NCI-H460 ląstelės – plaučių vėžio tyrimų gairės, remiantis NCI-H460 duomenimis
NCI-H460 – tai iš žmogaus organizmo gautos nedidelio ląstelių plaučių vėžio ląstelės, dažnai naudojamos plaučių karcinomos ir toksikologijos tyrimuose. Ši ląstelių linija yra vertinga priemonė tirti įvairius vėžio biologijos aspektus, susijusius su naviko vystymusi, augimu ir atsparumu vaistams. Be to, NCI-H460 ląstelės yra tinkamas modelis priešvėžinių preparatų kūrimui.
- Auginimo terpė
- NCI-H460 kultūrai naudojama RPMI 1640 terpė. Ji papildoma 10 % veršelių serumu, 2,1 mM stabiliu glutaminu ir 2,0 g/l NaHCO3. Terpę reikia keisti 2–3 kartus per savaitę.
- Padvigubėjimo laikas
- NCI-H460 ląstelių skaičiaus padvigubėjimo laikas yra maždaug 33 valandos.
- Augimo tipas
- NCI-H460 plaučių vėžio ląstelės yra adhezyvios.
- Biologinio saugumo lygis
- BSL-4
- Galima įsigyti iš
- „Cytion“ — Užsisakykite NCI-H460
NCI-H460 ląstelės: kilmė ir bendrosios charakteristikos
Ląstelių linijos kilmė ir bendrosios charakteristikos turi didelę įtaką jos pritaikymui moksliniuose tyrimuose. Ši straipsnio dalis padės jums susipažinti su NCI-H460 plaučių vėžio ląstelių kilme ir pagrindinėmis savybėmis. Sužinosite: Kas yra NCI-H460 ląstelės? Kokio tipo yra NCI-H460 ląstelių linija? Kokia yra NCI-H460 morfologija?
- NCI-H460 ląstelių linija buvo gauta iš Europos vyro, sergančio didelių ląstelių plaučių vėžiu, pleuros išsiliejimo. Ją 1982 m. sukūrė A. F. Gazdar ir kolegos.
- NCI-H460 plaučių vėžio ląstelės pasižymi epiteline morfologija.
- NCI-H460 yra naviką sukeliančios ląstelių linijos su hipotriploidiniu kariotipu. Modalinis šių ląstelių chromosomų skaičius yra 57. NCI-H460 ląstelės taip pat pasižymi 58 modaliniais chromosomų skaičiais, pasitaikančiais panašiu dažnumu.
- Šios plaučių vėžio ląstelės turi daug NCI-H460 mutacijų, būdingų nedidelio ląstelių plaučių navikams, pavyzdžiui, NCI-H460 KRAS mutaciją, kuri yra susijusi su ląstelių proliferacija, augimu, invazija ir metastazavimu.
Informacija apie NCI-H460 ląstelių kultivavimą
Norėdami tinkamai elgtis su NCI-H460 ląstelių linija ir ją prižiūrėti, turėtumėte žinoti šiuos pagrindinius dalykus. Čia rasite informaciją apie NCI-H460 ląstelių padvigubėjimo laiką, NCI-H460 auginimo terpę ir pagrindines NCI-H460 plaučių vėžio ląstelių auginimo procedūras.
Svarbiausi NCI-H460 ląstelių auginimo aspektai
Padvigubėjimo laikas:
NCI-H460 ląstelių padvigubėjimo laikas yra maždaug 33 valandos.
Adhezinės ar suspensinės:
NCI-H460 plaučių vėžio ląstelės yra adhezinės.
Subkultivavimo santykis:
NCI-H460 ląstelių linijai rekomenduojamas padalijimo santykis yra 1:2 ir 1:4. Pašalinus seną terpę, adhezyvinės ląstelės nuplaunamos 1x fosfato buferiniu fiziologiniu tirpalu. Po to ląstelės inkubuojamos su „Accutase“ perkėlimo tirpalu 8–10 minučių kambario temperatūroje. Atsiskyrusios ląstelės resuspenduojamos kultūrinėje terpėje ir centrifuguojamos. Surinktos ląstelės vėl resuspenduojamos ir supilamos į naują kolbą kultivavimui.
Auginimo terpė:
NCI-H460 kultūrai naudojama RPMI 1640 terpė. Ji papildoma 10 % veršelių serumu, 2,1 mM stabiliu glutaminu ir 2,0 g/l NaHCO3. Terpę reikia keisti 2–3 kartus per savaitę.
Auginimo sąlygos:
NCI-H460 kultūros laikomos 37 °C temperatūroje drėkinamame inkubatoriuje, į kurį nuolat tiekiamas 5 % CO₂.
Laikymas:
NCI-H460 plaučių vėžio ląstelės gali būti ilgam laikomos skysto azoto garų fazėje arba elektrinėje itin žemos temperatūros šaldiklyje, esant temperatūrai žemiau –150 °C.
Užšaldymo procesas ir terpė:
NCI-H460 ląstelėms užšaldyti ir laikyti naudojama CM-1 arba CM-ACF terpė. Siekiant užtikrinti maksimalų ląstelių gyvybingumą, rekomenduojamas lėtas užšaldymo metodas.
Atšildymo procesas:
Užšaldytos NCI-H460 ląstelės atšildomos iš anksto pašildytame vandens vonioje (37 °C temperatūroje) 40–60 sekundžių, kol lieka tik nedidelis ledo gabalėlis. Atšildytos ląstelės supilamos į šviežią terpę ir centrifuguojamos, kad būtų pašalinti užšaldymo terpės komponentai. Surinktas ląstelių nuosėdas vėl resuspenduojamas, o ląstelės išpilamos į naujas kolbas, kuriose yra augimui skirta terpė. NCI-H460 ląstelėms prisitvirtinti prie kolbos paviršiaus gali prireikti beveik 24 valandų.
Biologinio saugumo lygis:
NCI-H460 plaučių vėžio ląstelės tvarkomos ir laikomos 1 biologinio saugumo lygio laboratorijose.
Paskelbta: 2023 m. | Paskutinis peržiūrėjimas: 2026 m. gegužė
NCI-H460 ląstelių privalumai ir trūkumai
NCI-H460 yra plačiai naudojama ląstelių linija plaučių vėžio tyrimuose. Šiame skyriuje bus aptarti bendrieji NCI-H460 plaučių vėžio ląstelių privalumai ir trūkumai.
Privalumai
NCI-H460 nedidelio ląstelių plaučių vėžio ląstelių linijos privalumai yra šie:
-
Naviko kilmė
NCI-H460 ląstelių linija buvo gauta iš didelių ląstelių plaučių karcinomos sergančio paciento, todėl ji atspindi šį konkretų plaučių vėžio tipą. Jos naudojamos kaip modelis plaučių vėžio biologijai tirti ir naujiems bei veiksmingiems gydymo būdams kurti. NCI-H460 ląstelės turi navikų formavimo potencialą ir gali būti įšvirkščiamos imunodeficituojančioms pelėms, siekiant sukurti in vivo navikų modelius, skirtus navikų augimo, vystymosi ir potencialių vaistų veiksmingumo tyrimams.
-
Didelis proliferacijos greitis
NCI-H460 ląstelės auga sparčiau nei kitų nemelikulinių plaučių vėžio ląstelių linijų, pvz., A549, ląstelės. Šis privalumas padidina jų prieinamumą ir padeda tyrėjams atlikti pakartojamus ir laiko atžvilgiu jautrius eksperimentus.
Trūkumai
Su NCI-H460 plaučių vėžio ląstelėmis susiję trūkumai yra šie:
-
Vienalytiškumas
NCI-H460 ląstelės yra homogeniškos, nes jos buvo gautos iš vieno paciento naviko. Todėl joms paprastai trūksta sudėtingumo ir heterogeniškumo, būdingų pacientų navikams.
NCI-H460 ląstelių taikymas moksliniuose tyrimuose
NCI-H460 plaučių vėžio ląstelės plačiai naudojamos tyrimuose, susijusiuose su plaučių karcinoma. Štai keletas svarbių NCI-H460 ląstelių taikymo moksliniuose tyrimuose pavyzdžių:
- Plaučių vėžio tyrimai: NCI-H460 ląstelės yra neįkainojamas modelis, skirtas tirti ląstelių ir molekulinius mechanizmus, susijusius su naviko vystymusi, augimu ir metastazavimu. Be to, jos naudojamos svarbių signalinių kelių, molekulinių taikinų ir įvairių genetinių mutacijų, susijusių su plaučių vėžio progresavimu, tyrimams. Siekiant veiksmingai ištirti šiuos veiksnius, buvo atlikti keli tyrimai su NCI-H460 ląstelėmis. 2019 m. atliktas tyrimas leido daryti prielaidą, kad pernelyg ekspresuojamas branduolinis ubikvitinis kazeino ir ciklinu priklausomų kinazų substratas (NUCKS) dalyvauja naviko ląstelių augime, reguliuodamas PI3K/AKT signalizacijos kelią [1]. Panašiai, in vitro ir in vivo tyrime, naudojant NCI-H460 ląsteles, buvo tiriamas eIF4E geno vaidmuo. Rezultatai parodė, kad eIF4E genas dalyvauja plaučių karcinomos augime ir angiogenezėje, ir jis gali būti pasirinktas kaip taikinys kuriant perspektyvius vaistus nuo plaučių vėžio [2].
- Vaistų atradimas ir kūrimas: žmogaus plaučių vėžio ląstelių linija NCI-H460 plačiai naudojama vaistų atradimo ir kūrimo tyrimuose. Mokslininkai naudoja šias ląsteles, kad ištirtų naujų vaistų kandidatų, tikslinės terapijos ir gydymo būdų, daugiausia nukreiptų prieš NCI-H460 KRAS mutacijas, toksiškumą ir veiksmingumą. 2023 m. Haoyue Hu ir kolegų atliktame tyrime NCI-H460 ląstelės buvo panaudotos vaisto anlotinibo priešvėžiniam poveikiui tirti. Rezultatai parodė, kad anlotinibas iš dalies paveikė KRAS mutaciją turinčių plaučių vėžio ląstelių augimą, slopindamas MEK/ERK signalizacijos kaskadą [3]. Taip pat, naudojant NCI-H460 ląsteles, buvo tiriamas fenolinio junginio – karnozinės rūgšties – antiproliferacinis ir proapoptotinis aktyvumas [4].
- Atsparumas vaistams: NCI-H460 ląstelių linija yra ideali plaučių karcinomos atsparumo vaistams mechanizmui tirti. Mokslininkai naudoja šias ląsteles vaistų atsparumo modeliams kurti, siekdami identifikuoti pagrindinius genus, molekulinius veiksnius ir signalizacijos kelius. Pavyzdžiui, viename tyrime buvo sukurtos pemetreksedui, daugiatiksliam antifolato preparatui, atsparios NCI-H460 ląstelės, siekiant ištirti pagrindinius pemetreksedo atsparumo molekulinius mechanizmus nedidelio ląstelių plaučių vėžio ląstelėse [5].
Įsigykite NCI-H460 ląstelių liniją: jūsų vartai į plaučių vėžio tyrimus
Moksliniai straipsniai, kuriuose aptariamos NCI-H460 ląstelės
Čia pateikiami keli įdomūs moksliniai straipsniai apie NCI-H460 plaučių karcinomos ląstelių liniją.
Šiame žurnale „Molecules“ (2023 m.) paskelbtame tyrime teigiama, kad natūralus α-1,6-gliukanas BBWPW, išgautas iš juodųjų pupelių, slopina NCI-H460 ląstelių proliferaciją, reguliuodamas PI3K/AKT/MAPK signalinį kelią.
Šiame žurnale „Phytomedicine“ (2019 m.) paskelbtame straipsnyje ištirta, kad dioscin-6′-O-acetatas, naujas natūralus junginys, daro antiproliferacinį poveikį NCI-H460 plaučių vėžio ląstelėms.
miRNA-425-5p skatina plaučių vėžio augimą per PTEN/PI3K/AKT signalizacijos ašį
„BMC Pulmonary Medicine“ (2020 m.) tyrime teigiama, kad mikroRNR-425-5p skatina plaučių karcinomos tumorogenezę per PTEN/PI3K/AKT signalizacijos kelią.
Šiame „Molecular Medicine Reports“ (2017 m.) straipsnyje aptariamas kinalizarino junginio priešvėžinis potencialas ir jo veikimo mechanizmai NCI-H460 bei kitose plaučių vėžio ląstelėse.
Šiame žurnale „Food and Function“ (2019 m.) paskelbtame tyrime pabrėžiamas galimas Eucalyptus globulus Labill. ekstrakto priešvėžinis poveikis, nustatytas naudojant NCI-H460 ląsteles. Rezultatai parodė, kad augalinis ekstraktas šį poveikį pasiekė didindamas p53 ekspresiją NCI-H460 ląstelėse ir moduliuodamas ląstelių ciklo profilį.
Ištekliai apie NCI-H460 ląstelių liniją: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
Čia pateikiami keli internetiniai ištekliai, skirti NCI-H460 plaučių vėžio ląstelėms.
- NCI-H460 ląstelių transfekcija: Šis vaizdo įrašas yra žingsnis po žingsnio vadovas, kaip atlikti NCI-H460 ląstelių transfekciją plazmidine DNR.
Šiose nuorodose pateikiama būtina informacija apie H460 ląstelių kultūrą.
- NCI-H460 ląstelės: šioje svetainėje rasite svarbią informaciją apie NCI-H460 ląstelių auginimo terpę, subkultūravimą, užšaldymo ir atšildymo procedūras.
- NCI-H460 ląstelių perauginimas: Šis dokumentas padės jums susipažinti su NCI-H460 ląstelių linijos perauginimu ir subkultūravimu. Be to, jis taip pat padės jums išmokti NCI-H460 ląstelių transfekcijos protokolą.
NCI-H460 ląstelių linijos tyrimas: dažniausiai užduodami klausimai ir įžvalgos
NCI-H460 ląstelių linija yra gauta iš paciento, sergančio stambiųjų ląstelių plaučių karcinoma, todėl ji yra vertingas modelis šio tipo plaučių vėžiui tirti.
NCI-H460 ląstelės naudojamos plaučių vėžio biologijai tirti, naujiems gydymo būdams kurti ir galimų vaistų veiksmingumui vertinti. Jos taip pat gali būti švirkščiamos į imunodeficitines peles, kad būtų sukurti in vivo naviko modeliai, skirti naviko augimui ir vystymuisi tirti.
Tiek NCI-H460, tiek A549 ląstelių linijos yra kilusios iš plaučių karcinomų, tačiau NCI-H460 yra stambiųjų ląstelių karcinoma, o A549 - adenokarcinoma. Šis histologinio potipio skirtumas turi įtakos jų savybėms ir elgsenai.
Taip, NCI-H460 ląstelės turi navikinį potencialą ir gali būti implantuojamos į imunodeficitines peles, kad būtų sukurti ksenograftų modeliai, palengvinantys stambiųjų ląstelių plaučių karcinomos tyrimus in vivo.
Paklitakselio derinimas su kitais junginiais gali sustiprinti jo citotoksinį poveikį NCI-H460 ląstelėms, o tai gali pagerinti plaučių vėžio gydymo rezultatus.
Taip, NCI-H460 ląstelės ekspresuoja hipoksantino guanino fosforibosiltransferazę, kuri yra būtina nukleotidų apykaitai ir ląstelių proliferacijai.
NCI-H460 ląstelės dažnai naudojamos vėžio ir toksikologijos tyrimuose naviko augimui tirti, junginių citotoksiniam poveikiui vertinti ir atsparumo vaistams mechanizmams tirti.
NCI-H460 ląstelės paprastai ekspresuoja neurofilamentų tripletų baltymus, kurie dalyvauja išlaikant citoskeleto struktūrą ir gali būti svarbūs vėžio ląstelių migracijai ir invazijai.
Be kita ko, κB kelias yra susijęs su NCI-H460 ląstelių proliferacijos ir išgyvenamumo reguliavimu, todėl tai yra potencialūs taikiniai, į kuriuos galima nukreipti gydomąją intervenciją plaučių vėžio atveju.
Taip, NCI-H460 ląstelės dažniausiai naudojamos kaip in vitro modeliai chemoterapinių medžiagų, įskaitant paklitakselį ir karboplatiną, citotoksiniam poveikiui vertinti ir padeda kurti veiksmingus vėžio gydymo metodus.
Literatūra
- Hu, C. ir kt., „NUCKS skatina plaučių vėžio ląstelių proliferaciją, migraciją ir invaziją per Pi3k/Akt signalizacijos kelią“. „Clinical and Investigative Medicine“, 2021 m. 44(2): p. E55–61.
- Qi, X. ir kt., „EGPI-1, naujas eIF4E/eIF4G sąveikos inhibitorius, slopina plaučių vėžio ląstelių augimą ir angiogenezę per Ras/MNK/ERK/eIF4E signalinį kelią“. „Chemico-Biological Interactions“, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H. ir kt., Anlotinibas daro priešvėžinį poveikį KRAS mutaciją turinčioms plaučių vėžio ląstelėms, slopindamas MEK/ERK signalinį kelią. „Cancer Management and Research“, 2020: p. 3579–3587.
- Corveloni, A.C. ir kt., Karnosinė rūgštis pasižymi antiproliferaciniu ir proapoptotiniu poveikiu navikinėse NCI-H460 ir nenavikinėse IMR-90 plaučių ląstelėse. „Journal of Toxicology and Environmental Health“, A dalis, 2020. 83(10): p. 412–421.
- Xu, Y.-L. ir kt., Pemetreksedui atsparių NCI-H460/PMT ląstelių sukūrimas ir charakterizavimas. „Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry“ (buvęs „Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents“), 2019 m. 19(6): p. 731–739.