KG-1 ląstelių linija
KG-1 ląstelių linijos bendrosios charakteristikos ir kilmė
Ląstelių linijos kilmė ir bendrosios charakteristikos padeda tyrėjui nuspręsti, kaip ją panaudoti savo darbe. Prieš pradėdami dirbti su ja, galite išnagrinėti šią informaciją. Ši straipsnio dalis skirta KG-1 makrofagų kilmei ir charakteristikoms. Čia sužinosite: Kas yra KG-1 ląstelės? Kas yra KG-1a ląstelių linija? Kokia yra KG-1 ląstelių linijos kilmė? Kokia yra KG-1 morfologija?
- KG-1 yra limfoblastų tipo ląstelių linija, gauta iš kaukaziečio vyro (59 metų), sergančio ūmia mielogenine leukemija, kaulų čiulpų aspirato. Ją 1978 m. sukūrė Koeffleris ir Golde. Šios ląstelės daugiausia yra promielocitų arba mieloblastų brendimo stadijoje [1].
- KG-1 ląstelės pasižymi limfoblastams būdinga morfologija.
- KG-1 ląstelių linijos kariotipas pasižymi pseudodiploidiniu modaliniu chromosomų skaičiumi.
KG-1 ir KG-1a
KG-1a yra tėvinės KG-1 ląstelių sublinija. Ji buvo išauginta po 35 KG-1 ląstelių linijos pasėlių. Palyginti su KG-1 ląstelių linija, ji yra mažiau diferencijuota. Be to, ši sublinija yra mažiau subrendusi citochemiškai, morfologiškai ir funkciniu požiūriu, palyginti su pirminiu ląstelių kamienu (KG-1).
Informacija apie KG-1 ląstelių linijos auginimą
Šiame straipsnio skyriuje bus pateikta visa būtina informacija apie KG-1 ląstelių kultivavimą, kuri gali palengvinti jūsų darbą. Čia sužinosite: koks yra KG-1 ląstelių linijos dvigubėjimo laikas? Kokios yra KG-1 makrofagų kultivavimo sąlygos? Kaip kultivuoti KG-1 ląsteles?
Pagrindiniai KG-1 ląstelių auginimo aspektai
Padvigubėjimo laikas:
KG-1 ląstelių dvigubėjimo laikas yra maždaug 45 valandos. Tačiau jis gali skirtis priklausomai nuo auginimo sąlygų.
Adherentinis ar suspensinis auginimas:
KG-1 ląstelės auga suspensijoje.
Ląstelių tankis:
Optimalus KG-1 ląstelių linijos tankis yra nuo 1 iki 3 x 105 ląstelių/ml. Norint atlikti subkultūrą, ląstelių suspensija perkelia į sterilią mėgintuvėlį ir centrifuguojama. Į surinktas ląsteles įpilama šviežios terpės ir jos atsargiai resuspenduojamos. Vėliau ląstelės išpilamos į naujus kolbelius ir auginamos esant optimaliam ląstelių tankiui. Ląsteles galima dalyti, kai jos pasiekia maksimalų ląstelių tankį – 1–2 × 10⁶ ląstelių/ml.
Auginimo terpė:
IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium), kurio sudėtyje yra 10 % FBS, 4,5 g/l gliukozės, 4 mM L-glutamino, 1,0 mM natrio piruvato ir 3,0 g/l NaHCO₃, naudojama KG-1 ląstelių kultivavimui. Terpę reikia keisti kas tris dienas.
Auginimo sąlygos:
KG-1 AML ląstelių linija auginama drėgname inkubatoriuje 37 °C temperatūroje ir esant 5 % CO₂ koncentracijai.
Laikymas:
Užšaldytos ląstelės laikomos skysto azoto garų fazėje arba elektrinėje itin žemos temperatūros šaldiklyje, esant temperatūrai žemiau -150 °C, siekiant išsaugoti ląstelių gyvybingumą.
Užšaldymo procesas ir terpė:
KG-1 ląstelėms užšaldyti tinka CM-1 arba CM-ACF terpė. Ląstelės užšaldomos taikant lėto užšaldymo procesą, siekiant apsaugoti jas nuo šoko. Šis metodas leidžia temperatūrą mažinti palaipsniui – 1 °C per minutę.
Atšildymo procesas:
Ląstelės atšildomos iš anksto įkaitintoje 37 °C vandens vonioje, kol lieka tik nedidelis ledo gabalėlis. Į atšildytas ląsteles įpilama šviežios terpės ir jos centrifuguojamos, kad būtų pašalinti užšaldymo terpės komponentai. Ląstelių nuosėdos atsargiai resuspenduojamos ir supilamos į naujas kolbas, kuriose yra auginimo terpė.
Biologinio saugumo lygis:
KG-1 ląstelių kultūrų išlaikymui būtina 1-ojo biologinio saugumo lygio laboratorija.
Paskelbta: 2023 m. | Paskutinis peržiūrėjimas: 2026 m. gegužė
- KG-1 ląstelių linija: privalumai ir trūkumai
- KG-1 ląstelių pritaikymas moksliniuose tyrimuose
- Publikacijos apie KG-1 ląsteles
- Informacija apie KG-1 ląstelių linijos kultivavimą
- KG-1 ląstelių linijos bendrosios charakteristikos ir kilmė
- 6. KG-1 ląstelių linijos ištekliai: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
- Dažnai užduodami klausimai
KG-1 ląstelių linija: privalumai ir trūkumai
Kaip ir kitos ląstelių linijos, KG-1 mieloidinės leukemijos ląstelių linija taip pat turi daug privalumų ir trūkumų. Šiame skyriuje aptarsime keletą svarbiausių iš jų, kurie gali būti lemiamais veiksniais sprendžiant, ar ją naudoti savo tyrimuose.
Privalumai
Pagrindiniai KG-1 ląstelių privalumai yra šie:
-
Lengvas auginimas
KG-1 ląstelės lengvai auginamos mokslinių tyrimų laboratorijose, nes jų auginimo reikalavimai yra nesudėtingi. Dėl paprastos priežiūros ir auginimo sąlygų jos prieinamos plačiam mokslininkų ratui, turinčiam pagrindinę ląstelių kultivavimo įrangą.
-
Ūminės mieloidinės leukemijos (AML) modelis
KG-1 AML ląstelių linija, gauta iš vyro, sergančio ūmia mieloidine leukemija (AML), yra vertinga priemonė AML biologijai tirti ir potencialiems gydymo būdams tirti, suteikianti įžvalgų apie šios ligos pagrindinius mechanizmus ir gydymo strategijas.
Apribojimai
Su KG-1 ląstelių linija susiję apribojimai yra šie:
-
In vitro modelis
KG-1 ląstelės yra vertingas in vitro modelis AML tyrimams; tačiau svarbu pažymėti, kad jos gali nevisiškai atspindėti ligos sudėtingumą in vivo, nes tai yra supaprastintas ląstelių modelis, kuris gali neapimti visų AML biologijos aspektų.
KG-1 ląstelių pritaikymas moksliniuose tyrimuose
KG-1 siūlo keletą perspektyvių pritaikymų biomedicininiuose tyrimuose. Kai kurie svarbūs tyrimai, kuriuose naudojami KG-1 makrofagai, apima:
- Vėžio tyrimai: KG-1 ląstelės buvo gautos iš ūminės mieloidinės leukemijos paciento, todėl jos laikomos vertinga tyrimo priemone, skirta AML biologijai tirti. Mokslininkai naudoja šias ląsteles, siekdami ištirti ląstelinį ir molekulinį mechanizmą, skatinantį AML vystymąsi, augimą ir atsparumą vaistams. Tai taip pat apima naujų biomarkerių, genų mutacijų ir signalinių kelių, susijusių su AML, identifikavimą ir atradimą. Pavyzdžiui, 2019 m. atliktame tyrime buvo nustatyta, kad ilgas nekoduojantis RNR linc00239 skatina atsparumą doksorubicinui ir piktybinį elgesį ūminės mieloidinės leukemijos ląstelėse KG-1. Tolesni tyrimai parodė, kad lncRNA aktyvuoja PI3K/Akt/mTOR signalizacijos kelią, kad sukeltų šiuos poveikius AML ląstelėse [2].
- Toksikologija: KG1 ląstelių linija plačiai naudojama toksikologiniuose tyrimuose. Mokslininkai tiria potencialių terapinių agentų, įskaitant chemoterapinius vaistus ir tikslinės terapijos preparatus, toksiškumą ir veiksmingumą KG1 mieloidinės leukemijos ląstelėse, siekdami nustatyti perspektyvius vaistų kandidatus būsimiems ikiklinikiniams ir klinikiniams vertinimams. 2018 m. atliktame tyrime buvo analizuojamas doksorubicino turinčių nano-niosomų toksiškumas KG1 AML ląstelių linijoje. Tyrime buvo pateikta hipotezė, kad nano-niosomas yra tinkamas vaistų pristatymo nešiklis, nes jis padidina gydymo veiksmingumą [3]. Kito tyrimo metu mokslininkai nagrinėjo iš Urtica dioica augalo lapų paruoštos dilgėlių arbatos terapinį poveikį. Tyrimas parodė, kad šis vandeninis augalo lapų ekstraktas turi priešvėžinį poveikį ūminės mieloidinės leukemijos ląstelėms KG-1 ir U937 [4].
Publikacijos apie KG-1 ląsteles
Šiame straipsnio skyriuje pateikiama keletas įdomių mokslinių publikacijų apie KG-1 ląsteles.
Šis straipsnis buvo paskelbtas žurnale „Journal of Cellular Physiology“ (2019 m.). Tyrime buvo iškelta hipotezė, kad kvercetino junginys padidina KG-1 AML ląstelių linijos jautrumą TNF susijusiam apoptozę indukuojančiam ligandui (TRAIL) ir gali sustiprinti TRAIL sukelto citotoksiškumo poveikį ląstelėse.
KLF8 skatina ūminės mieloidinės leukemijos ląstelių augimą ir glikolizę per AKT/mTOR signalinį kelią
Šiame straipsnyje, paskelbtame žurnale „Tropical Journal of Pharmaceutical Research“ (2022 m.), teigiama, kad krüppel-panašaus transkripcijos faktoriaus 8 ekspresijos sumažinimas slopina AML ląstelių proliferaciją ir glikolizę, skatindamas apoptozę per AKT/mTOR signalinio kelio reguliavimą.
Sorafenibo ir arseno trioksido poveikis U937 ir KG-1 ląstelių linijoms: apoptozė ar autofagija?
Šiame tyrime, paskelbtame žurnale „Cell Journal“ (Yakhteh) (2020 m.), buvo tiriamas galimas arseno trioksido ir sorafenibo poveikis U937 ir KG-1 ląstelėms.
Šiame tyrime, paskelbtame žurnale „Medical Oncology“ (2020 m.), buvo vertinami OXPHOS ir glikolizė kaip terapiniai taikiniai AML ląstelių linijoje KG-1.
2020 m. žurnale „Drug Design, Development, and Therapy“ paskelbtame straipsnyje teigiama, kad kurkumino ir talidomido junginiai sinergiškai sukelia apoptozę KG-1 ląstelėse, mažindami STAT3 ir Bcl-xL ekspresiją.
6. Ištekliai, susiję su KG-1 ląstelių linija: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
Toliau pateikiami keli internetiniai ištekliai, susiję su KG-1 ląstelėmis.
- Suspensinių ląstelių subkultūravimas: šiame vaizdo įraše aprašomas KG-1 tipo suspensinių ląstelių kultūrų subkultūravimo protokolas.
Šioje nuorodoje pateikiamas KG-1 ląstelių kultūros protokolas:
- KG-1 ląstelių linija: šioje svetainėje pateikiama pagrindinė informacija apie KG-1 ląstelių linijos kultūrą. Joje rasite informaciją apie ląstelių linijos terpius bei protokolus, skirtus subkultūravimui ir kriokonservuotų bei proliferacinių kultūrų tvarkymui.
Nuorodos
- Pelliccia, F., V. Ubertini ir N. Bosco, „Molekulinės citogenetinės analizės svarba prieš naudojant ląstelių linijas moksliniuose tyrimuose: KG-1a leukemijos ląstelių linijos atvejis“. „Oncol Lett“, 2012. 4(2): p. 237–240.
- Yang, Y. ir kt., Ilga nekoduojanti RNR linc00239 skatina piktybinius pokyčius ir atsparumą doksorubicinui, iš dalies aktyvuodama PI3K/Akt/mTOR signalinį kelią ūminės mieloidinės leukemijos ląstelėse. „Oncology Reports“, 2019. 41(4): p. 2311–2320.
- Bahrami-Banan, F. ir kt., Doksorubicino turinčių nano-niosomų paruošimas ir tyrimas bei jų toksiškumo įvertinimas ūminės mieloblastinės leukemijos ląstelių linijoje KG-1. „Payavard Salamat“, 2018. 12(4): p. 309–323.
- Hodroj, M.H. ir kt., Dilgėlių arbata slopina ūminės mieloidinės leukemijos ląstelių augimą in vitro, skatindama apoptozę. „Nutrients“, 2020 m. 12(9): p. 2629.