Sel Hep3B: Penelitian dan Penemuan Kanker Hepatoseluler
HEP3B adalah garis sel karsinoma hepatosit manusia yang diimortalkan. Sel ini banyak digunakan dalam penelitian toksisitas hati dan metabolisme obat. Efisiensi transfeksi HEP3B cukup tinggi; oleh karena itu, sel-sel ini umumnya digunakan untuk mempelajari perkembangan, progresivitas, dan intervensi terapeutik kanker hati. Artikel ini mencakup semua informasi yang diperlukan tentang garis sel HEP3B untuk membantu Anda dalam menggunakannya. Secara khusus, artikel ini akan mencakup:
- Media Pertumbuhan
- Media EMEM yang mengandung 10% FBS, 2,2 g/L NaHCO3, 2 mM L-Glutamine, dan Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) digunakan untuk membiakkan sel HEP3B.
- Waktu Perlipatan
- Waktu penggandaan sel HEP3B sekitar 36 jam.
- Jenis Pertumbuhan
- Garis sel hepatoma ini bersifat melekat.
- Tingkat Keamanan Biologis
- BSL-1
- Tersedia dari
- Cytion — Pesan HEP3B
- Karakteristik umum dan asal sel HEP3B
- Informasi kultur tentang garis sel HEP3B
- Garis sel HEP3B: Keunggulan & Keterbatasan
- Aplikasi sel HEP3B dalam penelitian
- Publikasi tentang garis sel HEP3B
- Sumber daya untuk garis sel HEP3B: Protokol, Video, dan Lainnya
Karakteristik umum dan asal sel HEP3B
Informasi utama yang Anda perlukan tentang garis sel adalah asal-usul dan karakteristik umumnya. Hal ini dapat membantu Anda memutuskan penggunaannya dalam penelitian Anda dan membantu Anda dalam mengelolanya. Bagian artikel ini mencakup semua informasi penting tentang asal-usul dan karakteristik HEP3B. Di sini Anda akan mempelajari: Apa itu garis sel Hep 3B? Dari mana asal sel Hep3B? Bagaimana morfologi sel HEP3B?
- HEP3B, garis sel hepatoma manusia yang berkelanjutan, berasal dari jaringan hati seorang anak laki-laki Afrika berusia 8 tahun yang menderita karsinoma hepatoseluler (HCC). Sel ini didirikan oleh Aden dan rekan-rekannya pada tahun 1979 di laboratorium Barbara B. Knowles, Wistar Institute, Philadelphia, AS [1].
- Sel HEP3B memiliki integrasi genom virus hepatitis B (HBV) dalam kromosomnya.
- Sel-sel karsinoma hepatosit ini menunjukkan morfologi epitel.
- Sel HEP3B memiliki jumlah kromosom modal sebesar 60. Tidak seperti HepG2, sel ini tidak memiliki kromosom 1 yang tersusun ulang.
Apa perbedaan antara HepG2 dan Hep3B?
HepG2 dan HEP3B berbeda dalam jumlah kromosom per sel. HEP3B mengandung 60 kromosom, sedangkan sel HepG2 memiliki rata-rata 55 kromosom. Selain itu, HepG2 bersifat non-tumorigenik dan negatif hepatitis B, sedangkan HEP3B bersifat tumorigenik dan positif HBV.
Informasi tentang kultur sel HEP3B
Pengetahuan tentang informasi kultur suatu garis sel dapat memudahkan Anda dalam mengolahnya. Bagian ini mencakup semua poin penting untuk kultur garis sel HEP3B HBV, termasuk: Berapa lama waktu penggandaan sel HEP3B? Apa saja kondisi kultur HEP3B? Bagaimana cara mengkultur sel HEP3B HCC?
Poin-Poin Penting dalam Pembiakan Sel HEP3B
Waktu Penggandaan:
Waktu penggandaan sel HEP3B adalah sekitar 36 jam.
Menempel atau dalam Suspensi:
Garis sel hepatoma ini bersifat melekat.
Rasio Pembagian:
Sel HEP3B disubkultur dengan perbandingan 1:2 hingga 1:4. Sel HEP3B yang melekat dicuci dengan 1 x PBS dan kemudian diinkubasi dengan larutan disosiasi Accutase. Setelah 8 hingga 10 menit, media baru ditambahkan, dan sel-sel disentrifugasi. Sel-sel yang telah dipanen kemudian disuspensi kembali dengan hati-hati dan dituangkan ke dalam labu yang berisi media kultur dengan rasio pemisahan yang direkomendasikan.
Media Pertumbuhan:
Media EMEM yang mengandung 10% FBS, 2,2 g/L NaHCO3, 2 mM L-Glutamine, dan Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) digunakan untuk membiakkan sel HEP3B.
Kondisi Pertumbuhan:
Sel HEP3B dikultur dalam inkubator berhumiditas pada suhu 37°C dengan pasokan CO₂ 5% secara terus-menerus.
Penyimpanan:
Sel HEP3B beku disimpan pada suhu di bawah -150°C dalam freezer listrik atau fase uap nitrogen cair.
Proses Pembekuan dan Media:
Media pembekuan yang direkomendasikan untuk sel HEP3B adalah CM-1 atau CM-ACF. Sel dibekukan menggunakan proses pembekuan lambat yang hanya memungkinkan penurunan suhu sebesar 1°C per menit untuk melindungi viabilitas sel.
Proses Pencairan:
Sel beku dicairkan dalam penangas air yang telah diatur pada suhu 37°C selama 40 hingga 60 detik. Selanjutnya, sel-sel ini ditambahkan ke media pertumbuhan baru dan disentrifugasi untuk menghilangkan unsur-unsur media pembekuan. Sel yang terkumpul disuspensi kembali dan dimasukkan ke dalam labu baru untuk pertumbuhan.
Tingkat Keamanan Biologis:
Laboratorium dengan tingkat keamanan biologis 1 diperlukan untuk kultur sel HEP3B.
Baris sel HEP3B: Keunggulan & Keterbatasan
HEP3B adalah garis sel karsinoma hepatoseluler yang banyak digunakan. Bagian ini akan membahas beberapa kelebihan dan keterbatasan utama dari sel-sel hepatoma ini.
Keunggulan
Keunggulan utama sel HEP3B adalah:
Mudah dibudidayakan
Sel HEP3B tidak memiliki persyaratan kultur sel yang rumit, sehingga mudah ditangani dan dipelihara di laboratorium penelitian. Hal ini menyederhanakan prosedur eksperimental.
Efisiensi transfeksi yang tinggi
Sel HEP3B menunjukkan efisiensi transfeksi yang luar biasa, sehingga banyak digunakan dalam manipulasi genetik dan studi terkait ekspresi gen.
Tumorigenisitas
HEP3B adalah garis sel karsinoma hepatoseluler yang bersifat tumorigenik dan mampu membentuk tumor ketika disuntikkan ke tikus dengan sistem kekebalan yang terganggu. Hal ini membantu dalam mempelajari perkembangan dan pertumbuhan kanker menggunakan model xenograft HEP3B.
Status P53 HEP3B
Sel HEP3B memiliki mutasi gen P53 yang mirip dengan karsinoma hepatoseluler (HCC) dan kanker lainnya, sehingga relevan untuk mempelajari efek mutasi P53 terhadap pertumbuhan, perkembangan, dan perkembangan kanker.
Keterbatasan
Keterbatasan yang terkait dengan garis sel HEP3B adalah:
Model sel in vitro
Garis sel HEP3B berfungsi sebagai model in vitro sel karsinoma hepatoseluler (HCC). Namun, model ini mungkin tidak sepenuhnya mewakili kompleksitas HCC seperti yang ditemukan pada organisme hidup. Akibatnya, hasil eksperimen in vitro mungkin berbeda dari yang diamati in vivo.
Aplikasi sel HEP3B dalam penelitian
Garis sel HEP3B menawarkan beberapa aplikasi penelitian dalam penelitian biomedis. Beberapa aplikasi penelitian utama sel HEP3B meliputi:
- Biologi kanker: HEP3B adalah garis sel karsinoma hepatoseluler manusia. Ini merupakan model sel yang sangat berharga untuk menyelidiki mekanisme seluler dan molekuler yang mendasari perkembangan dan progresivitas HCC. Para peneliti menggunakan sel-sel ini untuk mempelajari mutasi genetik, proses seluler, dan jalur sinyal sel yang terkait dengan kanker hati. Sebuah studi yang menggunakan sel HEP3B menemukan bahwa mikroRNA-223-3p mengatur komponen inflammasome NLRP3, menghambat proliferasi, dan meningkatkan apoptosis sel karsinoma hepatoseluler HEP3B [2].
- Penyaringan dan pengembangan obat: Garis sel HEP3B juga digunakan untuk menguji, menyaring, dan mengembangkan terapi baru melawan karsinoma hati. Selain itu, garis sel ini digunakan untuk mengevaluasi toksisitas dan kemanjuran berbagai obat dan pengobatan antikanker. Para peneliti juga menggunakan sel-sel hepatoma ini untuk mempelajari metabolisme obat. Para peneliti menggunakan sel HEP3B dan menilai potensi sitotoksik ekstrak tanaman Cotinus coggygria pada sel-sel karsinoma hepatosit HEP3B [3].
- Infeksi virus: HEP3B adalah garis sel yang positif terhadap virus hepatitis B; oleh karena itu, garis sel ini digunakan untuk mempelajari infeksi virus yang dapat menyebabkan perkembangan kanker hati, yaitu HBV dan HCV. Hal ini dapat membantu memahami infeksi virus dengan lebih baik dan mengembangkan pengobatan antivirus potensial. Misalnya, sebuah penelitian menggunakan sel kanker hepatosit HEP3B dan menyelidiki pentingnya ubiquitinasi bagi penyebaran virus hepatitis C. Temuan tersebut menunjukkan bahwa ubiquitin-specific protease 15 (USP15) terlibat dalam penyebaran HCV melalui pengaturan fungsi spesifik hepatosit, termasuk pembentukan tetesan lipid dan translasi RNA HCV [4].
5. Publikasi tentang garis sel HEP3B
Bagian artikel ini akan membahas beberapa publikasi penelitian menarik mengenai sel HEP3B.
Regulasi apoptosis dan autofagi oleh luteolin pada sel kanker hepatoseluler manusia HEP3B
Publikasi dalam Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) ini mengusulkan bahwa stres retikulum endoplasma yang diinduksi oleh senyawa luteolin mungkin memberikan efek antitumor pada sel HEP3B P53-null secara independen dari P53.
Potensi penargetan sel kanker hati Hep3B oleh lupeol yang diisolasi dari Avicennia marina
Studi ini dalam jurnal Archiv der Pharmazie (2021) mengusulkan triterpenoid pentasiklik, lupeol, sebagai agen antikanker potensial terhadap sel HEP3B.
Artikel ini diterbitkan dalam Molecular Medicine Reports (2017). Temuan penelitian menyatakan bahwa ekstrak etanol Cnidium monnieri (L.) Cusson menginduksi kematian sel (apoptosis) dan penghentian siklus sel pada sel karsinoma hepatoseluler HepG2 dan HEP3B melalui regulasi jalur pensinyalan p53 dan Akt/GSK-3β.
Penelitian yang diterbitkan dalam jurnal Biomolecules and Therapeutics (2020) ini mengusulkan bahwa auranofin menunjukkan aktivitas sinergis dan mendorong apoptosis sel HEP3B yang dimediasi oleh sulforaphane melalui aktivasi jalur PI3K/AKT.
Artikel penelitian dalam BioFactors (2023) ini mengusulkan bahwa circular RNA-0072309 memberikan efek antitumor pada sel karsinoma hepatoseluler HEP3B melalui penargetan miRNA-665.
Sumber daya untuk garis sel HEP3B: Protokol, Video, dan Lainnya
Berikut ini adalah beberapa sumber daya yang tersedia mengenai sel HEP3B:
- Transfeksi HEP3B: Video ini akan menjelaskan protokol transfeksi untuk sel HEP3B.
- Efisiensi transfeksi HEP3B: Tautan ini akan membantu Anda mempelajari komposisi media DMEM HEP3B, pemindahan sel, dan protokol transfeksi untuk sel HEP3B. Selain itu, tautan ini juga memberikan informasi untuk mengoptimalkan reagen lipofectamine 3000 HEP3B dalam protokol transfeksi Anda.
Tautan berikut berisi protokol kultur sel HEP3B:
- Kondisi kultur HEP3B: Tautan ini akan membantu Anda mempelajari protokol penanganan dan pemeliharaan kultur Huh7 dan HEP3B.
- Sel HEP3B: Situs web ini memiliki banyak informasi tentang sel HEP3B, termasuk media HEP3B, protokol untuk pemisahan sel, pencairan, dan penanganan kultur proliferatif dan kultur yang diawetkan dengan cryopreservation.
Referensi
- Puttahanumantharayappa, L.D., dkk., Asal-usul dan sifat-sifat garis sel karsinoma hepatoseluler. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): hlm. 1040.
- Wan, L., dkk., miRNA-223-3p mengatur NLRP3 untuk mempromosikan apoptosis dan menghambat proliferasi sel Hep3B. Experimental and Therapeutic Medicine, 2018. 15(3): hlm. 2429-2435.
- Danjolli-Hashani, D. dan S. Selen-Isbilir, Efek sitotoksik ekstrak Cotinus coggygria pada garis sel kanker Hep3B. Natural Product Research, 2022: hlm. 1-4.
- Kusakabe, S., dkk., USP15 berperan dalam penyebaran virus hepatitis C melalui regulasi translasi RNA virus dan pembentukan tetesan lipid. Journal of Virology, 2019. 93(6): hlm. 10.1128/jvi. 01708-18.