BEWO ląstelių linija
BeWo yra iš žmogaus choriokarcinomos gauta ląstelių linija, plačiai naudojama biomedicininiuose tyrimuose. Ji yra vertingas in vitro modelis, skirtas tirti sudėtingą placentos vystymosi ir žmogaus trofoblastų sincitizacijos procesą. Mokslininkai taip pat naudoja šias ląsteles trofoblastų elgsenos, hormonų gamybos ir medžiagų pernašos per placentą tyrimams. Be to, BeWo ląstelės taip pat naudojamos toksikologijos, infekcijų ir ligų perdavimo tyrimuose.
Šiame straipsnyje pateikiama pagrindinė informacija apie BeWo ląsteles, kuri gali padėti jums dirbti su jomis savo tyrimuose. Straipsnyje aptariama:
- Bendrosios BeWo ląstelių charakteristikos ir kilmė
- BeWo ląstelių linija: informacija apie kultivavimą
- BeWo ląstelių linijos privalumai ir trūkumai
- BeWo ląstelių taikymas moksliniuose tyrimuose
- Moksliniai straipsniai apie BeWo ląsteles
- Ištekliai, susiję su BeWo ląstelių linija: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
Bendrosios BeWo ląstelių charakteristikos ir kilmė
Išankstinės žinios apie ląstelių linijos kilmę ir bendrąsias charakteristikas yra labai svarbios ją naudojant moksliniuose tyrimuose. Šioje straipsnio dalyje aptariama BeWo ląstelių linijos kilmė, charakteristikos ir daug daugiau. Čia sužinosite: Kas yra BeWo choriokarcinomos ląstelių linija? Kas yra BeWo sincitizacija? Iš kur kilusios BeWo ląstelės? Kokia yra BeWo ląstelių morfologija? Koks yra BeWo ploidumas?
- Placentos ląstelių linija BeWo atsirado 1968 m. iš piktybinės gestacinės choriokarcinomos, aptiktos vyriškojo vaisiaus placentoje [1]. Taigi ji yra neįkainojamas modelis placentos tyrimams.
- BeWo ląstelės pasižymi epitelio tipo morfologija.
- BeWo ląstelės yra palyginti mažos, jų dydis svyruoja nuo 20 iki 30 µm [2].
- BeWo ląstelės pasižymi stabiliu kariotipu. Jų kamieninių ląstelių linijos skaičius yra hipotetraploidinis. Modalinis BeWo ląstelių chromosomų skaičius yra 86. Jis gali svyruoti nuo 71 iki 178.
- BeWo ląstelės gamina keletą hormonų, t. y. žmogaus chorioninį somatomamotropiną, žmogaus chorioninį gonadotropiną (hCG) ir steroidinius hormonus.
- BeWo ląstelės ekspresuoja molekulinius žymeklius, įskaitant CK 7, E-kadheriną ir VE-kadheriną.
B30 sublinija
B30 yra BeWo ląstelių sublinija. Ji naudojama maistinių medžiagų įsisavinimui ir transportavimui tirti. Tai priskiriama jų intensyviam augimui ant akytųjų membranų.
BeWo ir JEG-3
BeWo ir JEG-3 ląstelių linijos yra gautos iš choriokarcinomų ir naudojamos placentos tyrimams. BeWo ląstelės gamina mažesnį kiekį hormonų nei JEG-3, pvz., žmogaus chorioninį gonadotropiną (hCG) ir estradiolį.
BeWo ląstelių linija: informacija apie auginimą
Ląstelių kultūros išlaikymas gali būti sudėtingas, jei nežinote svarbiausių detalių. Pavyzdžiui: koks yra BeWo ląstelių padvigubėjimo laikas? Kas yra BeWo ląstelių terpė? Kaip auginti BeWo ląstelių liniją? Ir kaip užšaldyti BeWo ląsteles?
Svarbiausi BeWo ląstelių auginimo aspektai
Padvigubėjimo laikas:
BeWo ląstelių populiacijos dvigubėjimo laikas yra maždaug 30 valandų.
Adhezyvinė ar suspensinė:
BeWo yra adhezyvinė ląstelių linija.
Ląstelių sėjimo tankis:
Rekomenduojamas BeWo ląstelių sėjimo tankis yra 1 x 10⁴ ląstelių/cm². Prieš sėjimą iš ląstelių pašalinama sena terpė, o ląstelės nuplaunamos 1x PBS tirpalu. Po to įpilama „Accutase“ (perkelimo tirpalo), o ląstelės inkubuojamos 8–10 minučių kambario temperatūroje. Tada atsiskyrusios ląstelės sumaišomos su auginimo terpe ir centrifuguojamos. Surinktos ląstelės vėl suspenduojamos ir supilamos į naują kolbą.
Auginimo terpė:
BeWo ląstelėms auginti naudojama „Ham’s F12K“ terpė, kurioje yra 10 % FBS, 2,0 mM L-glutamino, 2,0 mM natrio piruvato ir 2,5 g/l NaHCO₃. BeWo ląstelių terpę reikia keisti 2–3 kartus per savaitę.
Auginimo sąlygos:
BeWo ląstelės laikomos drėkinamame inkubatoriuje, nustatytame 37 laipsnių Celsijaus temperatūrai ir su 5 % CO₂ tiekimu.
Laikymas:
Užšaldytos BeWo ląstelės laikomos žemesnėje nei -150 °C temperatūroje elektriniame itin žemos temperatūros šaldiklyje arba skysto azoto garų fazėje.
Užšaldymo procesas ir terpė:
BeWo ląsteles rekomenduojama užšaldyti CM-1 arba CM-ACF užšaldymo terpėje. Ląstelės užšaldomos taikant lėto užšaldymo metodą. Šis metodas leidžia temperatūrai sumažėti tik 1 laipsniu per minutę, taip apsaugant ląsteles nuo šoko ir išsaugant jų gyvybingumą.
Atšildymo procesas:
Užšaldytos ląstelės atšildomos jas panardinant į iš anksto nustatytą 37 °C vandens vonią 40–60 sekundžių, kol lieka tik nedidelis ledo gabalėlis. Tada įpilama šviežios auginimo terpės, o ląstelės centrifuguojamos, kad būtų pašalinti užšaldymo terpės komponentai. Surinktas ląstelių nuosėdas vėl suspenduojamas ir perpilamas į kultūrinę kolbą auginimui.
Biologinio saugumo lygis:
BeWo ląstelių kultūroms tvarkyti ir prižiūrėti reikalinga 1 lygio biologinio saugumo laboratorija.
Paskelbta: 2023 m. | Paskutinis peržiūrėjimas: 2026 m. gegužė
- BeWo ląstelių linijos privalumai ir trūkumai
- BeWo ląstelių naudojimas moksliniuose tyrimuose
- BeWo ląstelių linija: informacija apie kultivavimą
- Bendrosios BeWo ląstelių charakteristikos ir kilmė
- 5. Moksliniai straipsniai apie BeWo ląsteles
- Ištekliai, susiję su BeWo ląstelių linija: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
- Dažnai užduodami klausimai
BeWo ląstelių linijos privalumai ir trūkumai
BeWo ląstelės pasižymi unikaliomis savybėmis ir turi tam tikrų privalumų bei trūkumų. Šiame skyriuje aptarsime keletą svarbiausių iš jų.
Privalumai
Pagrindiniai BeWo choriokarcinomos ląstelių linijos privalumai yra šie:
-
In vitro placentos ląstelių modelis
BeWo ląstelės suteikia in vitro modelį trofoblastų ląstelių elgesio ir placentos sincitizacijos tyrimams, atkartojant procesus, kuriuos sunku stebėti in vivo.
-
Hormonų gamyba
BeWo ląstelės išskiria hormonus, pvz., hCG ir placentos laktogeną, todėl jos yra vertingos hormonų reguliacijos tyrimams ir reprodukcinės biologijos moksliniams tyrimams.
Trūkumai
BeWo trofoblastų ląstelių trūkumai yra šie:
-
Vėžinių ląstelių linija
BeWo ląstelės buvo gautos iš choriokarcinomos, kuri yra placentos navikas. Ši kilmė gali nevisiškai atspindėti normalią placentos ląstelių funkciją.
BeWo ląstelių taikymas moksliniuose tyrimuose
BeWo ląstelių linija plačiai naudojama placentos tyrimuose. Čia paminėti keli konkretūs šios ląstelių linijos pritaikymo atvejai:
- Placentos ir nėštumo tyrimai: BeWo ląstelės yra labai svarbios placentos ir nėštumo tyrimuose. Pavyzdžiui, mokslininkai naudoja šias ląsteles, kad ištirtų medžiagų, įskaitant vaistus, maistines medžiagas ir toksinus, pernašą per placentos barjerą. Be to, jie taip pat tiria hormonų, įskaitant žmogaus chorioninį gonadotropiną (hCG), placentos laktogeną ir steroidinius hormonus, gamybą ir reguliavimą. Tai svarbu norint suprasti hormoninius pokyčius nėštumo metu. 2018 m. atliktuose tyrimuose buvo tiriamas bromintų antipirenų (BFR) poveikis sulfotransferazės aktyvumui žmogaus trofoblastinių ląstelių linijoje (BeWo). Šis fermentas dalyvauja reguliuojant skydliaukės hormono koncentraciją ląstelėse [3].
- Infekcijų ir ligų tyrimai: BeWo ląstelės taip pat naudojamos patogenų ir placentos ląstelių sąveikos tyrimams. Šie tyrimai yra vertingi siekiant suprasti ligas, kurios gali būti perduodamos iš motinos vaisiui, ir kuriant strategijas vaisiaus sveikatai apsaugoti. Be to, ši ląstelių linija padeda mokslininkams tirti nėštumo metu kylančias komplikacijas, pavyzdžiui, preeklampsiją. Pavyzdžiui, 2023 m. Michalina Bralewska atliktame tyrime, kuriame buvo naudojamas BeWo trofoblastų ląstelių modelis, nustatyta, kad tiek chromograninas A (CgA), tiek iš jo gautas peptidas, katestatinas (CST), gali turėti įtakos sudėtingame preeklampsijos (PE) patogenezės procese [4]. Vėliau kituose tyrimuose buvo tiriamas trichosantino potencialas kovojant su vėžiu, naudojant BeWo choriokarcinomos ląstelių liniją. Tyrėjai taip pat dėjo papildomas pastangas atrasti biomarkerius, atlikdami lyginamąją proteomikos analizę prieš eksperimentą ir po jo [5].
5. Moksliniai straipsniai apie „BeWo“ ląsteles
Čia pateikiami keli svarbūs moksliniai straipsniai, kuriuose aptariamos BeWo trofoblastų ląstelės.
Šiame tyrime, paskelbtame žurnale „Frontiers in Bioscience-Landmark“ (2022 m.), teigiama, kad AMPK signalizacija aktyvuoja mitofagiją BeWo trofoblastų ląstelėse per FUNDC1 ir PRKN palengvinamus mitofagijos kelius. Dėl to mitofagija padeda išlaikyti ATP gamybą ir mitochondrijų membranos potencialą.
Šis straipsnis buvo paskelbtas žurnale „Animal Cells and Systems“ (2020 m.). Tyrime teigiama, kad etilparabenas tarpininkauja BeWo ląstelių apoptozei reguliuodamas kaspazės 3 kelią.
Šiame tyrime, paskelbtame žurnale „Drug Metabolism and Disposition“ (2023 m.), buvo naudojamos placentos ląstelių linijos, įskaitant BeWo, JAR, JEG-3 ir HTR-8/SVneo, siekiant ištirti ksenobiotikų ir steroidų kaupimąsi ląstelėse.
Šiame moksliniame straipsnyje, paskelbtame žurnale „International Journal of Molecular Medicine“ (2020 m.), teigiama, kad apelin, APJ receptoriaus ligandas, skatina BeWo ląstelių proliferaciją per APJ ir ERK1/2, stat3 bei AMPK signalizacijos kelius. Taigi, tai galėtų būti esminis adipokinas, reguliuojantis placentos vystymąsi.
Šiame „Epilepsia“ (2021) žurnale paskelbtame tyrime buvo tiriamas vaisiaus maistinių medžiagų ir vaistų nuo traukulių poveikis cholino transporteriams žmogaus kilmės trofoblastinių ląstelių linijoje BeWo.
Ištekliai apie „BeWo“ ląstelių liniją: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
Čia pateikiami keli internetiniai ištekliai apie „BeWo“ ląsteles:
- In vitro transfekcija: Šis vaizdo įrašas padės jums susipažinti su in vitro plazmidinės DNR transfekcijos protokolu adhezyviosioms ląstelėms.
Šioje nuorodoje pateikiama informacija apie BeWo ląstelių kultūrą:
- BeWo ląstelės: šioje svetainėje pateikiama svarbi informacija apie BeWo ląstelių linijos kultūrą. Tai apima informaciją apie ląstelių terpę ir kultivavimo sąlygas. Taip pat pateikiami subkultivavimo ir kriokonservuotų bei proliferacinių kultūrų tvarkymo protokolai.
Nuorodos
- Weber, M., et al., Cytogenomics of six human trophoblastic cell lines. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
- Kolokol'tsova, T., et al., Ilgalaikėje kultūroje esančių trofoblastų charakteristikos. Eksperimentinės biologijos ir medicinos biuletenis, 2017. 164: p. 259–265.
- Leonetti, C.P., C.M. Butt ir H.M. Stapleton, „Bromintų antipireno cheminių medžiagų poveikis skydliaukės hormonų sulfotransferazės aktyvumui žmogaus choriokarcinomos placentos ląstelių linijoje BeWo“. Chemosphere, 2018. 197: p. 81–88.
- Bralewska, M., T. Pietrucha ir A. Sakowicz, CgA kilmės CST baltymų lygio sumažėjimas HTR-8/SVneo ir BeWo trofoblastinių ląstelių linijose, sukeltas preeklampsijos aplinkos. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): p. 7124.
- Hu, Y. ir kt., Lyginamoji proteominė analizė, atliekant vaisto trichosantino pridėjimą į BeWo ląstelių liniją. Molecules, 2022. 27(5): p. 1603.