Sel B16 - Panduan Dasar tentang Sel Melanoma B16 dalam Penelitian Onkologi
B16 adalah garis sel kanker kulit (melanoma) yang berasal dari tikus. Garis sel ini merupakan model in vitro yang efektif untuk mempelajari kanker kulit manusia. Garis sel ini sering digunakan untuk meneliti pembentukan tumor padat dan metastasis sel kanker.
- Media Pertumbuhan
- Sel B16 dikultur dalam media EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) yang mengandung 10% serum janin sapi (FBS). Media pertumbuhan harus diganti 2-3 kali seminggu.
- Waktu Penggandaan
- Waktu penggandaan populasi rata-rata untuk sel B16 diperkirakan 24 jam.
- Tipe Pertumbuhan
- Sel B16 bersifat melekat dan tumbuh dalam lapisan tunggal.
- Tingkat Keamanan Biologis
- BSL-1
- Tersedia dari
- Cytion — Pesan B16
Artikel ini akan membantu Anda memahami dasar-dasar garis sel melanoma B16. Secara khusus, artikel ini akan membahas hal-hal berikut:
Karakteristik umum dan asal-usul garis sel B16
Bagian artikel ini akan membahas ciri-ciri khas dari garis sel melanoma B16. Anda akan mengetahui jawaban atas pertanyaan-pertanyaan yang sering diajukan berikut ini. Seperti Apa itu garis sel kanker B16? Dari mana asal sel B16? Berapa ukuran sel B16?
- Garis sel B16 didirikan pada tahun 1954. Sel-sel ini berasal dari tikus C57BL/6J yang secara spontan mengalami tumor pada kulit di Jackson Laboratories di Maine.
- Ini adalah sel epitel penghasil melanin yang memiliki kemampuan untuk bermetastasis di limpa, hati, dan paru-paru.
- Sel melanoma B16 tumbuh sebagai lapisan tunggal dan menunjukkan morfologi sel seperti epitel dan berbentuk spindel.
- Ukuran garis sel B16 sekitar 15,4 μm.
- Terdapat subklon yang berbeda dari sel B16, termasuk B16GMCSF, B164A5, B16FLT3, dan B16F10. Subklon ini berbeda dari sel induk B16 dan mempertahankan beberapa ciri khas. Misalnya, mereka memiliki perbedaan dalam morfologi, ukuran sel, dan sifat lainnya. B16F10 memiliki kemampuan metastasis paru-paru yang tinggi, dan B164A5 adalah garis sel kanker kulit yang paling agresif dibandingkan dengan B16F10, B16-GMCSF, dan B16FLT3 [1].
Informasi tentang kultur sel B16
Sebelum memelihara atau membiakkan garis sel, Anda mungkin mencari informasi penting mengenai waktu penggandaan, jenis sel, media pertumbuhan, kondisi kultur, dan sebagainya. Bagian ini berisi semua informasi yang diperlukan untuk membiakkan sel B16.
Poin-poin Penting untuk Kultur Sel B16
Waktu Perduplikan Populasi:
Waktu penggandaan populasi rata-rata untuk sel B16 diperkirakan 24 jam.
Menempel atau dalam Suspensi:
Sel B16 bersifat melekat dan tumbuh dalam lapisan tunggal.
Kepadatan Penaburan:
Sel B16 direkomendasikan untuk disemai dengan kepadatan sel 1 hingga 2 x 104 sel/cm2. Sel B16 yang melekat dibilas dengan 1 x PBS dan dipisahkan dari permukaan menggunakan larutan Accutase. Sel disentrifugasi, dan endapan sel disuspensi kembali dalam media pertumbuhan. Kemudian sel-sel ini dipindahkan ke labu baru untuk pertumbuhan.
Media Pertumbuhan:
Sel B16 dikultur dalam media EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) yang mengandung 10% serum janin sapi (FBS). Media pertumbuhan harus diganti 2-3 kali seminggu.
Kondisi Pertumbuhan:
Inkubator yang dilembabkan dengan pasokan CO₂ 5% dan suhu 37 °C digunakan untuk menumbuhkan garis sel B16.
Penyimpanan:
Sel-sel ini disimpan pada suhu di bawah -150 °C atau dalam fase uap nitrogen cair untuk menjaga viabilitas sel.
Proses Pembekuan dan Media:
Media pembekuan CM-1 atau CM-ACF digunakan untuk membekukan sel B16 menggunakan proses pembekuan lambat.
Proses Pencairan:
Sel B16 yang dibekukan dicairkan pada suhu 37 °C dalam penangas air yang mengandung agen antimikroba. Sel yang telah dicairkan dapat langsung dikultur dengan memasukkannya ke dalam labu yang berisi media pertumbuhan. Selain itu, sel-sel ini dapat disentrifugasi untuk menghilangkan komponen media pembekuan dan kemudian dikultur dalam media baru.
Tingkat Keamanan Biologis:
Garis sel B16 harus ditangani atau dipelihara di laboratorium tingkat keamanan biologis satu.
Baris sel B16: Kelebihan & kekurangan
Seperti garis sel lainnya, B16 memiliki campuran unik antara kelebihan dan kekurangan. Beberapa kelebihan dan kekurangan utama dari garis sel melanoma ini tercantum dalam bagian ini.
Kelebihan
B16 adalah alat murine efektif pertama yang banyak digunakan dalam penelitian metastasis berkat kelebihan yang dimilikinya. Beberapa kelebihan dari garis sel kanker kulit ini adalah:
Mudah dibudidayakan
Garis sel B16 mudah dibudidayakan di laboratorium penelitian. Garis sel ini banyak digunakan untuk mempelajari biologi sel kanker, jalur sinyal, dan lainnya.
Pertumbuhan cepat
Garis sel melanoma B16 menunjukkan tingkat proliferasi yang tinggi, sehingga cocok untuk mempelajari proses pembelahan dan pertumbuhan sel.
Tumorigenisitas
B16 adalah garis sel tumorigenik dengan sifat-sifat mirip tumor seperti invasi, migrasi, dan proliferasi. Garis sel ini sangat berguna untuk mempelajari pembentukan tumor, perkembangan, dan metastasis.
Kekurangan
Kekurangan yang terkait dengan garis sel B16 adalah:
Kurangnya relevansi dengan manusia
Karena B16 merupakan garis sel melanoma tikus, garis sel ini mungkin tidak secara akurat mewakili biologi kanker kulit manusia, sehingga membatasi penerapan hasil penelitian.
Ketidakhomogenan
Sel B16 bersifat heterogen, menunjukkan sifat genetik dan fenotipik yang bervariasi dalam kultur yang sama. Hal ini dapat memengaruhi keandalan dan reproduktifitas hasil.
Aplikasi sel B16
Baris sel B16 digunakan secara luas dalam studi penelitian. Beberapa aplikasi yang menjanjikan dari baris sel ini adalah:
- Biologi tumor: Lini sel kanker kulit tikus ini bersifat tumorigenik dan banyak digunakan untuk memahami biologi tumor. Beberapa studi telah dilakukan untuk mengeksplorasi mekanisme seluler di balik pertumbuhan, proliferasi, dan metastasis sel tumor menggunakan sel B16. Sebuah studi penelitian yang dilakukan pada tahun 2020 memanfaatkan sel B16 untuk menyelidiki peran RNA non-koding panjang, LncRNA MEG3, dalam pembentukan, pertumbuhan, dan metastasis melanoma. Penelitian ini menemukan bahwa RNA non-koding memodulasi sumbu miRNA-21/E-Cadherin untuk merangsang peristiwa seluler tersebut [2]. Demikian pula, penelitian dilakukan untuk menyelidiki peran potensial sinyal Notch1 dalam imunosupresi yang diinduksi tumor menggunakan sel B16 [3].
- Penemuan obat: Sel B16 digunakan untuk memvalidasi dan menguji potensi efek terapeutik dari kandidat obat. Sebuah studi mengevaluasi efek antitumor asam neogambogik, senyawa alami, menggunakan garis sel B16. Hasil studi menunjukkan bahwa senyawa ini memodulasi jalur sinyal PI3K/Akt/mTOR untuk menyebabkan kematian sel kanker [4]. Studi lain menyelidiki efek antimaligna Ginsenoside Rg3, sebuah saponin, menggunakan garis sel B16. Penelitian tersebut mengusulkan bahwa senyawa alami ini menimbulkan aktivitas antitumor dengan menurunkan jalur ERK dan Akt [5].
5. Publikasi Penelitian yang Menampilkan Sel B16
Berikut adalah beberapa publikasi penelitian penting yang menampilkan garis sel melanoma B16.
Publikasi dalam jurnal Cancer Cell International (2020) ini mengusulkan bahwa RNA non-koding panjang MEG3 meningkatkan pembentukan, pertumbuhan, dan metastasis sel melanoma B16 dengan memodulasi sumbu miRNA-21/E-Cadherin.
Makalah ini diterbitkan dalam International Journal of Molecular Medicine pada tahun 2018. Penelitian ini menyelidiki efek melanogenik dan mekanisme turunan psoralen—4-metil-6-fenil-2H-furo[3,2-g] kromen-2-on (MPFC)—dalam sel B16. Studi ini mengusulkan bahwa turunan ini mendorong melanogenesis dengan merangsang jalur sinyal sel PKA dan p38 MAPK.
Penelitian ini diterbitkan pada tahun 2018 dalam Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Temuan studi ini menunjukkan bahwa aktivasi sinyal Notch1 pada sel B16 dapat menghambat imunitas antitumor dengan meningkatkan ekspresi gen TGF-β1.
Asam neogambogik menginduksi apoptosis sel melanoma B16 melalui jalur sinyal PI3K/Akt/mTOR
Penelitian ini dilakukan oleh Chunlan Wu dan rekan-rekannya pada tahun 2020 dan diterbitkan dalam jurnal Acta Biochimica Polonica. Penelitian ini menyatakan bahwa asam neogambogic, suatu senyawa alami, dapat menyebabkan kematian sel melanoma B16 dengan memodulasi kaskade sinyal PI3K/Akt/mTOR.
Makalah penelitian ini diterbitkan dalam European Journal of Medicinal Chemistry pada tahun 2018. Dalam studi ini, para peneliti menyelidiki aktivitas antikanker dari suatu senyawa, kompleks iridium (III), menggunakan sel melanoma B16.
Ailanthone menginduksi penghentian siklus sel dan apoptosis pada sel melanoma B16 dan A375
Studi ini mengusulkan bahwa senyawa bioaktif tumbuhan, Ailanthone, memiliki potensi antikanker karena dapat memicu apoptosis dan penghentian siklus sel pada sel melanoma B16 dan A375. Makalah ini diterbitkan di jurnal Biomolecules pada tahun 2019.
Sumber Daya untuk Garis Sel B16: Protokol, Video, dan Lainnya
Sumber daya mengenai garis sel B16 yang menjelaskan protokol kultur dan transfeksi masih terbatas.
- Kultur sel melanoma: Video ini memberikan tips berharga untuk kultur garis sel melanoma.
- Subkultur garis sel: Video ini menjelaskan protokol subkultur umum untuk garis sel.
- Transfeksi garis sel B16F10: Video ini menjelaskan protokol transfeksi untuk subgaris sel melanoma B16. Video ini dapat membantu Anda mengoptimalkan protokol transfeksi untuk sel B16.
Berikut ini adalah beberapa protokol kultur sel untuk sel B16.
- Kultur sel B16: Situs web ini berisi semua informasi yang diperlukan untuk kultur sel B16, termasuk media pertumbuhan, subkultur, pencairan, dan pembekuan sel.
Referensi
- Danciu, C., dkk., Perilaku empat subgaris sel melanoma tikus B16 yang berbeda: C57 BL/6J kulit. Jurnal Internasional Patologi Eksperimental, 2015. 96(2): hlm. 73-80.
- Wu, L., dkk., LncRNA MEG3 mempromosikan pertumbuhan, metastasis, dan pembentukan melanoma melalui modulasi sumbu miR-21/E-cadherin. Cancer Cell International, 2020. 20: hlm. 1-14.
- Yang, Z., dkk., Sinyal Notch1 pada sel melanoma mempromosikan supresi imun yang diinduksi tumor melalui peningkatan ekspresi TGF-β1. Jurnal Penelitian Kanker Eksperimental & Klinis, 2018. 37(1): hlm. 1-13.
- Wu, C., dkk., Asam neogambogik menginduksi apoptosis sel melanoma B16 melalui jalur sinyal PI3K/Akt/mTOR. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): hlm. 197-202.
- Meng, L., dkk., Aktivitas antitumor ginsenoside Rg3 pada melanoma melalui penurunan regulasi jalur ERK dan Akt. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): hlm. 2069-2079.