Sel NIH-3T3: Memajukan Studi Fibroblas dan Aplikasi NIH-3T3
Garis sel NIH-3T3, yang dibuat dari jaringan embrio tikus Swiss Albino berusia 17 hari pada tahun 1962 oleh Howard Green dan George Todaro di Fakultas Kedokteran Universitas New York, telah menjadi sumber daya mendasar dalam penelitian biomedis. Dikenal karena daya reseptivitasnya yang tinggi terhadap virus leukemia dan pembentukan fokus virus sarkoma, sel NIH-3T3 berfungsi sebagai alat penting untuk sejumlah besar pertanyaan ilmiah, termasuk studi onkologi virus, analisis ekspresi gen, dan eksplorasi dinamika pertumbuhan sel. Nomenklatur "3T3" mencerminkan metode kultur sel, yang menunjukkan interval "transfer 3 hari" dengan kepadatan pembenihan awal 3 × 10^5 sel, yang menyoroti kondisi standar di mana sel-sel ini pertama kali dikultur dan diperluas.
Beragam Morfologi dan Aplikasi Sel NIH-3T3
Salah satu karakteristik khas sel NIH-3T3 adalah kemampuan adaptasi morfologinya, yang bervariasi secara signifikan dengan pertemuan kultur. Pada kepadatan yang lebih rendah, fibroblas ini menampilkan struktur sel soliter berbentuk gelendong, berevolusi menjadi pola yang padat dan berputar-putar saat populasi mencapai pertemuan. Dengan diameter rata-rata sekitar 18 μm, sel NIH-3T3 menawarkan model serbaguna untuk studi biologi sel yang mendalam, mulai dari mekanisme perbaikan jaringan hingga jalur rumit regulasi siklus sel.
Informasi budaya
Rincian Kultur Utama:
Waktu Penggandaan Populasi: Sekitar 20 jam.
Tipe Pertumbuhan: Kultur yang patuh.
Kepadatan Penyemaian: Direkomendasikan: 3 hingga 4 x 10 ^ 4 sel / cm ^ 2.
Media pertumbuhan: DMEM atau Ham's F12, ditambah dengan 5% FBS dan 2,5 mM L-glutamin.
Kondisi Pertumbuhan: Pertahankan pada suhu 37 ° C dalam inkubator yang dilembabkan dengan 5% CO2.
Penyimpanan: Simpan pada suhu di bawah -195 ° C dalam fase uap nitrogen cair.
Metode Pembekuan: Gunakan media CM-1 atau CM-ACF; gunakan metode pembekuan lambat (penurunan suhu 1°C).
Protokol Pencairan: pemanasan cepat dalam penangas air 37°C, diikuti dengan sentrifugasi untuk menghilangkan media pembekuan, kemudian resuspensi dalam media pertumbuhan.
Tingkat Keamanan Hayati: Kultur membutuhkan pengaturan keamanan hayati level 1.
Tikus Swiss Albino di laboratorium.
Pro dan Kontra Menggunakan Sel NIH 3T3
Keuntungan
Efisiensi Transfeksi: Dikenal dengan tingkat transfeksi yang tinggi, sel NIH-3T3 sangat baik untuk studi ekspresi gen sementara dan stabil, mengakomodasi berbagai teknik transfeksi.
Utilitas Lapisan Pengumpan: Sel-sel ini sering berfungsi sebagai lapisan pengumpan yang mendukung untuk kultur bersama dengan sel-sel seperti keratinosit dan sel punca, berkat pelepasan faktor pertumbuhan yang mendorong pertumbuhan sel yang dikultur bersama.
PenelitianSel Punca : Sel NIH-3T3 adalah pilihan yang lebih disukai dalam penelitian sel punca untuk menginduksi pluripotensi tanpa modifikasi genetik dan menyediakan lingkungan yang kondusif untuk diferensiasi sel punca.
Stabilitas kultur: Sel NIH-3T3 dikenal dengan stabilitas dan frekuensi transformasi spontan yang rendah. Namun, dalam kondisi tertentu atau setelah terpapar onkogen atau mutagen tertentu, sel NIH-3T3 dapat mengalami transformasi spontan. Transformasi ini dapat menyebabkan perolehan sifat kanker seperti pertumbuhan yang tidak terkendali, hilangnya penghambatan kontak, dan kemampuan untuk membentuk tumor ketika disuntikkan ke dalam inang yang rentan.
Kekurangan
Ukuran Sel Tidak Konsisten: Morfologi sel NIH-3T3 yang memanjang dan seperti gelendong dapat bervariasi, sehingga menyulitkan analisis gambar dalam pengujian.
Kerentanan Infeksi: Sel-sel ini rentan terhadap infeksi bakteri dan mikoplasma jika tidak dipertahankan dalam kondisi aseptik yang ketat, yang berpotensi memengaruhi integritas eksperimental.
Aplikasi Penelitian Sel NIH-3T3
Studi Transfeksi DNA: Ketahanan sel NIH-3T3 menjadikannya ideal untuk memperkenalkan dan mempelajari fungsi berbagai gen, yang ditunjukkan dalam penelitian yang meneliti protein seperti NAB2-STAT6 dan perannya dalam proses seluler.
Pengujian Berbasis Sel: Keandalannya meluas ke berbagai pengujian, termasuk uji viabilitas, apoptosis, dan uji pembentukan fokus, yang menawarkan wawasan tentang respons seluler dalam kondisi eksperimental yang berbeda.
Penelitian Siklus Sel: Manipulasi siklus sel langsung dari garis sel melalui tingkat serum menjadikannya model yang kuat untuk mempelajari regulasi siklus sel dan penyimpangannya dalam konteks penyakit.
Tingkatkan Penelitian Anda dengan Sel NIH-3T3
Menyoroti Studi Utama yang Melibatkan garis sel fibroblas NIH 3T3
Lini sel NIH-3T3 telah berperan penting dalam berbagai proyek penelitian, yang mencakup berbagai aspek biologi seluler. Di bawah ini adalah beberapa penelitian penting yang menggunakan sel ini:
- Mengeksplorasi Protein Fusi NAB2-STAT6: Diterbitkan dalam Biochemical and Biophysical Research Communications, penelitian ini mempelajari bagaimana protein fusi NAB2-STAT6 berdampak pada sel NIH-3T3, khususnya perannya dalam meningkatkan pertumbuhan dan migrasi sel melalui regulasi EGR-1
- Menyelidiki APOBEC3 dan Murine Leukemia Virus: Penelitian dalam jurnal Virology ini meneliti hipermutasi virus leukemia murin AKV pada sel NIH-3T3 yang mengekspresikan gen APOBEC3 tikus
- Mengevaluasi Potensi Antimetastatik Obat Epigenetik: Dalam Oncotargets and Therapy, penelitian ini menilai efek antimetastasis dari hydralazine dan asam valproat pada sel NIH-3T3 yang mengalami transformasi RAS
- Dampak Baicalein pada Proliferasi NIH-3T3 dan Sintesis Kolagen: Penelitian ini menggunakan sel NIH-3T3 untuk mengeksplorasi bagaimana Baicalein memengaruhi proliferasi sel dan produksi kolagen melalui modulasi sumbu faktor pertumbuhan-1 miR-9 / insulin-like growth factor-1
- Mempelajari Penipisan Riboflavin dan Tumorigenesis: Studi ini menyajikan temuan tentang bagaimana kekurangan riboflavin dalam sel NIH-3T3 berkontribusi pada tumorigenesis dengan mendorong proliferasi sel dan disregulasi gen siklus sel
Sumber Daya Penting untuk Penelitian Sel NIH-3T3
Bagi para peneliti yang tertarik untuk bekerja dengan sel NIH-3T3, berbagai sumber daya tersedia untuk memandu kultur dan protokol eksperimental:
- Pembentukan Spheroid dalam Sel NIH-3T3: Video ini memberikan panduan terperinci untuk membentuk spheroid, teknik kultur sel 3D yang menggabungkan sel NIH-3T3 ke dalam kelompok, menawarkan model yang lebih relevan secara fisiologis untuk penelitian
- Memantau Pertumbuhan Sel NIH-3T3: Melalui sistem pencitraan sel hidup JuLI Br, video ini menangkap dinamika pertumbuhan sel NIH-3T3 selama 65 jam, yang menampilkan proliferasi sel secara real-time
Sumber daya ini bertujuan untuk mendukung upaya penelitian Anda dengan sel NIH-3T3, memberikan dasar untuk eksperimen dan penemuan yang sukses.
Pertanyaan yang Sering Diajukan tentang sel NIH-3T3
Referensi
- Rahimi, A.M., M. Cai, dan S. Hoyer-Fender, Heterogenitas Garis Sel Fibroblas NIH3T3. Cells, 2022. 11(17): p. 2677.
- Leibiger, C., dkk., Karakterisasi resolusi tinggi sitogenetik molekuler pertama dari garis sel NIH 3T3 dengan pita multi warna murine. Jurnal Histokimia & Sitokimia, 2013. 61(4): p. 306-312.
- Wang, H.-X., dkk., Analisis perbandingan lapisan pengumpan yang berbeda dengan fibroblas 3T3 untuk kultur sel punca limbal kelinci. Jurnal Internasional Oftalmologi, 2017. 10(7): p. 1021.
- Wang, Z., dkk., Diferensiasi sel neuron dari fibroblas NIH / 3T3 di bawah kondisi yang ditentukan. Perkembangan, pertumbuhan & diferensiasi, 2011. 53(3): p. 357-365.
- Park, Y.-S., dkk., Protein fusi NAB2-STAT6 memediasi proliferasi sel dan perkembangan onkogenik melalui regulasi EGR-1. Komunikasi Penelitian Biokimia dan Biofisika, 2020. 526(2): p. 287-292.
- Mattsson, M., Ekspresi Sloppymerase ™ dalam Sel NIH / 3T3: Menjelajahi Keserbagunaan Polimerase Fusi yang Rentan terhadap Kesalahan. 2021.
- Sahinturk, V., dkk., Akrilamida menunjukkan sitotoksisitasnya pada sel fibroblas NIH/3T3 melalui apoptosis. Toksikologi dan Kesehatan Industri, 2018. 34(7): p. 481-489.
- Lusi, E.A. dan F. Caicci, Penemuan Virus Raksasa Retro-Retro Manusia Pertama: Deskripsi morfologi, retroviral kinase, dan kemampuannya untuk menginduksi tumor pada tikus. bioRxiv, 2019: p. 851063.
- Endo, M., dkk.,PensinyalanE2F1-Ror2memediasi regulasi transkripsi terkoordinasi untuk mendorong transisi fase G1 / S padafibroblas NIH / 3T3yang dirangsang olehbFGF. Jurnal FASEB, 2020. 34(2): p. 3413-3428.
- Long, L., dkk., Penipisan Riboflavin Mempromosikan Tumorigenesis pada Sel HEK293T dan NIH3T3 dengan Mempertahankan Proliferasi Sel dan Mengatur Transkripsi Gen yang Berhubungan dengan Siklus Sel. Jurnal Nutrisi, 2018. 148(6): p. 834-843.