Garis Sel INS-1
INS-1 adalah garis sel insulinoma tikus yang dikarakterisasi dengan baik yang banyak digunakan dalam penelitian diabetes. Sel INS-1 mensekresikan insulin pada stimulasi glukosa; oleh karena itu, sel ini digunakan untuk mempelajari metabolisme glukosa, fisiologi sel beta, dan regulasi sekresi insulin. Selain itu, sel-sel ini juga digunakan dalam skrining, pengujian, dan pengembangan terapi potensial terhadap diabetes mellitus.
Artikel ini akan memberi Anda semua informasi yang diperlukan tentang sel beta INS-1 yang perlu Anda ketahui sebelum menggunakannya dalam penelitian Anda. Terutama, Anda akan mempelajari hal-hal berikut:
- Karakteristik umum dan asal sel INS-1
- Garis sel INS-1: Informasi kultur
- Keuntungan & kerugian dari garis sel INS-1
- Aplikasi penelitian sel insulinoma tikus INS-1
- Publikasi penelitian yang menampilkan sel beta INS-1
- Sumber daya untuk garis sel INS-1: Protokol, Video, dan Lainnya
1. Karakteristik umum dan asal sel INS-1
Mengetahui tentang fitur umum dan asal-usul garis sel dapat sangat membantu Anda menggunakannya secara efisien dan efektif dalam penelitian Anda. Bagian artikel ini akan memberi tahu Anda tentang asal dan karakteristik umum INS-1. Anda akan tahu: Apa itu garis sel Insulinoma tikus INS-1? Apa saja karakteristik umum INS-1? Apa itu garis sel INS-1 832/3? Apa itu INS-1E?
- Sel INS-1 pada awalnya diisolasi dari tikus berusia 666 hari dengan insulinoma transplantasi yang diinduksi sinar-X.
- Sel INS-1 bersifat bi-hormonal. Sel-sel ini secara simultan mengekspresikan protein insulin dan proglukagon. Sel-sel ini dianggap belum matang karena menunjukkan tingkat ekspresi yang rendah dari faktor transkripsi Nkx6.1 dan tidak memiliki penanda sel alfa [1].
- Ada dua subklon sel INS-1, yaitu INS-1E dan INS-1 832/3.
- INS-1E berbeda dari garis sel induk INS-1 dalam hal respons sekresi terhadap glukosa dan insulin.
- INS-1 832/3 atau INS-1 832/13 juga merupakan subklon dari garis sel INS-1. Ini adalah model yang sangat berharga untuk mempelajari fungsi sel beta pulau pankreas dan regulasi sekresi insulin. Ini juga berbeda dari sel INS-1 induk dalam konteks sekresi insulin yang dirangsang glukosa (GSIS).
2. Garis sel INS-1: Informasi kultur
Untuk menangani dan memelihara lini sel secara efisien, Anda harus mengetahui informasi kultur berikut ini. Bagian artikel ini akan membahas semua poin penting untuk menumbuhkan sel INS-1. Anda akan belajar: Bagaimana cara membiakkan sel beta INS-1? Apa itu protokol kultur sel INS-1? Berapa waktu penggandaan sel INS-1? Apa media sel insulinoma tikus INS-1?
Poin-poin Penting untuk Kultur Sel INS-1
|
Waktu Penggandaan: |
Waktu penggandaan populasi sel INS-1 adalah sekitar 44 jam. |
|
Patuh atau dalam Suspensi: |
Sel INS-1 tumbuh baik dalam bentuk suspensi maupun melekat. |
|
Rasio Sub-kultivasi: |
Sel INS-1 disubkultur dengan rasio pemisahan 1:3. Secara singkat, sel yang tersuspensi dikumpulkan. Sel-sel yang melekat dibilas dengan PBS dan diinkubasi dengan larutan Accutase. Setelah sel terlepas ditambahkan dengan media segar. Setelah itu, sel yang tersuspensi dan sel yang melekat disentrifugasi dan dikumpulkan. Sel diresuspensi dengan hati-hati dan disalurkan ke dalam labu baru untuk pertumbuhan. |
|
Media Pertumbuhan: |
RPM1 1640 digunakan untuk menumbuhkan garis sel insulinoma INS-1rat. Media dilengkapi dengan 10% serum sapi janin yang tidak aktif, 2,1 mM Glutamin stabil, 10 mM HEPES, 2,0 g / L NaHCO3, dan 1 mM natrium piruvat. |
|
Kondisi Pertumbuhan: |
Sel INS-1 disimpan dalam inkubator yang dilembabkan pada suhu 37 ° C dan dengan suplai CO2 5% secara terus menerus. |
|
Penyimpanan: |
Sel beta INS-1 dapat disimpan dalam fase uap nitrogen cair atau pada suhu di bawah -150 ° C dalam freezer listrik untuk jangka panjang. |
|
Proses dan Media Pembekuan: |
Media CM-1 atau CM-ACF digunakan untuk membekukan sel INS-1 melalui proses pembekuan yang lambat. Ini hanya memungkinkan penurunan suhu 1°C per menit untuk melindungi kelangsungan hidup sel. |
|
Proses Pencairan: |
Sel INS-1 beku dicairkan dalam penangas air yang telah diatur sebelumnya pada suhu 37 derajat Celcius selama 40 hingga 60 detik. Setelah dicairkan, sel ditambahkan dengan media segar dan langsung dituangkan ke dalam labu baru untuk pertumbuhan. Setelah 24 jam, media diganti untuk menghilangkan komponen media yang membeku. |
|
Tingkat Keamanan Hayati: |
Laboratorium keamanan hayati tingkat 1 diperlukan untuk membiakkan sel insulinoma tikus INS-1. |
3. keuntungan & Kerugian dari garis sel INS-1
Seperti lini sel lainnya, INS-1 juga memiliki beberapa fitur berbeda yang terkait dengan pro dan kontra tertentu. Di sini, kami telah menyebutkan beberapa yang penting.
Keuntungan
Keuntungan utama dari garis sel INS-1 adalah:
-
Terkarakterisasi dengan baik
INS-1 adalah garis sel yang mapan dan berkarakter baik. Ini telah digunakan dalam berbagai studi penelitian. Ini mempertahankan karakteristik fenotipik dan kapasitas sekresi insulin dalam jangka waktu yang lebih lama, sehingga memberikan hasil eksperimental yang dapat diandalkan dan konsisten.
-
Model sel beta
Sel INS-1 digunakan untuk mempelajari fungsi sel beta pulau pankreas karena mereka mengeluarkan insulin dan responsif terhadap fluktuasi kadar glukosa.
kekurangan
Kerugian dari sel INS-1 adalah:
-
Bukan berasal dari manusia
Sel beta INS-1 tidak berasal dari manusia. Mereka berasal dari insulinoma tikus. Hal ini dapat menyebabkan perbedaan spesifik spesies dan membatasi terjemahan langsung dari hasil eksperimental ke fisiologi manusia.
4. Aplikasi penelitian sel insulinoma tikus INS-1
Sel beta INS-1 banyak digunakan dalam penelitian diabetes. Beberapa aplikasi yang menjanjikan dari garis sel ini disebutkan di sini.
- Studi sekresi insulin: Sel INS-1 memiliki kemampuan mensekresi insulin dan dengan demikian digunakan secara luas untuk mempelajari mekanisme seluler yang mendasari sekresi insulin. Para peneliti menyelidiki faktor-faktor penting yang terlibat dalam pelepasan insulin, termasuk metabolisme glukosa, jalur sinyal, hormon, dan agen farmakologis. Sebuah penelitian menemukan bahwa jalur yang bergantung pada saluran ion K + ATP mengatur sekresi insulin dalam sel beta INS-1 [2]. Selain itu, penelitian juga mengungkapkan bahwa jalur GLP-1R dan AKT/PDX1 juga terlibat dalam sekresi insulin pada sel insulinoma tikus INS-1 [3].
- Studi fungsi sel beta: Sel INS-1 memiliki karakteristik seperti sel beta pulau pankreas seperti responsif terhadap metabolisme glukosa dan sekresi insulin. Oleh karena itu, sel ini digunakan untuk mempelajari proses dan fungsi fisiologis sel beta. Sebuah penelitian yang dilakukan pada tahun 2022 menggunakan sel INS-1 dan mengembangkan model disfungsi sel beta melalui H2O2. Mereka mempelajari kelangsungan hidup sel, sekresi insulin, dan penanda terkait stres oksidatif pada sel-sel ini sebagai respons terhadap pengobatan senyawa alami [4].
- Penemuan dan pengembangan obat: Sel insulinoma tikus INS-1 banyak digunakan untuk menyaring dan menguji senyawa atau obat anti-diabetes. Sel ini dapat digunakan untuk mempelajari efek potensial agen terapeutik pada sekresi insulin dan parameter relevan lainnya. Sebuah penelitian menemukan bahwa loganin, komponen dari formula herbal Tiongkok, melindungi fungsi sekresi insulin dari sel INS-1 dan memberikan efek anti-diabetes yang potensial. Komponen ini memediasi efek menguntungkan ini dengan menghambat translokasi nuklir gen FOXO1 melalui jalur PI3K / AKT [5].
5. Publikasi penelitian yang menampilkan sel beta INS-1
Berikut ini adalah beberapa publikasi penelitian penting yang menampilkan garis sel insulinoma tikus INS-1.
Penelitian ini diterbitkan dalam International Journal of Molecular Sciences pada tahun 2018. Studi ini mengusulkan bahwa senyawa alami kristal kuning, Alpha-mangostin, meningkatkan sekresi insulin dalam sel beta INS-1 dan melindunginya dari kerusakan yang disebabkan oleh streptozotocin toksin sel beta.
Penelitian ini dipublikasikan di acta pharmacologica sinica pada tahun 2018. Temuan penelitian mengungkapkan bahwa senyawa epicatechin meningkatkan sekresi insulin yang dirangsang glukosa dalam sel beta INS-1 yang mengalami gangguan asam lemak jenuh melalui aktivasi jalur CaMKII.
Artikel dalam Molecules (2019) ini mengusulkan bahwa senyawa alami baru Phenylethanoid Glycoside mempengaruhi sekresi insulin pada sel insulinoma tikus INS-1, dan dengan demikian memiliki potensi anti-diabetes.
Loureirin B meningkatkan sekresi insulin melalui jalur GLP-1R dan AKT/PDX1
Penelitian ini dipublikasikan di European Journal of Pharmacology (2022). Studi ini mengusulkan bahwa Loureirin B, produk alami meningkatkan sekresi insulin dalam sel beta pulau pankreas INS-1 melalui modulasi jalur AKT / PDX1 dan GLP-1R.
Artikel Penelitian Pengobatan Integratif (2018) ini mengevaluasi potensi antikanker ekstrak Withania coagulans menggunakan sel kanker INS-1.
6. Sumber daya untuk garis Sel INS-1: Protokol, Video, dan Lainnya
Berikut adalah beberapa sumber daya online yang menampilkan sel INS-1:
- Sel suspensi subkultur: Video ini adalah panduan komprehensif untuk subkultur sel yang tumbuh dalam kultur suspensi.
- Mensubkultur sel yang melekat: Video ini akan membantu Anda mempelajari protokol umum untuk melewatkan sel yang melekat.
Tautan berikut berisi protokol kultur sel INS-1:
- Garis sel INS-1: Situs web ini berisi semua informasi tentang kultur sel INS-1. Ini mencakup informasi kultur sel INS-1 dan media pembekuan, protokol untuk subkultur, dan penanganan kultur kriopreservasi dan proliferasi INS-1.
Referensi
- Acosta-Montalvo, A., dkk., Ekspresi dan Sekresi Peptida yang Berasal dari Proglukagon pada Sel Insulinoma INS-1 Tikus. Front Cell Dev Biol, 2020. 8: p. 590763.
- Park, JE dan JS Han, Ekstrak Portulaca oleracea L. meningkatkan sekresi insulin melalui jalur yang bergantung pada saluran K+ ATP dalam sel β pankreas INS-1. Penelitian dan Praktik Gizi, 2018. 12(3): p. 183.
- Fang, H., dkk., Loureirin B meningkatkan sekresi insulin melalui jalur GLP-1R dan AKT/PDX1. European Journal of Pharmacology, 2022. 936: p. 175377.
- Duan, J., dkk., Swietenine dan swietenolide dari Swietenia macrophylla king meningkatkan sekresi insulin dan melemahkan apoptosis pada sel INS-1 yang diinduksi H2O2. Toksikologi Lingkungan, 2022. 37(11): p. 2780-2792.
- Mo, F.-F., dkk., Efek anti-diabetes dari loganin dengan menghambat translokasi nuklir FOXO1 melalui jalur pensinyalan PI3K / Akt dalam sel INS-1. Jurnal Ilmu Kedokteran Dasar Iran, 2019. 22(3): p. 262.