Baris Sel HT22
HT22 adalah garis sel saraf tikus yang sering digunakan dalam penelitian ilmu saraf. Garis sel ini berguna untuk mempelajari gangguan neurodegeneratif dan menguji terapi atau pengobatan neuroprotektif potensial. Selain itu, sel HT22 sensitif terhadap glutamat, sehingga digunakan untuk menyelidiki toksisitas yang diinduksi glutamat atau kerusakan saraf.
- Media Pertumbuhan
- Media DMEM digunakan untuk membiakkan sel HT22. Media ini ditambah dengan 10% FBS, 4,5 g/L glukosa, 4 mM L-glutamin, 1,5 g/L NaHCO3, dan 1,0 mM natrium piruvat untuk pertumbuhan sel yang optimal.
- Waktu Penggandaan
- Waktu penggandaan sel HT22 sekitar 15 jam.
- Jenis Pertumbuhan
- Sel HT22 bersifat melekat.
- Tingkat Keamanan Biologis
- BSL-1
- Tersedia dari
- Cytion — Pesan HT22
Artikel ini menyoroti aspek-aspek penting sel HT22 yang dapat membantu Anda dalam pekerjaan penelitian. Artikel ini terutama akan membahas:
- Atribut umum dan asal sel HT22
- Informasi tentang kultur garis sel HT22
- Keunggulan & kelemahan garis sel HT22
- Aplikasi penelitian garis sel HT22
- Publikasi penelitian yang menampilkan sel HT22
- Sumber daya untuk sel HT22: Protokol, Video, dan Lainnya
Atribut umum dan asal sel HT22
Bagian artikel ini akan menjelaskan asal-usul dan karakteristik umum sel HT22. Mengetahui informasi ini tentang suatu garis sel sangat penting sebelum memulai penelitian menggunakan sel tersebut. Di sini, Anda akan mempelajari: Apa itu sel HT22? Bagaimana morfologi sel HT22 di daerah hipokampus? Berapa ukuran sel HT22?
HT22 adalah garis sel kontinu yang berasal dari daerah hipokampus otak tikus. Ini adalah subklon dari garis sel induk HT-4 yang dikembangkan melalui imortalisasi jaringan saraf tikus menggunakan antigen T virus simian 40 (SV40) yang sensitif terhadap suhu.
Sel-sel ini berbeda dari sel-sel hipokampus yang matang karena tidak memiliki reseptor glutamat dan kolinergik seperti neuron matang yang berasal dari hipokampus. Oleh karena itu, sel-sel ini tidak cocok untuk penelitian yang berkaitan dengan memori [1].
Sel HT22 memiliki penampilan yang mirip dengan sel epitel.
Informasi tentang kultur sel HT22
Sel HT22 digunakan di laboratorium penelitian saraf. Sebelum membiakkan sel-sel ini, para peneliti mencari informasi penting mengenai kultur sel yang dapat memudahkan dan meningkatkan efisiensi pekerjaan mereka. Bagian ini mencakup semua poin penting untuk membiakkan sel HT22. Anda akan mengetahui: Berapa lama waktu penggandaan sel HT22? Bagaimana cara membiakkan sel HT22? Apa protokol kultur sel HT22? Apa media kultur sel HT22?
Poin-Poin Penting dalam Pembiakan Sel HT22
Waktu Perduplikan:
Waktu penggandaan sel HT22 adalah sekitar 15 jam.
Menempel atau dalam Suspensi:
Sel HT22 bersifat melekat.
Rasio Subkultur:
Rasio subkultur untuk sel hipokampus HT22 adalah 1:3 hingga 1:6. Singkatnya, media dibuang, dan sel yang melekat dibilas dengan 1 x PBS. Larutan disosiasi Accutase ditambahkan ke dalam labu, dan sel diinkubasi selama 8 hingga 10 menit pada suhu kamar. Setelah itu, media kultur baru ditambahkan, dan sel dikumpulkan dalam botol untuk disentrifugasi. Pelet sel yang diperoleh disuspensi kembali dengan hati-hati, dan sel dimasukkan ke dalam labu kultur untuk pertumbuhan.
Media Pertumbuhan:
Media DMEM digunakan untuk membiakkan sel HT22. Media ini ditambah dengan 10% FBS, 4,5 g/L glukosa, 4 mM L-glutamin, 1,5 g/L NaHCO3, dan 1,0 mM natrium piruvat untuk pertumbuhan sel yang optimal.
Kondisi Pertumbuhan:
Kultur sel HT22 disimpan dalam inkubator yang dilembabkan (suhu 37 °C) dengan pasokan CO₂ 5%.
Penyimpanan:
Sel HT22 beku dapat disimpan pada suhu di bawah -150 °C baik dalam fase uap nitrogen cair maupun dalam freezer listrik bersuhu sangat rendah untuk jangka panjang.
Proses Pembekuan dan Media:
Sel HT22 dapat dibekukan dalam media CM-1 atau CM-ACF menggunakan metode pembekuan lambat. Proses ini memungkinkan penurunan suhu sampel hanya 1 °C per menit, melindungi sel dari guncangan, dan membantu menjaga viabilitasnya.
Proses Pencairan:
Sel dicairkan dalam bak air bersuhu 37 °C selama 40 hingga 60 detik hingga tersisa gumpalan es kecil. Setelah itu, media kultur ditambahkan ke dalam sel, dan sel-sel tersebut disentrifugasi untuk menghilangkan komponen media pembekuan. Pelet sel disuspensi kembali dan sel-sel dituangkan ke dalam labu baru yang berisi media kultur. Setelah itu, sel diinkubasi pada suhu 37 °C dalam inkubator selama minimal 24 jam.
Tingkat Keamanan Biologis:
Pengaturan laboratorium tingkat keamanan biologis 1 wajib diterapkan untuk membiakkan sel HT22.
Kelebihan dan kekurangan garis sel HT22
Sel-sel hipokampus HT22 memiliki beberapa kelebihan dan kekurangan yang membedakannya dari garis sel saraf lainnya. Beberapa kelebihan dan kekurangan utama dari garis sel ini disebutkan di sini.
Keuntungan
Keuntungan dari garis sel saraf tikus HT22 adalah:
-
Laju Pertumbuhan yang Cepat
Sel HT22 memiliki waktu penggandaan 15 jam, sehingga memungkinkan eksperimen yang cepat dan efisien serta membantu menghasilkan hasil penelitian yang tepat waktu.
-
Imortalitas
HT22 adalah garis sel yang diimortalkan, memastikan pertumbuhan berkelanjutan dalam jangka waktu yang lama. Hal ini memastikan ketersediaan sel yang konsisten, mengurangi waktu dan biaya, serta memfasilitasi eksperimen jangka panjang dengan hasil yang konsisten.
Kekurangan
Kekurangan sel HT22 adalah:
-
Asal Murine
Garis sel HT22 berasal dari jaringan hipokampus otak tikus, yang mungkin tidak sepenuhnya mewakili kompleksitas fisiologi dan perilaku sel saraf manusia, sehingga membatasi relevansi translasi sel tersebut.
4. Aplikasi penelitian garis sel HT22
Sel HT22 banyak digunakan dalam penelitian neurobiologi. Beberapa aplikasi yang menjanjikan dari garis sel ini dibahas dalam bagian artikel ini:
- Penelitian ilmu saraf: Sel HT22 banyak digunakan dalam penelitian penyakit neurodegeneratif, yaitu penyakit Alzheimer dan Parkinson. Sel ini dianggap sebagai alat penelitian yang berharga untuk mempelajari mekanisme neurotoksisitas dan stres oksidatif yang terkait dengan penyakit-penyakit tersebut. Penelitian yang dilakukan pada tahun 2020 menemukan bahwa jalur PI3K/AKT/CREB terlibat dalam toksisitas saraf yang diinduksi hiperglikemia pada sel HT22 [2]. Demikian pula, sebuah studi terbaru mengusulkan bahwa jalur Nrf2/HO-1 dan sumbu pensinyalan NF-κB memainkan peran penting dalam toksisitas beta-amiloid HT22 [3].
- Penyaringan obat: Sel HT22 secara luas digunakan untuk tujuan pengujian dan penyaringan obat. Sel ini membantu peneliti mengidentifikasi agen terapeutik potensial yang menunjukkan efek neuroprotektif untuk memerangi penyakit neurodegeneratif. Sebuah studi yang dilakukan pada tahun 2019 meneliti potensi neuroprotektif senyawa tetrahidro kurkumin pada sel-sel hipokampus HT22 yang diberi perlakuan glutamat. Dalam studi ini, glutamat menginduksi stres oksidatif pada sel-sel HT22 dan menyebabkan kematian sel dengan mengaktifkan protein kinase yang diaktifkan mitogen [4].
5. Publikasi penelitian yang menampilkan sel HT22
Berikut adalah beberapa makalah penelitian menarik yang menampilkan garis sel HT22:
Studi dalam International Journal of Molecular Medicine (2019) ini mengusulkan potensi neuroprotektif crocin, senyawa yang diisolasi dari Crocus sativus L., pada sel HT22 yang rusak akibat L-glutamat.
Publikasi dalam Neuropharmacology (2018) ini melaporkan bahwa turunan oxindole melindungi sel HT22 dari kematian yang disebabkan oleh stres oksidatif.
Ginsenoside Rb2 menekan stres oksidatif yang dimediasi glutamat dan kematian sel saraf pada sel HT22
Makalah penelitian ini diterbitkan dalam Journal of Ginseng Research pada tahun 2019. Penelitian ini mengeksplorasi efek neuroprotektif dari produk alami, ginsenoside Rb2, menggunakan garis sel HT22. Studi ini menemukan bahwa ginsenoside Rb2 secara efektif mengurangi stres oksidatif dan kematian sel yang diinduksi glutamat pada sel hipokampus tikus HT22.
Studi dalam jurnal Ecotoxicology and Environmental Safety (2021) ini mengevaluasi potensi sitotoksik nanopartikel perak pada garis sel HT22.
Ferrostatin-1 melindungi sel HT-22 dari toksisitas oksidatif
Artikel penelitian ini diterbitkan pada tahun 2020 dalam Neural regeneration research. Artikel ini mengusulkan bahwa ferrostatin-1, penghambat ferroptosis, mencegah toksisitas oksidatif pada sel hipokampus HT22.
Sumber Daya untuk Sel HT22: Protokol, Video, dan Lainnya
Beberapa sumber daya online mengenai sel HT22 menjelaskan protokol transfeksi, diferensiasi, dan kultur selnya:
- Transfeksi HT22: Dokumen ini berisi protokol yang dioptimalkan untuk transfeksi HT22 dalam pelat kultur sel 24 dan 96 sumur.
- Diferensiasi sel HT22: Artikel ini akan memandu Anda secara komprehensif mengenai protokol diferensiasi HT22.
Tautan berikut berisi protokol kultur sel HT22:
- Subkultur sel HT22: Tautan ini akan membantu Anda mempelajari protokol subkultur untuk garis sel HT22. Selain itu, tautan ini juga akan membantu Anda mempelajari protokol untuk menginduksi neurotoksisitas pada sel.
- Sel hipokampus HT22: Situs web ini berisi banyak informasi berguna tentang waktu penggandaan sel HT22, media, dan protokol kultur sel.
Referensi
- He, M., dkk., Diferensiasi menyebabkan kerentanan terhadap eksitotoksisitas pada neuron HT22. Neural Regen Res, 2013. 8(14): hlm. 1297-306.
- Zhang, S., dkk., Fisetin mencegah sel HT22 dari neurotoksisitas yang diinduksi glukosa tinggi melalui jalur sinyal PI3K/Akt/CREB. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: hlm. 241.
- Zhang, R.-l., dkk., Efek protektif berberin terhadap neurotoksisitas yang diinduksi β-amyloid pada sel HT22 melalui jalur Nrf2/HO-1. Bioorganic Chemistry, 2023. 133: hlm. 106-210.
- Park, C.-H., dkk., Efek neuroprotektif tetrahidrocurcumin terhadap stres oksidatif yang diinduksi glutamat pada sel HT22 hipokampus. Molecules, 2019. 25(1): hlm. 144.