Garis Sel HT-29
HT-29 adalah garis sel kanker kolorektal manusia dengan berbagai aplikasi penelitian kanker dan toksikologi. Misalnya, sel-sel ini sensitif terhadap pengobatan kemoterapi standar terhadap kanker kolorektal. Selain itu, garis sel HT-29 adalah model in vitro yang dikarakterisasi dengan baik untuk menyelidiki respons epitel usus terhadap infeksi bakteri. Sel HT-29 meniru karakteristik sel usus dewasa, yaitu enterosit, dan dengan demikian cocok untuk studi perlekatan dan mekanistik.
Artikel ini akan membahas semua aspek garis sel HT-29 yang perlu Anda ketahui sebelum bekerja dengannya. Terutama akan mencakup:
- Sel HT-29: Asal dan informasi umum
- Informasi kultur sel dari garis sel HT-29
- Sel HT-29: Keuntungan dan Keterbatasan
- Sel HT-29: Aplikasi
- Publikasi penelitian tentang sel HT-29
- Sumber daya sel HT-29: Protokol, Video & Lainnya
1. Sel HT-29: Asal dan informasi umum
Sebelum menggunakan garis sel apa pun, Anda harus mengetahui tentang karakteristik umum dan asal garis sel. Bagian ini akan membantu Anda mempelajarinya: Apa itu sel HT-29? Apakah HT-29 adalah garis sel kanker kolorektal? Bagaimana morfologi sel HT-29?
Apa itu garis sel HT-29? HT-29 adalah garis sel adenokarsinoma kolorektal yang didirikan pada tahun 1964 oleh Trempe dan Fogh. Sel-sel ini awalnya berasal dari tumor primer seorang wanita Kaukasia (44 tahun) dengan adenokarsinoma kolorektal [1]. Sejak didirikan, garis sel ini telah digunakan untuk mempelajari biologi kanker.
Morfologi sel HT-29: Garis sel HT-29 umumnya memiliki morfologi seperti epitel. Sel-sel yang terdiferensiasi tumbuh dalam lapisan tunggal, membentuk persimpangan sel-sel yang rapat, dan memiliki batas sikat apikal. Jika sel-sel ini ditumbuhkan dalam media yang kekurangan glukosa atau diberi penginduksi seperti butirat atau asam, mereka menunjukkan fitur seperti enterosit.
Ukuran sel: Diameter garis sel kanker kolorektal HT-29 adalah 11 μm.
Genom dan ploidi: Jumlah kromosom modal untuk garis sel HT-29 adalah 71. Ini mungkin berkisar antara 68-72. Selain itu, jumlah kromosom yang disederhanakan untuk sel HT-29 adalah hiper-triploid, dengan komponen 2S terjadi pada tingkat 2,4%.
Apa itu HT29 MTX? HT29 MTX adalah garis sel resisten metotreksat yang diisolasi dari garis sel kanker usus besar manusia HT-29 yang asli dengan adaptasi terhadap Metotreksat 10 µM. Sel-sel ini menunjukkan karakteristik sel piala dewasa yang mensekresi lendir.
2. Informasi kultur sel dari garis sel HT-29
Mengetahui tentang persyaratan kultur dasar dari garis sel dapat memudahkan pekerjaan Anda dengannya. Anda harus tahu: berapa waktu penggandaan garis sel HT-29? Berapa kepadatan pembenihan sel HT-29? Media apa untuk sel HT-29?
|
Waktu penggandaan |
Waktu penggandaan rata-rata untuk garis sel HT-29 adalah 24 jam. |
|
Patuh / suspensi |
HT-29 adalah garis sel yang patuh. |
|
Kepadatan penyemaian |
Kepadatan pembibitan yang direkomendasikan untuk sel HT-29 adalah 3 x104 sel/ cm2. Sel yang tumbuh dicuci dengan 1 X PBS dan dilepaskan setelah diinkubasi dengan Accutase selama 8-10 menit. Media segar ditambahkan, dan sel disentrifugasi. Pelet sel diresuspensi, dan sel dimasukkan ke dalam labu baru dengan kepadatan sel yang direkomendasikan. |
|
Media pertumbuhan |
Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) yang dilengkapi dengan 2,5 mM L-glutamin dan 10% FBS digunakan untuk kultur sel HT-29 yang optimal. Media harus diganti 2 hingga 3 kali seminggu. |
|
Kondisi pertumbuhan |
Sel HT-29 membutuhkan inkubator yang dilembabkan dengan suhu 37 ° C dan pasokanCO2 5% untuk pertumbuhan. |
|
Penyimpanan |
Sel-sel ini disimpan dalam fase uap nitrogen cair pada suhu di bawah -195 ° C. |
|
Media dan proses pembekuan |
Media pembekuan yang digunakan untuk lini sel HT-29 adalah CM-1 atau CM-ACF. Sel dibekukan dengan proses pembekuan lambat yang menyebabkan penurunan suhu 1 ° C dan secara efisien melindungi kelangsungan hidup sel. |
|
Proses pencairan |
Sel HT-29 yang dibekukan dicairkan dalam penangas air yang diatur pada suhu 37 ° C. Sel-sel ini dapat diresuspensi dan langsung disalurkan ke dalam labu media pertumbuhan segar. Sebaliknya, sel yang dicairkan dapat disentrifugasi untuk menghilangkan elemen media yang membeku, disuspensikan kembali ke dalam media segar, dan dikultur dalam labu. |
|
Tingkat keamanan hayati |
Tingkat keamanan hayati 1 digunakan untuk menangani dan memelihara garis sel HT-29. |
3. Sel HT-29: Keuntungan dan Keterbatasan
Setiap lini sel memiliki kelebihan dan kekurangan unik yang membedakannya dari lini sel lainnya. Bagian ini akan membahas keuntungan dan keterbatasan utama yang terkait dengan sel HT-29.
Keuntungan
Keuntungan utama dari sel HT-29 adalah:
-
Mudah Dikultur
Garis sel HT-29 mudah ditangani dan dipelihara, tanpa persyaratan yang rumit untuk dikultur. Ini secara luas dibudidayakan di laboratorium penelitian.
-
Model Sel Usus In Vitro
Sel HT-29 dapat berdiferensiasi menjadi sel usus dewasa (enterosit dan sel penghasil lendir) dalam kondisi kultur tertentu. Sel ini digunakan sebagai model seluler untuk mempelajari pencernaan makanan dan ketersediaan hayati.
-
Efisiensi Transfeksi Tinggi
Sel kanker usus besar HT-29 menawarkan efisiensi transfeksi yang tinggi, sehingga cocok untuk studi ekspresi dan regulasi gen. Eksperimen transfeksi sementara dan stabil dapat dilakukan dengan menggunakan berbagai metode.
-
Sensitivitas Obat
Sel HT-29 sensitif terhadap obat kemoterapi seperti fluorouracil dan oxaliplatin, yang biasa digunakan dalam pengobatan kanker usus besar. Sel ini digunakan untuk mempelajari resistensi obat dan menyaring obat terapeutik potensial untuk karsinoma kolorektal.
Keterbatasan
-
Heterogenitas
Sel HT-29, seperti garis sel kanker lainnya, menunjukkan heterogenitas dan mungkin tidak membentuk populasi sel yang seragam. Hal ini dapat berdampak pada reproduktifitas hasil dalam pengujian tertentu dan menyebabkan variasi kecil dalam hasil eksperimen.
-
Diferensiasi Terbatas
Sel HT-29 memiliki potensi diferensiasi yang terbatas. Mereka tidak sepenuhnya berdiferensiasi menjadi sel usus atau usus besar tetapi hanya menunjukkan beberapa fitur karakteristik. Keterbatasan ini dapat membatasi penggunaannya dalam mempelajari proses biologis yang lebih kompleks.
4. sel HT-29: Aplikasi
Garis sel HT-29 banyak dikultur di laboratorium penelitian karena berbagai aplikasinya. Bagian ini hanya akan membahas beberapa aplikasi penting dari sel HT-29.
Penelitian kanker: HT-29 adalah garis sel adenokarsinoma kolorektal, sehingga digunakan untuk mempelajari perkembangan kanker, perkembangan, dan mekanisme molekuler yang mendasarinya. Sebuah penelitian yang dilakukan pada tahun 2018 menggunakan garis sel HT-29 untuk menyelidiki molekul sel yang bertanggung jawab atas metastasis. Studi ini mengamati bahwa gen vimentin dan CXCR4 mengatur metastasis sel. Sedangkan mentransfeksi mimik microRNA-193a-5p dapat mengurangi tingkat mRNA gen-gen ini dan berhasil menurunkan metastasis sel kanker [2].
Penelitian toksikologi: Garis sel HT-29 banyak digunakan dalam penelitian toksikologi. Sel-sel karsinoma kolorektal ini digunakan untuk menilai toksisitas kandidat obat yang berbeda dengan menggunakan tes yang berbeda. Misalnya, sebuah penelitian yang mengeksplorasi potensi toksisitas ekstrak etanolik tanaman Syzygium cumini pada garis sel HT-29. Hasil penelitian menunjukkan penekanan yang signifikan terhadap pertumbuhan sel HT-29, yang menunjukkan sifat anti-kanker yang menjanjikan dari ekstrak tersebut [3].
Mikrobiologi: HT-29 dapat digunakan sebagai sistem sel inang untuk menyelidiki patogenesis mikroba potensial, yaitu bakteri dan virus. Para peneliti dapat menginfeksi sel HT-29 dengan mikroba untuk menyelidiki virulensi dan respons inangnya. Studi semacam itu menggunakan sel HT-29 untuk mengeksplorasi sifat probiotik bakteri asam laktat [4]. Penelitian lain menggunakan sel HT-29 untuk mengevaluasi kemanjuran dan keamanan perawatan bakteriofag [5].
5. Publikasi penelitian tentang sel HT-29
Bagian ini akan menjelaskan beberapa publikasi penting tentang sel HT-29 yang akan membantu Anda merancang studi penelitian Anda.
Evaluasi Efek Anti-kanker Ekstrak Etanolik Syzygium cumini pada Garis Sel Kolorektal HT-29
Penelitian ini mengusulkan ekstrak etanolik Syzygium cumini sebagai agen anti-kanker yang potensial terhadap garis sel kanker kolorektal HT-29. Ekstrak tersebut secara signifikan menekan pertumbuhan sel kanker.
Publikasi dalam Bioscience Reports ini menguji aktivitas anti-kanker dari suatu senyawa, Tetradrine, pada sel HT-29. Hasilnya menunjukkan bahwa tetradrine menghambat proliferasi dan pertumbuhan sel kanker dengan mengatur jalur pensinyalan sel.
Studi ini mengusulkan bahwa miRNA-193a-5p berpotensi mengatur metastasis sel HT-29 dengan mengatur gen yang berhubungan dengan metastasis.
Makalah ini dipublikasikan di Nature Scientific Reports pada tahun 2018. Penelitian ini menggunakan garis sel tumorigenik HT-29 sebagai model seluler usus untuk mengevaluasi kemanjuran pengobatan bakteriofag yang diusulkan.
Dalam penelitian ini, para peneliti menggunakan sel HT-29 untuk menyelidiki aktivitas probiotik bakteri asam laktat. Menariknya, penelitian ini menunjukkan bahwa bakteri lactobacilli mencegah perlekatan bakteri patogen pada sel usus besar.
6. Sumber daya sel HT-29: Protokol, Video & Lainnya
Bagian ini akan membahas beberapa sumber daya online yang tersedia pada sel HT-29 yang akan membantu mempelajari pemeliharaan, kultur, dan protokol transfeksi.
Protokol kultur sel
Sumber daya berikut akan memandu Anda tentang subkultur sel HT-29.
- Membudidayakan sel HT-29: Tautan ini akan memberikan pengetahuan dasar tentang media pertumbuhan, pencairan, dan subkultur sel HT-29.
- Mempertahankan kultur HT-29: Artikel ini berisi semua informasi yang berguna tentang kultur dan pemeliharaan sel HT-29.
Protokol transfeksi
Garis sel HT-29 memiliki efisiensi transfeksi yang tinggi, dan sering digunakan dalam studi ekspresi gen. Sumber daya berikut menjelaskan protokol transfeksi yang mungkin untuk sel-sel ini.
- Mentransfeksi HT-29: Tautan situs web ini berisi protokol terperinci untuk transfeksi sel HT-29.
- Transfeksi garis sel HT-29: Dokumen ini menjelaskan protokol transfeksi garis sel HT-29 dengan DNA plasmid.
Video yang terkait dengan garis sel HT-29
Berikut adalah beberapa video tentang kultur dan pemeliharaan garis sel tumorigenik ini.
- Melewati sel: Video ini menunjukkan protokol perpindahan sel untuk jalur sel yang patuh.
- Mentransfeksi sel HT-29: Video ini akan memandu Anda tentang metode transfeksi yang digunakan untuk sel HT-29.
Kami berharap bahwa informasi dalam artikel ini berharga dan cukup bagi Anda untuk menangani penanganan dan pemeliharaan lini sel HT-29. Jika Anda berencana untuk menggunakan sel HT-29 dalam penelitian Anda, pesanlah dari kami.
Referensi
- Martínez-Maqueda, D., B. Miralles, dan I. Recio, Garis sel HT29. Dampak Bioaktif Makanan terhadap Kesehatan: model in vitro dan ex vivo, 2015: hal. 113-124.
- Shirafkan, N., dkk., microRNA-193a-5p menghambat migrasi sel kanker usus besar HT-29 manusia melalui penekanan jalur metastasis. Jurnal biokimia seluler, 2019. 120(5): p. 8775-8783.
- Khodavirdipour, A., R. Zarean, dan R. Safaralizadeh, Evaluasi efek anti-kanker ekstrak etanolik Syzygium cumini pada garis sel kolorektal HT-29. Jurnal kanker gastrointestinal, 2021. 52: p. 575-581.
- Fonseca, H.C., dkk., Sifat probiotik laktobasilus dan kemampuannya untuk menghambat adhesi bakteri enteropatogenik ke sel Caco-2 dan HT-29. Probiotik dan protein antimikroba, 2021. 13: p. 102-112.
- Shan, J., dkk., Bakteriofag lebih ganas terhadap bakteri dengan sel manusia dibandingkan dengan kultur bakteri; wawasan dari sel HT-29. Laporan ilmiah, 2018. 8(1): p. 5091.