RAW 264.7 ląstelių linija makrofagų ir imunologijos tyrimuose

RAW 264.7 ląstelių linija yra patikimas pelių makrofagų in vitro modelis, turintis esminę reikšmę imunologinių tyrimų srityje. Šios ląstelės, kilusios iš patino BALB/c pelės, buvo transformuotos Abelsono pelių leukemijos virusu, dėl ko susiformavo makrofagams panaši ląstelių linija. Dėl savo funkcinio stabilumo ir įgimto gebėjimo vykdyti tiek fagocitozę, tiek pinocitozę, RAW 264.7 ląstelės yra nepakeičiamos tiriant šeimininko ir patogeno sąveiką, todėl jos yra imunologinių tyrimų kertinis akmuo [1,2].

Morfologinės charakteristikos ir augimo savybės

Tyrimo metu nustatyta, kad RAW 264.7 ląstelės auga pusiau adhezyviai ir turi polinkį formuoti tiek verpstės formos adhezyvias ląsteles, tiek sferines plūduriuojančias gyvybingas ląsteles, kurių skersmuo svyruoja nuo 10 iki 20 µm. Dėl šio polimorfinio pobūdžio ir prisitaikymo prie auginimo sąlygų RAW 264.7 ląstelės yra universali priemonė eksperimentiniams tyrimams ir stebėjimams.

Imunologinė funkcija ir antigenų pateikimas

Kaip antigenus pateikiančios ląstelės, RAW 264.7 ląstelės atlieka lemiamą vaidmenį imuninėje sistemoje. Jų funkcija apima ne tik paprastą patogenų atpažinimą, bet ir antigenų apdorojimą bei pateikimą T ląstelėms, taip koordinuojant visapusišką imuninį atsaką. Ši dinamika leidžia giliau suprasti, kaip imuninė sistema atpažįsta ir neutralizuoja svetimkūnius.

Makrofagų poliarizacija: M0, M1 ir M2 paradigma

RAW 264.7 ląstelės, būdamos bazinėje būsenoje kaip M0 makrofagai, turi nepaprastą gebėjimą poliarizuotis į M1 proinflamacinį arba M2 antiinflamacinį fenotipą. Šis poliarizacijos gebėjimas suteikia tyrėjams modelį, leidžiantį tirti įvairių citokinų ir aplinkos veiksnių įtaką bei poveikį makrofagų funkcijai ir imuniniams atsakams [3,4].

Osteoklastogenezė ir kaulų pertvarkymas

Nors RAW 264.7 ląstelės pačios nėra osteoklastai, jos buvo labai svarbios tiriant osteoklastogenezę – osteoklastų susidarymo procesą. Šios ląstelės palengvina osteoklastinių genų ekspresijos ir jų reakcijos į receptorių aktyvaciją tyrimą. Šie tyrimai turi didelę reikšmę siekiant suprasti tokių būklių kaip osteoporozė, kuriai būdinga sutrikusi kaulų remodeliacija, patofiziologiją.

RAW 264.7 ląstelių privalumai ir trūkumai

Privalumai

• Lengvas auginimas: RAW 264.7 ląstelių liniją lengva auginti ir prižiūrėti laboratorijoje be jokių sudėtingų reikalavimų.
• Gerai apibūdinta: RAW 264.7 yra gerai apibūdinta ląstelių linija, o tai reiškia, kad ji turi stabilias fenotipines ir funkcines savybes.
• Makrofagų in vitro modelis: Kadangi RAW 264.7 ląstelės yra makrofagai, jos atlieka pagrindines makrofagams būdingas funkcijas, pvz., fagocitozę ir pinocitozę. Todėl jos dažnai naudojamos kaip makrofagų in vitro modelis.
• Diferenciacija į osteoklastus: RAW 264.7 ląstelės, naudojant specifinius molekulinius veiksnius, gali būti diferencijuojamos į osteoklastus. Šios diferencijuotos ląstelės, panašiai kaip osteoklastai, gali vykdyti kaulų remodeliaciją.

Trūkumai

• Prastas pirminių makrofagų atspindėjimas: kaip transformuota ląstelių linija, RAW 264.7 gali netiksliai atspindėti pirminių makrofagų savybes ir gali turėti tam tikrų skirtumų genų ekspresijos, fenotipo ir funkcijos atžvilgiu.
• Apribojimai atliekant vaistų atranką: RAW 264.7 ląstelės gali netikti visų tipų vaistų atrankos tyrimams, o jų reakcija į kai kuriuos vaistus gali skirtis nuo pirminių makrofagų reakcijos.
• Stipri ląstelių adhezija: RAW 264.7 ląstelės stipriai prilimpa prie kultūros kolbos paviršiaus ir kartais jas gali būti sudėtinga atskirti.

RAW 264.7 ląstelių pritaikymas makrofagų imitavimui ir imunologiniams tyrimams

Ląstelių imunologinių reakcijų modeliavimas

RAW 264.7 ląstelių linija, atspindinti tikrųjų makrofagų funkcijas, yra pagrindinis modelis tiriant ląstelių reakcijas į patogenus ir imunologinius dirgiklius. Šį aspektą pabrėžiantis tyrimas įvertino termiškai sunaikintų pieno rūgšties bakterijų imunomoduliuojantį ir antioksidacinį poveikį šioms ląstelėms, pateikdamas reikšmingus atradimus imuninės sistemos reguliacijos srityje [5 ].

Papildant šiuos duomenis, 2019 m. atliktas tyrimas išaiškino imunologinį poveikį, kurį RAW 264.7 ląstelėms daro augalo Polygonatum sibiricum polisacharidai. Tyrime padaryta išvada, kad šie junginiai sukelia imuninį atsaką, aktyvuodami NF-κB/MAPK signalizacijos kelius, ir tai suteikia gilų molekulinį supratimą [6].

Osteoklastogenezės tyrimai

RAW 264.7 ląstelės, naudojamos kaip pakaitalas osteoklastų diferenciacijos tyrimams, padeda išsiaiškinti osteoklastų elgseną ir diferenciacijos kelius. Tokie tyrimai praplečia mūsų žinias apie kaulų rezorbcijos mechanizmus ir osteoporozės patogenezę. Siekiant stebėti ląstelių vidinius pokyčius ir analizuoti hemo metabolizmą šiose ląstelėse, dažnai naudojamos pažangios vaizdinimo technologijos.

Molekulinės įžvalgos apie osteoklastogenezę

Nepaisant to, kad RAW 264.7 ląstelės pirmiausia naudojamos kaip makrofagų modelis, jos taip pat taikomos in vitro osteoklastogenezės tyrimams. Indukuodami šiose ląstelėse osteoklastams būdingas savybes, mokslininkai gauna įžvalgų apie diferenciacijos procesą ir ikiosteoklastų elgseną, nors atliekant šiuos tyrimus labai svarbu atsižvelgti į šiai ląstelių linijai būdingas savybes ir kilmę.

Natūralių produktų bioaktyvumo atranka

Natūralių produktų bioaktyvumo atranka yra dar viena sritis, kurioje RAW 264.7 ląstelės pasižymi puikiomis savybėmis. Pavyzdžiui, jų panaudojimas Korėjos tyrime, kuriame buvo tiriamos žolelių mišinio imunostimuliacinės savybės, parodė šios ląstelių linijos veiksmingumą nustatant bioaktyvius junginius natūraliose medžiagose [7 ].

Atlikite novatoriškus mokslinius tyrimus naudodami mūsų RAW 264.7 ląsteles

Moksliniai straipsniai, kuriuose naudojamos RAW 264.7 ląstelės

Yra daug mokslinių publikacijų apie pelių makrofagų ląstelių liniją RAW 264.7:

• Poligonatumo sibiricum (Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute) polisacharidai sukelia imuninį atsaką RAW 264.7 ląstelių linijoje per NF-κB/MAPK signalų perdavimo grandinę: Šiame tyrime buvo iškelta hipotezė, kad iš Polygonatum sibiricum augalo gauti polisacharidai gali sukelti imuninį atsaką pelių makrofagų ląstelių linijoje RAW 264.7, reguliuodami NF-κB/MAPK signalų kaskadą.
• Tinospora crispa ekstrakto ir jo pagrindinių junginių imunomoduliuojantis poveikis RAW 264.7 makrofagų imuninėms funkcijoms: Šiame žurnale „International Immunopharmacology“ paskelbtame straipsnyje aprašoma, kad „Tinospora crispa“ augalo ekstraktas ir jo pagrindinės sudedamosios dalys turi imunomoduliuojantį ir imunostimuliuojantį poveikį RAW 264.7 makrofagų ląstelių linijai.
• Terminiu būdu sunaikintos pieno rūgšties bakterijos slopina azoto oksido gamybą per indukuojamą azoto oksido sintazę ir ciklooksigenazę-2 RAW 264.7 ląstelėse: Šiame tyrime teigiama, kad termiškai sunaikintos pieno rūgšties bakterijos gali būti naudojamos probiotinių produktų gamyboje, nes jos pasižymi imunomoduliuojančiomis ir antioksidacinėmis savybėmis. Tyrėjai naudojo RAW 264.7 ląsteles, kad ištirtų šiuos biologinius poveikius.
• Žolelių preparato poveikis imuninio atsako stiprinimui RAW 264.7 makrofaguose: Šiame tyrime, naudojant RAW 264.7 ląsteles, buvo tiriamas žolelių preparato, pavadinto KM1608, imunostimuliuojantis poveikis. Tyrimas leidžia manyti, kad KM1608 yra potencialus imuninio atsako stiprinimo agentas.
• Kolumbijos tradicinėje medicinoje naudojamų augalų atranka atskleidė „Physalis angulata“ taurėlių priešuždegiminį potencialą: šiame straipsnyje, paskelbtame žurnale „Saudi Journal of Biological Sciences“, buvo tiriamas 10 dažniausiai naudojamų tradicinių Kolumbijos augalų priešuždegiminis potencialas, naudojant LPS stimuliuotas RAW 264.7 ląsteles.

RAW 264.7 ląstelės: ištekliai, protokolai, vaizdo įrašai ir kita

RAW 264.7 ląstelės dažnai naudojamos transfekcijos tyrimuose. Toliau pateiktuose ištekliuose paaiškinami įvairūs transfekcijos metodai, taikomi RAW 264.7 ląstelių linijai.

• RAW 264.7 ląstelių transfekcija: šioje svetainėje pateikiamas RAW 264.7 makrofagų transfekcijos protokolas, naudojant lipofektamino reagentą.
• Transfekcijos protokolas: šiame paskelbtame straipsnyje aprašomas išsamus RAW 264.7 ląstelių transfekcijos protokolas.
• Efektyvus RAW 264.7 ląstelių transfekcijos metodas: šiame dokumente aprašomas kitas praktinis transfekcijos metodas, taikomas RAW 264.7 ląstelėms.

Vaizdo įrašai, susiję su RAW 264.7 ląstelių linija

• RAW 264.7 ląstelių kultivavimas: šiame vaizdo įraše paaiškinamas RAW 264.7 ląstelių perauginimo protokolas.
• Transfekcijos metodas: šiame vaizdo įraše rodoma, kaip RAW 264.7 ląstelės transfekuojamos su reporteriniu genu.

Svarbiausi DUK apie RAW 264.7 ląstelių liniją: įžvalgos apie makrofagų imitaciją ir osteoklastogenezės tyrimus

Literatūra

1. Taciak, B. ir kt., RAW 264.7 ląstelių linijos fenotipinio ir funkcinio stabilumo vertinimas per serijinius pasėlius. PloS one, 2018. 13(6): p. e0198943.
2. Wang, S. ir kt., Uždegiminiai makrofagai pertraukia osteocitų brendimą ir mineralizaciją, reguliuodami Notch signalizacijos kelią. „Molecular Medicine“, 2022. 28(1): p. 102.
3. Orekhov, A.N. ir kt., Monocitų diferenciacija ir makrofagų poliarizacija. „Vessel Plus“, 2019. 3: p. 10.
4. Khabipov, A. ir kt., RAW 264.7 makrofagų poliarizacija, kurią sukelia kasos vėžio ląstelės – modelis, skirtas naviką skatinančių makrofagų tyrimams. „Anticancer Research“, 2019. 39(6): p. 2871–2882.
5. Kang, C.-H. ir kt., Šiluma sunaikintos pieno rūgšties bakterijos slopina azoto oksido gamybą per indukuojamą azoto oksido sintazę ir ciklooksigenazę-2 RAW 264.7 ląstelėse. „Probiotics and Antimicrobial Proteins“, 2021. 13(6): p. 1530–1538.
6. Zhang, J. ir kt., Polisacharidai iš Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute sukelia imuninį atsaką RAW264.7 ląstelių linijoje per NF-κB/MAPK signalinį kelią. „RSC Advances“, 2019. 9(31): p. 17988–17994.
7. Trinh, T.A. ir kt., Žolinių preparatų poveikis imuninio atsako stiprinimui RAW 264.7 makrofaguose. „Biomolecules“, 2020. 10(3): p. 424.