Sel COS-1: Pekerja Keras Seluler dalam Studi Ekspresi Gen
Garis sel COS-1 adalah sel mirip fibroblas yang berasal dari jaringan ginjal monyet dan sering digunakan oleh para peneliti untuk menyelidiki virus monyet, SV40. Sel-sel ini mudah ditransfeksi dan sering digunakan untuk membuat protein rekombinan untuk berbagai eksperimen biokimia, molekuler, dan biologi sel.
Artikel ini akan memberikan rincian komprehensif tentang garis sel COS-1, yang mencakup semua informasi penting yang Anda butuhkan. Secara khusus, Anda akan mendapatkan pengetahuan tentang hal-hal berikut:
- Garis sel COS-1: Asal dan informasi umum.
- Pro dan Kontra sel COS-1
- Aplikasi Penelitian Sel COS-1
- Sel COS-1: Publikasi
- Sumber daya untuk lini sel COS-1, termasuk protokol, video, dan lainnya
- Membudidayakan sel COS-1
1.garis sel COS-1: Asal dan informasi umum.
Sebelum memulai pekerjaan apa pun dengan garis sel, penting untuk memiliki pemahaman mendasar tentang garis sel itu sendiri. Ini termasuk informasi seperti asal sel, bagaimana mereka diisolasi, dan karakteristiknya. Pada bagian ini, kita akan mempelajari dasar-dasar sel COS-1.
Apa itu garis sel COS-1?
Garis sel COS-1 terdiri dari sel mirip fibroblas yang pertama kali dibuat oleh J.W.F. Cowell dan rekan-rekannya pada tahun 1981. Sel-sel ini dihasilkan dengan mengubah garis sel epitel monyet hijau yang dikenal sebagai CV-1 dengan bentuk mutan dari Simian Virus SV40. Selanjutnya, garis sel COS-1 yang terbentuk dikarakterisasi secara menyeluruh untuk mengembalikan wilayah genom SV40 yang sebelumnya telah dihapus dari asal replikasi. Sel-sel ini mengekspresikan antigen T besar dan protein lain yang diperlukan untuk mereplikasi genom melingkar, seperti plasmid dengan benar.
Sel COS-1 memiliki morfologi seperti fibroblas dan melekat pada permukaan, menyebar sebagai lapisan tunggal. Saat ini tidak ada varian genetik yang diketahui dari garis sel COS-1. Namun, garis sel terkait COS-7 juga berasal dari sel CV-1 dan menunjukkan karakteristik yang serupa.
2.pro dan Kontra dari sel COS-1
Garis sel COS-1 memiliki kelebihan dan keterbatasan yang unik, yang akan kita bahas di bawah ini.
Keuntungan
- Kemampuan transfeksi: Lini sel COS-1 mudah ditransfeksi menggunakan berbagai metode, termasuk pendekatan fisik dan kimia.
- Produksi Lentivirus: Garis sel COS-1 adalah inang pengemasan yang cocok untuk memproduksi partikel lentivirus rekombinan berkualitas tinggi tanpa langkah pemurnian tambahan. Sel-sel ini melekat kuat pada permukaan plastik, yang mencegah kontaminasi supernatan transfeksi yang mengandung partikel virus [1].
- Ekspresi Gen: Garis sel COS-1 banyak digunakan untuk studi analisis ekspresi sementara dan stabil, menghasilkan banyak protein rekombinan melalui transfeksi dengan plasmid melingkar yang mengandung asal replikasi SV40 [2].
Keterbatasan
- Garis sel non-manusia: Karena sel COS-1 berasal dari primata non-manusia, protein rekombinan yang diproduksi oleh lini sel ini hanya cocok untuk eksperimen laboratorium dan tidak dapat direkomendasikan untuk penggunaan pada manusia.
3.aplikasi Penelitian Sel COS-1
Salah satu pertimbangan paling penting ketika membahas garis sel adalah aplikasi penelitiannya. Bagian ini akan mengeksplorasi aplikasi penelitian yang paling menonjol dari sel COS-1.
- Produksi protein rekombinan: Garis sel COS-1 banyak digunakan untuk memproduksi protein rekombinan melalui transfeksi sementara atau stabil dari vektor melingkar yang mengandung asal replikasi SV40. Dalam sebuah penelitian baru-baru ini, ahli biologi menggunakan garis sel COS-1 untuk memproduksi gonadotropin korionik kuda, hormon reproduksi rekombinan untuk aplikasi reproduksi [3]. Demikian pula, penelitian lain menggunakan sel COS-1 untuk memproduksi antibodi monoklonal rekombinan ayam terhadap jenis virus influenza tertentu [4].
- Produksi partikel mirip virus: Sel COS-1 berfungsi sebagai inang pengemasan untuk produksi lentivirus berkualitas tinggi dan dapat digunakan untuk menghasilkan vaksin virus. Sebuah penelitian menggunakan garis sel COS-1 untuk memproduksi partikel mirip virus dengue yang tidak menular tetapi sangat imunogenik, yang merupakan kandidat vaksin yang efektif [5].
4.sel COS-1: Publikasi
Beberapa publikasi penting tentang sel COS-1 adalah:
- Produksi dan Pemurnian Partikel Mirip Virus Dengue dari Sel COS-1: Publikasi dalam Bio-Protocol ini menjelaskan penggunaan sel COS-1 untuk memproduksi partikel mirip virus dengue yang sangat imunogenik.
- Analisis ekspresi gonadotropin korionik kuda rekombinan dalam tiga sistem inang - E. coli BL21C, lisat sel serangga Sf, dan sel mamalia COS-1: Dalam penelitian ini, para peneliti telah membandingkan produksi dan modifikasi pasca-translasi hormon reproduksi rekombinan, misalnya, equine chorionic gonadotropin dalam sistem ekspresi yang berbeda, termasuk sel mamalia COS-1.
- Menyelidiki partikel mirip Flaviviral yang ditularkan melalui kutu sebagai sistem penghantaran untuk terapi gen: Penelitian ini menggunakan sel COS-1 untuk memproduksi partikel mirip virus ensefalitis tick-borne (TBEV). Partikel-partikel ini diusulkan sebagai pesawat ulang-alik untuk mengantarkan replika yang diperlukan (yaitu gen terapeutik).
- Pembuatan antibodi monoklonal rekombinan ayam terhadap neuraminidase virus flu burung H9N2: Artikel yang diterbitkan dalam jurnal AMB Express ini menggunakan sel COS-1 untuk memproduksi antibodi monoklonal rekombinan terhadap neuraminidase virus flu burung tipe H9N2.
- Pelarutan bebas deterjen dari saluran Kv manusia yang diekspresikan dalam sel mamalia: Dalam penelitian ini, garis sel mamalia COS-1 digunakan untuk mengekspresikan saluran Kv manusia untuk melakukan beberapa percobaan pelarutan.
5.sumber daya untuk lini sel COS-1, termasuk protokol, video, dan lainnya
Protokol kultur sel
- Kultur sel COS-1: Tautan ini berisi informasi berharga tentang pemisahan, pembekuan, dan pencairan sel COS-1.
- Sel COS-1: Tautan ini berisi informasi dasar tentang garis sel COS-1.
Protokol transfeksi
Berikut adalah beberapa sumber yang menjelaskan metode transfeksi untuk sel COS-1.
- Transfeksi sementara sel COS-1: Dokumen ini terdiri dari protokol untuk transfeksi sementara garis sel COS-1.
Video yang terkait dengan garis sel COS-1
Sumber daya video berikut dapat membantu dalam memperoleh informasi umum tentang kultur, pemeliharaan, dan transfeksi sel COS-1.
- Melewati sel: Video ini membahas praktik kultur dasar untuk jalur sel mamalia.
- Membekukan sel yang melekat: Video ini berisi informasi untuk membekukan garis sel yang melekat.
- Protokol transfeksi: Video ini menunjukkan prosedur untuk mentransfeksi sel mamalia.
6.membudidayakan sel COS-1
|
Karakteristik |
Informasi |
|
Waktu penggandaan |
Sekitar 48 jam |
|
Patuh atau dalam suspensi |
Patuh tumbuh sebagai lapisan tunggal pada permukaan labu kultur |
|
Kepadatan penyemaian |
2 hingga 4 x 10 ^ 4 sel / cm²; sel yang melekat dicuci dengan 1x PBS, diperlakukan dengan Accutase, disentrifugasi, diresuspensi, dan disalurkan ke dalam labu baru |
|
Media pertumbuhan |
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) yang mengandung 10% FBS; media harus diganti 2 hingga 3 kali seminggu |
|
Kondisi pertumbuhan (suhu, CO2) |
Membutuhkan inkubator yang dilembabkan dengan 5% CO2 dan suhu 37°C |
|
Penyimpanan |
Di bawah suhu -150°C dalam fase uap nitrogen cair |
|
Proses dan media pembekuan |
Metode pembekuan lambat dengan penurunan suhu hanya 1 °C menggunakan media CM-1 atau CM-ACF |
|
Proses pencairan |
Mencairkan sel beku dengan menginkubasinya dalam penangas air bersuhu 37°C selama 40-60 detik dengan agitasi cepat. Sentrifus sel untuk menghilangkan media pembekuan, resuspensi pelet, dan masukkan ke dalam labu kultur dengan media segar. Adhesi membutuhkan waktu sekitar 24 jam. |
|
Tingkat keamanan hayati |
Tingkat keamanan hayati 1 direkomendasikan untuk menangani sel COS-1 |
Kami berharap artikel ini telah memberikan banyak informasi untuk membantu Anda mulai bekerja dengan sel COS-1. Silakan memesan dari kami jika Anda ingin menggunakan lini sel ini untuk studi penelitian Anda.
Referensi
- Smith, SL dan T. Shioda, Keuntungan sel epitel ginjal monyet COS-1 sebagai inang pengemasan untuk produksi volume kecil lentivirus rekombinan berkualitas tinggi. Jurnal metode virologi, 2009. 157(1): p. 47-54.
- MacKenzie, C.J. dan T. Shioda,Sel COS-1sebagai Inang Pengemas untuk Produksi Lentivirus. Protokol terkini dalam biologi sel, 2011. 50(1): p. 26.7. 1-26.7. 15.
- Bhardwaj, A., dkk., Analisis ekspresi gonadotropin korionik kuda rekombinan dalam tiga sistem inang: E. coli BL21C, lisat sel serangga Sf, dan sel mamalia COS-1. Jurnal Penelitian Hewan India, 2021. 55(1): p. 40-45.
- Wang, F., dkk., Pembuatan antibodi monoklonal rekombinan ayam terhadap neuraminidase virus flu burung H9N2. AMB Express, 2020. 10: p. 1-7.
- Galula, J.U., G.-J.J. Chang, dan D.-Y. Chao, Produksi dan Pemurnian Partikel Mirip Virus Dengue dari Sel COS-1. Bio-protokol, 2019. 9(12): p. e3280-e3280.

