Garis Sel HCT116: Pilar dalam Penelitian Kanker Kolorektal

Garis sel HCT116 berfungsi sebagai landasan dalam eksplorasi kanker kolorektal, menawarkan wawasan yang tak ternilai ke dalam patogenesis penyakit dan jalan terapeutik yang potensial. Terkenal karena kegunaannya dalam penelitian kanker dan penilaian farmakologis, HCT116 memfasilitasi studi penting tentang perilaku tumor dan kemanjuran obat.

Asal-usul dan Karakteristik Dasar Sel HCT116

Memahami akar dan sifat dasar sel HCT116, seperti fitur morfologi, susunan genetik, dan dimensi selulernya, sangat penting bagi para peneliti yang memulai studi menggunakan garis sel ini.

Asal Usul dan Lanskap Genetik: Berasal dari usus besar seorang pria Kaukasia berusia 48 tahun yang didiagnosis menderita kanker kolorektal, sel HCT116 terkenal karena mutasi pada kodon 13 (G13D) gen KRAS, bagian dari jalur pensinyalan RAS / RAF / Mek / ERK. Mutasi khusus ini sangat penting dalam transformasi onkogenik sel-sel ini, menggarisbawahi relevansinya dalam penelitian kanker.

Morfologi dan Karakteristik Pertumbuhan: Menunjukkan morfologi seperti epitel, sel HCT116 biasanya tumbuh dalam kultur monolayer tetapi juga dapat membentuk sferoid dengan diameter 150-400 µm. Kemampuan beradaptasi dalam pola pertumbuhan ini menggarisbawahi keserbagunaannya dalam berbagai pengaturan eksperimental.

Profil Kromosom: Komposisi kromosom sel HCT116 mendekati diploid, dengan sekitar 70% dari populasi sel memiliki 45 kromosom. Khususnya, ada amplifikasi berulang pada lengan panjang kromosom 8, 10, 16, dan 17, sedangkan kromosom Y tidak ada, berkontribusi pada tanda tangan genom yang unik.

Analisis Komparatif: Garis Sel HCT116 vs HT29

Ketika menyandingkan HCT116 dengan HT29, garis sel karsinoma kolorektal manusia lainnya, perbedaan yang jelas dalam potensi onkogenik dan kapasitas diferensiasi muncul:

Agresivitas dan Diferensiasi Onkogenik: Sel-sel HCT116 dicirikan oleh agresivitas onkogeniknya yang tinggi dan potensi diferensiasi yang terbatas, menjadikannya model untuk mempelajari fenotipe tumor agresif. Sebaliknya, sel HT29 menunjukkan kemampuan untuk berdiferensiasi menjadi garis keturunan yang mirip enterosit dan penghasil mucin, memberikan model kontras yang meniru beragam aspek biologi kanker kolorektal.

Pemahaman komparatif tentang garis sel HCT116 dan HT29 ini memperkaya perangkat yang tersedia bagi para peneliti, yang memungkinkan penyelidikan yang lebih bernuansa terhadap sifat kanker kolorektal yang beragam.

Polip pra-kanker yang tumbuh di usus besar.

Menangani sel HCT116

Waktu Penggandaan:

Waktu penggandaan untuk sel kanker HCT116 berkisar antara 25 hingga 35 jam.

Patuh atau dalam Penangguhan:

Garis sel kanker usus besar HCT116 bersifat patuh, dengan sel-sel yang tumbuh dalam lapisan tunggal.

Kepadatan Penyemaian:

Kepadatan pembibitan 2 x104 sel / cm2 direkomendasikan untuk kultur sel HCT116. Untuk subkultur, sel harus dilepaskan menggunakan larutan Accutase setelah pencucian PBS 1x. Setelah sentrifugasi, pelet sel disuspensikan kembali dalam media pertumbuhan segar dan dipindahkan ke labu baru.

Media Pertumbuhan:

Media McCoys 5a, dilengkapi dengan 3,0 g / L L-glukosa, 1,5 mM L-glutamin, 3,0 g / L NaHCO3, dan 10% serum sapi janin, optimal untuk budidaya sel HCT116. Dianjurkan untuk memperbarui media 1 hingga 2 kali per minggu.

Kondisi Pertumbuhan (Suhu,CO2):

Kultivasi dilakukan dalam inkubator yang dilembabkan pada suhu 37 ° C dengan atmosferCO2 5%.

Penyimpanan:

Sel HCT116 dapat disimpan pada suhu di bawah -150 ° C baik dalam fase uap atau cair nitrogen cair.

Proses dan Media Pembekuan:

Gunakan media CM-1 atau CM-ACF untuk kriopreservasi. Metode pembekuan dengan laju terkontrol direkomendasikan, yang memungkinkan penurunan suhu secara bertahap sebesar 1°C per menit, yang membantu mempertahankan kelangsungan hidup sel.

Proses Pencairan:

Cairkan sel HCT116 dalam penangas air bersuhu 37°C. Setelah menambahkan media pertumbuhan, sentrifugasi untuk menghilangkan residu media beku. Resuspensi pelet sel dalam media segar dan kultur dalam labu baru.

Tingkat Keamanan Hayati:

Tingkat 1

Sel kanker usus besar HCT116 yang dikultur diperbesar pada 20x dan 10x.

Keuntungan dari garis sel HCT116

Bagian ini mempelajari garis sel HCT116, menyoroti peran pentingnya dalam penelitian kanker, khususnya dalam studi kanker kolorektal, dan mendiskusikan keunggulan yang melekat padanya.

Garis sel HCT116 menonjol dalam penelitian kanker karena beberapa keunggulan utama:

  • Model Kanker Kolorektal: Ini berfungsi sebagai model in vitro yang diakui secara luas untuk kanker kolorektal, kanker paling umum ketiga di dunia. Relevansinya untuk meniru kanker kolorektal manusia membuatnya sangat berharga untuk memahami biologi kanker dan menguji strategi terapeutik.

  • Homogenitas: Hebatnya, sekitar 70% sel HCT116 menunjukkan profil genetik yang konsisten, menawarkan populasi yang relatif homogen. Keseragaman ini sangat penting untuk penelitian yang berfokus pada ekspresi gen, jalur pensinyalan seluler, dan menilai kemanjuran perawatan obat, karena memastikan konsistensi dan keandalan dalam hasil eksperimen.

  • Efisiensi Transfeksi: Salah satu ciri khas sel HCT116 adalah kemampuannya yang tinggi untuk transfeksi, terutama dengan vektor virus. Karakteristik ini sangat bermanfaat dalam penelitian terapi gen, memungkinkan pengenalan materi genetik dengan efisiensi dan presisi, sehingga memfasilitasi manipulasi genetik tingkat lanjut dan studi fungsional.

Tingkatkan penemuan Anda dengan lini sel HCT116 kami yang telah diautentikasi

Aplikasi penelitian dari garis sel HCT116

Garis sel HCT116 memiliki berbagai aplikasi dalam penelitian kanker. Beberapa aplikasi yang menonjol adalah:

Biologi kanker

Garis sel kanker usus besar HCT116 digunakan untuk mempelajari perkembangan dan perkembangan kanker usus besar. Selain itu, ini membantu menjelaskan mekanisme yang mendasari dan jalur pensinyalan yang terlibat dalam proliferasi, migrasi, dan invasi kanker. Sebuah penelitian menggunakan sel HCT116 untuk mempelajari gen yang terlibat dalam pengembangan resistensi obat. Para peneliti mengekspresikan gen MDR1 secara berlebihan pada sel kanker usus besar dan mengamati ekspresi isoform NOX (NADPH oksida) dan Nrf2. Studi tersebut mengungkapkan bahwa regulasi NOX2 dan Nrf2 menyebabkan kemoresistensi pada sel kanker; dengan demikian, gen-gen ini dapat ditargetkan untuk mengatasi perkembangan resistensi selama terapi kanker [1]. Demikian juga, penelitian yang dilakukan pada tahun 2021 melaporkan bahwa jalur pensinyalan NF-κB terlibat dalam regulasi proliferasi dan migrasi kanker usus besar. Dengan demikian, jalur ini dapat ditargetkan untuk mengembangkan terapi baru dan efektif terhadap karsinoma kolorektal [2].

Dalam bidang onkologi, memahami proses rumit siklus sel, proliferasi dan pertumbuhan, serta apoptosis adalah hal yang mendasar. Fungsi-fungsi biologis ini sangat penting dalam mempelajari garis sel manusia, terutama yang berasal dari sel ganas seperti sel kanker usus besar manusia dan model kanker pankreas. Garis sel HCT116 dan SW620, misalnya, berperan penting dalam mengeksplorasi mekanisme yang mendasari kanker usus besar dan pankreas. Melalui teknik seperti flow cytometry dan uji klonogenik, para peneliti dapat menjelaskan profil ekspresi gen dan perilaku sel independen dalam tumor, menjelaskan bagaimana kanker berkomunikasi dalam matriks ekstraseluler.

Peran Apoptosis dalam Perkembangan Kanker

Apoptosis, atau kematian sel terprogram, memainkan peran penting dalam mempertahankan homeostasis seluler dan merupakan bidang studi utama dalam penelitian kanker. Perbedaan antara apoptosis yang tidak terkait dan apoptosis yang secara khusus diinduksi dalam konteks kanker, seperti kematian sel kanker usus besar, sangat penting. Proses ini bukan hanya tentang penghapusan sel, tetapi melibatkan interaksi sinyal yang kompleks yang dapat memengaruhi pertumbuhan tumor dan metastasis. Dengan memeriksa apoptosis dan kematian sel bersama dengan penekan metastasis dan aktivitas penekan tumor, para ilmuwan dapat memperoleh wawasan tentang jalur yang mengatur perkembangan kanker dan potensi metastasis.

Metastasis dan Penanda Molekuler pada Kanker

Metastasis tetap menjadi salah satu aspek kanker yang paling berat, dengan metastasis hematogen yang menjadi perhatian penting dalam penyebaran sel ganas. Eksplorasi metastasis melibatkan studi tentang pergerakan dan kemampuan invasi sel kanker, atau kemampuan gerak sel, dan bagaimana sel berinteraksi dengan lingkungannya, termasuk matriks ekstraseluler. Penanda molekuler seperti ekspresi CD133 dan reseptor faktor pertumbuhan epidermal sangat penting dalam mengidentifikasi dan memahami perilaku sel karsinoma usus besar positif dan jenis kanker lainnya. Jalur SIRT6, misalnya, telah muncul sebagai area yang menarik karena peran potensialnya dalam memodulasi pertumbuhan tumor dan kanker usus besar metastasis.

Toksikologi/pengembangan obat

Garis sel HCT116 digunakan sebagai model skrining untuk obat kanker baru. Beberapa penelitian telah dilakukan untuk menilai kemanjuran dan toksisitas obat antikanker, termasuk produk alami dan nanopartikel yang disintesis secara kimiawi. Dengan demikian, penelitian ini menilai sitotoksisitas nanopartikel perak yang disintesis dari ekstrak obat herbal, Caesalpinia pulcherrima, pada sel HCT116 [3]. Dalam sebuah penelitian, para peneliti menggunakan garis sel kanker HCT116 untuk mengevaluasi potensi antikanker ekstrak air teh kakao. Mereka menemukan bahwa ekstrak teh kakao mengurangi proliferasi kanker usus besar dan menginduksi kematian sel [4]. Studi lain menggunakan sel kanker HCT116 dan menemukan bahwa ekstrakkentang udara, Dioscorea bulbifera, menunjukkan aktivitas pro-apoptosis pada sel karsinoma kolorektal melalui aktivasi kaskade pensinyalan JNK dan penekanan gen ERK1 / 2 [5] .

Efek metformin pada sel kanker, terutama dalam konteks kanker usus besar dan pankreas, menunjukkan bagaimana memahami fungsi biologis sel kanker dapat mengarah pada strategi terapeutik yang potensial. Penelitian tentang kelangsungan hidup klonogenik, atau kemampuan untuk membentuk klon, sel kanker setelah pengobatan dengan agen seperti metformin atau menargetkan jalur tertentu seperti reseptor faktor pertumbuhan epidermal dapat memberikan wawasan yang berharga ke dalam pengobatan kanker yang efektif. Selain itu, penggunaan klon HCT116 dan populasi sel HCT116 dalam penelitian ini memungkinkan pemahaman yang lebih baik tentang bagaimana sel kanker merespons intervensi terapeutik yang berbeda, sehingga membuka jalan bagi pendekatan yang lebih personal untuk pengobatan kanker.

Sel HCT116: Publikasi penelitian

Bagian ini akan membahas beberapa publikasi terbaru yang signifikan dan paling banyak dikutip yang menampilkan lini sel HCT116.

Studi sitotoksisitas dari biji Piper nigrum yang dimediasi oleh nanopartikel SnO2 yang disintesis terhadap kolorektal (HCT116) dan kanker paru-paru (A549)

Penelitian ini dipublikasikan di Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2017). Para peneliti menggunakan kanker usus besar HCT116 dan garis sel kanker paru-paru A549 untuk mengevaluasi efek sitotoksik dari nanopartikel oksida timah yang dimediasi oleh biji piper nigrum yang disintesis.

RNA non-kode panjang SNHG15 berinteraksi dengan dan menstabilkan faktor transkripsi Siput dan mendorong perkembangan kanker usus besar

Penelitian dalam Cancer Letters (2018) ini mengusulkan bahwa lncRNA SNHG15 mendorong migrasi sel kanker usus besar pada garis sel kanker kolorektal, termasuk HCT116.

Ekspresi berlebih dari RNA non-kode TUG1 yang panjang mendorong perkembangan kanker usus besar

Makalah ini diterbitkan dalam jurnal Medical Science Monitor pada tahun 2016. Studi ini menemukan bahwa LncRNA TUG1 onkogenik mendorong proliferasi dan migrasi sel kanker usus besar HCT116.

Resistensi obat menginduksi peningkatan regulasi enzim penghasil H2S dalam sel kanker usus besar HCT116

Penelitian dalam jurnal Biochemical Pharmacology (2018) ini mengusulkan bahwa perkembangan resistensi obat meningkatkan kadar enzim penghasil H2S dalam sel kanker usus besar HCT116.

Efek apoptosis dan antiproliferasi dari ekstrak air Inula viscosa L. dalam ekspresi microRnas pada garis sel HCT 116: studi in vitro

Makalah penelitian ini dalam International Journal of Environmental Health Research (2023) mengusulkan bahwa ekstrak Inula viscosa L. memberikan efek antikanker pada sel kanker kolorektal HCT116 melalui pengaturan microRNA.

Sumber daya untuk sel HCT116

Di bawah ini adalah beberapa sumber daya pada sel HCT116.

  • Mentransfeksi HCT116: Video ini adalah panduan langkah demi langkah untuk mentransfeksi sel kanker HCT116.
  • Membudidayakan garis sel HCT116: Video ini menunjukkan protokol subkultur untuk garis sel kanker usus besar HCT116.
  • Subkultur garis sel HCT116: Situs web ini berisi banyak informasi berguna tentang media kultur HCT116. Selain itu, situs web ini menyediakan prosedur untuk pembekuan, pencairan, dan subkultur sel.

Pertanyaan yang Sering Diajukan Tentang Sel HCT116

referensi

  1. Waghela, BN, FU Vaidya, dan C. Pathak: Peningkatan regulasi NOX-2 dan Nrf-2 meningkatkan resistensi 5-fluorourasil pada sel karsinoma usus besar manusia (HCT-116). Biokimia (Moskow), 2021, 86, hlm. 262-274.
  2. Yang, M., dkk., Astragalin menghambat proliferasi dan migrasi sel kanker usus besar manusia HCT116 dengan mengatur jalur pensinyalan NF-κB. Perbatasan dalam Farmakologi, 2021, 12: p. 639256.
  3. Deepika, S., CI Selvaraj, dan SM Roopan, Skrining bioaktivitas Caesalpinia pulcherrima L. swartz dan sitotoksisitas ekstrak nanopartikel perak yang disintesis pada garis sel HCT116. Ilmu dan Rekayasa Material, C, 2020, 106, hlm. 110279.
  4. Gao, X., dkk., Teh kakao (Camellia ptilophylla) menginduksi apoptosis yang bergantung pada mitokondria pada sel HCT116 melalui pembentukan ROS dan jalur pensinyalan PI3K / Akt. Food Research International, 2020, 129, hlm. 108854.
  5. Hidayat, A.F.A., dkk., Dioscorea bulbifera menginduksi apoptosis melalui penghambatan ERK 1/2 dan aktivasi jalur pensinyalan JNK pada sel karsinoma kolorektal manusia HCT116. Biomedis & Farmakoterapi, 2018. 104: p. 806-816.

Kami telah mendeteksi bahwa Anda berada di negara lain atau menggunakan bahasa peramban yang berbeda dari yang dipilih saat ini. Apakah Anda ingin menerima pengaturan yang disarankan?

Tutup