrimuose. Visų pirma, šios ląstelės naudojamos smegenų vėžio tyrimuose, siekiant ištirti svarbiausias ląsteles ir molekulinius veiksnius, prisidedančius prie šio vėžio atsiradimo. Be to, jos padeda tyrėjams atrinkti ir išbandyti naujus vaistus nuo vėžio, kurie gali prisidėti prie vaistų kūrimo.
T98G ląstelių linijos bendrosios charakteristikos ir kilmė
Ši straipsnio dalis padės jums susipažinti su pagrindinėmis T98G ląstelių linijos charakteristikomis. Joje bus pateikta informacija apie ląstelių linijos kilmę, morfologiją, dydį ir ploidiją. Be to, čia išsamiai bus atsakyta į šiuos klausimus: Kas yra T98G ląstelės? Kokio tipo ląstelės yra T98G? Iš kur atsirado T98G? Kokios yra T98G ląstelių linijos savybės? Kas yra glioblastomos ląstelių linija T98G U87?
- T98G ląstelių liniją sukūrė GH Stein. Ji susideda iš fibroblastų tipo ląstelių, gautų iš 61 metų amžiaus kaukaziečio vyro, sergančio daugiaformine glioblastoma, smegenų audinio [1].
- T98G ląstelės nėra tumorigeninės; įšvirkštus jas „nude“ pelėms, jos nesukelia navikų. Tačiau ląstelių kultūroje, esant tinkamam prisitvirtinimui, jos linkusios daugintis.
- Šios ląstelės turi fibroblastams būdingą morfologiją.
- Glioblastomos ląstelių linija T98G pasižymi hiperpentaploidija. Modalinis chromosomų skaičius svyruoja nuo 128 iki 132. 1,39 % ląstelių populiacijos gali būti didesnės ploidijos.
T98 ir T98G
Abi yra žmogaus glioblastomos ląstelių linijos ir turi panašią kilmę. Vienintelis šių ląstelių linijų skirtumas yra chromosomų skaičius. T98G turi beveik dvigubai daugiau chromosomų nei T98. Todėl T98G yra žinoma kaip T98 poliploidinis variantas.
T98G ir U87
U87 ir T98G yra žmogaus glioblastomos ląstelių linijos, naudojamos smegenų vėžio tyrimuose. U87 pasižymi agresyvesniu fenotipu, palyginti su T98G GBM.
2. Informacija apie T98G ląstelių linijos auginimą
Prieš pradėdami dirbti su ląstelių linija, būtina susipažinti su informacija apie jos kultivavimą. Tai padės jums lengvai ir patogiai dirbti su ląstelių linija laboratorijoje. Turėtumėte žinoti: koks yra T98G ląstelių linijos dvigubėjimo laikas? Kokia auginimo terpė geriausiai tinka T98G ląstelėms? Kokios yra T98G augimo charakteristikos? Koks yra T98G ląstelių sėjimo tankis? Kaip užšaldyti T98G ląsteles?
Svarbiausi T98G ląstelių auginimo aspektai
Padvigubėjimo laikas:
Apytikslis T98G ląstelių dvigubėjimo laikas yra 40 valandų. Jis gali skirtis priklausomai nuo auginimo sąlygų.
Adhezinės ar suspensinės:
T98G ląstelės yra adhezinės. Jos prisitvirtina prie kultūrinio indo dugno ir sudaro monosluoksnius.
Padalijimo santykis:
T98G ląstelės subkultivuojamos 1:2–1:5 padalijimo santykiu. Tam ląstelės pirmiausia nuplaunamos 1X PBS buferiniu tirpalu, o tada inkubuojamos su perkelimo tirpalu (Accutase) 8–10 minučių kambario temperatūroje. Po inkubacijos atsiskyrusios ląstelės įdedamos į šviežią auginimo terpę ir centrifuguojamos. Tada surinktas ląstelių nuosėdas atsargiai resuspenduojamas, o ląstelės išpilamos į auginimo terpę turinčią kultūrinę kolbą.
Auginimo terpė:
T98G ląstelėms kultivuoti naudojama EMEM terpė, kurioje yra 10 % veršelių serumo, 2 mM L-glutamino, 2,2 g/l NaHCO₃ ir EBSS. Terpę reikia keisti 3–4 kartus per savaitę.
Auginimo sąlygos:
T98G ląstelės laikomos drėkinamame inkubatoriuje, nustatytame 37 °C temperatūrai ir prijungtame prie CO₂ tiekimo.
Laikymas:
Užšaldytos ląstelės gali būti laikomos žemesnėje nei -150 °C temperatūroje arba skysto azoto garų fazėje, siekiant užtikrinti ląstelių gyvybingumą ilgesnį laiką.
Užšaldymo procesas ir terpė:
T98G ląsteles rekomenduojama užšaldyti CM-1 arba CM-ACF ląstelių užšaldymo terpėse. Tam siūlomas lėtas užšaldymo procesas, kurio metu temperatūra mažėja tik 1 °C per minutę. Tai apsaugo ląsteles nuo šoko ir išsaugo jų gyvybingumą.
Atšildymo procesas:
Užšaldytos ląstelės švelniai atšildomos, 40–60 sekundžių laikant jas iš anksto įkaitintoje 37 laipsnių Celsijaus vandens vonioje. Po to jos vėl suspenduojamos šviežioje auginimo terpėje ir perkeltos į naują kolbą. Po 24 valandų inkubacijos terpė pakeičiama, siekiant pašalinti užšaldymo terpės komponentus.
Biologinio saugumo lygis:
T98G kultūros laikomos 1-ojo biologinio saugumo lygio laboratorijoje.
Paskelbta: 2023 m. | Paskutinis peržiūrėjimas: 2026 m. gegužė
- T98G ląstelių linija: privalumai ir trūkumai
- T98G ląstelių taikymo sritys
- 2. Informacija apie T98G ląstelių linijos auginimą
- Svarbiausi T98G ląstelių auginimo aspektai
- T98G ląstelių linijos bendrosios charakteristikos ir kilmė
- 5. Moksliniai straipsniai apie T98G ląsteles
- T98G ląstelių ištekliai: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
- Dažnai užduodami klausimai
T98G ląstelių linija: privalumai ir trūkumai
T98G yra plačiai naudojama žmogaus kilmės glioblastomos ląstelių linija. Ji turi keletą privalumų ir trūkumų, kurie ją išskiria iš kitų. Keletas svarbiausių iš jų aptariami šio straipsnio skyriuje.
Privalumai
T98G ląstelių privalumai yra šie:
-
Gerai apibūdinta
Gerai įsitvirtinusi ir gerai apibūdinta ląstelių linija. Išsamiai ištirta ir aprašyta mokslinėje literatūroje.
-
In vitro modelis
Atspindi glioblastomos, agresyviausios smegenų auglio rūšies, savybes. Vertinga priemonė ligos tyrimams, biologijos supratimui ir gydymo metodų kūrimui.
Trūkumai
Su T98G ląstelėmis susiję trūkumai yra šie:
-
Heterogeniškumas
Genetinė T98G ląstelių populiacijos heterogeniškumas gali lemti eksperimentinių rezultatų nenuoseklumą ir apsunkinti duomenų interpretavimą.
T98G ląstelių taikymo sritys
T98G ląstelių linija yra vertinga priemonė, naudojama vėžio tyrimuose. Čia išvardyti keli pagrindiniai T98G ląstelių taikymo tyrimų srityse pavyzdžiai:
- Vėžio tyrimai: T98G ląstelių linija yra vertinga priemonė glioblastomos navikų biologijai tirti. Šios ląstelės daugiausia naudojamos sudėtingų molekulinių kelių, lemiančių glioblastomos ligos vystymąsi ir progresavimą, tyrimams. Be to, jos naudojamos siekiant identifikuoti genetines mutacijas, skatinančias naviko augimą, bei kitus vėžinių ląstelių mechanizmus. Yang Chen ir kolegos, tyrinėdami šias ląsteles, nustatė, kad miRNA-21 perprodukcija sumažina PDCD4 (programuotos ląstelių mirties baltymo 4) koncentraciją T98G ląstelėse. Tai lemia PDCD4 reguliuojamos T98G ląstelių apoptozės slopinimą. Taigi, tyrimas rodo, kad miRNA-21 gali būti potencialus taikinys kuriant gydymo būdus [2]. Panašiai kaip šiame tyrime, Fanqiang Kong ir kolegos tyrė mikroRNR-15a vaidmenį T98G glioblastomos ląstelių proliferacijoje ir invazijoje. Jie nustatė, kad miRNA-15a-5p skatina šiuos ląstelių procesus, veikdama ląstelių adhezijos molekulę 1 (CADM1) [3].
- Vaistų bandymai ir terapijos plėtra: T98G yra puikus glioblastomos in vitro modelis, skirtas naujų vaistų atrankai ir suteikiantis platformą potencialių vėžio terapijų veiksmingumui įvertinti. Tyrėjai taip pat išbando įvairius junginius ir terapijas, siekdami identifikuoti ir atrasti vaistų kandidatus, turinčius perspektyviausias savybes kovai su glioblastoma. Tai veda prie naujų vaistų ir gydymo strategijų kūrimo, suteikiančių viltį glioblastomos pacientams. Viename iš tokių tyrimų buvo tiriamas natūralaus junginio, vadinamo korilaginu, priešvėžinis potencialas temozolomidui atsparioje T98G GBM ląstelių linijoje. Tyrimo rezultatai leidžia daryti prielaidą, kad korilaginas, vartojamas kartu su temozolomidu, ląstelėse sukelia stipresnį antiproliferacinį ir antiapoptozinį poveikį [4].
5. Moksliniai straipsniai apie T98G ląsteles
Toliau pateikiami keli įdomūs ir dažnai cituojami moksliniai straipsniai apie glioblastomos ląstelių liniją T98G.
REV-ERB agonisto SR9009 chemoterapinis poveikis žmogaus glioblastomos T98G ląstelėms
Šiame leidinyje, paskelbtame žurnale „ASN Neuro“ (2019 m.), buvo tiriamas REV-ERB agonisto, vadinamo SR9009, priešvėžinis poveikis T98G glioblastomos ląstelėms.
Šiame moksliniame straipsnyje, paskelbtame žurnale „Neurochemical Research“ (2019 m.), buvo iškelta hipotezė, kad natrio butiratas ir kvercetinas sinergiškai slopina apsauginę autofagiją T98G ląstelėse ir skatina ląstelių apoptozę.
Šiame žurnale „Genes“ (2023 m.) paskelbtame tyrime hipoksijai prisitaikiusi T98G ląstelių linija buvo ištirta taikant RNR sekvenavimą, o IRE1 (inozitolo reikalaujantis fermentas 1) buvo pasiūlytas kaip perspektyvus terapinis taikinys.
Šis straipsnis buvo paskelbtas žurnale „Oncology Letters“ (2017 m.). Tyrime nustatyta, kad miRNA-548c-3p veikia T98G onkogenus (c-Myb), slopindamas T98G ląstelių proliferaciją ir migraciją.
Šiame straipsnyje, paskelbtame žurnale „Journal of Medicinal Plants Research“ (2011 m.), teigiama, kad Dracocephalum tanguticum chloroformo ekstraktas daro antiproliferacinį poveikį T98G ląstelėms, reguliuodamas kaspazės-3, Bax ir P21 genų veiklą.
Ištekliai, susiję su T98G ląstelėmis: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
Čia pateikiami ištekliai, kuriuose aprašomi T98G ląstelių kultivavimo ir transfekcijos protokolai.
- T98G transfekcija: Šiame moksliniame straipsnyje pateikiamas T98G transfekcijos protokolas. Jame trumpai paaiškinamas metodas ir reikalingi reagentai.
Toliau pateiktos nuorodos labai padės jums susipažinti su T98G ląstelių kultivavimo protokolu ir palengvins jūsų darbą.
- T98G ląstelės: šioje svetainėje pateikiama svarbi informacija apie T98G ląstelių kultivavimo protokolus, įskaitant subkultivavimą bei proliferacinių ir kriokonservuotų kultūrų tvarkymą. Be to, ji padės jums susipažinti su ląstelių auginimo terpėmis, sąlygomis ir dvigubėjimo trukme.
Nuorodos
- Haehl, E., Endotelinių ląstelių sukeltas atsparumas radiacijai glioblastomoje. 2021 m., Tübingeno universitetas.
- Chen, Y. ir kt., MikroRNR-21 slopina naviko slopintojo PDCD4 ekspresiją žmogaus glioblastomos ląstelėse T98G. „Cancer Letters“, 2008. 272(2): p. 197–205.
- Kong, F. ir kt., MikroRNR-15a-5p skatina T98G glioblastomos ląstelių proliferaciją ir invaziją, veikdama ląstelių adhezijos molekulę 1. „Oncology Letters“, 2021. 21(2): p. 1–1.
- Milani, R. ir kt., „Corilagin“ sukelia aukštą apoptozės lygį temozolomidui atsparioje T98G gliomos ląstelių linijoje. „Oncol Res“, 2018. 26(9): p. 1307–1315.