Sel B16 - Panduan Dasar untuk Sel Melanoma B16 dalam Penelitian Onkologi
B16 adalah garis sel kanker kulit (melanoma) yang berasal dari murine. Garis sel ini adalah model in vitro yang efektif untuk mempelajari kanker kulit manusia. Ini sering digunakan untuk menyelidiki pembentukan tumor padat dan metastasis sel kanker.
Artikel ini akan membantu Anda memahami dasar-dasar garis sel melanoma B16. Secara khusus, artikel ini akan membahas hal-hal berikut:
1.karakteristik umum dan asal usul garis sel B16
Bagian artikel ini akan membahas ciri-ciri karakteristik garis sel melanoma B16. Anda akan mempelajari jawaban atas pertanyaan umum berikut. Seperti Apa itu garis sel kanker B16? Dari mana sel B16 berasal? Berapa ukuran sel B16?
- Garis sel B16 didirikan pada tahun 1954. Sel-sel ini berasal dari tikus C57BL/6J yang secara spontan memiliki tumor di kulit di Laboratorium Jackson di Maine.
- Sel-sel ini adalah sel epitel penghasil melanin yang memiliki kemampuan untuk bermetastasis di limpa, hati, dan paru-paru.
- Sel melanoma B16 tumbuh sebagai lapisan tunggal dan menunjukkan morfologi sel yang mirip epitel dan berbentuk gelendong.
- Ukuran garis sel B16 adalah sekitar 15,4 μm.
- Ada beberapa subklon sel B16 yang berbeda, termasuk B16GMCSF, B164A5, B16FLT3, dan B16F10. Subklon ini berbeda dari sel B16 induk dan memiliki beberapa fitur spesifik. Misalnya, mereka memiliki perbedaan dalam morfologi, ukuran sel, dan sifat-sifat lainnya. B16F10 memiliki kemampuan metastasis paru-paru yang tinggi, dan B164A5 adalah garis sel kanker kulit yang paling agresif dibandingkan dengan B16F10, B16-GMCSF, dan B16FLT3 [1].
2.informasi kultur dari garis sel B16
Sebelum memelihara atau mengkultur garis sel, Anda mungkin mencari informasi penting tentang waktu penggandaan, jenis sel, media pertumbuhan, kondisi kultur, dll. Di sini bagian ini berisi semua informasi yang diperlukan untuk kultur sel B16.
Poin-poin Penting untuk Membiakkan Sel B16
|
Waktu Penggandaan Populasi: |
Waktu penggandaan populasi rata-rata untuk sel B16 diperkirakan 24 jam. |
|
Patuh atau dalam Suspensi: |
Sel B16 bersifat melekat dan tumbuh dalam lapisan tunggal. |
|
Kepadatan Penyemaian: |
Sel B16 direkomendasikan untuk benih pada kepadatan sel 1 hingga 2 x104 sel / cm2. Sel B16 yang menempel dibilas dengan 1 x PBS dan dipisahkan dari permukaan menggunakan larutan Accutase. Sel disentrifugasi, dan pelet sel disuspensikan kembali ke dalam media pertumbuhan. Kemudian sel-sel ini dimasukkan ke dalam labu baru untuk pertumbuhan. |
|
Media Pertumbuhan: |
Sel B16 dikultur dalam medium EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) yang mengandung 10% fetal bovine serum (FBS). Media pertumbuhan harus diperbarui 2-3 kali seminggu. |
|
Kondisi Pertumbuhan: |
Inkubator yang dilembabkan dengan suplaiCO2 5% dan suhu 37 ° C digunakan untuk menumbuhkan garis sel B16. |
|
Penyimpanan: |
Sel-sel ini disimpan pada suhu di bawah -150 ° C atau dalam fase uap nitrogen cair untuk melindungi kelangsungan hidup sel. |
|
Proses dan Media Pembekuan: |
Media pembekuan CM-1 atau CM-ACF digunakan untuk membekukan sel B16 menggunakan proses pembekuan yang lambat. |
|
Proses Pencairan: |
Sel B16 yang dibekukan dicairkan pada suhu 37°C dalam penangas air yang mengandung agen antimikroba. Sel yang telah dicairkan dapat langsung dikultur dengan memasukkannya ke dalam labu yang berisi media pertumbuhan. Selain itu, sel-sel ini dapat disentrifugasi untuk menghilangkan komponen media yang membeku dan kemudian dikultur dalam media baru. |
|
Tingkat Keamanan Hayati: |
Garis sel B16 harus ditangani atau dipelihara di laboratorium keamanan hayati tingkat satu. |
3. garis sel B16: Keuntungan & kerugian
Seperti garis sel lainnya, B16 memiliki campuran unik antara kelebihan dan kekurangan. Beberapa pro dan kontra yang signifikan dari garis sel melanoma ini tercantum dalam bagian ini.
Keuntungan
B16 adalah alat murine efektif pertama yang banyak digunakan dalam penelitian metastasis karena keunggulan yang ditawarkannya. Beberapa keuntungan dari garis sel kanker kulit ini adalah:
|
Mudah tumbuh |
Garis sel B16 mudah dikultur di laboratorium penelitian. Ini banyak digunakan untuk mempelajari biologi sel kanker, jalur pensinyalan, dan banyak lagi. |
|
Tumbuh cepat |
Garis sel melanoma B16 menunjukkan tingkat proliferasi yang tinggi, sehingga cocok untuk mempelajari pembelahan sel dan proses pertumbuhan. |
|
Tumorigenitas |
B16 adalah garis sel tumorigenik dengan sifat seperti tumor seperti invasi, migrasi, dan proliferasi. Ini sangat berharga untuk mempelajari pembentukan, perkembangan, dan metastasis tumor. |
Kekurangan
Kerugian yang terkait dengan garis sel B16 adalah:
|
Kurangnya relevansi dengan manusia |
Karena B16 adalah garis sel melanoma tikus, mungkin tidak secara akurat mewakili biologi kanker kulit manusia, sehingga membatasi kemampuan penerjemahan temuan penelitian. |
|
Heterogenitas |
Sel B16 bersifat heterogen, menunjukkan sifat genetik dan fenotipik yang bervariasi dalam kultur yang sama. Hal ini dapat memengaruhi keandalan dan reproduktifitas hasil. |
4. aplikasi sel B16
Garis sel B16 banyak digunakan dalam studi penelitian. Beberapa aplikasi yang menjanjikan dari lini sel ini adalah:
- Biologi tumor: Garis sel kanker kulit murine ini bersifat tumorigenik dan banyak digunakan untuk memahami biologi tumor. Beberapa penelitian telah dilakukan untuk mengeksplorasi mekanisme seluler di balik pertumbuhan, proliferasi, dan metastasis sel tumor dengan menggunakan sel B16. Sebuah studi penelitian yang dilakukan pada tahun 2020 menggunakan sel B16 untuk menyelidiki peran RNA non-kode panjang, LncRNA MEG3, dalam pembentukan, pertumbuhan, dan metastasis melanoma. Penelitian ini menemukan bahwa RNA non-coding memodulasi sumbu miRNA-21/E-Cadherin untuk menstimulasi peristiwa seluler ini [2]. Dengan demikian, penelitian dilakukan untuk menyelidiki peran potensial pensinyalan Notch1 dalam penekanan imun yang diinduksi tumor menggunakan sel B16 [3].
- Penemuan obat: Sel B16 digunakan untuk memvalidasi dan menguji potensi efek terapeutik dari kandidat obat. Sebuah penelitian mengevaluasi efek anti-tumor dari asam neogambogic, sebuah senyawa alami, menggunakan garis sel B16. Hasil penelitian mengungkapkan bahwa senyawa ini memodulasi jalur pensinyalan PI3K / Akt / mTOR untuk menyebabkan kematian sel kanker [4]. Penelitian lain menyelidiki efek anti-melanoma dari Ginsenoside Rg3, sebuah saponin, menggunakan garis sel B16. Penelitian ini mengusulkan bahwa senyawa alami ini menyebabkan aktivitas anti-tumor dengan menurunkan regulasi jalur ERK dan Akt [5].
5.publikasi Penelitian yang Menampilkan Sel B16
Berikut adalah beberapa publikasi penelitian penting yang menampilkan garis sel melanoma B16.
Publikasi dalam jurnal Cancer Cell International (2020) ini, mengusulkan bahwa RNA non-kode panjang MEG3 meningkatkan pembentukan, pertumbuhan, dan metastasis sel melanoma B16 dengan memodulasi sumbu miRNA-21 / E-Cadherin.
Makalah ini diterbitkan dalam International Journal of Molecular Medicine pada tahun 2018. Penelitian ini menyelidiki efek melanogenik dan mekanisme turunan psoralen - 4-metil-6-fenil-2H-furo [3,2-g] chromen-2-one (MPFC) dalam sel B16. Studi ini mengusulkan bahwa turunan ini mendorong melanogenesis dengan menstimulasi pensinyalan sel PKA dan p38 MAPK.
Penelitian ini diterbitkan pada tahun 2018 di Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Temuan penelitian menunjukkan bahwa aktivasi pensinyalan Notch1 pada sel B16 dapat mencegah kekebalan antitumor dengan meningkatkan ekspresi gen TGF-β1.
Asam neogambogat menginduksi apoptosis sel melanoma B16 melalui jalur pensinyalan PI3K / Akt / mTOR
Penelitian ini dilakukan oleh Chunlan Wu dan rekan-rekannya pada tahun 2020 dan dipublikasikan di jurnal Acta Biochimica Polonica. Penelitian ini menyatakan bahwa asam neogambogic, suatu senyawa alami, dapat menyebabkan kematian sel melanoma B16 dengan memodulasi kaskade pensinyalan PI3K / Akt / mTOR.
Makalah penelitian ini dipublikasikan di European Journal of Medicinal Chemistry pada tahun 2018. Dalam penelitian ini, para peneliti menyelidiki aktivitas anti-kanker dari suatu senyawa, iridium (III) kompleks, menggunakan sel melanoma B16.
Ailanthone menginduksi penghentian siklus sel dan apoptosis pada sel melanoma B16 dan A375
Penelitian ini mengusulkan bahwa bioaktif tanaman, Ailanthone memiliki potensi antikanker karena dapat menginduksi apoptosis dan penghentian siklus sel pada sel melanoma B16 dan A375. Makalah ini diterbitkan di Biomolecules pada tahun 2019.
6. sumber daya untuk garis Sel B16: Protokol, Video, dan Lainnya
Ada sumber daya terbatas pada garis sel B16 yang menjelaskan protokol kultur dan transfeksi.
- Mengultur sel melanoma: Video ini memberikan kiat-kiat berharga untuk menumbuhkan garis sel melanoma.
- Subkultur garis sel: Video ini menjelaskan protokol subkultur umum untuk garis sel.
- Transfeksi garis sel B16F10: Video ini menjelaskan protokol transfeksi untuk subgaris sel melanoma B16. Ini dapat membantu Anda mengoptimalkan protokol transfeksi untuk sel B16.
Berikut ini adalah beberapa protokol kultur sel untuk sel B16.
- Membudidayakan sel B16: Situs web ini berisi semua informasi yang diperlukan untuk menumbuhkan sel B16, termasuk media pertumbuhan, subkultur, pencairan, dan pembekuan sel.
Referensi
- Danciu, C., dkk., Perilaku empat sublines sel melanoma murin B 16 yang berbeda: Kulit C57 BL/6J. Jurnal internasional patologi eksperimental, 2015. 96(2): p. 73-80.
- Wu, L., dkk., LncRNA MEG3 mendorong pertumbuhan, metastasis, dan pembentukan melanoma melalui modulasi sumbu miR-21 / E-cadherin. Sel kanker internasional, 2020. 20: p. 1-14.
- Yang, Z., dkk., Pensinyalan Notch1 pada sel melanoma mendorong penekanan imun yang diinduksi tumor melalui peningkatan regulasi TGF-β1. Jurnal Penelitian Kanker Eksperimental & Klinis, 2018. 37(1): p. 1-13.
- Wu, C., dkk., Asam neogambogic menginduksi apoptosis sel melanoma B16 melalui jalur pensinyalan PI3K / Akt / mTOR. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): p. 197-202.
- Meng, L., dkk., Aktivitas antitumor ginsenoside Rg3 pada melanoma melalui penurunan regulasi jalur ERK dan Akt. Jurnal Onkologi Internasional, 2019. 54(6): p. 2069-2079.