Sel P19 - Penelitian Karsinoma Embrionik menggunakan Sel P19
P19 adalah garis sel karsinoma embrionik murine. Sel ini banyak digunakan dalam penelitian biomedis, terutama untuk mempelajari biologi perkembangan, biologi sel punca, diferensiasi sel, dan skrining obat. Karena sel P19 memiliki kemampuan diferensiasi, sel ini dapat berguna dalam menyelidiki proses biologis yang kompleks seperti pembentukan jaringan dan perkembangan embrio awal. Pada artikel ini, kita akan membahas dasar-dasar sel P19 yang berasal dari tikus.
Karakteristik umum dan asal sel P19
Mengetahui tentang karakteristik umum dan asal-usul garis sel sangat penting sebelum Anda mulai bekerja dengannya. Bagian ini akan membahas hal-hal berikut: Apa yang dimaksud dengan garis sel P19? Berapa ukuran sel P19? Apa asal usul sel P19?
- P19 adalah jenis sel karsinoma embrionik pluripoten yang awalnya diperoleh dari teratokarsinoma yang dikembangkan pada tikus C3H/He. Garis sel ini pertama kali dibuat pada tahun 1982 oleh McBurney dan Rogers.
- Sel P19 dapat terus tumbuh dalam media kultur yang disuplementasi dengan serum. Sel ini dapat dibedakan menjadi jenis sel lain ketika terpapar dengan obat-obatan yang tidak beracun seperti asam retinoat dan dimetil sulfoksida (DMSO) [1].
- Sel-sel karsinoma tikus ini memiliki morfologi seperti epitel.
- Garis sel P19 memiliki kariotipe jantan euploid (n = 40; XY).
Informasi Kultur pada Sel P19
Lini sel P19 banyak dikultur di laboratorium penelitian karena karakteristiknya yang unik. Kulturnya mudah dan dapat dikelola. Bagian ini telah menyebutkan semua informasi penting yang Anda butuhkan untuk memelihara dan menumbuhkan kultur sel P19. Kami akan tahu: Berapa waktu penggandaan sel P19? Bagaimana Anda membudidayakan garis sel P19? Apakah P19 merupakan garis sel yang patuh?
Poin-poin Penting untuk Mengultur Sel P19
|
Waktu Penggandaan: |
Waktu penggandaan yang dilaporkan untuk garis sel P19 adalah sekitar 2 hingga 3 hari. |
|
Patuh atau dalam Suspensi: |
Garis sel karsinoma embrionik P19 bersifat patuh. |
|
Rasio subkultur: |
Sel P19 harus disubkultur setiap 48 jam, dan rasio pemisahan 1:10 harus dipertahankan untuk sel-sel ini. Sel-sel yang melekat dicuci dengan 1 X larutan garam penyangga fosfat dan diinkubasi dengan Accutase sampai sel-selnya terpisah. Sel ditambahkan dengan media kultur dan dipanen melalui sentrifugasi. Sel yang terkumpul diresuspensi dengan hati-hati dan disalurkan ke dalam labu baru. |
|
Media Pertumbuhan: |
Media DMEM / Ham's F12 yang mengandung 5% Fetal bovine serum, 3,1 g / L Glukosa, 1,6 mM L-Glutamin, 1,0 mM Sodium piruvat, 15 mM HEPES dan 1,2 g / L NaHCO3 digunakan untuk kultur sel P19. |
|
Kondisi Pertumbuhan: |
Inkubator yang dilembabkan yang diatur pada suhu 37 ° C dengan pasokan CO2 5% sangat penting untuk menumbuhkan dan membiakkan garis sel karsinoma embrionik P19. |
|
Penyimpanan: |
Botol sel P19 beku harus disimpan pada suhu di bawah -150 ° C dalam freezer atau fase uap nitrogen cair untuk menjaga kelangsungan hidup sel untuk jangka panjang. |
|
Proses Pembekuan dan Media: |
Media CM-1 atau CM-ACF dapat digunakan untuk membekukan sel P19 menggunakan metode pembekuan lambat yang melindungi sel dari goncangan apa pun dan mempertahankan kelangsungan hidupnya. |
|
Proses Pencairan: |
Sel P19 yang dibekukan dapat dicairkan dalam penangas air bersuhu 37°C dengan mengaduk botol secara cepat selama 40 hingga 60 detik. Sel ditambahkan dengan media segar dan disentrifugasi untuk menghilangkan elemen media yang membeku. Palet sel kembali diresuspensi, dan sel dituangkan ke dalam labu baru untuk pertumbuhan. |
|
Tingkat Keamanan Hayati: |
Pengaturan laboratorium tingkat keamanan hayati 1 diperlukan untuk lini sel P19. |
Garis sel P19: Keuntungan & Kerugian
Bagian ini akan membahas keuntungan dan kerugian dari lini sel P19.
Keuntungan
- Potensi diferensiasi: Sel P19 dapat berdiferensiasi menjadi berbagai jenis sel, termasuk kardiomiosit, neuron, dan sel mikroglial. Mereka membutuhkan obat tidak beracun untuk diferensiasi, seperti asam retinoat dan dimetil sulfoksida (DMSO). Asam retinoat menginduksi perkembangan neuron, mikroglia, dan astroglia, sedangkan DMSO memulai perkembangan kardiomiosit dan sel otot polos. Dengan demikian, sel P19 berguna dalam mempelajari diferensiasi sel dan proses perkembangan
- Sistem model: Garis sel karsinoma embrionik pluripoten P19 adalah model yang berharga untuk mempelajari perkembangan embrio awal. Para peneliti menggunakan sel P19 untuk menjelaskan jalur pensinyalan sel dan mekanisme seluler dan molekuler yang terlibat dalam proses ini
Kekurangan
- Asal murine: P19 adalah garis sel karsinoma embrionik murin. Akibatnya, temuan dari penelitian yang menggunakan sel-sel ini mungkin tidak sepenuhnya diterjemahkan ke dalam biologi dan proses manusia
Aplikasi penelitian sel P19
Sel P19 memiliki beberapa aplikasi penelitian karena kemampuan diferensiasi dan relevansinya dengan biologi perkembangan dan penelitian sel punca. Beberapa aplikasi penelitian penting dari sel karsinoma embrionik P19 meliputi:
- Studi diferensiasi sel: Seperti yang kita ketahui, sel P19 dapat berdiferensiasi menjadi neuron, mikroglial, sel otot polos, dan kardiomiosit; dengan demikian banyak digunakan untuk mempelajari proses diferensiasi sel. Selain itu, hal ini membantu penelitian untuk menyelidiki perkembangan saraf dan jantung serta mekanisme yang mendasarinya. Sebuah studi yang dilakukan pada tahun 2018 menemukan bahwa spesies oksigen reaktif (ROS) mengarahkan diferensiasi sel P19 ke dalam jenis sel tertentu dan mencegah induksi yang lain [3]. Studi lain mengeksplorasi proses diferensiasi saraf yang dimediasi oleh asam retinoat dan menemukan keterlibatan jalur pensinyalan PI3K / Akt / GSK3β [4].
- Biologi perkembangan: Sel P19 adalah model yang sangat berharga untuk mempelajari perkembangan embrio awal. Mereka membantu para peneliti memahami proses biologis yang kompleks, seperti pembentukan jaringan selama perkembangan embrio. Penelitian ini menggunakan sel P19 dan mempelajari faktor molekuler yang berkontribusi terhadap pembentukan defek septum ventrikel (VSD). Temuan ini mengungkapkan bahwa RNA noncoding SNHG6 yang panjang berkontribusi pada VSD dengan mengatur miRNA-101 secara negatif dan mengaktifkan jalur Wnt/β-catenin [5].
- Pengujian obat: Garis sel karsinoma embrionik tikus P19 juga digunakan untuk menyaring kandidat obat potensial. Sebuah penelitian menggunakan neuron sel P19 yang terdiferensiasi dan menyelidiki efek penghambatan asetilkolinesterase neuroprotektif dari L-Dopa sintetis dan ekstrak air biji koro pedang. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak tanaman menunjukkan hasil yang menjanjikan dibandingkan dengan L-Dopa [6].
Beli Lini Sel P19 Anda Hari Ini
Sel P19: Publikasi penelitian
Bagian artikel ini akan membahas beberapa publikasi penelitian yang menarik yang menampilkan sel P19.
Artikel ini diterbitkan dalam Oncology Reports pada tahun 2017. Studi ini mengusulkan bahwa hormon seks hipofisis mendorong adhesi, proliferasi, dan migrasi garis sel teratokarsinoma, termasuk sel P19.
RNA non-coding yang panjang uc. 4 memengaruhi diferensiasi sel melalui jalur pensinyalan TGF-beta
Publikasi dalam jurnal Experimental & Molecular Medicine (2018) ini menggunakan sel P19 dan mempelajari fungsi RNA non-coding uc.4. Temuan ini mengungkapkan bahwa uc.4 memengaruhi diferensiasi sel melalui modulasi jalur pensinyalan TGF beta.
Artikel penelitian ini diterbitkan pada tahun 2018 di Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. Penelitian ini menemukan bahwa ekstrak jaringan otak alami dan kultur sel 3D dapat mempercepat diferensiasi sel karsinoma embrionik P19 menjadi sel saraf.
Penelitian ini dipublikasikan di Journal of Ethnopharmacology pada tahun 2020. Penelitian ini mengusulkan bahwa ekstrak daun Cichorium intybus L. dapat menginduksi diferensiasi pada sel karsinoma embrionik P19 menjadi sel β pankreas penghasil insulin.
Penelitian ini dipublikasikan di Molecules (2022). Penelitian ini mengeksplorasi efek penghambatan neuroprotektif dan asetilkolinesterase dari ekstrak biji kacang koro pedang pada neuron sel P19.
Sumber daya untuk garis sel P19: Protokol, Video, dan Lainnya
Berikut ini adalah beberapa sumber daya tentang sel P19.
- Protokol diferensiasi neuron sel P19: Artikel ini berisi protokol diferensiasi saraf sel P19 dan informasi berguna lainnya tentang diferensiasi sel P19.
- Transfeksi sel P19: Tautan ini akan membantu Anda mempelajari protokol transfeksi sel P19.
Tautan berikut berisi protokol kultur sel p19.
- Sel P19: Situs web ini berisi semua informasi yang berguna tentang garis sel P19, termasuk kondisi kultur, media sel P19, pemisahan sel, dan banyak lagi.
Menjelajahi Garis Sel P19: Pertanyaan yang Sering Diajukan
Referensi
- McBurney, MW, Sel karsinoma embrionik P19. Int J Dev Biol, 1993. 37(1): p. 135-40.
- Bressler, J., dkk., Garis Sel Karsinoma Embrionik P19: Sebuah Model Untuk Mempelajari Interaksi Gen-Lingkungan. Cell Culture Techniques, 2011: p. 223-240.
- Pashkovskaia, N., U. Gey, dan G. Rödel, ROS mitokondria mengarahkan diferensiasi sel P19 pluripoten murine. Penelitian Sel Punca, 2018. 30: p. 180-191.
- Fu, F., dkk., All-trans-retinoid acid menginduksi diferensiasi sel P19 menjadi neuron yang terlibat dalam jalur pensinyalan PI3K / Akt / GSK3β. Jurnal Biokimia Seluler, 2020. 121(11): p. 4386-4396.
- Jiang, Y., dkk., RNA noncoding panjang SNHG6 berkontribusi pada pembentukan defek septum ventrikel melalui regulasi negatif miR-101 dan aktivasi jalur Wnt / β-catenin. Die Pharmazie-Jurnal Internasional Ilmu Farmasi, 2019. 74(1): p. 23-28.
- Kamkaen, N., dkk., Ekstrak air biji kacang koro pedang meningkatkan efek penghambatan neuroprotektif dan asetilkolinesterase dibandingkan dengan L-dopa sintetis. Molecules, 2022. 27(10): p. 3131.