Sel DU-145 - Panduan Komprehensif Peneliti
DU-145 adalah garis sel karsinoma prostat manusia yang diterapkan secara luas dalam penelitian biomedis. Sel-sel ini berfungsi sebagai model yang sangat berharga untuk mempelajari biologi kanker prostat, pengujian obat, dan pengembangan. Selain itu, para peneliti juga menggunakan sel DU-145 untuk menyelidiki mekanisme molekuler yang mendasari perkembangan, pertumbuhan, dan perkembangan kanker prostat.
Artikel ini akan memberi Anda wawasan berharga tentang sel kanker prostat DU-145. Secara khusus, ini akan mencakup:
- Informasi umum dan asal-usul garis sel DU-145
- Kultur sel DU-145
- Garis sel DU-145: Keuntungan & Keterbatasan
- Aplikasi penelitian sel DU-145
- Publikasi Penelitian yang Menampilkan Sel DU-145
- Sumber daya untuk garis Sel DU-145: Protokol, Video, dan Lainnya
1. Informasi umum dan asal usul lini sel DU-145
Memahami atribut dasar dan asal-usul lini sel sangat penting sebelum mulai bekerja dengannya. Bagian ini akan memberikan pemahaman yang komprehensif tentang karakteristik dan asal-usul lini sel DU-145. Anda akan mengetahui: Apa itu sel kanker DU145? Bagaimana morfologi sel DU145? Apa perbedaan antara PC-3 dan DU145?
- DU-145, garis sel kanker prostat manusia, berasal dari otak seorang pria Kaukasia (69 tahun) dengan karsinoma prostat metastatik. Sel-sel ini pertama kali disimpan oleh K.R. Stone dan rekan-rekannya pada tahun 1978.
- Seperti sel kanker prostat PC-3, DU-145 juga mengekspresikan reseptor androgen. Namun, ketika sel-sel ini mengalami pengobatan ligan androgen, mereka tidak menunjukkan aktivitas gen yang responsif terhadap reseptor androgen sehingga dianggap sebagai sel yang tidak bergantung pada androgen.
- Sel DU-145 memiliki morfologi epitel.
- Sel DU-145 bersifat hipotriploid dan memiliki jumlah kromosom modal 64. Mereka menunjukkan beberapa kromosom penanda, seperti del (11) (q23), t (11q12q), 16q+, del (1) (p32), dan del (9) (p11).
PC-3 Vs DU145
Kedua garis sel kanker prostat tidak bergantung pada reseptor androgen. Mereka berbeda dalam hal potensi tumorigenik dan metastasisnya. Ketika disuntikkan ke dalam tikus yang mengalami gangguan kekebalan, garis sel PC-3 membentuk adenokarsinoma kelas IV yang sangat metastasis. Sebaliknya, garis sel DU-145 mengembangkan kanker prostat dengan potensi metastasis sedang [1].
2. kultur sel DU-145
Garis sel DU-145 banyak digunakan di laboratorium penelitian kanker prostat. Anda harus mempelajari poin-poin penting berikut ini untuk memfasilitasi kultur yang mudah dan efisien. Bagian ini akan mencakup informasi tentang media DU145, waktu penggandaan, kondisi kultur sel, dan protokol.
Poin-poin Penting untuk Kultur Sel DU-145
|
Waktu Penggandaan Populasi: |
Waktu penggandaan DU-145 berkisar antara 30 hingga 40 jam. |
|
Patuh atau dalam Penangguhan: |
DU-145 adalah garis sel yang patuh. |
|
Kepadatan Penyemaian: |
Sel DU-145 diunggulkan pada kepadatan sel yang direkomendasikan yaitu 2 x104 sel/ cm2 . Pada kepadatan ini, sel menghasilkan monolayer yang menyatu dalam waktu hampir 4 hari. Untuk penyemaian, sel dicuci dengan 1 x garam penyangga fosfat dan diinkubasi dengan larutan passaging, Accutase. Setelah 8 hingga 10 menit inkubasi pada suhu kamar, sel ditambahkan dengan media kultur segar dan disentrifugasi. Pelet sel yang terkumpul diresuspensi dengan hati-hati, dan sel dituangkan ke dalam labu kultur baru untuk pertumbuhan. |
|
Media Pertumbuhan: |
EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) dengan suplemen media, yaitu 10% Fetal Bovine Serum (FBS), 2 mM L-Glutamine, 2,2 g/L NaHCO3, dan EBSS. Media diperbarui 2 hingga 3 kali per minggu. |
|
Kondisi Pertumbuhan: |
Kultur DU-145 disimpan dalam inkubator yang dilembabkan pada suhu 37°C dengan sumber CO2 5%. |
|
Penyimpanan: |
Sel DU-145 disimpan dalam fase uap nitrogen cair atau pada suhu di bawah -150 ° C dalam freezer listrik untuk mempertahankan kelangsungan hidup sel dalam jangka waktu yang lebih lama. |
|
Proses dan Media Pembekuan: |
Media pembekuan CM-1 atau CM-ACF direkomendasikan untuk sel kanker prostat DU-145. Metode pembekuan lambat yang memungkinkan suhu turun secara bertahap sebesar 1 ° C dipilih untuk membekukan sel. Hal ini mencegah sel dari guncangan apa pun dan membantu mempertahankan kelangsungan hidupnya. |
|
Proses Pencairan: |
Botol sel DU-145 yang dibekukan dengan cepat dicairkan dalam penangas air bersuhu 37°C selama 40 hingga 60 detik. Setelah itu, sel ditambahkan dengan media kultur dan disentrifugasi untuk menghilangkan komponen media yang membeku. Sel yang dipanen disuspensikan kembali dalam media pertumbuhan dan dituangkan ke dalam labu untuk pertumbuhan. Pemulihan pembekuan membutuhkan waktu hampir 24 jam. |
|
Tingkat Keamanan Hayati: |
Pengaturan keamanan hayati tingkat 1 diperlukan untuk membiakkan garis sel independen reseptor androgen DU145. |
3. garis sel DU-145: Keuntungan & Keterbatasan
Seperti garis sel lainnya, garis sel kanker prostat DU-145 dikaitkan dengan beberapa pro dan kontra. Atribut-atribut ini dapat membantu Anda memutuskan penggunaannya dalam penelitian Anda. Keuntungan dan kerugian utama sel DU-145 disebutkan di bawah ini.
Keuntungan
Keuntungan dari sel DU-145 adalah:
|
Tumorigenitas |
DU-145 adalah garis sel kanker prostat tumorigenik yang agresif dengan potensi metastasis sedang. Digunakan untuk mengembangkan model xenograft DU145 pada tikus yang mengalami gangguan kekebalan untuk mempelajari biologi, perkembangan, dan pertumbuhan kanker prostat secara in vitro dan in vivo. |
|
Kemandirian Reseptor Androgen |
Sel kanker prostat DU-145 tidak bergantung pada reseptor androgen. Mereka tidak bergantung pada androgen untuk pertumbuhan dan tidak menunjukkan respons pada tingkat sel dan molekuler ketika diobati dengan androgen. Ideal untuk meneliti mekanisme kanker prostat yang tidak bergantung pada hormon. |
Keterbatasan
Keterbatasan garis sel DU-145 adalah:
|
Model In Vitro |
DU-145 adalah model sel in vitro dari karsinoma prostat metastatik, sehingga mungkin tidak sepenuhnya mewakili kompleksitas tumor prostat primer. Selain itu, ini mungkin tidak menyiratkan semua jenis dan subtipe kanker prostat karena karakteristik spesifik seperti kemandirian reseptor androgen. |
4. aplikasi penelitian sel DU-145
Garis sel kanker prostat DU-145 memiliki berbagai aplikasi penelitian. Beberapa aplikasi yang menjanjikan tercantum di sini.
- Biologi kanker prostat: DU-145 adalah model yang relevan untuk mempelajari biologi kanker prostat. Para peneliti menggunakan sel-sel ini untuk menyelidiki mekanisme molekuler yang mendorong perkembangan, perkembangan, dan metastasis kanker. Selain itu, perubahan genetik yang umumnya terkait dengan kanker prostat juga dieksplorasi. Penelitian yang dilakukan pada tahun 2021 meneliti sel DU-145 untuk mengidentifikasi biomarker potensial untuk implikasi diagnostik dan terapeutik yang efisien. Penelitian ini menyarankan actin gamma 1 (ACTG1) sebagai biomarker kanker prostat yang potensial karena mendorong proliferasi sel kanker dan mengatur metastasis melalui aktivasi jalur MAPK / ERK [2].
- Skrining dan pengembangan obat: Sel kanker prostat DU-145 banyak digunakan untuk menguji sitotoksisitas dan kemanjuran obat anti-kanker potensial. Hal ini membantu para peneliti mengidentifikasi obat baru, memahami resistensi obat dan mekanisme molekuler yang mendasarinya. Sebuah studi yang dilakukan pada tahun 2022 mengeksplorasi efek sitotoksik dari campuran resin, propolis atau lem lebah, pada garis sel kanker prostat PC-3 dan DU-145. Studi ini menunjukkan efek penghambatan pertumbuhan dari bahan alami ini pada kedua garis sel dan mengusulkan potensi anti-kankernya [3]. Penelitian lain dilakukan pada tahun 2019 yang menyelidiki efek anti-proliferasi dari senyawa alami, Betaine pada sel kanker prostat DU-145. Penelitian tersebut menunjukkan bahwa betaine memberikan aktivitas anti-proliferasi dengan meningkatkan kematian sel yang dimediasi oleh stres oksidatif dan peradangan pada sel DU-145 [4].
5.publikasi Penelitian yang Menampilkan Sel DU-145
Berikut ini adalah beberapa publikasi penelitian tentang garis sel DU-145.
Studi ini dalam Penelitian Elemen Jejak Biologis, 2020, mengusulkan bahwa seng sulfat (ZnSo4) memberikan efek anti-proliferasi pada sel DU-145 dengan menginduksi apoptosis, perubahan morfologi, kerusakan oksidatif, dan peradangan.
Artikel penelitian ini telah dipublikasikan di BMC Complementary Medicine and Therapies pada tahun 2020. Penelitian ini mengeksplorasi potensi sitotoksik dan anti-metastasis dari tanaman, ekstrak kulit kayu Annona muricata L., dan annonacin bioaktifnya dalam garis sel DU-145.
Publikasi dalam IUBMB Life (2019) ini mengusulkan bahwa interaksi RNA LOXL1-AS1 non-kode yang panjang dengan miR-let-7a-5p dan jalur EGFR mengatur resistensi doksorubisin pada sel kanker prostat DU-145.
Artikel dalam Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) menyatakan bahwa downregulasi gen Discoidin Domain Receptor1 (DDR1) menyebabkan kematian sel DU-145 dan menghambat transisi epitel ke mesenkim (EMT) melalui pengaktifan jalur Pyk2 / MKK7.
Studi dalam Journal of Food Biochemistry (2019) ini mengusulkan bahwa Casticin, sebuah polimetoksiflavon, menghambat migrasi dan invasi sel DU-145 dengan mengatur pensinyalan Ras / Akt / NF-κB.
6. sumber daya untuk garis Sel DU-145: Protokol, Video, dan Lainnya
Banyak sumber daya online tersedia di garis sel kanker prostat DU-145. Di sini bagian ini akan menyebutkan beberapa sumber daya yang menjelaskan penanganan, pemeliharaan, dan protokol transfeksi untuk sel-sel ini:
- Transfeksi DU-145: Video tutorial ini adalah panduan langkah demi langkah untuk mempelajari protokol transfeksi sel DU-145.
Protokol kultur sel DU-145 disebutkan di sini.
- Subkultur DU-145: Tautan ini akan membantu Anda mempelajari protokol untuk subkultur atau subkultur sel DU-145.
- Sel DU-145: Situs web ini berisi banyak informasi berguna tentang lini sel DU-145, termasuk media DU145, protokol untuk subkultur, dan penanganan kultur proliferatif dan kriopreservasi.
Referensi
- Lima, AR, dkk., Diskriminasi antara eksometabolom sel normal dan kanker prostat manusia dengan GC-MS. Laporan ilmiah, 2018. 8(1): p. 5539.
- Xiao, L., dkk., Membungkam ekspresi ACTG1 menginduksi transisi mesenkim epitel kanker prostat melalui jalur pensinyalan MAPK / ERK. DNA dan Biologi Sel, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
- Gogacz, M., dkk., Efek antikanker ekstrak propolis yang diperoleh dengan metode pemisahan dingin pada garis sel kanker prostat PC-3 dan DU-145. Molecules, 2022. 27(23): p. 8245.
- Kar, F., dkk., Betaine menekan proliferasi sel dengan meningkatkan apoptosis yang dimediasi oleh stres oksidatif dan peradangan pada garis sel kanker prostat manusia DU-145. Stres dan Pendamping Sel, 2019. 24: p. 871-881.