U2OS-CRISPR-NUP96-SNAP 세포
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제품은 드라이아이스로 냉동된 상태로 크라이오튜브에 포장되어 배송됩니다. 각 크라이오튜브에는 일반적으로 부착 세포주 기준 3 × 10⁶ 세포 또는 현탁 세포주 기준 5 × 10⁶ 세포가 포함됩니다(자세한 내용은 배치별 CoA 참조).
일반 정보
| 설명 | U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP은 모체인 U-2 OS 인간 세포주에서 유래한 유전자 변형 골육종 세포주입니다. 이 세포주는 CRISPR/Cas9 매개 게놈 편집을 통해 NUP96 유전자에 SNAP 태그를 통합하도록 설계되어 핵 기공 복합체의 역학을 시각화하고 연구할 수 있습니다. 핵 기공 복합체(NPC)는 핵 세포질 수송 조절에 매우 중요하며, NUP96은 NPC의 중요한 구성 요소로 구조적 무결성과 기능에 중추적인 역할을 합니다. U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP 클론 33번에서는 NUP96 유전자좌에 SNAP 태그가 통합되어 있어 형광 기질이나 기타 화학 프로브의 특이적이고 공유적인 부착이 가능하여 살아있는 세포 이미징 및 기타 생화학 분석에 사용할 수 있습니다. 이 기능은 핵세포질 수송의 분자 역학을 조사하고, NPC 관련 병리를 이해하고, NPC 기능에 영향을 미치는 치료 화합물을 스크리닝하는 데 매우 유용한 도구입니다. 이 세포주는 또한 높은 수준의 유전적 안정성과 배양 용이성을 포함하는 모체 U-2 OS 세포주의 특성을 유지하므로 세포 생물학에서 높은 처리량 스크리닝 및 확장 연구에 적합합니다. NUP96 유전자 변형의 특이성으로 인해 U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP 클론 33번은 세포 기능 및 기능 장애의 맥락에서 NPC 구성 요소의 세부적인 연구를 위한 고유한 모델을 제공합니다. 연구자들은 SNAP 태그 시스템을 활용하여 선택적이고 신속하게 NUP96에 라벨을 부착함으로써 생리적 및 병리학적 조건에서 NPC의 역학을 실시간으로 시각화할 수 있습니다. 이 특정 클론은 기초 연구와 응용 생물의학 연구 모두에 강력한 플랫폼으로 사용될 수 있으며 세포 생물학, 유전학, 종양학 분야에 크게 기여할 수 있습니다. |
|---|---|
| 유기체 | 인간 |
| 조직 | Bone |
| 질병 | 골육종 |
특성
| 나이 | 15년 |
|---|---|
| 성별 | 여성 |
| 민족 | 백인 |
| 성장 속성 | 준수자 |
규제 데이터
| 인용 | U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP(사이티온 카탈로그 번호 300444) |
|---|---|
| 생물학적 안전 수준 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| 셀로사우루스 계승 | CVCL_B7FL |
| 예금자 | 엘렌버그 연구소(EMBL) |
| GMO 현황 | GMO-S1: 이 인간 골육종 세포주(U2OS-CRISPR-NUP96-SNAP, 클론 33)에는 핵 기공의 SNAP 태그 화학적 라벨링을 촉진하는 CRISPR-엔지니어링된 NUP96-SNAP 융합이 포함되어 있습니다. 이 수정은 안정적으로 통합되었습니다. 이 분류는 독일 내에서만 적용되며 다른 지역에서는 다를 수 있습니다. |
생체 분자 데이터
| 단백질 발현 | NUP96-SNAP(핵 기공 복합 단백질 96, SNAP 태그) |
|---|
처리
| 배양 배지 | 맥코이 5a, w: 3.0g/L 포도당, w: 안정 글루타민, w: 2.0mM 피루브산 나트륨, w: 2.2g/L NaHCO3(사이티온 제품 번호 820200a) |
|---|---|
| 보충제 | 배지에 10% FBS, 3.0g/L 포도당, 안정 글루타민, 2.0mM 피루브산 나트륨, 2.2g/L NaHCO3, 1% NEAA를 보충합니다 |
| 해리 시약 | 아큐타제 |
| 서브컬처 | 부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다. |
| 시딩 밀도 | 1 x 10⁴ 세포/cm² |
| 유체 갱신 | 주 2~3회 |
| 동결 매체 | 냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다. |
| 세포 해동 및 배양 |
|
| 인큐베이션 분위기 | 37°C, 5%CO2, 습한 대기. |
| 플라스크 코팅 | 해동 후 최적의 부착력과 생존력을 위해 콜라겐 코팅 플라스크나 플레이트를 사용하는 것이 좋습니다. |
| 동결 절차 | 냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다. |
| 배송 조건 | 냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다. |
| 보관 조건 | 장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다. |
품질 관리 / 유전자 프로필 / HLA
| 무균 | 마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다. 박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다. |
|---|
분석 인증서(CoA)
| 로트 번호 | 인증서 유형 | 날짜 | 카탈로그 번호 |
|---|---|---|---|
| 300444-040724 | 분석 증명서 | 23. May. 2025 | 300444 |