BxPC-3 ląstelių linija
BxPC-3 yra iš žmogaus gauta kasos vėžio ląstelių linija. Ji plačiai taikoma vėžio tyrimuose. Mokslininkai šias ląsteles naudoja daugiausia kasos vėžio biologijai tirti, terapiniams taikiniams nustatyti ir vaistams nuo vėžio kurti.
- Auginimo terpė
- BxPC-3 ląstelių linijos kultūrai naudojama RPMI 1640 terpė. Ji papildoma 10 % veršelių serumu, 2,1 mM stabiliu glutaminu ir 2,0 g/l NaHCO3, siekiant užtikrinti idealų ląstelių augimą. Terpę reikia keisti 2–3 kartus per savaitę.
- Padvigubėjimo laikas
- BxPC-3 ląstelių dvigubėjimo laikas svyruoja nuo 48 iki 60 valandų.
- Augimo tipas
- BxPC-3 yra adhezyvinė ląstelių linija.
- Biologinio saugumo lygis
- BSL-3
- Galima įsigyti iš
- Cytion — Užsisakykite BxPC-3
Šiame straipsnyje pateikiama svarbi informacija apie BxPC-3 ląstelių liniją, kuri gali labai padėti jums dirbant su ja. Pagrindiniai aptariami klausimai:
- Bendrą informaciją ir BxPC-3 ląstelių linijos kilmę
- BxPC-3 ląstelių kultivavimą
- BxPC-3 ląstelių linija: privalumai ir trūkumai
- BxPC-3 ląstelių pritaikymas moksliniuose tyrimuose
- Moksliniai straipsniai apie BxPC-3 ląsteles
- Ištekliai, susiję su BxPC-3 ląstelių linija: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
- Bendroji informacija ir BxPC-3 ląstelių linijos kilmė
- BxPC-3 ląstelių kultivavimas
- BxPC-3 ląstelių linija: privalumai ir trūkumai
- BxPC-3 ląstelių pritaikymas moksliniuose tyrimuose
- 5. Moksliniai straipsniai apie BxPC-3 ląsteles
- Ištekliai, susiję su BxPC-3 ląstelių linija: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
- Dažnai užduodami klausimai
Bendroji informacija ir BxPC-3 ląstelių linijos kilmė
Žinios apie ląstelių linijos kilmę yra labai svarbios jos pritaikymui moksliniuose tyrimuose. Susipažinimas su jos savybėmis, įskaitant morfologiją, ląstelių dydį ir ploidiją, leidžia ją naudoti paprasčiau ir patogiau. Čia sužinosite apie BxPC-3 ląstelių kilmę ir bendruosius požymius: Kas yra BxPC-3 ląstelės? Kas yra BxPC-3 ląstelių linija? Kokia yra BxPC-3 ląstelių linijos kilmė? Kokia yra BxPC-3 morfologija?
- BxPC-3, žmogaus kasos karcinomos ląstelės, buvo gautos 1986 m. iš 61 metų amžiaus europietės, sergančios kasos adenokarcinoma. Buvo patvirtinta, kad šios ląstelės yra tumorigeninės net ir po to, kai pacientei buvo atliktos kelios radioterapijos ir chemoterapijos sesijos. Taigi, sukurta ląstelių linija yra neįkainojamas modelis vėžio vystymosi ir progresavimo tyrimams.
- BxPC-3 ląstelės turi epitelinių ląstelių morfologiją.
- Tipinis BxPC-3 chromosomų skaičius yra 59. Šios ląstelės turi homozigotinę deleciją 18q chromosomoje, kuri koduoja SMAD4/DPC4 baltymą. Be to, ląstelių linijoje nėra BxPC-3 kras mutacijos, paplitusios tarp kasos navikų. Šiose kasos vėžio ląstelėse taip pat randama BxPC-3 BRAF delecija.
Kuo skiriasi BxPC3 ir PANC-1?
BxPC-3 PADC (kasos latakų adenokarcinoma) ir PANC-1 ląstelės yra pirminės kasos vėžio ląstelių linijos su epiteline morfologija. Pirmoji ląstelių linija turi daugiau epitelinių savybių, o antroji – daugiau mezenchiminių savybių [1].
BxPC-3 ląstelių auginimas
BxPC-3 ląstelių linija plačiai naudojama vėžio tyrimų laboratorijose. Norint veiksmingai kultivuoti šią kasos vėžio ląstelių liniją, reikia žinoti šiuos pagrindinius dalykus. Sužinosite: koks yra BxPC-3 ląstelių padvigubėjimo laikas? Kaip kultivuoti BxPC-3 ląstelių liniją?
Svarbiausi BxPC-3 ląstelių auginimo aspektai
Populiacijos dvigubėjimo laikas:
BxPC-3 ląstelių dvigubėjimo laikas svyruoja nuo 48 iki 60 valandų.
Adhezyvinės ar suspensinės:
BxPC-3 yra adhezyvinė ląstelių linija.
Padalijimo santykis:
BxPC-3 ląstelės subkultivuojamos santykiu nuo 1:2 iki 1:4. Ląstelės nuplaunamos 1 x PBS ir inkubuojamos su perkelimo tirpalu, vadinamu accutase. Po 8–10 minučių į ląsteles įpilama šviežios terpės, o ląstelės centrifuguojamos. Osadą vėl resuspenduoja terpėje, o ląsteles supila į naują kultūrinį indą augimui.
Auginimo terpė:
BxPC-3 ląstelių linijos kultūrai naudojama RPMI 1640 terpė. Ji papildoma 10 % veršelių serumu, 2,1 mM stabiliu glutaminu ir 2,0 g/l NaHCO3, siekiant užtikrinti idealų ląstelių augimą. Terpę reikia keisti 2–3 kartus per savaitę.
Auginimo sąlygos:
BxPC-3 ląstelių kultūros laikomos 37 °C drėgname inkubatoriuje, prijungtame prie 5 % CO2 tiekimo.
Laikymas:
Užšaldytos ląstelės paprastai laikomos žemesnėje nei -150 °C temperatūroje arba skysto azoto garų fazėje, siekiant apsaugoti ląstelių gyvybingumą.
Užšaldymo procesas ir terpė:
BxPC-3 ląstelių kultūroms užšaldyti galima naudoti CM-1 arba CM-ACF. Siekiant išvengti ląstelių šoko, taikomas lėtas užšaldymo procesas, kurio metu temperatūra krinta tik 1 °C.
Atšildymo procesas:
Užšaldytos BxPC-3 ląstelės atšildomos iš anksto nustatytame 37 °C vandens vonioje 40–60 sekundžių. Kai lieka tik nedidelis ledo gabalėlis, į ląsteles įpilama šviežios auginimo terpės ir jos centrifuguojamos, kad būtų pašalinti užšaldymo terpės elementai. Tada ląstelių nuosėdos vėl suspenduojamos, o ląstelės perpilamos į kolbą augimui.
Biologinio saugumo lygis:
BxPC-3 ląstelių kultūros laikomos 1 biologinio saugumo lygio laboratorijose.
BxPC-3 ląstelių linija: privalumai ir trūkumai
BxPC-3 yra gerai žinoma kasos adenokarcinomos ląstelių linija, turinti keletą privalumų ir trūkumų. Pagrindiniai šios ląstelių linijos privalumai ir trūkumai išvardyti čia.
Privalumai
Pagrindiniai BxPC-3 ląstelių privalumai yra šie:
-
Kasos vėžio in vitro modelis
BxPC-3 ląstelės, gautos iš kasos adenokarcinomos pacientų, pasižymi atitinkamomis savybėmis, todėl jos yra tinkamas modelis kasos vėžio elgsenos tyrimams in vitro.
-
Tumorigeninė ląstelių linija
BxPC-3 ląstelės turi tumorigenines savybes ir gali formuoti navikus, kai yra įšvirkščiamos į nuogas arba imunokompromituotas peles. Šie navikai labai panašūs į pirminius kasos adenokarcinomos navikus, todėl BxPC-3 ksenotransplantacijos modelis yra idealus vėžio augimo ir progresavimo tyrimams.
Apribojimai
Su BxPC-3 ląstelių linija susiję apribojimai yra šie:
-
Kryžminis užteršimas
BxPC-3 ląstelių linija, kaip ir bet kuri kita, kelia kryžminio užteršimo riziką. Tyrėjai turėtų elgtis atsargiai ir laikytis griežtų užteršimo prevencijos protokolų, dirbdami su šiomis ląstelėmis.
-
Lėtas augimo tempas
BxPC-3 ląstelės pasižymi palyginti lėtu dauginimosi greičiu, o jų dvigubėjimo laikas trunka nuo 48 iki 60 valandų. Dėl šios savybės tam tikriems eksperimentams gali prireikti ilgesnių inkubacijos laikotarpių, o tai gali sulėtinti tyrimų pažangą.
BxPC-3 ląstelių pritaikymas moksliniuose tyrimuose
BxPC-3 ląstelės turi daug pritaikymų vėžio tyrimuose. Dažniausiai jos naudojamos:
- Kasos vėžio tyrimai: BxPC-3 ląstelės imituoja kasos adenokarcinomą, todėl jos naudojamos tirti genetinius ir molekulinius mechanizmus, lemiančius naviko vystymąsi ir augimą. Be to, mokslininkai, naudodami šias ląsteles, atranda naujus biomarkerius ir terapinius tikslus. Be to, BxPC-3 ląstelės išreiškia angiogeninius veiksnius, t. y. interleukiną-8 (IL-8), prostaglandiną E2 (PGE2) ir kraujagyslių endotelio augimo faktorių (VEGF), todėl jos tinka angiogenezei tirti. Angiogenezė yra svarbus procesas, susijęs su vėžio augimu ir metastazavimu. 2022 m. paskelbtame tyrime nustatyta, kad laminino-5 gama-2 (LAMC2) perteklius BxPC3 PDAC (kasos latakų adenokarcinoma) ląstelėse sustiprina naviko susidarymą, reguliuodamas BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/mTOR signalizacijos kelią [2].
- Vaistų atradimas ir kūrimas: BxPC-3 ląstelių linija yra neįkainojamas priešvėžinių vaistų bandymo modelis. Tyrėjai tiria potencialių vaistų citotoksinį, antimetastazinį ir apoptozinį poveikį BxPC3 PDAC. 2020 m. Alexandria Turner ir kolegų atliktame tyrime buvo tiriamos Elaeocarpus reticulatus vaisių ekstraktų apoptozės savybės BxPC-3 kasos vėžio ląstelėse [3]. Panašiai, 2020 m. buvo atliktas tyrimas, kurio metu buvo nustatytas augalo Oxialis obtriangulata metanolinio ekstrakto priešvėžinis potencialas BxPC-3 ląstelėse. Be to, mokslininkai taip pat tyrė ląstelių mechanizmą, per kurį augalo ekstraktas darė terapinį poveikį [4].
5. Moksliniai straipsniai apie BxPC-3 ląsteles
Šiame skyriuje pateikiami kai kurie dažniausiai cituojami ir įdomiausi leidiniai, kuriuose aptariama BxPC-3 ląstelių linija.
Likokumaronas sukelia BxPC-3 kasos adenokarcinomos ląstelių mirtį, slopindamas DYRK1A
Šiame leidinyje „Chemico-Biological Interactions“ (2020) buvo tiriamas natūralaus produkto, likokumarono, apoptozės poveikis BxPC-3 kasos vėžio ląstelėms.
Hidroksichlorochinas skatina Bcl-xL slopinimo sukeltą apoptozę BxPC-3 žmogaus kasos vėžio ląstelėse
Šis mokslinis straipsnis buvo paskelbtas žurnale „Anticancer Research“ (2022 m.). Tyrime buvo iškelta hipotezė, kad hidroksichlorokvinas sukelia BxPC3 ląstelių mirtį slopindamas BCL-XL geną.
Šis tyrimas buvo paskelbtas 2020 m. žurnale „Journal of Cellular Biochemistry“. Tyrime teigiama, kad natūralus junginys salidrosidas pasižymi priešvėžinėmis savybėmis BxPC-3 ląstelėse, reguliuodamas HIF-1α (hipoksijos indukuojamąjį faktorių) ir LOXL2 signalų kaskadą.
Šis straipsnis žurnale „Biomedicine & Pharmacotherapy“ rodo, kad ibrutinibas gali būti naudojamas kaip puikus radiacijos jautrumą didinantis vaistas kasos vėžio pacientams. In vitro tyrimas su BxPC-3 ląstelėmis rodo, kad jis mažina BxPC3 EGFR fosforilinimą ir pAKT bei pasroviui esančių genų, kurių ekspresija padidėja dėl radioterapijos, ekspresiją.
Chelidoninas indukuoja apoptozę per GADD45a-p53 reguliavimą žmogaus kasos vėžio ląstelėse
Šiame žurnale „Integrative Cancer Therapies“ paskelbtame tyrime teigiama, kad natūralus produktas chelidoninas sukelia apoptozę žmogaus kasos ląstelėse BxPC-3, reguliuodamas BxPC3 p53 ir GADD45a signalizaciją.
Ištekliai, susiję su BxPC-3 ląstelių linija: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
BxPC-3 ląstelių linija turi daug patrauklių privalumų, dėl kurių ji tinka naudoti moksliniams tyrimams. Daugelyje internetinių išteklių apie BxPC-3 ląstelių liniją minima jos tvarkymo, priežiūros ir transfekcijos protokolai.
- BxPC3 transfekcija: Šis vaizdo įrašas yra žingsnis po žingsnio vadovas, padedantis išmokti BxPC-3 ląstelių transfekcijos protokolą.
Ši straipsnio dalis apima keletą nuorodų, paaiškinančių BxPC3 ląstelių kultūros protokolus.
- BxPC3 ląstelių kultūra: ši svetainė padės jums išmokti subkultūravimo ir kriokonservuotų bei proliferacinių BxPC-3 kultūrų tvarkymo protokolus.
Nuorodos
- Kim, Y., et al., „Pankreatinio latakų adenokarcinomos ląstelių linijų lyginamasis proteominis profiliavimas“. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888–98.
- Kirtonia, A., et al., Laminin-5 gamma-2 perprodukcija skatina kasos latakų adenokarcinomos tumorigenesę per EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR kaskadą. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Elaeocarpus reticulatus vaisių ekstraktai mažina gyvybingumą ir indukuoja apoptozę kasos vėžio ląstelėse in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: p. 2073–2084.
- An, E.-J. ir kt., Oxialis obtriangulata priešvėžinis potencialas kasos vėžio ląstelėse reguliuojant ERK/Src/STAT3 tarpininkaujamą kelią. Molecules, 2020. 25(10): p. 2301.