NCI-H1299 ląstelės: NCI-H1299 plaučių vėžio ląstelių tyrimai ir klinikinė reikšmė
NCI-H1299 yra nemirtinga žmogaus nedidelio ląstelių plaučių vėžio ląstelių linija, plačiai naudojama imunologinės onkologijos, vėžio ir vaistų atradimo tyrimuose. Be to, mokslininkai naudojo šias ląsteles, siekdami ištirti jautrumą vaistams, pagrindinius signalizacijos kelius ir molekulinius mechanizmus, susijusius su plaučių vėžiu. Taip pat šios ląstelės naudojamos virusinių infekcijų, pavyzdžiui, SARS-CoV-2, tyrimams.
- Auginimo terpė
- RPM1 1640 yra ideali NCI-H1299 ląstelių terpė. Ji papildyta 10 % veršelių serumu, 4500 mg/l gliukozės, 2,0 mM L-glutamino, 1 mM natrio piruvato, 1500 mg/l NaHCO₃ ir 10 mM HEPES. Terpę reikia keisti 2–3 kartus per savaitę.
- Padvigubėjimo laikas
- NCI-H1299 ląstelių skaičiaus padvigubėjimo laikas svyruoja nuo 22 iki 30 valandų.
- Augimo tipas
- NCI-H1299 yra adhezyvinė ląstelių linija.
- Biologinio saugumo lygis
- BSL-1
- Galima įsigyti iš
- „Cytion“ — Užsisakykite NCI-H1299
- Bendrosios NCI-H1299 ląstelių charakteristikos ir kilmė
- Informacija apie kultivavimą
- Įsigykite NCI-H1299 ląstelių liniją: aukštos kokybės mokslinių tyrimų priemonės plaučių vėžio biologijos tyrimams
- NCI-H1299 ląstelių privalumai ir trūkumai
- NCI-H1299 ląstelių taikymas moksliniuose tyrimuose
- Moksliniai straipsniai, kuriuose aptariamos NCI-H1299 ląstelės
- Ištekliai, susiję su NCI-H1299 ląstelių linija: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
- Dažnai užduodami klausimai apie NCI-H1299 ląstelių liniją
- Nuorodos
- Dažnai užduodami klausimai
Bendrosios NCI-H1299 ląstelių charakteristikos ir kilmė
Pirmas dalykas, kurį reikia žinoti apie ląstelių liniją, yra jos kilmė ir bendrosios charakteristikos, nes jos padeda suplanuoti jos naudojimą jūsų tyrimuose. Ši straipsnio dalis padės jums sužinoti svarbią informaciją apie NCI-H1299 kilmę ir charakteristikas. Pavyzdžiui, kas yra NCI-H1299 plaučių vėžio ląstelės? Kokio tipo ląstelės yra NCI-H1299? Koks yra NCI-H1299 ląstelių dydis? Kuo skiriasi A549 ir NCI-H1299?
- NCI-H1299 ląstelių linija buvo gauta iš 43 metų amžiaus kaukazietiškos kilmės vyro, sergančio vėžiu, plaučių limfmazgių metastazės.
- Šios ląstelės turi homozigotinę dalinę p53 geno deleciją; todėl jos neekspresuoja p53 baltymo. NCI-H1299 p53 baltymo ekspresijos trūkumas prisideda prie H1299 plaučių vėžio ląstelių proliferacijos tendencijos.
- Be p53, šios nemirtingos ląstelės, kaip pranešama, turi NCI-H1299 KRAS mutaciją, kuri lemia jų augimo, proliferacijos, migracijos ir invazijos savybes.
- NCI-H1299 kariotipas yra beveik diploidinis.
- NCI-H1299 ląstelės turi epitelinių ląstelių morfologiją.
- Šios ląstelės yra plokščios, o jų storis yra mažesnis nei 5 µm.
NCI-H1299 ir A549
NCI-H1299 ir A549 yra nemelikulinio plaučių vėžio ląstelių linijos. NCI-H1299 ląstelės yra agresyvesnės ir jautresnės, palyginti su A549. Abi turi palyginti panašias mutacijas, pvz., KRAS. Tačiau, skirtingai nuo NCI-H1299 ląstelių, A549 ląstelės ekspresuoja P53 geną.
Informacija apie kultūravimą
Ląstelių linijos kultūros išlaikymas nėra lengvas, kol nežinote visos svarbiausios informacijos apie ją, įskaitant: koks yra NCI-H1299 ląstelių skaičiaus padvigubėjimo laikas? Koks yra NCI-H1299 ląstelių sėjimo tankis? Kokia yra NCI-H1299 ląstelių terpė? Kaip auginti NCI-H1299 ląstelių linijas? Šiame skyriuje rasite atsakymus į visus šiuos klausimus apie NCI-H1299 ląstelių auginimą.
Pagrindiniai NCI-H1299 ląstelių auginimo aspektai
Padvigubėjimo laikas:
NCI-H1299 ląstelių dvigubėjimo laikas svyruoja nuo 22 iki 30 valandų.
Adhezyvinė ar suspensinė:
NCI-H1299 yra adhezyvinė ląstelių linija.
Subkultivavimo santykis:
NCI-H1299 ląstelės subkultivuojamos rekomenduojamu santykiu nuo 1:3 iki 1:6. Sėjimui adhezyvinės ląstelės nuplaunamos 1x PBS tirpalu ir inkubuojamos su „Accutase“ perėjimo tirpalu 8–10 minučių kambario temperatūroje. Atsiskyrusios ląstelės sumaišomos su šviežia auginimo terpe ir centrifuguojamos. Po to ląstelių nuosėdos vėl suspenduojamos, o ląstelės supilamos į naujus kolbelius su auginimo terpe.
Augimo terpė:
„RPM1 1640“ yra ideali NCI-H1299 ląstelių terpė. Ji papildoma 10 % veršelių serumu, 4500 mg/l gliukozės, 2,0 mM L-glutamino, 1 mM natrio piruvato, 1500 mg/l NaHCO₃ ir 10 mM HEPES. Terpę reikia keisti 2–3 kartus per savaitę.
Auginimo sąlygos:
NCI-H1299 plaučių vėžio ląstelių kultūros auginamos drėkinamame inkubatoriuje 37 °C temperatūroje su 5 % CO₂ tiekimu.
Laikymas:
NCI-H1299 ląstelių liniją galima ilgam laikui saugoti skysto azoto garų fazėje arba itin žemos temperatūros šaldikliuose, kurių temperatūra yra žemesnė nei -150 °C.
Užšaldymo procesas ir terpė:
CM-1 arba CM-ACF yra NCI-H1299 ląstelių užšaldymo terpės. Ląstelės užšaldomos taikant lėto užšaldymo procesą, kurio metu temperatūra mažėja tik 1 laipsniu per minutę, siekiant išsaugoti ląstelių gyvybingumą.
Atšildymo procesas:
Užšaldytos NCI-H1299 ląstelės greitai maišomos iš anksto įkaitintoje vandens vonioje 37 laipsnių Celsijaus temperatūroje 40–60 sekundžių, kol lieka tik nedidelis ledo gabalėlis. Atšildytos ląstelės įpilamos į šviežią terpę ir gali būti tiesiogiai auginamos naujose kolbose arba centrifuguojamos. Pirmuoju atveju terpę reikia pakeisti po 24 valandų inkubacijos. Centrifugavimas padeda pašalinti užšaldymo terpės elementus. Po to surinktos ląstelės vėl suspenduojamos šviežioje terpėje ir perpilamos į naują kolbą auginimui.
Biologinio saugumo lygis:
NCI-H1299 ląstelių kultūrai tvarkyti reikalinga 1 biologinio saugumo lygio laboratorija.
Įsigykite NCI-H1299 ląstelių liniją: aukštos kokybės mokslinių tyrimų priemonės plaučių vėžio biologijos tyrimams
NCI-H1299 ląstelių privalumai ir trūkumai
Kaip ir kitos žmogaus vėžio ląstelių linijos, NCI-H1299 taip pat turi tam tikrų išskirtinių savybių, susijusių su konkrečiais privalumais ir trūkumais. Čia apibendrinome keletą svarbiausių iš jų.
Privalumai
Pagrindiniai NCI-H1299 nedidelio ląstelių plaučių vėžio ląstelių linijos privalumai yra šie:
-
In vitro plaučių vėžio modelis
NCI-H1299 ląstelių linijos buvo išskirtos iš plaučių karcinomos limfmazgių metastazių, todėl pasižymi palyginti panašiomis savybėmis. Dėl to šios ląstelės gali būti naudojamos kaip in vitro modelis plaučių vėžio biologijai, ląstelių ir molekulinėms mechanizmams tirti, taip pat potencialiems vaistams atrinkti ir išbandyti.
-
Lengva auginti
NCI-H1299 ląsteles lengva auginti ir prižiūrėti mokslinių tyrimų laboratorijoje. Ląstelių kultūrai netaikomi sudėtingi reikalavimai ir procedūros.
-
NCI-H1299 p53 ir NCI-H1299 KRAS mutacijos
NCI-H1299 ląstelėse nėra p53 geno ekspresijos, todėl ląstelės gali intensyviai daugintis. Be to, jos turi KRAS mutaciją, kuri prisideda prie ląstelių augimo, proliferacijos, invazijos ir migracijos. Atsižvelgdami į tai, mokslininkai naudoja H1299 ląsteles, siekdami tirti molekulinius mechanizmus, susijusius su KRAS ir P53 mutacijomis.
Trūkumai
NCI-H1299 ląstelių trūkumai yra šie:
-
Audinių specifiškumas
NCI-H1299 ląstelės kilusios iš plaučių audinio. Todėl jų pritaikomumas daugiausia apsiriboja plaučių karcinomos tyrimais. Jos gali nevisiškai atspindėti kitų vėžio tipų heterogeniškumą ir bendrąsias charakteristikas.
NCI-H1299 ląstelių taikymas moksliniuose tyrimuose
NCI-H1299 ląstelių linija plačiai naudojama plaučių vėžio tyrimuose. Čia paminėtos kelios perspektyvios šios ląstelių linijos taikymo sritys.
- Vėžio biologija: NCI-H1299 ląstelės yra puiki mokslinių tyrimų priemonė, skirta tirti vėžio vystymąsi, progresavimą ir susijusius ląstelių bei molekulinius mechanizmus. Šios ląstelės turi tam tikrų mutacijų, leidžiančių mokslininkams tirti susijusius vėžio ląstelių elgesio modelius, signalizacijos kelius ir genų ekspresijos profilius. Keliuose tyrimuose NCI-H1299 nedidelio ląstelių plaučių karcinomos ląstelių linija buvo panaudota plaučių vėžio biologijai tirti. Pavyzdžiui, 2018 m. atliktame tyrime, naudojant NCI-H1299 ląsteles, buvo tiriamas signalizacijos kelias, susijęs su plaučių vėžio ląstelių apoptoze. Mokslininkai nustatė, kad PI3K/AKT kelias prisideda prie ląstelių proliferacijos, o jo slopinimas gali sukelti vėžio ląstelių mirtį [1]. Taip pat kituose tyrimuose buvo tirti mechanizmai, susiję su NCI-H1299 epitelio-mezenchiminio perėjimo (EMT) procesu. Šiame tyrime buvo iškelta hipotezė, kad ekstraląstelinis baltymas SPARC (sekretuojamas rūgštinis ir cisteinu turtingas baltymas) prisideda prie NCI-H1299 EMT ir migracijos, taigi skatina navikų susidarymą ląstelėse – SPARC baltymas veikia kaip TGF-β1 signalizacijos tarpininkas [2].
- Vaistų atradimas ir atranka: žmogaus plaučių vėžio ląstelių linija NCI-H1299 plačiai naudojama potencialių vaistų toksiškumui ir veiksmingumui įvertinti. Be to, mokslininkai ją naudoja priešvėžinių vaistų veikimo mechanizmams tirti. Tyrimuose šios ląstelės taip pat buvo naudojamos galimiems vaistų taikiniams ir atsparumo mechanizmams nustatyti. Pavyzdžiui, Xiao-Yun Shen ir kolegų atliktame tyrime buvo tiriamas natūralaus junginio bruceino D (BD) priešvėžinis potencialas. Rezultatai parodė, kad BD žymiai slopina NCI-H1299 ląstelių proliferaciją, invaziją ir migraciją. Todėl jį galima laikyti potencialia adjuvantine terapija gydant nedidelio ląstelių plaučių karcinomą [3]. Panašiai viename tyrime buvo vertinamas ksantohumolio citotoksinis poveikis atskirai ir kartu su chemoterapiniu vaistu cisplatinu NCI-H1299 plaučių vėžio ląstelėms [4].
Moksliniai straipsniai, kuriuose nagrinėjamos NCI-H1299 ląstelės
Čia pateikiami kai kurie svarbūs ir dažniausiai cituojami moksliniai straipsniai apie NCI-H1299 plaučių karcinomos ląstelių liniją.
Šis straipsnis paskelbtas žurnale „Human and Experimental Toxicology“ (2021 m.). Tyrime teigiama, kad indolo-3-karbinolis indukuoja H1299 ląstelių apoptozę, padidindamas reaktyviųjų deguonies rūšių (ROS) lygį.
Šis tyrimas buvo paskelbtas 2018 m. žurnale „Cellular Physiology and Biochemistry“. Tyrimo rezultatai parodė, kad kofeino rūgšties ir paklitakselio derinys daro sinergetinį priešvėžinį poveikį nesmulkiųjų ląstelių plaučių vėžio ląstelių linijai NCI-H1299.
Šis mokslinis straipsnis buvo paskelbtas žurnale „Molecular Medicine Reports“ (2018 m.). Tyrime buvo vertinamas triterpenoido saponino tubeimosido-1 priešvėžinis poveikis ir jo veikimo mechanizmai NCI-H1299 ląstelių linijoje.
Pristimerin sukelia apoptozę ir slopina H1299 plaučių vėžio ląstelių proliferaciją bei migraciją
Šiame straipsnyje, paskelbtame žurnale „Journal of Cancer“ (2020 m.), teigiama, kad natūralus junginys pristimerinas slopina NCI-H1299 ląstelių proliferaciją ir migraciją.
VIPR1 geno reguliavimo mechanizmas žmogaus plaučių adenokarcinomos H1299 ląstelėse
Šiame „Medical Oncology“ (2019 m.) žurnale paskelbtame tyrime buvo nagrinėjamas galimas VIPR1 geno perprodukcijos poveikis NCI-H1299 adenokarcinomos ląstelių linijai.
Ištekliai, susiję su NCI-H1299 ląstelių linija: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
Čia pateikiami keli internetiniai ištekliai, susiję su NCI-H1299 ląstelėmis.
- NCI-H1299 transfekcija: šiame vaizdo įraše paaiškinamas NCI-H1299 ląstelių linijų laikinosios transfekcijos protokolas.
- Adhezyvios ląstelių linijos subkultivavimas: šiame vaizdo įraše sužinosite apie bendrą adhezyvios ląstelių linijos subkultivavimo procedūrą.
Šioje nuorodoje pateikiama informacija apie NCI-H1299 ląstelių kultūrą.
- NCI-H1299 ląstelių linija: Ši nuoroda padės jums susipažinti su NCI-H1299 ląstelių perauginimo ir transfekcijos protokolu.
Dažniausiai užduodami klausimai apie NCI-H1299 ląstelių liniją
Literatūra
- Gu, J. ir kt., EGCG sukeltos apoptozės plaučių vėžio ląstelėse, slopinant PI3K/Akt signalizacijos kelią, tyrimas. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): p. 4557–4563.
- Sun, W. ir kt., „SPARC veikia kaip TGF-β1 tarpininkas, skatindamas epitelio-mezenchiminį perėjimą A549 ir H1299 plaučių vėžio ląstelėse“. Biofactors, 2018. 44(5): p. 453–464.
- Shen, X.-Y. ir kt., Tyrimas apie bruceino D veikimo mechanizmą gydant nesmulkiųjų ląstelių plaučių vėžio H1299 ląsteles. „World Journal of Traditional Chinese Medicine“, 2020. 6(4): p. 500.
- Long, B. ir kt., „Ksantohumolio ir jo derinio su cisplatinu citotoksinis poveikis žmogaus metastaziniam plaučių vėžiui H1299 ląstelėms“. „Journal of Advances in Medicine and Medical Research“, 2019. 30(9): p. 1–15.