Garis Sel HT22
HT22 adalah garis sel neuron murine yang biasa digunakan dalam penelitian ilmu saraf. Sel ini sangat berharga untuk mempelajari gangguan neurogeneratif dan menguji terapi atau perawatan neuroprotektif yang potensial. Selain itu, sel HT22 sensitif terhadap glutamat sehingga digunakan untuk menyelidiki toksisitas yang diinduksi glutamat atau kerusakan saraf.
Artikel ini menyoroti aspek penting dari sel HT22 yang dapat membantu Anda dalam pekerjaan penelitian Anda. Ini terutama akan membahas:
- Atribut umum dan asal sel HT22
- Informasi kultur garis sel HT22
- Keuntungan & kerugian dari garis sel HT22
- Aplikasi penelitian garis sel HT22
- Publikasi penelitian yang menampilkan sel HT22
- Sumber daya untuk Sel HT22: Protokol, Video, dan Lainnya
1. Atribut umum dan asal sel HT22
Bagian artikel ini akan menjelaskan asal-usul dan karakteristik umum sel HT22. Mengetahui informasi ini tentang garis sel diperlukan sebelum mulai mengerjakannya. Di sini, Anda akan belajar: Apa itu sel HT22? Bagaimana morfologi sel hipokampus HT22? Berapa ukuran sel HT22?
HT22 adalah garis sel kontinu yang berasal dari daerah hipokampus otak tikus. Ini adalah subklon dari garis sel HT-4 orang tua yang dikembangkan dengan mengabadikan jaringan neuron murin melalui antigen T virus simian virus polio yang peka terhadap suhu (SV40).
Sel-sel ini berbeda dari sel hipokampus dewasa karena tidak memiliki reseptor glutamat dan kolinergik seperti neuron dewasa yang berasal dari hipokampus. Dengan demikian, mereka tidak cocok untuk studi penelitian yang berhubungan dengan memori [1].
Sel HT22 memiliki penampilan seperti sel epitel.
2. Informasi kultur garis sel HT22
Sel HT22 digunakan di laboratorium penelitian ilmu saraf. Sebelum mengkultur sel ini, para peneliti mencari informasi kultur sel yang penting yang membuat pekerjaan mereka mudah dan efisien. Bagian ini mencakup semua poin penting untuk kultur sel HT22. Anda akan tahu: Berapa waktu penggandaan sel HT22? Bagaimana Anda membudidayakan sel HT22? Apa protokol kultur sel HT22? Apa media sel HT22?
Poin-poin Penting untuk Kultur Sel HT22
|
Waktu Penggandaan: |
Waktu penggandaan sel HT22 adalah sekitar 15 jam. |
|
Patuh atau dalam Suspensi: |
Sel HT22 bersifat patuh. |
|
Rasio Sub-kultivasi: |
Rasio sub-kultivasi untuk sel hipokampus HT22 adalah 1:3 hingga 1:6. Secara singkat, media dihapus, dan sel-sel yang melekat dibilas dengan 1 x PBS. Larutan pemisah accutase ditambahkan ke dalam labu, dan sel diinkubasi selama 8 hingga 10 menit pada suhu kamar. Setelah itu, media kultur segar ditambahkan, dan sel dikumpulkan dalam botol untuk disentrifugasi. Pelet sel yang diperoleh diresuspensi dengan hati-hati, dan sel disalurkan ke dalam labu kultur untuk pertumbuhan. |
|
Media Pertumbuhan: |
Media DMEM digunakan untuk menumbuhkan sel HT22. Ini dilengkapi dengan 10% FBS, 4,5 g / L Glukosa, 4 mM L-Glutamin, 1,5 g / L NaHCO3, dan 1,0 mM Natrium piruvat untuk pertumbuhan sel yang optimal. |
|
Kondisi Pertumbuhan: |
Kultur sel HT22 disimpan dalam inkubator yang dilembabkan (suhu 37 ° C) dengansuplai CO2 5%. |
|
Penyimpanan: |
Sel HT22 beku dapat disimpan pada suhu di bawah -150 ° C baik dalam fase uap nitrogen cair atau dalam freezer listrik bersuhu sangat rendah untuk jangka panjang. |
|
Proses dan Media Pembekuan: |
Sel HT22 dapat dibekukan dalam media CM-1 atau CM-ACF menggunakan metode pembekuan lambat. Proses ini hanya memungkinkan penurunan suhu sampel sebesar 1 °C per menit, melindungi sel dari guncangan, dan membantu mempertahankan kelangsungan hidupnya. |
|
Proses Pencairan: |
Sel dicairkan dalam penangas air bersuhu 37°C selama 40 hingga 60 detik hingga tersisa gumpalan es kecil. Setelah itu, media kultur ditambahkan ke dalam sel, dan disentrifugasi untuk menghilangkan komponen media yang membeku. Pelet sel diresuspensi dan sel dituangkan ke dalam labu baru yang berisi media kultur. Setelah itu, sel diinkubasi pada suhu 37°C dalam inkubator selama minimal 24 jam. |
|
Tingkat Keamanan Hayati: |
Pengaturan laboratorium tingkat keamanan hayati 1 adalah wajib untuk membiakkan sel HT22. |
3. Keuntungan & kerugian dari garis sel HT22
Sel-sel hipokampus HT22 dikaitkan dengan beberapa pro dan kontra yang membedakannya dari garis sel neuron lainnya. Beberapa keuntungan dan kerugian penting dari garis sel disebutkan di sini.
Keuntungan
Keuntungan dari garis sel neuron murine HT22 adalah:
-
Tingkat Pertumbuhan Cepat
Sel HT22 memiliki waktu penggandaan 15 jam, memungkinkan eksperimen yang cepat dan efisien serta membantu hasil penelitian yang tepat waktu.
-
Pengabadian
HT22 adalah garis sel yang diabadikan, memastikan pertumbuhan yang berkelanjutan untuk waktu yang lama. Hal ini memberikan ketersediaan sel yang konsisten, mengurangi waktu dan biaya, dan memfasilitasi eksperimen jangka panjang dengan hasil yang konsisten.
Kekurangan
Kerugian dari sel HT22 adalah:
-
Asal Murine
Garis sel HT22 berasal dari jaringan hippocampus otak tikus, yang mungkin tidak sepenuhnya mewakili kompleksitas fisiologi dan perilaku sel neuron manusia, sehingga membatasi relevansi translasi mereka.
4. Aplikasi penelitian garis sel HT22
Sel HT22 banyak digunakan dalam penelitian neurobiologi. Beberapa aplikasi yang menjanjikan dari garis sel ini dibahas di bagian artikel ini:
- Penelitian ilmu saraf: Sel HT22 banyak digunakan dalam penelitian penyakit neurodegeneratif, yaitu penyakit Alzheimer dan Parkinson. Sel ini dianggap sebagai alat penelitian yang berharga untuk mempelajari neurotoksisitas dan mekanisme stres oksidatif yang terkait dengan penyakit-penyakit ini. Penelitian yang dilakukan pada tahun 2020 menemukan bahwa jalur PI3K / AKT / CREB terlibat dalam toksisitas saraf yang diinduksi hiperglikemia pada sel HT22 [2]. Demikian pula, sebuah penelitian baru-baru ini mengusulkan bahwa jalur Nrf2 / HO-1 dan sumbu pensinyalan NF-κB memainkan peran penting dalam toksisitas amiloid beta HT22 [3].
- Skrining obat: Sel HT22 secara luas digunakan untuk tujuan pengujian dan penyaringan obat. Mereka membantu para peneliti mengidentifikasi agen terapeutik potensial yang menunjukkan efek pelindung saraf untuk memerangi penyakit neurodegeneratif. Sebuah penelitian yang dilakukan pada tahun 2019 mengeksplorasi potensi neuroprotektif senyawa tetrahidro kurkumin dalam sel hipokampus HT22 yang diobati dengan glutamat. Di sini, glutamat menginduksi stres oksidatif pada sel HT22 dan menyebabkan kematian sel dengan mengaktifkan protein kinase yang diaktifkan oleh mitogen [4].
5. Publikasi penelitian yang menampilkan sel HT22
Berikut adalah beberapa makalah penelitian menarik yang menampilkan garis sel HT22:
Studi dalam International Journal of Molecular Medicine (2019) ini mengusulkan potensi pelindung saraf crocin, senyawa yang diisolasi dari Crocus sativus L. dalamsel HT22yang rusak akibatL-glutamat.
Publikasi dalam Neuropharmacology (2018) melaporkan bahwa turunan oksindol melindungi terhadap kematian sel HT22 yang disebabkan oleh stres oksidatif.
Makalah penelitian ini diterbitkan dalam Journal of Ginseng Research pada tahun 2019. Penelitian ini mengeksplorasi efek pelindung saraf dari produk alami, ginsenoside Rb2, menggunakan garis sel HT22. Studi ini menemukan bahwa ginsenoside rb2 secara efisien mengurangi stres oksidatif yang diinduksi glutamat dan kematian sel pada sel hipokampus tikus HT22.
Studi dalam Ekotoksikologi dan Keamanan Lingkungan (2021) ini mengevaluasi potensi sitotoksik nanopartikel perak dalam garis sel HT22.
Ferrostatin-1 melindungi sel HT-22 dari toksisitas oksidatif
Artikel penelitian ini diterbitkan pada tahun 2020 dalam penelitian Regenerasi saraf. Diusulkan bahwa ferrostatin-1, penghambat ferroptosis, mencegah toksisitas oksidatif pada sel hipokampus HT22.
6. Sumber daya untuk Sel HT22: Protokol, Video, dan Lainnya
Beberapa sumber daya online tentang sel HT22 menjelaskan transfeksi, diferensiasi, dan protokol kultur sel:
- Transfeksi HT22: Dokumen ini berisi protokol yang dioptimalkan untuk transfeksi HT22 dalam pelat kultur sel 24 dan 96 sumuran.
- Diferensiasi sel HT22: Artikel ini akan memandu Anda secara komprehensif tentang protokol diferensiasi HT22.
Tautan berikut berisi protokol kultur sel HT22:
- Subkultur sel HT22: Tautan ini akan membantu Anda mempelajari protokol subkultur untuk garis sel HT22. Selain itu, ini akan membantu Anda mempelajari protokol untuk menginduksi neurotoksisitas dalam sel.
- Sel hipokampus HT22: Situs web ini berisi banyak informasi berguna tentang waktu penggandaan sel HT22, media, dan protokol kultur sel.
Referensi
- He, M., dkk., Diferensiasi membuat kerentanan terhadap eksitotoksisitas pada neuron HT22. Neural Regen Res, 2013. 8(14): p. 1297-306.
- Zhang, S., dkk., Fisetin mencegah sel HT22 dari neurotoksisitas yang diinduksi glukosa tinggi melalui jalur pensinyalan PI3K / Akt / CREB. Perbatasan dalam Ilmu Saraf, 2020. 14: p. 241.
- Zhang, R.-l., dkk., Efek perlindungan berberin terhadap neurotoksisitas yang diinduksi β-amiloid pada sel HT22 melalui jalur Nrf2 / HO-1. Kimia Bioorganik, 2023. 133: p. 106-210.
- Park, C.-H., dkk., Efek pelindung saraf tetrahidrokurkumin terhadap stres oksidatif yang diinduksi glutamat pada sel HT22 hipokampus. Molekul, 2019. 25(1): p. 144.
