U2OS-CRISPR-SNAPf-Nup133 세포
€800.00*
제품은 드라이아이스로 냉동된 상태로 크라이오튜브에 포장되어 배송됩니다. 각 크라이오튜브에는 일반적으로 부착 세포주 기준 3 × 10⁶ 세포 또는 현탁 세포주 기준 5 × 10⁶ 세포가 포함됩니다(자세한 내용은 배치별 CoA 참조).
일반 정보
| 설명 | U2OS-CRISPR-SNAPf-Nup133은 부모 U2OS 배경을 기반으로 유전자 조작된 인간 골육종 세포주로서, 내인성 NUP133 유전자좌를 CRISPR/Cas9 매개 게놈 편집을 통해 C-말단 SNAPf 태그를 암호화하도록 변형시켰습니다. NUP133은 핵공 복합체(NPC) 조립 및 유지에 필수적인 구조적 하위 복합체인 Y-복합체(NUP107-160 복합체)의 핵심 구성 요소입니다. 내인성 유전자좌에 SNAPf 코딩 서열을 인프레임으로 도입함으로써, 융합 단백질은 생리적 발현 수준과 세포 내 국소화를 유지하면서 내재적 조절 하에 발현됩니다. SNAPf 태그는 벤질구아닌 접합 기질과 공유 결합 반응을 일으키는 공학화된 O6-알킬구아닌-DNA 알킬트랜스퍼레이스인 SNAP-태그의 신속 표지 변형체입니다. 이를 통해 세포 투과성 또는 비투과성 SNAP 기질을 사용하여 생세포 또는 고정 세포 내 Nup133을 매우 특이적이고 다용도로 형광 표지할 수 있습니다. U2OS-CRISPR-SNAPf-Nup133 세포에서 융합 단백질은 핵포어 복합체(NPC)의 특징적인 점상 패턴으로 핵막에 국소화됩니다. 태깅이 내인성 유전자좌에서 발생하므로 NPC의 화학량론적 비율과 구조는 최소한으로 교란되어, 이 모델은 정량적 초고해상도 현미경, 단일 분자 추적, NPC 조립 및 전환의 동역학적 분석에 적합합니다. 이 세포주는 핵 수송, 핵-세포질 간 이동 역학, 간기 및 분열 후 핵 재조립 과정에서의 NPC 생합성, 그리고 기공 스캐폴드 내 Y-복합체의 구조적 조직화를 연구하기 위한 강력한 플랫폼을 제공합니다. U2OS 배지는 평평한 형태와 큰 핵을 제공하여 고해상도 이미징을 용이하게 합니다. U2OS-CRISPR-SNAPf-Nup133 세포는 특히 펄스-체이스 표지 실험, 상관 광학 및 전자 현미경, 그리고 추가 내인성 표지된 핵포린 또는 수송 인자와 결합한 다색 이미징 접근법에 매우 적합합니다. |
|---|---|
| 유기체 | 인간 |
| 조직 | Bone |
| 질병 | 골육종 |
특성
| 나이 | 15년 |
|---|---|
| 성별 | 여성 |
| 민족 | 백인 |
| 형태학 | 상피 유사 |
| 성장 속성 | 준수자 |
규제 데이터
| 인용 | U2OS-CRISPR-SNAPf-Nup133(사이티온 카탈로그 번호 300666) |
|---|---|
| 생물학적 안전 수준 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| 예금자 | 엘렌버그 연구소(EMBL) |
| GMO 현황 | GMO-S1: 이 인간 골육종 세포주(U2OS-CRISPR-SNAPf-Nup133)는 CRISPR 도입 SNAPf-Nup133 융합을 포함하고 있어 Nup133 뉴클레오포린의 형광 태깅을 가능하게 합니다. 삽입물이 안정적으로 존재합니다. 이 분류는 독일 내에서만 적용되며 다른 지역에서는 다를 수 있습니다. |
생체 분자 데이터
| 단백질 발현 | Nup133, SNAPf-tag |
|---|
처리
| 배양 배지 | 맥코이 5a, w: 3.0g/L 포도당, w: 안정 글루타민, w: 2.0mM 피루브산 나트륨, w: 2.2g/L NaHCO3(사이티온 제품 번호 820200a) |
|---|---|
| 보충제 | 배지에 10% FBS, 3.0g/L 포도당, 안정 글루타민, 2.0mM 피루브산 나트륨, 2.2g/L NaHCO3, 1% NEAA를 보충합니다 |
| 해리 시약 | 아큐타제 |
| 서브컬처 | 부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다. |
| 동결 매체 | 냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다. |
| 세포 해동 및 배양 |
|
| 인큐베이션 분위기 | 37°C, 5%CO2, 습한 대기. |
| 플라스크 코팅 | 해동 후 최적의 부착력과 생존력을 위해 콜라겐 코팅 플라스크나 플레이트를 사용하는 것이 좋습니다. |
| 동결 절차 | 냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다. |
| 배송 조건 | 냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다. |
| 보관 조건 | 장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다. |
품질 관리 / 유전자 프로필 / HLA
| 무균 | 마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다. 박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다. |
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분석 인증서(CoA)
| 로트 번호 | 인증서 유형 | 날짜 | 카탈로그 번호 |
|---|---|---|---|
| 300666-101225 | 분석 증명서 | 22. Jan. 2026 | 300666 |