Garis Sel A375 - Panduan Penelitian Melanoma

A375 adalah garis sel melanoma manusia yang banyak digunakan dalam penelitian toksikologi dan imuno-onkologi. Para peneliti menggunakan garis sel ini untuk mempelajari biologi kanker dan jalur sinyal, menguji atau menyaring agen antikanker potensial, serta mengembangkan terapi baru dan efektif.

Asal dan karakteristik umum sel A375

Mengetahui asal-usul dan karakteristik umum suatu garis sel dapat membantu Anda merencanakan penggunaannya dalam penelitian. Bagian artikel ini akan membahas asal-usul dan fitur garis sel A375. Misalnya, apa itu garis sel A375? Apa saja karakteristik garis sel A375? Dari mana asal sel A375? Bagaimana morfologi sel melanoma A375? Berapa ukuran sel A375?

• Baris sel kanker kulit A375 berasal dari kultur eksplan tumor padat seorang wanita berusia 54 tahun yang menderita melanoma ganas [1].
• Sel A375 memiliki morfologi mirip epitel.
• Ukuran sel A375 relatif lebih kecil dibandingkan dengan garis sel lainnya. Diameternya kira-kira 12 µm.
• Sel melanoma A375 bersifat hipotriploid. Jumlah kromosom modal untuk garis sel ini adalah 62. Biasanya, setiap sel memiliki sembilan kromosom penanda dan satu salinan kromosom normal N2, N6, dan N22.

Sel A375: Informasi kultur sel

Kultur sel A375 mudah dipelihara. Sel ini tidak memiliki persyaratan kultur sel yang rumit. Bagian ini akan membantu Anda mempelajari informasi kultur sel yang diperlukan. Seperti berapa lama waktu penggandaan sel A375. Apa media kultur sel A375? Berapa kepadatan penanaman sel A375? Apakah sel melanoma A375 bersifat melekat?

Poin-Poin Penting dalam Kultur Sel A375

Waktu penggandaan populasi:

Waktu penggandaan A375 adalah 20 jam.

Melekat atau dalam Suspensi:

A375 adalah garis sel melanoma manusia yang melekat.

Kepadatan Penaburan:

Kepadatan sel 1 x 10⁴ sel/cm² ideal untuk kultur sel A375. Sel yang melekat dibilas dengan 1 x larutan garam fosfat (PBS) dan diinkubasi dengan larutan passaging (Accutase). Setelah itu, sel ditambahkan dengan media kultur dan disentrifugasi. Sel yang dipanen disuspensi kembali dalam media kultur dan dimasukkan ke dalam labu baru untuk pertumbuhan.

Media Pertumbuhan:

DMEM direkomendasikan sebagai media A375 yang ideal bila ditambah dengan 10% serum sapi janin (FBS), 4,5 g/L glukosa, 1,5 g/L NaHCO3, 4 mM L-glutamin, dan 1,0 mM natrium piruvat. Media A375 harus diganti 2-3 hari sekali.

Kondisi Pertumbuhan:

Sel melanoma A375 ditumbuhkan dalam inkubator yang dilembabkan (37°C) dengan pasokan CO₂ 5%.

Penyimpanan:

Sel A375 beku harus disimpan di bawah -150°C dalam fase uap nitrogen cair atau freezer listrik.

Proses Pembekuan dan Media:

Media CM-1 atau CM-ACF digunakan untuk membekukan garis sel A375. Proses pembekuan lambat yang memungkinkan penurunan suhu secara bertahap sebesar 1°C dipilih untuk melindungi viabilitas sel.

Proses Pencairan:

Botol sel melanoma A375 beku dikocok dengan cepat dalam penangas air selama 40 hingga 60 detik hingga hanya tersisa gumpalan es kecil. Sel ditambahkan dengan media baru dan disentrifugasi untuk menghilangkan unsur-unsur media pembekuan. Pelet sel yang diperoleh kemudian disuspensi kembali dan dituangkan ke dalam labu baru.

Tingkat Keamanan Biologis:

Kultur A375 ditangani dan dipelihara di laboratorium dengan tingkat keamanan biologis 1.

Aplikasi penelitian garis sel A375

Garis sel A375 memiliki aplikasi penelitian yang luas dalam penelitian kanker. Berikut adalah beberapa bidang umum di mana sel A375 digunakan.

• Penelitian kanker: Sel A375 memiliki aplikasi yang luas dalam penelitian melanoma. Para peneliti menggunakan sel-sel ini untuk menyelidiki biologi kanker kulit, prosesnya, dan mekanisme pensinyalan sel yang mendasarinya, termasuk proliferasi sel, migrasi, dan invasi. Hal ini juga dapat membantu para peneliti mengidentifikasi target terapi molekuler baru. Sebuah studi yang dilakukan oleh Lin Zhu dan rekan-rekannya pada tahun 2019 menggunakan sel melanoma A375 yang sangat agresif dan menemukan peran microRNA-3662 dalam pertumbuhan dan invasi sel melanoma A375. Temuan studi tersebut menyatakan bahwa microRNA-3662 menargetkan gen ZEB1 dan mengatur pertumbuhan sel melanoma secara in vitro dan in vivo pada model tumor A375 [2]. Demikian pula, penelitian yang dilakukan pada tahun 2018 menemukan bahwa jalur PI3K/AKT dan MAPK/ERK terlibat dalam proliferasi dan metastasis garis sel A375 [3].
• Penemuan dan pengujian obat: Sel A375 merupakan model tumor in vitro yang berguna untuk menguji dan menyaring agen antikanker potensial. Para peneliti mengevaluasi toksisitas dan kemanjuran obat kemoterapi baru, senyawa, dan terapi lain menggunakan sel melanoma A375 ini. Misalnya, sebuah studi meneliti sifat antikanker dari mikrovesikel dan nanovesikel yang berasal dari jeruk bali pada sel kanker melanoma manusia A375. Hasilnya menunjukkan bahwa mikrovesikel dan nanovesikel tersebut memicu penghentian siklus sel dan apoptosis serta menghambat ekspresi gen dalam proliferasi, migrasi, dan invasi sel [4].

Sel A375: Publikasi

Beberapa publikasi penelitian penting yang menampilkan sel A375 disebutkan di sini.

Vitamin D dan analognya yang memiliki efek hipokalsemik memodulasi sifat antikanker cisplatin dan dacarbazine pada garis sel melanoma manusia A375

Penelitian ini diterbitkan dalam Journal of Oncology pada tahun 2019. Penelitian ini mengusulkan bahwa pengobatan bersama dengan vitamin D dan analognya meningkatkan aktivitas antikanker cisplatin dan dacarbazine pada sel melanoma A375.

Evaluasi in vitro efek antikanker (garis sel A375) dari gel dan ekstrak daun utuh spesies aloe terpilih

Penelitian ini diterbitkan dalam Journal of Herbal Medicine pada tahun 2022. Penelitian ini mengeksplorasi efek antimaligna gel lidah buaya pada sel melanoma A375.

Anggota keluarga Fermitin 2 mendorong perkembangan melanoma dengan meningkatkan ikatan p-α-Pix ke Rac1 untuk mengaktifkan jalur MAPK

Studi dalam jurnal Oncogene (2021) ini mengusulkan bahwa anggota keluarga fermitin 2 (FERMT2 atau kindlin-2) mendorong perkembangan melanoma melalui aktivasi MAPK dengan mengikat p-α-Pix dan Rac1.

FARP1 memfasilitasi proliferasi sel melalui modulasi jalur sinyal MAPK pada melanoma kulit

Penelitian dalam The American Journal of Dermatopathology (2019) ini mengusulkan bahwa FARP1 mungkin memfasilitasi perkembangan dan perkembangan melanoma kulit. Dengan demikian, hal ini dapat menjadi target terapi yang berguna.

Potensi sitotoksik dan apoptosis ekstrak Phyllodium elegans pada garis sel kanker manusia

Artikel penelitian ini diterbitkan dalam Bioengineered (2019). Penelitian ini mengeksplorasi aktivitas sitotoksik dan apoptosis ekstrak tumbuhan Phyllodium elegans pada garis sel karsinoma manusia, termasuk A375.

Sumber daya untuk garis sel A375: Protokol, Video, dan Lainnya

Berikut ini adalah beberapa sumber daya online yang menampilkan sel A375.

• Transfeksi sel A375: Video tutorial ini akan membantu Anda mempelajari transfeksi sel A375 langkah demi langkah.
• Kultur sel: Video ini berisi informasi yang sangat berguna mengenai kultur garis sel.

Protokol kultur sel untuk sel A375 tercantum di sini.

• Baris sel A375: Tautan ini berisi informasi berguna tentang kultur dan pemeliharaan baris sel A375, termasuk media A375 serta penanganan kultur A375 beku dan yang sedang berkembang biak.

Daftar Pustaka

1. Avram, S., dkk., Standarisasi model melanoma manusia A375 pada membran korioalantoik embrio ayam dan tikus telanjang Balb/c. Oncol Rep, 2017. 38(1): hlm. 89-99.
2. Zhu, L., dkk., MicroRNA-3662 menargetkan ZEB1 dan melemahkan invasi garis sel melanoma A375 yang sangat agresif. Cancer Manag Res, 2019. 11: hlm. 5845-5856.
3. Peng, X., dkk., Oxyfadichalcone C menghambat proliferasi dan metastasis sel melanoma A375 melalui penghambatan jalur PI3K/Akt dan MAPK/ERK. Life sciences, 2018. 206: hlm. 35-44.
4. Stanly, C., dkk., Mikro dan nanovesikel yang berasal dari jeruk bali menunjukkan profil metabolom yang berbeda dan aktivitas antikanker pada garis sel melanoma manusia A375. Cells, 2020. 9(12): hlm. 2722.