Sel ARPE-19 - Pandangan Khusus ke dalam Penelitian Sel Epitel Pigmen Retina dengan ARPE-19

ARPE-19 adalah sel epitel pigmen retina yang muncul secara spontan yang berasal dari manusia. Sel ini digunakan untuk mempelajari berbagai aspek biologi retina, kondisi patologis, dan intervensi terapeutik (farmakologi). Artikel ini bertujuan untuk memberikan wawasan yang komprehensif tentang sel yang diabadikan ARPE-19. Terutama, karakteristik umum, kondisi kultur, dan beragam aplikasi penelitian dari garis sel akan dibahas. Oleh karena itu, dengan membaca ini, Anda akan mendapatkan pemahaman yang menyeluruh tentang:

Sel ARPE-19: Asal dan atribut umum
Garis sel ARPE-19: Informasi kultur
Keuntungan & Keterbatasan sel ARPE-19
Aplikasi garis sel ARPE-19 dalam penelitian
Sel ARPE-19: Publikasi penelitian
Sumber daya untuk garis sel ARPE-19: Protokol, Video, dan Lainnya

1. sel ARPE-19: Asal dan atribut umum

Mengetahui asal usul dan atribut umum suatu lini sel sangat penting untuk penggunaan yang efektif dalam penelitian. Bagian artikel ini akan membahas semua informasi tentang garis sel ARPE. Seperti, Apa itu lini sel ARPE-19? Mengapa menggunakan sel ARPE-19? Apa itu garis sel ARPE-19 / HPV-16? Apakah sel ARPE-19 abadi? Apa itu morfologi dan ukuran sel ARPE 19?

Garis sel epitel pigmen retina yang diawetkan, ARPE-19, berasal dari mata seorang pria berusia 19 tahun yang meninggal karena trauma kepala dalam suatu kecelakaan. Sel ini didirikan oleh Amy Aotaki-Keen pada tahun 1986.
Sel-sel ini mengekspresikan penanda sel epitel pigmen retina, yaitu CRALBP dan RPE-65, yang menunjukkan bahwa sel ini dapat membuat monolayer yang stabil yang ditandai dengan polaritas morfologis dan fungsional.
Sel ARPE-19 memiliki morfologi seperti sel epitel.
Sel ARPE-19 sebagian besar memiliki kariotipe normal kecuali untuk satu delesi dan penambahan pada lengan panjang kromosom 9 dan 19. Selain itu, beberapa aneuploidi juga diamati [1].

Memindai mikrograf elektron (SEM) batang dan kerucut retina.

2.garis sel ARPE-19: Informasi kultur

Informasi kultur sel dasar sangat penting untuk menangani dan memelihara lini sel dengan benar. Bagian ini akan membantu Anda mempelajari poin-poin penting untuk kultur lini sel ARPE-19. Anda akan tahu: apa itu waktu penggandaan ARPE-19? Apa kepadatan pembenihan ARPE-19? Apa kepadatan sel ARPE-19? Apa itu media pembekuan ARPE-19? Bagaimana Anda membudidayakan garis sel ARPE-19?

Poin-poin Penting untuk Mengultur Sel ARPE-19

Waktu Penggandaan Populasi:	Waktu penggandaan ARPE-19 adalah sekitar 55-65 jam. Mereka dapat mengalami hingga 48 penggandaan populasi.
Patuh atau dalam Penangguhan:	ARPE-19 adalah garis sel yang patuh.
Rasio sub-kultivasi:	Rasio sub-kultivasi ARPE-19 adalah 1: 3 hingga 1: 5. Sel-sel yang melekat dibilas dengan 1x PBS dan diinkubasi dengan larutan disosiasi, accutase, selama 8 hingga 10 menit. Sel yang terlepas ditambahkan dengan media segar dan disentrifugasi. Pelet sel kembali diresuspensi dan dituangkan ke dalam labu kultur yang berisi media segar.
Media Pertumbuhan:	Media DMEM atau Ham's F12 digunakan untuk menumbuhkan garis sel ARPE-19. Media ARPE-19 dilengkapi dengan 5% FBS, 3,1 g / L Glukosa, 15 mM HEPES, 1,6 mM L-Glutamin, 1,0 mM Sodium piruvat, dan 1,2 g / L NaHCO3. Media diganti 2 hingga 3 kali per minggu.
Kondisi Pertumbuhan:	Sel ARPE-19 disimpan dalam inkubator yang dilembabkan pada suhu 37 ° C dengan suplai CO2 5%.
Penyimpanan:	Garis sel dapat disimpan dalam fase uap nitrogen cair atau pada suhu di bawah -150 ° C untuk melindungi kelangsungan hidup sel untuk jangka panjang.
Proses dan Media Pembekuan:	CM-1 atau CM-ACF digunakan sebagai media pembekuan media pembekuan ARPE-19. Secara singkat, sel dibekukan melalui metode pembekuan lambat yang hanya memungkinkan penurunan suhu 1°C per menit dan melindungi sel dari guncangan.
Proses Pencairan:	Sel dicairkan dalam penangas air yang telah diatur sebelumnya pada suhu 37°C. Setelah gumpalan es kecil tertinggal, sel ditambahkan ke media kultur segar dan disentrifugasi. Ini menghilangkan elemen media yang membeku. Selanjutnya, pelet sel diresuspensi, dan sel dimasukkan ke dalam labu untuk dikultur.
Tingkat Keamanan Hayati:	Sel ARPE-19 ditangani di laboratorium keamanan hayati 1.

Sel ARPE-19 pada perbesaran 10x pasca-subkultivasi dan semi-konfluen.

3.keuntungan & Keterbatasan sel ARPE-19

Sel ARPE-19 banyak digunakan dalam studi biologi sel retina. Seperti sel lainnya, sel ini juga memiliki beberapa keunggulan dan keterbatasan. Beberapa di antaranya tercantum dalam bagian ini:

Keuntungan

Keuntungan utama dari garis sel ARPE-19 meliputi:

Model sel retina	Sel ARPE-19 sangat mirip dengan sel epitel pigmen retina manusia, sehingga ideal untuk mempelajari penyakit retina dan pengujian obat.
Tingkat pertumbuhan yang stabil	Sel-sel ini menunjukkan pertumbuhan yang stabil dan dapat dipertahankan dalam jangka waktu yang lama, sehingga memfasilitasi eksperimen jangka panjang.
Kemampuan transfeksi	Garis sel ARPE-19 adalah inang transfeksi yang sangat baik, banyak digunakan dalam studi ekspresi sementara dan stabil.

Keterbatasan

Berikut adalah beberapa keterbatasan yang terkait dengan garis sel ARPE-19:

Diferensiasi Terbatas

Diferensiasi ARPE-19 terbatas dibandingkan dengan sel retina primer. Hal ini berpotensi berdampak pada penelitian terkait diferensiasi tertentu.

4.aplikasi garis sel ARPE-19 dalam penelitian

Garis sel ARPE-19 memiliki banyak aplikasi dalam penelitian retina. Di sini, kami telah membahas tentang beberapa penggunaan penelitian yang spesifik dan signifikan dari garis sel epitel pigmen retina ini.

Penelitian penyakit retina: Sel ARPE-19 menawarkan wawasan yang berharga tentang patogenesis retina. Para peneliti menggunakan sel untuk menyelidiki mekanisme penyakit dan pengobatan potensial. Sebuah studi yang dilakukan pada tahun 2020 menemukan bahwa RNA sirkuler hsa_circ_0041795 berinteraksi dengan miRNA-646 dan VEGFC untuk memfasilitasi cedera yang diinduksi glukosa tinggi pada sel epitel pigmen retina manusia ARPE-19. Oleh karena itu, penelitian ini mengusulkan RNA sirkuler ini sebagai target terapeutik dan diagnostik yang efektif untuk memerangi retinopati diabetes [2]. Demikian pula, Jing Yang dan rekannya menggunakan sel ARPE-19 dan memberikan wawasan tentang patogenesis retinopati diabetik. Mereka mempelajari bahwa menghambat lncRNA SNHG1 (Small Nucleolar RNA Host Gene 1) dapat menekan respons inflamasi dan transisi epitel ke mesenkim sel ARPE-19 yang diobati dengan glukosa tinggi [3].
Pengujian obat: Sel ARPE-19 digunakan untuk mengevaluasi kemanjuran dan keamanan obat dan senyawa, membantu mengembangkan pengobatan atau terapi untuk penyakit retina. Sebagai contoh, sebuah penelitian yang dilakukan pada tahun 2019 menemukan efek perlindungan dari bioaktif Syzygium malaccense terhadap stres yang diinduksi hidrogen peroksida pada sel epitel pigmen retina manusia, ARPE-19 [4]. Setelah itu, sebuah penelitian menemukan peran terapeutik ekstrak Prunella vulgaris var. L terhadap cedera yang diinduksi cahaya biru pada sel ARPE-19 dan model tikus [5] .

€650,00*

Konten: 1.5 milliliter

Harga belum termasuk pajak ditambah biaya pengiriman

cryovial

Nomor produk: 305025

5.sel ARPE-19: Publikasi penelitian

Berikut ini adalah beberapa publikasi penelitian menarik yang menampilkan sel epitel pigmen retina ARPE-19.

Evaluasi respons mikroRNA dalam sel ARPE-19 terhadap stres oksidatif

Artikel penelitian ini diterbitkan pada tahun 2018 di Cutaneous and Ocular Toxicology. Penelitian ini mengevaluasi ekspresi miRNA sebagai respons terhadap stres oksidatif yang diinduksi pada sel epitel pigmen retina manusia ARPE-19 melalui perlakuan hidrogen peroksida.

Media terkondisi ARPE-19 mendorong diferensiasi saraf sel punca mesenkim turunan adiposa

Publikasi dalam World Journal of Stem Cells (2021) ini mengusulkan bahwa media yang dikondisikan sel ARPE-19 mengandung faktor pertumbuhan yang mendorong diferensiasi saraf sel punca mesenkim yang berasal dari jaringan adiposa.

Quercetin menghambat produksi sitokin inflamasi yang diinduksi IL-1β dan kemokin pada sel ARPE-19 melalui jalur pensinyalan MAPK dan NF-κB

Penelitian ini dipublikasikan di International Journal of Molecular Sciences (2019). Ini menyatakan bahwa quercetin melindungi pelepasan kemokin yang dirangsang IL-1β dalam sel ARPE-19 dengan mencegah aktivasi kaskade MAPK dan NF-κB untuk meningkatkan respons inflamasi.

Resveratrol memodulasi fungsi SIRT1 dan DNMT dan mengembalikan tingkat metilasi LINE-1 dalam sel ARPE-19 di bawah stres oksidatif dan peradangan

Artikel penelitian ini dipublikasikan di International Journal of Molecular Sciences (2018). Penelitian ini mengevaluasi kemungkinan efek stres oksidatif dan peradangan pada fungsi SIRT1 (Sirtuin 1) dan DNMT (DNA methyltransferases) serta pada metilasi LINE-1 (long interspersed nuclear element-1) pada sel ARPE-19.

Efek Perlindungan Ekstrak Bunga Chrysanthemum boreale terhadap Kerusakan Retina yang Diinduksi A2E pada Sel ARPE-19

Artikel dalam Antioxidants (2022) ini menemukan bahwa Ekstrak Bunga Chrysanthemum boreale memberikan efek perlindungan terhadap kerusakan retina yang diinduksi oleh N-retinylidene-N-retinylethanolamine (A2E) pada sel ARPE-19.

6.sumber daya untuk garis sel ARPE-19: Protokol, Video, dan Lainnya

ARPE-19 adalah garis sel epitel retina yang banyak digunakan. Sumber daya yang tersedia yang mencakup kultur sel ARPE-19 dan protokol transfeksi tercantum di sini:

Transfeksi ARPE-19: Video ini adalah panduan langkah demi langkah untuk mempelajari protokol transfeksi untuk lini sel ARPE-19.

Berikut adalah beberapa sumber daya yang menjelaskan protokol kultur sel ARPE-19:

Protokol kultur sel ARPE-19: Tautan ini berisi informasi tentang kultur dan pemeliharaan sel ARPE-19. Ini terdiri dari informasi tentang media ARPE-19, kondisi kultur, protokol untuk subkultur, dan penanganan kultur proliferatif dan kriopreservasi.

Referensi

Schnichels, S., dkk., Retina dalam cawan: Kultur sel, eksplan retina, dan model hewan untuk penyakit umum pada retina. Kemajuan dalam penelitian retina dan mata, 2021. 81: p. 100880.
Sun, H. dan X. Kang, hsa_circ_0041795 berkontribusi pada cedera sel epitel pigmen retina manusia (ARPE 19) yang diinduksi oleh glukosa tinggi melalui sponging miR-646 dan mengaktifkan VEGFC. Gen, 2020. 747: p. 144654.
Yang, J., dkk., SNHG1 yang Dibungkam Menghambat Transisi Epitel-Mesenkim dan Respon Inflamasi Sel ARPE-19 yang Diinduksi oleh Glukosa Tinggi. J Inflamm Res, 2021. 14: p. 1563-1573.
Arumugam, B., dkk., Efek perlindungan turunan myricetin dari Syzygium malaccense terhadap stres yang diinduksi hidrogen peroksida pada sel ARPE-19. Molecular vision, 2019. 25: p. 47.
Kim, J., K. Cho, dan S.-Y. Choung, Efek perlindungan ekstrak Prunella vulgaris var. L terhadap kerusakan yang diinduksi cahaya biru pada sel ARPE-19 dan retina tikus. Biologi dan Kedokteran Radikal Bebas, 2020. 152: p. 622-631.