Sel CHO-K1: Bahan Pokok dalam Aplikasi Penelitian Bioteknologi

Sel CHO-K1 merupakan turunan dari garis sel ovarium hamster Cina (CHO). Sel ini digunakan secara luas dalam bioteknologi industri untuk memproduksi produk biopharmasi dan protein rekombinan lainnya. Selain itu, garis sel CHO-K1 juga digunakan dalam penelitian toksikologi. Para peneliti memodifikasi sel-sel ini secara genetik untuk meningkatkan glikosilasi, mengurangi apoptosis, dan meningkatkan produktivitas secara keseluruhan.

📋 Garis Sel CHO-K1 — Fakta Singkat

Media Pertumbuhan: Media pertumbuhan Ham's F12 yang ditambah dengan 10% FBS, 1,0 mM Glutamin stabil, 1,0 mM Sodium piruvat, dan 1,1 g/L NaHCO3 digunakan untuk membiakkan sel CHO-K1. Media harus diganti 2 hingga 3 kali seminggu.
Waktu Penggandaan: Waktu penggandaan CHO-K1 sekitar 22 jam.
Jenis Pertumbuhan: Sel CHO-K1 bersifat melekat. Namun, sel ini dapat dimodifikasi secara genetik menjadi sel suspensi CHO-K1.
Tingkat Keamanan Biologis: BSL-1
Tersedia dari: Cytion — Pesan CHO-K1

📋 Isi

Asal dan karakteristik umum: Sel CHO-K1
Garis sel CHO-K1: Informasi kultur
Keunggulan & Keterbatasan sel CHO-K1
Aplikasi garis sel CHO-K1 dalam penelitian
5. Sel CHO-K1: Publikasi penelitian
Sumber daya untuk garis sel CHO-K1: Protokol, Video, dan Lainnya
Pertanyaan yang Sering Diajukan

Asal dan karakteristik umum: Sel CHO-K1

Karakteristik umum dan asal-usul suatu garis sel menentukan penggunaannya dalam penelitian. Bagian ini akan membantu Anda mempelajari asal-usul dan fitur dari garis sel CHO-K1 yang terkenal. Anda akan mengetahui: Dari mana asal sel CHO-K1? Seberapa besar ukuran sel CHO-K1? Apa bentuk lengkap dari garis sel CHO-K1? Bagaimana morfologi sel CHO-K1?

CHO-K1 atau garis sel ovarium hamster Cina K1 adalah subklon dari sel CHO induk yang berasal dari biopsi ovarium hamster Cina betina dewasa pada tahun 1957. Garis sel asli dikembangkan oleh T.T. Puck dan rekan-rekannya di Fakultas Kedokteran Universitas Colorado, Denver, AS [1].
Garis sel CHO-K1 menunjukkan morfologi mirip epitel.
Diameter sel CHO-K1 sekitar 0,001 milimeter. Menariknya, sel-sel ini awalnya berukuran besar; namun, ukurannya mengecil seiring waktu.
Genom CHO-K1 terdiri dari jumlah kromosom yang serupa dengan sel manusia. Sel-sel ini memiliki kariotipe diploid dan hanya memiliki sedikit kelainan kromosom.

Garis sel CHO-K1 vs CHO-S

Kedua garis sel tersebut merupakan turunan dari CHO. Keduanya berbeda dalam cara pertumbuhan dan proliferasi sel. Sel CHO-S beradaptasi untuk tumbuh dalam kultur, sedangkan CHO-K1 dapat dimanipulasi secara genetik untuk menghasilkan sel yang melekat dan sel suspensi.

Budidaya suspensi dalam produksi farmasi.

Garis sel CHO-K1: Informasi tentang kultur sel

Garis sel CHO-K1 banyak digunakan dalam penelitian bioteknologi industri. Garis sel ini mudah dipelihara. Mengetahui poin-poin penting dalam kultur sel CHO-K1 dapat membantu Anda melakukannya dengan mudah. Bagian ini akan membantu Anda mempelajari: Apakah sel CHO-K1 bersifat melekat? Berapa lama waktu penggandaan sel CHO-K1? Media apa yang digunakan untuk kultur sel CHO? Berapa kepadatan penyemaian CHO-K1?

Poin-Poin Penting dalam Pembiakan Sel CHO-K1

Waktu Penggandaan Populasi:: Waktu penggandaan CHO-K1 sekitar 22 jam.
Melekat atau dalam Suspensi:: Sel CHO-K1 bersifat melekat. Namun, sel ini dapat dimodifikasi secara genetik menjadi sel CHO-K1 suspensi.
Kepadatan Penaburan:: Kepadatan penaburan CHO-K1 adalah 1 x 10⁴ sel/cm². Pada kepadatan ini, sel dapat membentuk lapisan konfluen dalam waktu sekitar 6 hari. Untuk sel yang melekat, sel dibilas dengan 1 x PBS dan diinkubasi selama 8 hingga 10 menit pada suhu kamar. Sel yang terdisosiasi ditambahkan ke media baru dan disentrifugasi. Sel yang dipanen disuspensi kembali dan dituangkan ke dalam labu baru untuk pertumbuhan.
Media Pertumbuhan:: Media pertumbuhan Ham's F12 yang ditambah dengan 10% FBS, 1,0 mM Glutamin stabil, 1,0 mM Sodium piruvat, dan 1,1 g/L NaHCO3 digunakan untuk membiakkan sel CHO-K1. Media harus diganti 2 hingga 3 kali seminggu.
Kondisi Pertumbuhan:: Kultur CHO-K1 disimpan dalam inkubator berhumiditas pada suhu 37°C dengan pasokan CO₂ 5%.
Penyimpanan:: Sel CHO-K1 beku disimpan pada suhu di bawah -150°C atau dalam fase uap nitrogen cair.
Proses Pembekuan dan Media:: Media pembekuan CM-1 atau CM-ACF digunakan untuk membekukan sel CHO-K1. Proses pembekuan lambat yang memungkinkan penurunan suhu secara bertahap sebesar 1°C digunakan untuk membekukan sel CHO-K1.
Proses Pencairan:: Sel CHO-K1 beku disimpan dalam penangas air bersuhu 37°C hingga hanya tersisa gumpalan es kecil. Sel yang telah dicairkan ditambahkan dengan media kultur baru dan dituangkan ke dalam labu baru yang berisi media kultur dengan kepadatan 5 x 10⁴ sel/cm². Sel membutuhkan waktu hampir 24 hingga 48 jam untuk pulih dengan baik.
Tingkat Keamanan Biologis:: Kultur CHO-K1 ditangani dan dipelihara di laboratorium tingkat keamanan biologis 1.

CHO K1 cells

Sel CHO-K1 dalam kultur suspensi yang menunjukkan kurang dari 10% sel yang melekat (kiri) dan bergerombol (kanan).

Keunggulan & Keterbatasan Sel CHO-K1

CHO-K1 merupakan alat penelitian yang sangat berharga. Kombinasi unik antara kelebihan dan keterbatasannya membuatnya berbeda dari garis sel lainnya. Bagian ini telah membahas beberapa kelebihan dan kekurangan dari garis sel CHO-K1.

Keunggulan

Keunggulan utama dari garis sel CHO-K1 meliputi:

Kemudahan transfeksi: Sel CHO-K1 banyak digunakan dalam studi transfeksi. Sel ini dapat ditransfeksi secara sementara dan stabil melalui berbagai prosedur fisik dan kimiawi. Karena kemampuannya yang tinggi dalam transfeksi, sel CHO-K1 banyak digunakan untuk memproduksi protein rekombinan dan biofarmasi lainnya.
Laju pertumbuhan yang cepat dan mudah dibudidayakan: Waktu penggandaan sel CHO-K1 hanya 22 jam, sehingga sel ini memiliki laju pertumbuhan yang tinggi dan ideal untuk penggunaan bioteknologi industri. Selain itu, adaptasi suspensi CHO-K1 membuatnya berguna untuk memproduksi biofarmasi dalam jumlah besar. Selain itu, sel ini mudah dibudidayakan dan dipelihara di laboratorium serta tidak memerlukan kondisi dan prosedur budidaya yang rumit.
Frekuensi kelainan kromosom yang rendah: CHO-K1 adalah sistem model yang terkarakterisasi dengan baik dan mapan. Genom CHO-K1 stabil dan hanya memiliki sedikit kelainan kromosom. Oleh karena itu, sel ini merupakan inang yang ideal untuk produksi protein rekombinan.

Keterbatasan

Berikut adalah beberapa keterbatasan dari garis sel CHO-K1:

Berasal dari non-manusia: Meskipun sel CHO-K1 memiliki kemampuan untuk melakukan pola glikosilasi mirip manusia, sel ini berasal dari non-manusia. Hal ini mungkin menjadi perhatian saat mempelajari proses sel yang sangat spesifik pada manusia dan imunogenisitas agen terapeutik.
Heterogenitas: Sel CHO-K1 mungkin menunjukkan karakteristik genetik yang sedikit berbeda dalam populasi yang sama, sehingga menghasilkan heterogenitas genetik. Hal ini dapat memengaruhi fungsi seluler dan menyebabkan variabilitas dalam tingkat ekspresi protein, yang berpotensi memengaruhi reproduktifitas hasil eksperimen.

Aplikasi garis sel CHO-K1 dalam penelitian

Garis sel CHO-K1 memiliki banyak aplikasi dalam bioteknologi industri dan penelitian toksikologi. Di sini, kami telah membahas beberapa aplikasi spesifik.

Produksi protein rekombinan: Sel CHO-K1 merupakan alat penelitian yang sangat berharga untuk produksi protein rekombinan, termasuk antibodi, protein terapeutik, dan enzim. Laju pertumbuhan yang tinggi dan kondisi kultur yang mudah membantu menghasilkan jumlah besar protein rekombinan dengan lipatan dan glikosilasi yang tepat. Misalnya, sebuah studi yang dilakukan oleh Kritika Gupta menggunakan sel CHO-K1 dan mentransfeksi secara stabil sel tersebut untuk memproduksi antibodi monoklonal rekombinan terhadap faktor nekrosis tumor alfa (TNF-α) [2]. Produksi antibodi CHO-K1 cukup andal dan praktis. Para peneliti juga memodifikasi sel-sel ini untuk meningkatkan produksi antibodi CHO-K1. Misalnya, sebuah penelitian memodifikasi sel CHO-K1 secara genetik untuk menghasilkan antibodi dengan rasio tinggi N-glikan terikat Fc yang difukosilasi-a, yang penting untuk fungsi efektornya [3].
Penelitian toksikologi: Sel CHO-K1 sering digunakan untuk penemuan obat dan uji skrining. Sel ini dapat digunakan untuk mengevaluasi toksisitas dan efektivitas obat potensial. Selain itu, para peneliti menggunakan sel CHO-K1 untuk menyelidiki interaksi obat-target dan mempelajari metabolisme obat. Beberapa studi telah dilakukan untuk menilai efek terapeutik potensial dari ekstrak tumbuhan, senyawa, nanopartikel, protein terapeutik, dan agen lain menggunakan garis sel CHO-K1. Penelitian serupa dilakukan pada tahun 2022 di mana para peneliti mengukur potensi sitotoksik ekstrak tumbuhan kaya flavonoid pada sel CHO-K1 [4]. Demikian pula, sebuah studi penelitian yang dilakukan oleh Ryan Deweese dan rekan-rekannya mengevaluasi sitotoksisitas ekstrak Baptisia australis, Trifolium pratense, dan Rubus idaeus pada sel ovarium hamster Cina CHO-K1 [5].

€430,00*

Konten: 1.5 milliliter

Harga belum termasuk pajak ditambah biaya pengiriman

cryovial

Nomor produk: 603480

5. Sel CHO-K1: Publikasi penelitian

Berikut ini adalah beberapa publikasi penelitian menarik mengenai sel CHO-K1.

Overekspresi SIRT6 mengurangi apoptosis dan meningkatkan viabilitas sel serta ekspresi antibodi monoklonal pada sel CHO-K1

Studi yang diterbitkan dalam Molecular Biology Reports (2023) ini mengusulkan efek positif dari overexpresi gen SIRT6 terhadap viabilitas sel CHO-K1 dan ekspresi antibodi.

Meningkatkan hasil dan aktivitas antibodi defukosilasi yang diproduksi oleh sel CHO-K1 menggunakan penargetan gen multiplex yang dimediasi oleh Cas13d

Publikasi ini dimuat dalam Journal of the Taiwan Institute of Chemical Engineers (2021). Temuan penelitian ini menyatakan potensi CRISPR-Cas13d untuk memodifikasi genetik sel CHO-K1 guna meningkatkan produksi antibodi baik dari segi kualitas maupun kuantitas.

Penerapan maltosa sebagai sumber energi dalam kultur CHO-K1 bebas protein untuk meningkatkan produksi antibodi monoklonal rekombinan

Artikel penelitian dari Nature Scientific Reports (2018) ini menyarankan maltosa sebagai sumber energi yang menjanjikan untuk membiakkan sel CHO-K1 dalam media bebas protein dan meningkatkan produksi antibodi monoklonal rekombinan.

Mengungkap sitotoksisitas dan antigenotoksisitas ekstrak etanol Piper nigrum L. dan kombinasi dengan doxorubicin pada sel CHO-K1

Studi dalam Indonesian Journal of Cancer Chemoprevention (2018) ini menggunakan sel CHO-K1 untuk mengevaluasi potensi efek sitotoksik dan antigenotoksik ekstrak etanol lada hitam secara tunggal maupun dalam kombinasi dengan doxorubicin.

Sitotoksisitas dan genotoksisitas nanopartikel perak pada sel garis sel ovarium hamster Cina (CHO-K1)

Penelitian ini diterbitkan di The Nucleus pada tahun 2019. Di sini, para peneliti mengevaluasi potensi sitotoksik dan genotoksik nanopartikel perak pada garis sel CHO-K1.

Sumber daya untuk garis sel CHO-K1: Protokol, Video, dan Lainnya

CHO-K1 adalah garis sel yang terkenal. Sumber daya yang tersedia mengenai protokol kultur dan transfeksi CHO-K1 disebutkan di sini.

Transfeksi CHO-K1: Tautan ini akan menjelaskan protokol transfeksi CHO-K1. Ini adalah panduan langkah demi langkah untuk mentransfeksi DNA plasmid ke dalam sel CHO-K1 menggunakan Reagen Lipofectamine LTX.
Tutorial transfeksi CHO-K1: Video ini akan menjelaskan prosedur transfeksi sementara CHO-K1 secara terperinci.

Berikut adalah beberapa sumber daya yang menjelaskan protokol kultur sel untuk sel CHO-K1.

Sel CHO-K1: Tautan situs web ini berisi informasi berguna tentang sel CHO-K1, termasuk resep media CHO-K1, subkultur, dan protokol pencairan.

Referensi

Gamper, N., J.D. Stockand, dan M.S. Shapiro, Penggunaan sel ovarium hamster Cina (CHO) dalam studi saluran ion. J Pharmacol Toxicol Methods, 2005. 51(3): hlm. 177-85.
Gupta, K., dkk., Garis sel CHO-K1 yang stabil untuk produksi antibodi monoklonal rekombinan terhadap TNF-α. Molecular Biotechnology, 2021. 63(9): hlm. 828-839.
Popp, O., dkk. Pengembangan garis sel inang CHO-K1 yang telah dimodifikasi glikoprotein sebelumnya untuk ekspresi antibodi dengan fungsi efektor yang ditingkatkan melalui Fc. dalam MAbs. 2018. Taylor & Francis.
Kurchatova, M., dkk., Toksisitas Ekstrak Tumbuhan yang Mengandung Flavonoid terhadap Garis Sel CHO: Studi Perbandingan. Biologi Sel dan Jaringan, 2022. 16(1): hlm. 80-85.
Deweese, R., dkk., Efek Sitotoksik Ekstrak Trifolium pratense, Baptisia australis, dan Rubus idaeus pada Sel CHO-K1. GSC Advanced Research and Reviews, 2021. 8(1): hlm. 128-139.