RAW 264.7 Cell Line dalam Penelitian Makrofag dan Imunologi
Garis sel RAW 264.7 berfungsi sebagai model in vitro yang kuat untuk makrofag murin, yang sangat penting dalam bidang penelitian imunologi. Berasal dari tikus BALB/c jantan, sel-sel ini ditransformasikan oleh virus leukemia murin Abelson, menghasilkan garis sel seperti makrofag. Karena stabilitas fungsional dan kemampuan yang melekat untuk melakukan fagositosis dan pinositosis, sel RAW 264.7 sangat penting untuk mempelajari interaksi inang-patogen, menjadikannya sebagai landasan dalam upaya penelitian imunologi [1,2].
Karakteristik Morfologi dan Perilaku Pertumbuhan
Setelah diperiksa, sel RAW 264.7 menunjukkan pertumbuhan semi-adheren dengan kecenderungan untuk membentuk sel adheren berbentuk gelendong dan sel viabel mengambang berbentuk bola, dengan diameter sel berkisar antara 10 hingga 20 µm. Sifat polimorfik dan kemampuan beradaptasi dalam kondisi kultur menjadikan sel RAW 264.7 sebagai alat serbaguna untuk manipulasi dan observasi eksperimental.
Fungsi Imunologi dan Presentasi Antigen
Sebagai sel penyaji antigen, sel RAW 264.7 memainkan peran penting dalam sistem kekebalan tubuh. Fungsinya melampaui pengenalan patogen sederhana hingga pemrosesan dan penyajian antigen ke sel T, sehingga mengatur respons imun yang komprehensif. Dinamika ini memfasilitasi pemahaman yang lebih dalam tentang bagaimana sistem kekebalan tubuh mengidentifikasi dan menetralkan entitas asing.
Polarisasi Makrofag: Paradigma M0, M1, dan M2
Sel RAW 264.7, dalam keadaan basal sebagai makrofag M0, memiliki kapasitas luar biasa untuk terpolarisasi menjadi fenotipe pro-inflamasi M1 atau fenotipe antiinflamasi M2. Kemampuan polarisasi ini memberi para peneliti model untuk mempelajari pengaruh dan efek berbagai sitokin dan faktor lingkungan pada fungsi makrofag dan respons imun [3,4].
Osteoklastogenesis dan Renovasi Tulang
Meskipun bukan osteoklas itu sendiri, sel RAW 264.7 telah berperan penting dalam mempelajari osteoklastogenesis - proses pembentukan osteoklas. Sel-sel ini memfasilitasi eksplorasi ekspresi gen osteoklastik dan responsifitasnya terhadap aktivasi reseptor. Penelitian ini memiliki implikasi yang mendalam untuk memahami patofisiologi kondisi seperti osteoporosis, di mana remodeling tulang yang tidak teregulasi merupakan ciri khasnya.
Informasi kultur sel pada RAW 264.7
Sebelum Anda memulai eksperimen Anda, Anda harus memahami beberapa informasi dasar tentang garis sel yang kuat ini. Apakah Anda tahu waktu penggandaan sel RAW 264.7? Berapa kepadatan pembenihan untuk sel-sel ini, dan apakah mereka patuh? Selain itu, apa saja kondisi pertumbuhan optimal untuk RAW 264.7? Teruslah membaca untuk menemukan semua jawaban yang Anda butuhkan untuk bekerja dengan lini sel yang luar biasa ini!
|
Informasi Kultur Sel |
Garis Sel RAW 264.7 |
|
Waktu penggandaan populasi |
11 hingga 30 jam |
|
Patuh atau dalam suspensi |
Sebagian besar melekat, dengan beberapa populasi sel suspensi |
|
Kepadatan penyemaian |
4 x 10 ^ 4 sel / cm ^ 2 |
|
Media pertumbuhan yang direkomendasikan |
RPMI 1640 dilengkapi dengan 10% serum sapi janin dan L-glutamin (2,5 mM) |
|
Kondisi pertumbuhan yang optimal |
Inkubator yang dilembabkan dengan 5% CO2 dan suhu 37°C |
|
Penggantian media |
2 hingga 3 kali seminggu |
|
Penyimpanan |
Fase uap nitrogen cair |
|
Media pembekuan |
CM-1 atau CM-ACF |
|
Proses pembekuan |
Pembekuan lambat |
|
Proses pencairan |
Agitasi cepat dalam penangas air 37°C |
|
Tingkat keamanan hayati |
Laboratorium BSL-2 direkomendasikan |

Makrofag Murine RAW 264.7 pada pertemuan yang berbeda.
Keuntungan dan kerugian sel RAW 264.7
Keuntungan
- Kultur yang mudah: Garis sel RAW 264.7 mudah ditumbuhkan dan dipelihara di laboratorium tanpa persyaratan yang rumit.
- Berkarakter baik: RAW 264.7 adalah garis sel yang dikarakterisasi dengan baik, yang berarti memiliki fitur fenotipik dan fungsional yang stabil.
- Model makrofag in vitro: Karena sel RAW 264.7 adalah makrofag, mereka menunjukkan fungsi penting seperti makrofag seperti fagositosis dan pinositosis. Oleh karena itu, mereka sering digunakan sebagai model makrofag in vitro.
- Diferensiasi menjadi osteoklas: Sel RAW 264.7 dapat dibedakan menjadi osteoklas menggunakan faktor molekuler tertentu. Sel-sel yang terdiferensiasi ini mampu melakukan renovasi tulang, mirip dengan osteoklas.
Kekurangan
- Representasi makrofag primer yang buruk: Sebagai garis sel yang ditransformasikan, RAW 264.7 mungkin tidak secara akurat mewakili fitur makrofag primer dan mungkin memiliki beberapa perbedaan dalam ekspresi gen, fenotipe, dan fungsi.
- Keterbatasan dalam skrining obat: Sel RAW 264.7 mungkin tidak cocok untuk semua jenis tes skrining obat, dan responsnya terhadap beberapa obat mungkin berbeda dari makrofag primer.
- Adhesi sel yang kuat: Sel RAW 264.7 sangat melekat pada permukaan labu kultur dan terkadang sulit untuk dilepaskan.
Aplikasi Sel RAW 264.7 dalam Mimikri Makrofag dan Studi Imunologi
Memodelkan Respons Imunologi Seluler
Garis sel RAW 264.7, yang mencerminkan fungsi makrofag otentik, adalah model utama untuk penyelidikan respons sel terhadap patogen dan rangsangan imunologis. Sebuah penelitian yang menyoroti aspek ini menilai efek imunomodulator dan antioksidan dari bakteri asam laktat yang dibunuh dengan panas pada sel-sel ini, memberikan temuan yang signifikan dalam regulasi sistem kekebalan tubuh[5]
Melengkapi hal ini, penelitian yang dilakukan pada tahun 2019 menjelaskan dampak imunologis dari paparan RAW 264.7 terhadap polisakarida dari tanaman Polygonatum sibiricum. Penelitian tersebut menyimpulkan bahwa senyawa ini memicu respons imun dengan aktivasi jalur pensinyalan NF-κB / MAPK, yang menawarkan pemahaman molekuler yang mendalam[6]
Eksplorasi Osteoklastogenesis
Berfungsi sebagai pengganti untuk studi diferensiasi osteoklas, sel RAW 264.7 berkontribusi pada penjelasan perilaku osteoklas dan jalur diferensiasi. Penelitian tersebut memperluas pengetahuan kita tentang mekanisme resorpsi tulang dan patogenesis osteoporosis. Teknik pencitraan canggih sering digunakan untuk memantau perubahan intraseluler dan menganalisis metabolisme heme di dalam sel-sel ini
Memperoleh Wawasan Molekuler tentang Osteoklastogenesis
Terlepas dari peran utamanya sebagai model makrofag, sel RAW 264.7 juga digunakan untuk penelitian osteoklastogenesis in vitro. Dengan menginduksi karakteristik mirip osteoklas pada sel-sel ini, para peneliti mendapatkan wawasan tentang proses diferensiasi dan perilaku pra-osteoklas, meskipun sangat penting untuk mempertimbangkan karakteristik dan asal-usul garis sel yang melekat pada penelitian ini
Skrining Bioaktivitas Produk Alami
Penyaringan bioaktivitas dalam produk alami adalah aplikasi lain di mana sel RAW 264.7 unggul. Misalnya, penggunaannya dalam penelitian di Korea yang menyelidiki sifat imunostimulan dari campuran herbal menunjukkan keefektifan garis sel dalam mengidentifikasi senyawa bioaktif dalam bahan alami[7]
Memelopori penelitian Anda dengan sel RAW 264.7 kami
Publikasi penelitian yang menggunakan sel RAW 264.7
Banyak publikasi penelitian yang tersedia pada garis sel makrofag tikus RAW 264.7:
- Polisakarida dari Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute menginduksi respon imun pada garis sel RAW264. 7 melaluijalurNF-κB /MAPK: Studi ini mengusulkan bahwa polisakarida yang diperoleh dari tanaman Polygonatum sibiricum dapat memicu respons imun pada garis sel makrofag tikus RAW 264.7 melalui pengaturan kaskade pensinyalan NF-κB / MAPK.
- Efek imunomodulator dari ekstrak Tinospora crispa dan senyawa utamanya terhadap fungsi kekebalan makrofag RAW 264.7: Artikel yang diterbitkan dalam jurnal International Immunopharmacology ini menjelaskan bahwa ekstrak tanaman Tinosporacrispa dan konstituen utamanya memiliki efek imunomodulator dan stimulasi imun pada garis sel makrofag RAW 264.7.
- Bakteri asam laktat yang terbunuh olehpanas menghambat produksi oksida nitrat melalui sintase oksida nitrat yang dapat diinduksi dan siklooksigenase-2 dalam sel RAW 264.7: Studi ini mengusulkan bahwa bakteri asam laktat yang dibunuh dengan panas berpotensi digunakan dalam sintesis produk probiotik karena memiliki sifat modulator kekebalan dan antioksidan. Para peneliti menggunakan sel RAW 264.7 untuk mempelajari aktivitas biologis ini.
- Pengaruh formulasi herbal terhadap peningkatan respon imun pada makrofag RAW 264.7: Penelitian ini menggunakan sel RAW 264.7 untuk mempelajari efek stimulasi kekebalan dari formulasi herbal bernama KM1608. Studi ini menyarankan KM1608 sebagai agen peningkatan respon imun yang potensial.
- Sebuah penyaringan tanaman yang digunakan dalam pengobatan tradisional Kolombia mengungkapkan potensi anti-inflamasi dari kelopak Physalis angulata: Makalah ini diterbitkan dalam Saudi Journal of Biological Sciences menyelidiki potensi anti-inflamasi dari 10 tanaman tradisional Kolombia yang umum digunakan menggunakan sel RAW 264.7 yang dirangsang LPS.
Sel RAW 264.7: Sumber Daya, Protokol, Video & Lainnya
Sel RAW 264.7 sering digunakan dalam studi transfeksi. Sumber daya berikut menjelaskan berbagai metode transfeksi yang digunakan untuk garis sel RAW 264.7.
- Mentransfeksi sel RAW 264.7: Situs web ini akan memberikan protokol untuk mentransfeksi makrofag RAW 264.7 menggunakan reagen lipofektamin.
- Protokol transfeksi: Artikel yang diterbitkan ini menjelaskan protokol terperinci untuk transfeksi sel RAW 264.7.
- Metode Transfeksi yang Efisien untuk sel RAW 264.7: Dokumen ini menjelaskan pendekatan transfeksi praktis lainnya menggunakan sel RAW 264.7.
Video yang terkait dengan garis sel RAW 264.7
- Membudidayakan sel RAW 264.7: Video ini menjelaskan protokol penularan sel RAW 264.7.
- Metode transfeksi: Video ini adalah tentang mentransfeksi sel RAW 264.7 dengan gen reporter.
Pertanyaan Umum Penting tentang Garis Sel RAW 264.7: Wawasan ke dalam Penelitian Mimikri Makrofag dan Osteoklastogenesis
Referensi
- Taciak, B., dkk., Evaluasi stabilitas fenotipik dan fungsional garis sel RAW 264.7 melalui jalur serial. PloS one, 2018. 13(6): p. e0198943.
- Wang, S., dkk., Makrofag inflamasi mengganggu pematangan dan mineralisasi osteosit melalui pengaturan jalur pensinyalan Notch. Kedokteran Molekuler, 2022. 28(1): p. 102.
- Orekhov, AN, dkk., Diferensiasi monosit dan polarisasi makrofag. Vessel Plus, 2019. 3: p. 10.
- Khabipov, A., dkk., Polarisasi makrofag RAW 264.7 oleh sel kanker pankreas-sebuah model untuk mempelajari makrofag pemicu tumor. Penelitian Antikanker, 2019. 39(6): p. 2871-2882.
- Kang, C.-H., dkk., Bakteri asam laktat yang dibunuh dengan panas menghambat produksi oksida nitrat melalui sintase oksida nitrat yang dapat diinduksi dan siklooksigenase-2 dalam sel RAW 264.7. Probiotik dan Protein Antimikroba, 2021. 13(6): p. 1530-1538.
- Zhang, J., dkk., Polisakarida dari Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute menginduksi respons imun pada garis sel RAW264. 7 melalui jalur NF-κB / MAPK. Kemajuan RSC, 2019. 9(31): p. 17988-17994.
- Trinh, TA, dkk., Efek formulasi herbal pada peningkatan respons imun pada makrofag RAW 264.7. Biomolecules, 2020. 10(3): p. 424.