Pergi ke beranda
Keranjang belanja €0,00*
Tampilkan semua kategori Sel SK-MEL dalam Prediksi Respons Terapi Imun Kembali

Sel SK-MEL dalam Prediksi Respons Imunoterapi

Revolusi imunoterapi telah mengubah pengobatan melanoma, dengan penghambat pos pemeriksaan yang mencapai respons yang tahan lama pada sebagian besar pasien. Di Cytion, kami menyadari bahwa memprediksi pasien mana yang akan merespons imunoterapi tetap menjadi tantangan kritis, membutuhkan model praklinis yang kuat yang merekapitulasi interaksi tumor-imun. Garis sel melanoma SK-MEL menyediakan platform penting untuk mempelajari faktor penentu molekuler dari respons imunoterapi dan mengidentifikasi biomarker yang dapat memandu pemilihan pasien untuk perawatan transformatif ini.

Kesimpulan Utama

  • Garis SK-MEL menampilkan ekspresi PD-L1 yang bervariasi yang memengaruhi respons penghambat pos pemeriksaan
  • Beban mutasi tumor dan presentasi neoantigen berkorelasi dengan imunogenisitas
  • Sistem ko-kultur dengan sel imun memungkinkan penilaian fungsional imunitas anti-tumor
  • Integritas jalur pensinyalan interferon-gamma memprediksi sensitivitas imunoterapi
  • Mekanisme resistensi termasuk cacat presentasi antigen dapat dimodelkan secara in vitro
Sel SK-MEL dalam Penelitian Imunoterapi Panel SK-MEL SK-MEL-1: BRAF WT SK-MEL-2: NRAS mut SK-MEL-5: BRAF V600E SK-MEL-28 BRAF V600E SK-MEL-29.1: Tahan Variabel PD-L1 / HLA Sumbu Pos Pemeriksaan Kekebalan Tubuh SK-MEL PD-L1+ Sel T PD-1 + Sinyal penghambatan → Diblokir oleh anti-PD-1 Biomarker Respons - Tingkat ekspresi PD-L1 - Beban mutasi tumor - Beban neoantigen - Ekspresi HLA kelas I - Status jalur IFN-γ - β2-mikroglobulin utuh Mekanisme Resistensi Imunoterapi Kehilangan/Downreg HLA mutasi β2M Mutasi JAK1/2 Ketidakpekaan IFN-γ Sistem Uji Kultur Bersama - Kultur bersama SK-MEL + PBMC - Pembunuhan sel T yang reaktif terhadap tumor - Pelepasan IFN-γ / Granzyme B - Sitotoksisitas waktu nyata (xCELLigence) Strategi Kombinasi - Anti-PD-1 + Anti-CTLA-4 - Pos pemeriksaan + penghambat BRAF/MEK - ICI + virus onkolitik - ICI + terapi radiasi © Cytion - Memungkinkan Penelitian Imunoterapi Melanoma

Panel Garis Sel Melanoma SK-MEL

Seri SK-MEL mencakup beberapa garis sel melanoma yang berasal dari pasien dan lokasi metastasis yang berbeda, menyediakan panel yang beragam untuk mempelajari heterogenitas respons imunoterapi. Garis-garis ini berbeda dalam hal mutasi pendorong, ekspresi penanda imun, dan sensitivitas terhadap terapi berbasis target dan imun.

Sel SK-MEL-28 (300337 ) kami mengandung mutasi BRAF V600E yang ditemukan pada sekitar 50% melanoma. Sel ini mengekspresikan tingkat PD-L1 moderat dan telah digunakan secara luas untuk mempelajari interaksi antara terapi yang ditargetkan dengan BRAF dan imunoterapi.

Sel SK-MEL-5 (300157) juga membawa BRAF V600E tetapi menunjukkan sifat imunologis yang berbeda, memungkinkan studi komparatif tentang bagaimana latar belakang genetik memengaruhi pengenalan kekebalan tubuh. Sel SK-MEL-1 (300424 ) dan Sel SK-MEL-2 (300423) mewakili melanoma tipe liar BRAF dengan status NRAS yang berbeda.

Untuk penelitian melanoma yang lebih luas, Sel A375 (300110 ) kami menyediakan model mutan BRAF tambahan dengan sifat imunologis yang terkarakterisasi dengan baik.

Ekspresi PD-L1 dan Respons Blokade Pos Pemeriksaan

Ekspresi ligan kematian terprogram 1 (PD-L1) pada sel tumor berfungsi sebagai biomarker utama untuk respons penghambat pos pemeriksaan, meskipun nilai prediktifnya tidak sempurna. Garis SK-MEL menunjukkan ekspresi PD-L1 konstitutif variabel yang dapat diinduksi lebih lanjut oleh interferon-gamma, meniru mekanisme resistensi kekebalan adaptif yang diamati pada tumor pasien.

Kuantifikasi flow cytometry PD-L1 permukaan memungkinkan karakterisasi tingkat ekspresi di seluruh garis SK-MEL. Ekspresi konstitutif bervariasi dari rendah hingga sedang, dengan pengobatan IFN-γ (10-50 ng / mL selama 24-48 jam) secara dramatis meningkatkan regulasi PD-L1 pada garis responsif.

Induksi PD-L1 oleh IFN-γ menunjukkan pensinyalan interferon yang utuh, yang berkorelasi dengan sensitivitas penghambat pos pemeriksaan. Garis dengan pensinyalan JAK-STAT yang rusak menunjukkan gangguan induksi PD-L1 dan sering menunjukkan resistensi imunoterapi, memodelkan mekanisme resistensi yang relevan secara klinis.

Sistem Kultur Bersama Imunitas Tumor

Penilaian fungsional imunitas anti-tumor memerlukan sistem ko-kultur yang memungkinkan interaksi antara sel SK-MEL dan efektor imun. Sel mononuklear darah tepi (PBMC) atau populasi sel T yang dimurnikan dapat dikultur bersama dengan sel melanoma untuk menilai pembunuhan yang dimediasi oleh imun.

Uji sitotoksisitas mengukur pembunuhan sel T terhadap target SK-MEL melalui berbagai pembacaan termasuk pelepasan kromium, pelepasan laktat dehidrogenase (LDH), atau pemantauan impedansi waktu nyata. Antibodi pos pemeriksaan yang ditambahkan ke dalam ko-kultur ini dapat meningkatkan sitotoksisitas sel T, memberikan validasi fungsional blokade sumbu PD-1/PD-L1.

Tes pelepasan sitokin mengukur sekresi IFN-γ, TNF-α, granzyme B, dan perforin oleh sel T pada ko-kultur dengan sel SK-MEL. Peningkatan produksi sitokin menunjukkan aktivasi sel T yang produktif yang dapat memprediksi respons imunoterapi in vivo.

Ko-kultur spheroid tiga dimensi memodelkan lingkungan mikro tumor dengan lebih baik, dengan memasukkan batasan spasial yang memengaruhi infiltrasi dan pembunuhan sel T. Spheroid SK-MEL yang dikultur bersama dengan sel T memungkinkan visualisasi penetrasi sel imun dan pembunuhan sel target dalam struktur mirip tumor.

Presentasi Antigen dan Pengenalan Neoantigen

Imunitas anti-tumor yang efektif membutuhkan pengenalan sel tumor melalui presentasi kompleks histokompatibilitas utama (MHC) dari antigen tumor ke sel T. Garis SK-MEL bervariasi dalam ekspresi HLA kelas I, yang secara langsung memengaruhi pengenalan kekebalan dan respons penghambat pos pemeriksaan.

Analisis pengetikan dan ekspresi HLA mengkarakterisasi kapasitas presentasi antigen dari setiap garis SK-MEL. Hilangnya HLA kelas I melalui perubahan genetik (mutasi β2-mikroglobulin, penghapusan gen HLA) atau pembungkaman epigenetik merupakan mekanisme resistensi imunoterapi yang umum yang dapat dimodelkan dengan menggunakan garis SK-MEL tertentu.

Algoritme prediksi neoantigen menganalisis lanskap mutasi garis SK-MEL untuk mengidentifikasi antigen spesifik tumor yang potensial. Jalur dengan beban mutasi yang lebih tinggi umumnya memiliki lebih banyak neoantigen, yang berkorelasi dengan peningkatan imunogenisitas dan respons penghambat pos pemeriksaan.

Memodelkan Mekanisme Resistensi

Memahami resistensi imunoterapi sangat penting untuk mengembangkan strategi untuk mengatasi kegagalan pengobatan. Sel SK-MEL dapat digunakan untuk memodelkan mekanisme resistensi primer dan yang didapat.

Mutasi JAK1/2 mengganggu pensinyalan IFN-γ yang penting untuk induksi PD-L1 dan pembunuhan yang dimediasi oleh sel T. Garis SK-MEL dengan mutasi JAK yang direkayasa memodelkan mekanisme resistensi ini dan memungkinkan penyaringan untuk strategi untuk memulihkan sensitivitas.

hilangnya β2-mikroglobulin menghilangkan ekspresi HLA kelas I di permukaan, sehingga sel tumor tidak terlihat oleh sel T sitotoksik. Mekanisme ini terjadi pada sekitar 30% melanoma yang resisten terhadap imunoterapi dan dapat dimodelkan melalui KO CRISPR pada garis SK-MEL.

Produk yang Direkomendasikan untuk Penelitian Imunoterapi Melanoma:

Situs web ini menggunakan cookie untuk memastikan Anda mendapatkan pengalaman terbaik di situs web kami... Informasi lebih lanjut.
- Imprint

Kami telah mendeteksi bahwa Anda berada di negara lain atau menggunakan bahasa peramban yang berbeda dari yang dipilih saat ini. Apakah Anda ingin menerima pengaturan yang disarankan?

Tutup