Garis Sel Neuro-2a
Neuro-2a adalah garis sel saraf yang berasal dari tikus dan secara luas digunakan dalam penelitian ilmu saraf. Secara umum, sel-sel ini digunakan untuk mempelajari perkembangan saraf, diferensiasi, neurotoksisitas, jalur pensinyalan sel, dan pertumbuhan akson. Selain itu, sel-sel ini juga digunakan untuk pengembangan obat dan tujuan penyaringan.
Artikel ini berfokus pada aspek-aspek penting sel neuroblastoma Neuro-2a yang dapat membantu Anda sebelum memulai penelitian dengan sel ini. Artikel ini terutama akan membahas:
- Atribut umum dan asal sel Neuro-2a
- Informasi tentang kultur garis sel Neuro-2a
- Keunggulan & kelemahan garis sel Neuro-2a
- Aplikasi penelitian garis sel Neuro-2a
- Publikasi penelitian yang menampilkan sel Neuro-2a
- Sumber Daya untuk Sel Neuro-2a: Protokol, Video, dan Lainnya
Atribut umum dan asal-usul sel Neuro-2a
Bagian artikel ini akan membahas latar belakang dan karakteristik dasar garis sel Neuro-2a yang penting untuk diketahui sebelum menggunakannya. Di sini, Anda akan mempelajari: Apa itu garis sel Neuro-2a? Dari mana asal garis sel Neuro-2a ? Apa itu diferensiasi sel Neuro-2a? Berapa ukuran sel Neuro-2a? Bagaimana morfologi sel Neuro-2a?
- Sel Neuro-2a berasal dari tumor spontan (neuroblastoma) seekor tikus albino (strain A). Garis sel ini didirikan oleh R.J. Klebe dan F.H. Ruddle.
- Sel neuroblastoma Neuro-2a menunjukkan morfologi sel induk saraf dan amoeboid.
- Ukuran sel Neuro-2a adalah 12 mikrometer tinggi [1].
- Jumlah kromosom sel Neuro-2a dapat berkisar antara 59 hingga 193 dengan angka modal 95. Kariotipe sel neuroblastoma ini tidak stabil dalam rentang 94 hingga 98 kromosom.
Informasi tentang kultur sel Neuro-2a
Sel Neuro-2a banyak digunakan di laboratorium penelitian ilmu saraf. Sebelum bekerja dengan sel-sel ini, Anda harus mempelajari informasi penting mengenai kultur sel yang disebutkan di bawah ini. Hal ini dapat membantu Anda melakukannya dengan lebih mudah. Anda akan mengetahui: Apa itu Neuro-2a medium kultur sel? Bagaimana cara mengkultur sel Neuro-2a? Berapa lama waktu penggandaan sel Neuro-2a? Berapa kepadatan penyemaian sel Neuro-2a ? Apa saja protokol kultur sel Neuro-2a? Apa saja media kultur sel Neuro-2a?
Poin-Poin Penting dalam Kultur Sel Neuro-2a
Waktu Penggandaan:
Waktu penggandaan sel Neuro-2a adalah sekitar 70 jam.
Sel yang Melekat atau dalam Suspensi:
Neuro-2a adalah garis sel yang melekat.
Kepadatan Penaburan:
Kepadatan penaburan sel yang dioptimalkan untuk garis sel Neuro-2a adalah 1 x 10⁴ sel/cm². Untuk penaburan, sel dicuci dengan larutan garam fosfat (PBS) bebas magnesium dan kalsium (1x). Selanjutnya, larutan passaging (Accutase) ditambahkan, dan sel diinkubasi selama 8 hingga 10 menit pada suhu kamar. Setelah disosiasi sel, media segar ditambahkan, dan sel disentrifugasi. Pelet sel yang telah dipanen disuspensi kembali dengan hati-hati, dan sel dituangkan ke dalam wadah kultur untuk pertumbuhan.
Media Pertumbuhan:
EMEM digunakan untuk kultur sel Neuro-2a. Media ini mengandung 10% FBS, 2 mM L-Glutamin, 1,5 g/L NaHCO₃, EBSS, 1 mM natrium piruvat, dan NEAA untuk pertumbuhan sel yang optimal. Media harus diganti 1 hingga 2 kali seminggu.
Kondisi Pertumbuhan:
Kultur Neuro-2a dipelihara dalam inkubator berhumiditas pada suhu 37°C yang terhubung ke pasokan CO₂ 5%.
Penyimpanan:
Sel harus disimpan pada suhu di bawah -150 °C dalam freezer listrik bersuhu sangat rendah atau dalam fase uap nitrogen cair untuk penyimpanan jangka panjang.
Proses Pembekuan dan Media:
Media CM-1 atau CM-ACF digunakan untuk membekukan sel Neuro-2a. Sel dibekukan melalui proses pembekuan lambat yang hanya memungkinkan penurunan suhu sebesar 1 °C per menit. Hal ini melindungi sel dari guncangan dan menjaga kelangsungan hidupnya.
Proses Pencairan:
Untuk mencairkan kultur yang dibekukan, vial ditempatkan dalam bak air bersuhu 37 °C selama 40 hingga 60 detik hingga hanya tersisa gumpalan es kecil. Kemudian, media kultur ditambahkan, dan sel-sel tersebut disentrifugasi. Langkah ini membantu menghilangkan komponen media pembekuan. Endapan sel kemudian disuspensi kembali, dan sel-sel tersebut dipindahkan ke labu baru yang diisi dengan media kultur. Setelah itu, sel-sel tersebut ditempatkan dalam inkubator pada suhu 37 °C selama minimal 24 jam.
Tingkat Keamanan Hayati:
Penggunaan laboratorium dengan tingkat keamanan biologis 1 wajib dilakukan untuk menangani dan memelihara kultur Neuro-2a.
- Keunggulan dan kelemahan garis sel Neuro-2a
- Aplikasi penelitian garis sel Neuro-2a
- Informasi tentang kultur garis sel Neuro-2a
- Ciri-ciri umum dan asal-usul sel Neuro-2a
- 5. Publikasi penelitian yang menampilkan sel Neuro-2a
- Sumber daya untuk sel Neuro-2a: Protokol, Video, dan Lainnya
- Pertanyaan yang Sering Diajukan
Keunggulan & kelemahan garis sel Neuro-2a
Sel Neuro-2a memiliki beberapa kelebihan dan kekurangan yang membedakannya dari garis sel saraf lainnya. Beberapa kelebihan dan kekurangan utama dari sel ini tercantum di sini.
Keunggulan
Keunggulan dari garis sel neuroblastoma tikus Neuro-2a adalah:
-
Mudah Dipelihara:
Garis sel Neuro-2a tidak memerlukan prosedur kultur sel yang rumit atau kompleks. Sel-sel ini mudah dikultur dan dipelihara di laboratorium penelitian.
-
Model Sel Neuron In Vitro:
Neuro-2a merupakan model sel saraf yang praktis dan banyak digunakan oleh para peneliti dalam studi perkembangan dan diferensiasi sel saraf.
Kekurangan
Kekurangan sel Neuro-2a adalah:
-
Asal Murine:
Neuro-2a berasal dari tikus, dan para peneliti harus berhati-hati saat menggeneralisasi hasil dari penelitian berbasis tikus ke kesehatan dan penyakit manusia, karena biologi tikus dan manusia dapat berbeda secara signifikan.
Aplikasi penelitian garis sel Neuro-2a
Sel Neuro-2a menawarkan banyak aplikasi di bidang penelitian ilmu saraf. Beberapa penggunaan yang menjanjikan dari garis sel ini dibahas di sini:
- Perkembangan saraf: Neuro-2a adalah model sel saraf in vitro yang banyak digunakan untuk mempelajari perkembangan saraf dan proses terkait seperti diferensiasi, pertumbuhan akson, dan pembentukan sinapsis. Sebuah studi yang dilakukan pada tahun 2020 memanfaatkan sel Neuro-2a untuk mengeksplorasi peran mikroRNA-124 dalam diferensiasi sel saraf yang diinduksi oleh asam retinoat [2]. Studi lain menyelidiki ekspresi reseptor asam retinoat gamma (RARG) dan miRNA-124 pada garis sel neuroblastoma (N2A). Studi ini mengusulkan bahwa RARG menjadi target miR-124 dan menghambat pertumbuhan neurit [3].
- Neurotoksisitas: Sel Neuro-2a juga digunakan untuk menilai efek toksik obat, bahan kimia, atau faktor lingkungan terhadap sel saraf. Misalnya, sebuah penelitian yang dilakukan oleh Zhihong Yin dan rekan-rekannya menyelidiki neurotoksisitas bisphenol A (BPA), suatu bahan kimia lingkungan, dengan menggunakan sel Neuro-2a. Mereka mengamati bahwa BPA menghambat diferensiasi dan proliferasi sel saraf dengan mengganggu integritas seluler dan sinaptik sel-sel tersebut [4].
- Penyaringan Obat: Sel Neuro-2a juga digunakan untuk mengevaluasi aktivitas terapeutik berbagai obat, senyawa, dan produk alami. Sebagai contoh, sebuah penelitian menggunakan sel Neuro-2a untuk mempelajari potensi antioksidan ekstrak tanaman Ginkgo biloba. Selain itu, penelitian tersebut menyimpulkan bahwa ekstrak tersebut menyebabkan penurunan agregasi Aβ dan berpotensi menjadi pengobatan untuk penyakit Alzheimer [5].
5. Publikasi penelitian yang menampilkan sel Neuro-2a
Berikut ini adalah beberapa makalah penelitian menarik yang menyoroti garis sel Neuro-2a.
Penelitian yang dipublikasikan dalam Journal of Natural Medicines, 2018 ini menyelidiki efek terapeutik alkamida yang diisolasi dari lada putih (P. nigrum) pada sel saraf Neuro-2a.
Penurunan ekspresi Nkx2.1 terlibat dalam kelainan otak yang disebabkan oleh kelebihan asam retinoat
Penelitian yang dipublikasikan dalam jurnal *Acta Biochimica et Biophysica Sinica* tahun 2020 ini mengusulkan bahwa gen Nkx2.1 memainkan peran penting dalam perkembangan otak tikus dengan mengatur jalur sinyal Shh.
Artikel ini diterbitkan dalam jurnal *Toxicology and Industrial Health* (2023) dan mengusulkan bahwa bahan kimia lingkungan bisfenol A memicu neurotoksisitas pada sel neuro-2a serta mengganggu fungsi sinapsis dan sitoskeleton sel tersebut.
Makalah ini dalam jurnal Pharmaceuticals (2021) mengusulkan bahwa obat, hexarelin, memodulasi kaskade PI3K/AKT dan MAPK pada sel neuroblastoma (Neuro-2a) serta menghambat apoptosis sel Neuro-2a yang diinduksi oleh hidrogen peroksida.
Makalah penelitian yang diterbitkan dalam jurnal *Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine* (2021) ini mengusulkan bahwa ekstrak buah Emblica officinalis menekan peradangan saraf pada sel Neuro-2a dan karenanya dapat bermanfaat bagi penyakit-penyakit yang melibatkan peradangan saraf.
Sumber Daya untuk Sel Neuro-2a: Protokol, Video, dan Lainnya
Berikut ini adalah sumber daya daring yang tersedia mengenai sel Neuro-2a. Sumber daya tersebut mencakup protokol kultur sel Neuro-2a dan protokol transfeksi.
- Protokol transfeksi Neuro-2a: Neuro-2a merupakan inang yang cocok untuk transfeksi. Tautan ini akan memandu Anda mengenai protokol transfeksi garis sel tersebut. Efisiensi transfeksi Neuro-2a bervariasi tergantung pada reagen yang digunakan.
Tautan berikut berisi protokol kultur sel Neuro-2a.
- Protokol kultur sel Neuro-2a: Tautan ini akan membantu Anda mempelajari protokol subkultur sel Neuro-2a.
- Sel Neuro-2a: Situs web ini berisi pengetahuan komprehensif tentang media sel Neuro-2a, kepadatan penyemaian, serta protokol untuk subkultur dan penanganan kultur yang diawetkan secara kriogenik dan kultur proliferatif.
Referensi
- Lulevich, V., dkk., Mekanika sel tunggal menyediakan metode yang sensitif dan kuantitatif untuk menyelidiki interaksi peptida amyloid-beta dan sel saraf. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(31): hlm. 13872-7.
- You, Q., dkk., Peran miR-124 dalam regulasi diferensiasi sel Neuro-2A yang diinduksi asam retinoat. Neural Regen Res, 2020. 15(6): hlm. 1133-1139.
- Su, X., dkk., Reseptor asam retinoat gamma menjadi target mikroRNA-124 dan menghambat pertumbuhan neurit. Neuropharmacology, 2020. 163: hlm. 107657.
- Yin, Z., dkk., Paparan bisfenol-A menginduksi neurotoksisitas dan terkait dengan sinapsis serta sitoskeleton pada sel Neuro-2A. Toxicology in Vitro, 2020. 67: hlm. 104911.
- Chen, L., dkk., Ekstrak Ginkgo biloba (EGb) menghambat stres oksidatif pada sel Neuro-2A yang mengekspresikan APP secara berlebihan. BioMed Research International, 2019. 2019.