Baris Sel HT-29
HT-29 adalah garis sel kanker kolorektal manusia yang memiliki berbagai aplikasi dalam penelitian kanker dan toksikologi. Misalnya, sel-sel ini sensitif terhadap pengobatan kemoterapi standar untuk kanker kolorektal. Selain itu, garis sel HT-29 merupakan model in vitro yang telah terdefinisi dengan baik untuk menyelidiki respons epitel usus terhadap infeksi bakteri. Sel-sel HT-29 meniru karakteristik sel usus yang matang, yaitu enterosit, sehingga cocok untuk studi penempelan dan mekanistik.
- Media Pertumbuhan
- Lihat halaman produk
- Waktu Perlipatan
- Lihat halaman produk
- Jenis Pertumbuhan
- Adherent
- Tingkat Keamanan Biologis
- BSL-1
- Tersedia dari
- Cytion — Pesan HT-29
Sel HT-29: Asal dan informasi umum
Sebelum menggunakan lini sel apa pun, Anda harus mengetahui karakteristik umum dan asal-usul lini sel tersebut. Bagian ini akan membantu Anda mempelajari: Apa itu sel HT-29? Apakah HT-29 merupakan lini sel kanker kolorektal? Bagaimana morfologi sel HT-29?
Apa itu garis sel HT-29? HT-29 adalah garis sel adenokarsinoma kolorektal yang didirikan pada tahun 1964 oleh Trempe dan Fogh. Sel-sel ini awalnya berasal dari tumor primer seorang wanita Kaukasia (44 tahun) yang menderita adenokarsinoma kolorektal [1]. Sejak didirikan, garis sel ini telah digunakan untuk mempelajari biologi kanker.
Morfologi sel HT-29: Lini sel HT-29 umumnya memiliki morfologi mirip epitel. Sel yang terdiferensiasi tumbuh dalam lapisan tunggal, membentuk sambungan sel-sel yang rapat, dan memiliki batas sikat apikal. Jika sel-sel ini ditumbuhkan dalam media yang kekurangan glukosa atau diberi induktor seperti butirat atau asam, sel-sel tersebut menunjukkan ciri-ciri seperti enterosit.
Ukuran sel: Diameter garis sel kanker kolorektal HT-29 adalah 11 μm.
Genom dan ploidi: Jumlah kromosom modal untuk garis sel HT-29 adalah 71. Jumlah ini dapat berkisar antara 68-72. Selain itu, jumlah kromosom yang disederhanakan untuk sel HT-29 adalah hiper-triploid, dengan komponen 2S terjadi pada tingkat 2,4%.
Apa itu HT29 MTX? HT29 MTX adalah garis sel yang resisten terhadap metotreksat yang diisolasi dari garis sel kanker kolon manusia HT-29 asli melalui adaptasi terhadap 10 µM metotreksat. Sel-sel ini menunjukkan karakteristik sel goblet matang yang menghasilkan lendir.
Informasi kultur sel dari garis sel HT-29
Mengetahui persyaratan kultur dasar dari suatu garis sel dapat memudahkan pekerjaan Anda. Anda perlu mengetahui: berapa waktu penggandaan garis sel HT-29? Berapa kepadatan penyemaian sel HT-29? Media apa yang digunakan untuk sel HT-29?
Waktu penggandaan
Waktu penggandaan rata-rata untuk garis sel HT-29 adalah 24 jam.
Adherent/suspensi
HT-29 adalah garis sel yang melekat.
Kepadatan penanaman
Kepadatan penyemaian yang direkomendasikan untuk sel HT-29 adalah 3 x 104 sel/cm². Sel yang telah tumbuh dicuci dengan 1X PBS dan dilepaskan setelah inkubasi dengan Accutase selama 8-10 menit. Media segar ditambahkan, dan sel-sel disentrifugasi. Pelet sel disuspensi kembali, dan sel-sel ditempatkan ke dalam labu baru dengan kepadatan sel yang direkomendasikan.
Media pertumbuhan
Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) yang ditambah dengan 2,5 mM L-glutamin dan 10% FBS digunakan untuk kultur sel HT-29 yang optimal. Media harus diganti 2 hingga 3 kali seminggu.
Kondisi pertumbuhan
Sel HT-29 memerlukan inkubator yang dilembabkan dengan suhu 37°C dan pasokan CO2 5% untuk pertumbuhannya.
Penyimpanan
Sel-sel ini disimpan dalam fase uap nitrogen cair pada suhu di bawah -195°C.
Media pembekuan yang digunakan untuk garis sel HT-29 adalah CM-1 atau CM-ACF. Sel-sel dibekukan melalui proses pembekuan lambat yang menyebabkan penurunan suhu sebesar 1 °C dan secara efektif melindungi viabilitas sel.
Proses pencairan
Sel HT-29 yang dibekukan dicairkan dalam penangas air yang disetel pada suhu 37°C. Sel-sel ini dapat disuspensi kembali dan langsung dimasukkan ke dalam labu media pertumbuhan yang baru. Sebaliknya, sel yang telah dicairkan dapat disentrifugasi untuk menghilangkan unsur-unsur media pembekuan, disuspensi kembali dalam media baru, dan dikultur dalam labu.
Tingkat keamanan biologis
Tingkat keamanan biologis 1 digunakan untuk menangani dan memelihara garis sel HT-29.
Sel HT-29: Keunggulan dan Keterbatasan
Setiap garis sel memiliki kelebihan dan kekurangan yang membedakannya dari garis sel lainnya. Bagian ini akan membahas kelebihan dan keterbatasan utama yang terkait dengan sel HT-29.
Keunggulan
Keunggulan utama sel HT-29 adalah:
-
Mudah Dikultur
Baris sel HT-29 mudah ditangani dan dipelihara, tanpa persyaratan kultur yang rumit. Sel ini banyak dikultur di laboratorium penelitian.
-
Model In Vitro Sel Usus
Sel HT-29 dapat berdiferensiasi menjadi sel usus yang matang (enterosit dan sel penghasil lendir) di bawah kondisi kultur tertentu. Sel ini digunakan sebagai model seluler untuk mempelajari pencernaan makanan dan ketersediaan hayati.
-
Efisiensi Transfeksi yang Tinggi
Sel kanker usus besar HT-29 menawarkan efisiensi transfeksi yang tinggi, sehingga cocok untuk studi ekspresi dan regulasi gen. Eksperimen transfeksi sementara dan stabil dapat dilakukan menggunakan berbagai metode.
-
Sensitivitas Obat
Sel HT-29 sensitif terhadap obat kemoterapi seperti fluorouracil dan oxaliplatin, yang umum digunakan dalam pengobatan kanker usus besar. Sel ini digunakan untuk mempelajari resistensi obat dan menyaring obat terapeutik potensial untuk karsinoma kolorektal.
Keterbatasan
-
Heterogenitas
Sel HT-29, seperti garis sel kanker lainnya, menunjukkan heterogenitas dan mungkin tidak membentuk populasi sel yang seragam. Hal ini dapat memengaruhi reproduktifitas hasil dalam uji tertentu dan menyebabkan variasi kecil pada hasil eksperimen.
-
Diferensiasi Terbatas
Sel HT-29 memiliki potensi diferensiasi yang terbatas. Sel-sel ini tidak sepenuhnya berdiferensiasi menjadi sel usus atau sel usus besar, tetapi hanya menunjukkan beberapa ciri khas. Keterbatasan ini dapat membatasi penggunaannya dalam mempelajari proses biologis yang lebih kompleks.
Sel HT-29: Aplikasi
Garis sel HT-29 banyak dibudidayakan di laboratorium penelitian karena berbagai aplikasinya. Bagian ini hanya akan membahas beberapa aplikasi penting sel HT-29.
Penelitian kanker: HT-29 adalah garis sel adenokarsinoma kolorektal, sehingga digunakan untuk mempelajari perkembangan, perkembangan, dan mekanisme molekuler yang mendasari kanker. Sebuah studi yang dilakukan pada tahun 2018 menggunakan garis sel HT-29 untuk menyelidiki molekul sel yang bertanggung jawab atas metastasis. Studi ini mengamati bahwa gen vimentin dan CXCR4 mengatur metastasis sel. Sementara itu, transfeksi mikroRNA-193a-5p mimic dapat menurunkan tingkat mRNA gen-gen ini dan berhasil mengurangi metastasis sel kanker [2].
Penelitian toksikologi: Sel HT-29 banyak digunakan dalam penelitian toksikologi. Sel-sel karsinoma kolorektal ini digunakan untuk menilai toksisitas berbagai kandidat obat menggunakan berbagai uji. Misalnya, sebuah penelitian mengeksplorasi potensi toksisitas ekstrak etanol tanaman Syzygium cumini pada sel HT-29. Hasilnya menunjukkan penekanan yang signifikan terhadap pertumbuhan sel HT-29, yang mengindikasikan sifat antikanker yang menjanjikan dari ekstrak tersebut [3].
Mikrobiologi: HT-29 dapat digunakan sebagai sistem sel inang untuk menyelidiki patogenesis mikroba potensial, yaitu bakteri dan virus. Para peneliti dapat menginfeksi sel HT-29 dengan mikroba untuk menyelidiki virulensi dan respons inangnya. Sebuah studi menggunakan sel HT-29 untuk mengeksplorasi sifat probiotik bakteri asam laktat [4]. Studi lain menggunakan sel HT-29 untuk mengevaluasi kemanjuran dan keamanan pengobatan bakteriofag [5].
5. Publikasi penelitian mengenai sel HT-29
Bagian ini akan mengulas beberapa publikasi penting mengenai sel HT-29 yang akan membantu Anda merancang studi penelitian Anda.
Evaluasi Efek Antikanker Ekstrak Etanol Syzygium cumini pada Sel Kolorektal HT-29
Penelitian ini mengusulkan ekstrak etanol Syzygium cumini sebagai agen antikanker potensial terhadap garis sel kanker kolorektal HT-29. Ekstrak tersebut secara signifikan menghambat pertumbuhan sel kanker.
Publikasi dalam Bioscience Reports ini menguji aktivitas antikanker suatu senyawa, Tetrandrine, pada sel HT-29. Hasilnya menunjukkan bahwa tetrandrine menghambat proliferasi dan pertumbuhan sel kanker melalui pengaturan jalur pensinyalan sel.
Studi ini mengusulkan bahwa miRNA-193a-5p berpotensi mengatur metastasis sel HT-29 dengan mengatur gen-gen yang terkait dengan metastasis.
Makalah ini diterbitkan dalam Nature Scientific Reports pada tahun 2018. Penelitian ini menggunakan garis sel tumorigenik HT-29 sebagai model sel usus untuk mengevaluasi keefektifan pengobatan bakteriofag yang diusulkan.
Dalam studi ini, para peneliti menggunakan sel HT-29 untuk menyelidiki aktivitas probiotik bakteri asam laktat. Menariknya, studi tersebut menunjukkan bahwa bakteri Lactobacillus mencegah adhesi bakteri patogen ke sel-sel kolon.
Sumber Daya Sel HT-29: Protokol, Video, dan Lainnya
Bagian ini akan membahas beberapa sumber daya online yang tersedia mengenai sel HT-29 yang akan membantu mempelajari protokol pemeliharaan, kultur, dan transfeksi sel tersebut.
Protokol kultur sel
Sumber daya berikut akan memandu Anda tentang subkultur sel HT-29.
- Kultur sel HT-29: Tautan ini akan memberikan pengetahuan dasar tentang media pertumbuhan, pencairan, dan subkultur sel HT-29.
- Pemeliharaan kultur HT-29: Artikel ini berisi semua informasi berguna tentang kultur dan pemeliharaan sel HT-29.
Protokol transfeksi
Garis sel HT-29 memiliki efisiensi transfeksi yang tinggi dan sering digunakan dalam studi ekspresi gen. Sumber daya berikut menjelaskan protokol transfeksi yang mungkin untuk sel-sel ini.
- Transfeksi HT-29: Tautan situs web ini berisi protokol terperinci untuk transfeksi sel HT-29.
- Transfeksi garis sel HT-29: Dokumen ini menjelaskan protokol transfeksi garis sel HT-29 dengan DNA plasmid.
Video terkait garis sel HT-29
Berikut adalah beberapa video mengenai kultur dan pemeliharaan garis sel tumorigenik ini.
- Passaging sel: Video ini menunjukkan protokol passaging sel untuk garis sel yang melekat.
- Transfeksi sel HT-29: Video ini akan memandu Anda mengenai metode transfeksi yang digunakan untuk sel HT-29.
Kami berharap informasi dalam artikel ini bermanfaat dan memadai bagi Anda dalam menangani dan memelihara garis sel HT-29. Jika Anda berencana menggunakan sel HT-29 dalam penelitian Anda, silakan memesan dari kami.
Referensi
- Martínez-Maqueda, D., B. Miralles, dan I. Recio, Garis sel HT29. Dampak Bioaktif Makanan terhadap Kesehatan: Model in vitro dan ex vivo, 2015: hlm. 113-124.
- Shirafkan, N., dkk., microRNA-193a-5p menghambat migrasi sel kanker kolon HT-29 manusia melalui penghambatan jalur metastasis. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): hlm. 8775-8783.
- Khodavirdipour, A., R. Zarean, dan R. Safaralizadeh, Evaluasi efek antikanker ekstrak etanol Syzygium cumini pada garis sel kolorektal HT-29. Jurnal Kanker Gastrointestinal, 2021. 52: hlm. 575-581.
- Fonseca, H.C., dkk., Sifat probiotik lactobacilli dan kemampuannya untuk menghambat adhesi bakteri enteropatogenik pada sel Caco-2 dan HT-29. Probiotik dan protein antimikroba, 2021. 13: hlm. 102-112.
- Shan, J., dkk., Bakteriofag lebih virulen terhadap bakteri dengan sel manusia daripada dalam kultur bakteri; wawasan dari sel HT-29. Laporan ilmiah, 2018. 8(1): hlm. 5091.