garis Sel 3T3-L1: Kunci untuk Memahami Obesitas

Garis sel 3T3-L1, yang berasal dari preadiposit tikus, digunakan secara luas dalam penelitian yang berfokus pada mekanisme seluler mendasar yang terlibat dalam obesitas, diabetes, dan kondisi kesehatan terkait lainnya. Selain itu, sel 3T3-L1 sangat penting untuk mengeksplorasi jalur subseluler yang rumit yang memfasilitasi adipogenesis, proses di mana preadiposit berubah menjadi adiposit dewasa.

Latar Belakang dan Asal Usul Garis Sel 3T3-L1

Bagian ini mempelajari detail penting tentang garis sel 3T3-L1, seperti sifatnya, ukuran adiposit 3T3-L1, dan turunannya, yang sangat penting bagi para peneliti yang mulai bekerja dengan garis sel ini.

Berasal dari sel fibroblas tikus, garis 3T3-L1 disubkloning dari sel 3T3 tikus albino Swiss, yang dipilih berdasarkan kemampuannya untuk mengakumulasi lipid. Sel prekursor 3T3 berasal dari embrio tikus.
Pada awalnya, sel 3T3-L1 menunjukkan struktur seperti fibroblas; namun, dalam kondisi tertentu, sel ini mengalami diferensiasi, mengadopsi karakteristik adiposit.
Ukuran adiposit 3T3-L1 bervariasi melalui berbagai tahap diferensiasi: sel yang tidak berdiferensiasi biasanya memiliki diameter rata-rata 15,4 μm, sedangkan setelah berdiferensiasi, diameter rata-rata pada hari ke-7 dan ke-14 setelah diferensiasi masing-masing sekitar 18,8 μm dan 20,3 μm [1].
sel 3T3-L1 dicirikan oleh kariotipe yang tidak stabil, dengan jumlah kromosom 2n = 40.

animasi medis 3 dimensi tentang pertumbuhan sel lemak.

Kultur sel 3T3-L1

sel 3T3-L1 banyak dikultur di laboratorium penelitian. Informasi kultur berikut ini yang diberikan dalam bagian ini dapat membantu Anda menangani dan memelihara kultur 3T3-L1 secara efektif. Di sini Anda akan tahu: Berapa waktu penggandaan sel 3T3-L1? Apakah 3T3-L1 merupakan garis sel yang melekat atau suspensi? Berapa kepadatan pembenihan 3T3-L1?

Poin-poin Penting untuk Mengultur Sel 3T3-L1

Waktu Penggandaan Populasi:	Perkiraan waktu penggandaan populasi untuk sel 3T3-L1 adalah 28 jam.
Patuh atau dalam Suspensi:	3T3-L1 adalah garis sel yang patuh.
Kepadatan Penyemaian:	kepadatan pembenihan sel 3 x¹⁰³ sel / ^cm2 direkomendasikan untuk sel 3T3-L1. Sel harus dilewatkan pada 70 hingga 80% pertemuan ketika kepadatan sel mencapai 6 x¹⁰⁴ sel / ^cm2. Untuk pembenihan, sel dicuci dengan 1 x PBS, dilepaskan menggunakan larutan Accutase, ditambahkan dengan media, dan disentrifugasi. Sel yang dipulihkan disuspensikan kembali dalam media baru dan dimasukkan ke dalam labu baru.
Media Pertumbuhan:	DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) digunakan untuk pertumbuhan optimal sel 3T3-L1. Media ini biasanya dilengkapi dengan, 4,0 mM L-glutamin, 3,7 g / L NaHCO3, 4,5 g / L glukosa, dan 10% serum sapi janin.
Kondisi Pertumbuhan:	kultur sel 3T3-L1 disimpan dalam inkubator yang dilembabkan pada suhu 37 ° C dan dengan suplai CO2 5%.
Penyimpanan:	sel 3T3-L1 disimpan pada suhu di bawah -150°C baik di dalam freezer listrik atau dalam fase uap nitrogen cair.
Proses dan Media Pembekuan:	Media CM-1 atau CM-ACF digunakan untuk pembekuan adiposit 3T3-L1 melalui metode pembekuan lambat. Metode ini hanya memungkinkan penurunan suhu sel sebesar 1°C dan melindungi kelangsungan hidupnya.
Proses Pencairan:	Sel 3T3-L1 yang dibekukan dengan cepat dicairkan pada suhu 37°C dalam penangas air. Sel yang telah dicairkan segera disuspensikan kembali ke dalam media kultur dan dapat langsung disalurkan ke dalam labu untuk pertumbuhan. Sebaliknya, sel dapat disentrifugasi untuk menghilangkan media pembekuan lama, disuspensikan kembali dalam media segar, dan dikultur.
Tingkat Keamanan Hayati:	Pengaturan laboratorium tingkat keamanan hayati 1 direkomendasikan untuk garis sel murine 3T3-L1.

Monolayer konfluen sel 3T3-L1 di bawah perbesaran 10x dan 20x.

garis sel 3T3-L1: Keuntungan & Keterbatasan

Ada banyak pro dan kontra yang terkait dengan garis sel fibroblas ini. Beberapa keuntungan dan keterbatasan penting dari jalur sel 3T3-L1 dibahas di sini.

Keuntungan

Mudah dipelihara: Sel 3T3-L1 mudah dikultur di laboratorium, sehingga nyaman untuk berbagai eksperimen berbasis sel.
Biaya rendah: Garis sel 3T3-L1 lebih terjangkau daripada adiposit yang baru diisolasi, memberikan alternatif yang hemat biaya untuk mempelajari diferensiasi dan proses sel lainnya.
Kemampuan diferensiasi: Sel fibroblas 3T3-L1 tikus memiliki kemampuan untuk berdiferensiasi. Mereka dapat memperoleh fenotipe adiposit dan fitur karakteristik lainnya ketika terpapar rangsangan tertentu.

Keterbatasan

Kurangnya relevansi fisiologis: Sel adiposit 3T3-L1 yang berasal dari tikus tidak memiliki relevansi fisiologis dengan adiposit manusia dan jaringan adiposa. Sel ini tidak sepenuhnya mewakili heterogenitas dan kompleksitas jaringan adiposa secara in vivo, sehingga membatasi penerapan langsung hasil eksperimental pada manusia.

Aplikasi sel 3T3-L1

Diferensiasi Adiposit 3T3-L1

Garis sel 3T3-L1 umumnya digunakan untuk mempelajari biologi adiposit, diferensiasi sel adiposit, dan mekanisme seluler dan molekuler terkait. Diferensiasi sel 3T3-L1 menjadi adiposit sangat mirip dengan jalur diferensiasi adiposit in vivo. Dalam jaringan adiposa, sel prekursor yang berada di dalam fraksi pembuluh darah stroma memiliki potensi untuk berdiferensiasi menjadi adiposit matang sebagai respons terhadap berbagai isyarat fisiologis, termasuk status nutrisi dan sinyal hormonal. Model 3T3-L1 memungkinkan untuk mempelajari secara rinci jalur diferensiasi prekursor adiposit, memberikan wawasan tentang mekanisme molekuler yang mengatur adipogenesis dan pengaturannya oleh faktor eksternal.

Proses diferensiasi dapat diinduksi dalam kultur dengan mengekspos preadiposit 3T3-L1 yang bertemu dengan campuran penginduksi spesifik yang biasanya mengandung insulin, deksametason, dan isobutilmetilxantin (IBMX). Induksi ini memicu serangkaian peristiwa transkripsi dan seluler yang mengarah pada perolehan fenotipe adiposit yang ditandai dengan akumulasi tetesan lipid, sensitivitas insulin, dan ekspresi protein spesifik adiposit seperti gamma reseptor yang diaktifkan oleh proliferator peroksisom (PPARγ) dan protein pengikat alfa pengikat CCAAT / enhancer (C / EBPα).

Karakteristik Fungsional Adiposit 3T3-L1 Dewasa

Adiposit 3T3-L1 yang terdiferensiasi mengekspresikan gen adipogenik dan menunjukkan banyak karakteristik fungsional adiposit dewasa, kemampuan untuk menyimpan dan memobilisasi lipid, mengeluarkan adipokin, dan merespons insulin. Sel-sel ini mampu mensintesis dan memecah trigliserida, sehingga berperan dalam homeostasis energi. Studi tentang adiposit 3T3-L1 juga telah menjelaskan fungsi endokrin jaringan adiposa, dengan menyoroti sekresi berbagai peptida bioaktif dan protein yang memengaruhi metabolisme sistemik.

Penelitian diabetes dan obesitas

preadiposit 3T3-L1 digunakan sebagai model in vitro untuk mempelajari jalur molekuler yang terlibat dalam diabetes dan obesitas. Selain itu, penelitian ini dapat membantu menyaring obat atau agen terapeutik lainnya untuk memerangi penyakit-penyakit ini. Sebagai contoh, penelitian yang dilakukan pada tahun 2022 mengeksplorasi efek anti-diabetes dari ramuan tradisional, Ocimum forskolei Benth, menggunakan sel 3T3-L1. Mereka mengevaluasi penyerapan glukosa, penanda adipogenik, dan penanda transkripsi yaitu, DGAT1, CEBP / α, dan PPARγ pada sel yang diobati. Oleh karena itu, sebuah penelitian menilai efek anti-obesitas dari senyawa tanaman, kaempferol menggunakan sel 3T3-L1. Para peneliti mengeksplorasi senyawa tersebut yang menunjukkan potensi anti-obesitas dengan menghambat adipogenesis dan meningkatkan lipolisis pada preadiposit ini.

Publikasi Penelitian yang Menampilkan Sel 3T3-L1

Berikut adalah publikasi terbaru yang menonjol dan beberapa yang paling banyak dikutip yang menampilkan sel 3T3-L1.

Apigetrin menghambat adipogenesis pada sel 3T3-L1 dengan menurunkan regulasi PPARγ dan CEBP-α

Publikasi ini dalam Lipid dalam Kesehatan dan Penyakit (2018) mengusulkan bahwa apigetrin, flavonoid, menekan adipogenesis dengan mengurangi tingkat faktor transkripsi, yaitu, CEBP-α dan PPARγ, dalam sel 3T3-L1.

Efek antiadipogenik asam loganat pada preadiposit 3T3-L1 dan tikus yang diovariektomi

Penelitian ini diterbitkan dalam jurnal Molecules pada tahun 2018. Penelitian ini mengusulkan bahwa senyawa asam loganat dalam akar Gentiana lutea L. (GL) memiliki potensi anti-obesitas karena memiliki efek adipogenik pada sel 3T3-L1.

Efek dimetil sulfoksida yang bergantung pada dosis pada kandungan lipid, viabilitas sel, dan stres oksidatif pada adiposit 3T3-L1

Makalah ini dalam laporan Toksikologi (2018) mengeksplorasi efek potensial dimetil sulfoksida pada kandungan lipid, stres oksidatif, dan viabilitas sel 3T3-L1 dengan cara yang bergantung pada dosis.

Efek adropin pada proliferasi dan diferensiasi sel 3T3-L1 dan preadiposit primer tikus

Artikel ini diterbitkan dalam jurnal Molecular and Cellular Endocrinology pada tahun 2019. Dalam penelitian ini, para peneliti mengevaluasi kemungkinan efek protein adropin terhadap proliferasi dan diferensiasi sel 3T3-L1 dan adiposit primer tikus.

Fucoidan dari Undaria pinnatifida memiliki efek anti-diabetes melalui stimulasi pengambilan glukosa dan pengurangan lipolisis basal pada adiposit 3T3-L1

Penelitian Nutrition Research (2019) ini menyelidiki potensi anti-diabetes dari polisakarida tersulfasi, Fucoidan yang diperoleh dari Undaria pinnatifida. Hasil penelitian mengungkapkan bahwa fucoidan merangsang penyerapan glukosa, mengurangi lipolisis basal pada sel preadiposit 3T-L1, dan memberikan efek ini.

Ginsenoside Rg2 menghambat adipogenesis pada preadiposit 3T3-L1 dan menekan obesitas pada tikus gemuk yang diinduksi diet tinggi lemak melalui jalur AMPK

Artikel penelitian ini diterbitkan pada tahun 2019 di jurnal Food and Function. Artikel tersebut mengusulkan bahwa produk alami, ginsenoside Rg2 memberikan efek anti-obesitas dengan menghambat adipogenesis pada sel 3T3-L1 dan tikus obesitas dengan mengatur kaskade AMPK.

Sumber daya untuk garis Sel 3T3-L1: Protokol, Video, dan Lainnya

3T3-L1 adalah garis sel fibroblas tikus yang terkenal. Berbagai sumber daya tersedia pada protokol kultur, transfeksi, pembekuan, dan pencairan garis sel ini.

Beberapa sumber daya disebutkan di sini.

Diferensiasi sel 3T3-L1: Tautan ini menyediakan protokol terperinci untuk membedakan preadiposit 3T3-L1.
Transfeksi sel 3T3-L1: Video ini adalah panduan tutorial untuk transfeksi sel 3T3-L1.
Melewati sel 3T3: Video ini menjelaskan prosedur untuk melewatkan sel fibroblas tikus 3T3.

Di sini Anda dapat menemukan beberapa protokol untuk kultur garis sel 3T3-L1.

Membudidayakan sel 3T3-L1: Tautan ini berisi panduan langkah demi langkah terperinci untuk membelah sel 3T3-L1. Selain itu, ia memiliki protokol untuk pembekuan dan diferensiasi sel.
kultur dan diferensiasi sel 3T3-L1: Tautan ini akan memberikan protokol untuk kultur dan diferensiasi sel 3T3-L1.

€430,00*

Konten: 1.5 milliliter

Harga belum termasuk pajak ditambah biaya pengiriman

cryovial

Nomor produk: 400107

Referensi

Analisis Cepat Sel Punca yang Berasal dari Adiposa Manusia dan Diferensiasi 3T3-L1 Terhadap Adiposit Menggunakan Penghitung Sel Scepter ™ 2.0. BioTechniques, 2012. 53(2): p. 109-111.
Xu, J., dkk., microRNA-16-5p mempromosikan diferensiasi adiposit 3T3-L1 melalui pengaturan EPT1. Komunikasi penelitian biokimia dan biofisika, 2019. 514(4): p. 1251-1256.
Zhang, L., dkk., Mempromosikan diferensiasi dan metabolisme lipid adalah efek utama untuk paparan DINP pada preadiposit 3T3-L1. Pencemaran lingkungan, 2019. 255: p. 113154.
Khalil, HE, dkk., Efek Amelioratif Ocimum forskolei Benth terhadap Biomarker Diabetes, Apoptosis, dan Adipogenik pada Tikus Diabetes dan Fibroblas 3T3-L1 yang Dibantu dengan Pendekatan In Silico. Molecules, 2022. 27(9): p. 2800.
Torres-Villarreal, D., dkk., Efek anti-obesitas kaempferol dengan menghambat adipogenesis dan meningkatkan lipolisis pada sel 3T3-L1. Jurnal fisiologi dan biokimia, 2019. 75: p. 83-88.